[논문]자연발증적 고혈압 흰쥐에서 무청 건조분말의 항고혈압 효과

김보람; 박지호; 김선희; 조강진; 장문정

doi:10.4163/kjn.2010.43.6.561

자연발증적 고혈압 흰쥐에서 무청 건조분말의 항고혈압 효과
Antihypertensive Properties of Dried Radish Leaves Powder in Spontaneously Hypertensive Rats 원문보기

韓國營養學會誌 = The Korean journal of nutrition．, v.43 no.6, 2010년, pp.561 - 569

김보람 (국민대학교 자연과학대학 식품영양학과) , 박지호 (국민대학교 자연과학대학 식품영양학과) , 김선희 (국민대학교 자연과학대학 식품영양학과) , 조강진 (국립농업과학원 기능성식품과) , 장문정 (국민대학교 자연과학대학 식품영양학과)

Abstract ▼ AI-Helper

The study aim was to investigate the antihypertensive effect after oral supplementation of dried radish leaves powder (DRLP). Angiotensin-converting enzyme (ACE) activity was measured by spectrophotometric assay. The systolic blood pressure (SBP) was measured in spontaneously hypertensive (SHR) and normotensive rats (Wistar) by the tail cuff method after a 4-week diet with DRLP at the level of 2.5% or 5%. The supplementation of DRLP decreased SBP of SHR although the 5% supplementation level did not show any more pronounced effect than the 2.5% level did. The decrease in the SBP observed for both 2.5% and 5% DRLP was accompanied by significant increases of the urinary Na and K excretion. The DRLP supplementation showed a potent ACE-inhibitory activity in pulmonary tissue from both hypertensive and normotensive rats. However, the DRLP supplementation did not affect the SBP in normotensive rats. These results indicated that DRLP exerted an antihypertensive effect in SHR due to the decreased ACE activity and increased urinary Na excretion.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 실험에서 무청 건조 분말 섭취로 인한 혈압의 감소가 체내 Na 및 K배설을 통한 체액조절에 의한 것인지를 파악하기 위해 뇨 Na 및 K 배설량을 측정하였다. 무청 건조 분말 섭취는 뇨를 통한 Na 및 K 배설을 유의하게 증가시켰다.
본 연구는 무청 건조분말의 섭취가 SHR의 혈압에 미치는 효과 및 관련기전 분석을 통해 무청 건조분말의 항고혈압 효과를 조사하고자 하였다.
본 연구는 무청 건조분말의 섭취가 자연발증적 고혈압쥐(SHR)의 혈압에 미치는 영향을 살펴보았고, 관련 기전으로 안지오텐신 전환효소 (ACE) 활성, 뇌의 γ-aminobutyric acid (GABA)와 뇨의 Na 및 K 배설량에 미치는 영향을 분석하였다.
본 연구는 무청 건조분말의 섭취가 혈압에 미치는 영향을 조사하고, ACE 활성과 뇌 GABA 수준의 변화 및 뇨를 통한 Na과 K 배설량 분석을 통해 혈압을 낮추는 데 관련된 인자를 중심으로 그 기전을 밝히고자 하는 것이었다.

제안 방법

12주령 본태성 고혈압 동물인 spontaneously hypertensive rat (SHR, S)과 정상혈압의 Wistar (W) 종 수컷 흰쥐를 중앙 동물센터에서 구입하여 정상적인 실험실조건 (온도 22℃ ± 1, 상대 습도 65 ± 5%, 낮밤주기 12시간) 에서 물과 실험 식이를 자유급식으로 사육하였다. 1주일간의 적응 시기를 거친 후 종과 실험 식이에 따라 혈압을 기준으로 36마리의 실험동물을 난괴법에 의해 6군 (n = 6)으로 나누어 대조군은 무청 건조분말 무첨가군 (CC), 실험식이군은 2.5% 무청 건조분말첨가군 (LR)과 5% 무청 건조 분말 첨가군 (HR)으로 나누어 4주간 사육하였다. 실험 식이는 American Institute of Nutrition (AIN-93M)식이를 기준으로 하였으며, 실험군의 식이조성은 Table 1과 같다.
22) 무청 건조분말내 총 플라보노이드 및 페놀 화합물 함량의 상대적 비교를 위해 국내산 단감 및 피자두, 산수유를 동일한 조건으로 건조하여 분석하였으며 3회 반복 측정을 하였다.
26) 80 μL의 혈청에 40 μL의 20% trichloroacetic acid를 첨가하여 5,800rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액 50 μL에 500 μL의 0.1 M borate buffer (pH 10)과 50 μL의 o-phtaldehyde용액을 첨가한 뒤 vortex로 잘 혼합한 뒤 0.45 μM PVDF membrane으로 filter 한 용액을 빛을 차단시킨 상태에서 10 μL을 HPLC에 injection 한 뒤 fluorescence detector로 excitation 330 nM, Emission 450 nM에서 측정하였다.
50 mM HEPES, 300 mM NaCl, 400 mM Na2SO4, 30 mM Hip-Gly-Gly를 함유한 용액 100 μL에 10 μL의 혈청을 넣고 37℃에서 30분간 반응시킨 후 100 μL의 sodium tungstate (100 g/L)와 100μL 0.33 M H2SO4를 넣어 반응을 종료시켰다.
GABAnergic 뉴런의 활성은 시상하부에 작용하여 호흡기 및 심혈관계 활성에 영향을 준다. GABA 길항제나 GABA 합성을 억제하는 물질을 시상하부에 투여하였을 때 뚜렷한 혈압 상승을 유발하고, 심장박동수와 호흡수를 증가시켰다.^38,39) 안지오텐신 II에 반응하는 뉴런이 시상하부에 존재하며, 내재하는 안지오텐신 II에 의해 활성화될 때 혈압이 상승하며, 안지오텐신 II에 의해 자극되는 뉴런의 반응을 억제하였을 때 혈압이 감소된다고 하였다.
무청 건조분말의 총 츨라보노이드 함량과 페놀 함량 조사는 조제한 시료를 Marinova 등의 방법을 변형하여 측정 하였다.²²⁾ 무청 건조분말내 총 플라보노이드 및 페놀 화합물 함량의 상대적 비교를 위해 국내산 단감 및 피자두, 산수유를 동일한 조건으로 건조하여 분석하였으며 3회 반복 측정을 하였다.
실험 식이는 American Institute of Nutrition (AIN-93M)식이를 기준으로 하였으며, 실험군의 식이조성은 Table 1과 같다. 무청건조분말의 첨가량은 우리나라와 식생활이 유사한 일본의플라보노이드 섭취량 63 mg/일 (1.36 mg/kg 체중)을 근거로 하며 1일 총 플라보노이드 섭취량이 2.5% 첨가군은 1.5 mg/kg 체중, 5% 첨가군은 3 mg/kg 체중이 되는 양으로 결정하였다.²³⁾ 동물실험과 관련된 모든 절차는 국민대학교 동물실험윤리위원회의 승인을 받아 진행되었다.
본 연구에서 무청 건조분말의 혈압감소효과와 관련된 기전을 탐색하기 위해 ACE 활성, 뇌와 혈중 GABA 농도의 측정, 뇨를 통한 Na와 K 배설량을 측정하였다. RAS는 심혈관계 생리적 기능을 조절하기 위해 체액을 조절하는 중요한 체계로, 레닌, 안지오텐신과 안지오텐신 수용체로 구성되어있다.
상등액을 새로운 시험관에 옮긴 후나머지 침전물에 증류수 2 mL을 넣고 다시 voltex 로 혼합한 수 33,000 × g에서 원심분리한뒤 상등액을 처음의 상등액과 합하여 ACE 활성 측정을 위한 효소원으로 사용하여 혈액의 ACE 활성 측정과 동일한 방법으로 분석하였다.
본 연구는 무청 건조분말의 섭취가 자연발증적 고혈압쥐(SHR)의 혈압에 미치는 영향을 살펴보았고, 관련 기전으로 안지오텐신 전환효소 (ACE) 활성, 뇌의 γ-aminobutyric acid (GABA)와 뇨의 Na 및 K 배설량에 미치는 영향을 분석하였다. 생후 12주령 고혈압 동물모델인 SHR과 정상혈압 동물모델인 Wistar쥐에서 무청 건조분말 무첨가식이, 2.5% 무청 건조분말식이 또는 5% 무청 건조분말 식이를 4주간 급여시켰다. 실험 기간 동안 무청 건조 분말 섭취가 식이섭취량 및 체중 증가량에는 영향을 주지 않았으며, 무청 건조분말 섭취한 SHR군에서 유의하게 혈압이 감소되었으며, 2.
실험식이 급여 4주째 실험동물을 대사장에 1마리씩 넣은 후 대변과 소변을 48시간 동안 수집하였다. 소변의 총부피를 측정하고 50 mL로 희석하였고, 실험종료 되기 전날 부터 16시간 절식시킨 후 단두하여 혈액을 채취한 다음 3,000 rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 채취하였고, 간, 신장, 폐 및 뇌를 적출한 후 드라이아이스에 급속냉동하였다. 모든 시료는 분석전까지 -70℃에 보관하였다가 생화학적 분석에 사용하였다.
[Table 5]에 폐. 신장, 혈청의 ACE 활성을 제시하였다. 무청건조분말의 섭취가 폐조직내 ACE 활성에 미치는 영향은 Wistar종과 SHR 종의 실험군에서 모두 관찰되었다.
실험기간 동안 electrosphygomonanometer (Non invasive blood pressure measuring systems, Panlab, Spain)를 사용하여 꼬리동맥의 혈압을 tail cuff 방법에 의해 매주 측정하였다. 안정된 조건에서 혈압을 측정하기 위해 실험동물을 보정틀에 넣은 다음, 37℃에서 15분간 안정시키는 적응훈련을 1주일간 하였다. 혈압측정은 일정시간(09：00~11：00)에 37℃가 유지되는 보정틀에서 안정을 시킨다음 적어도 5회 이상을 반복 측정하여 높은값과 낮은값을 제외한 평균값을 기록하였다.
혈청 및 뇌조직의 GABA 함량은 HPLC를 이용하여 Clarke 등의 방법을 변형하여 분석하였다.²⁵⁾ 뇌조직에서 대뇌, 소뇌 .
45 μM PVDF membrane으로 filter 한 뒤 빛을 차단시킨 상태에서 10 μL 을 HPLC에 injection하여 fluorescence detector로 excitation 420 nM, emission 489 nM에서 측정하였다. 혈청내 GABA 함량 분석은 Vermeiji와 Edelbroek 등의 방법을 변형하여 사용하였다.²⁶⁾ 80 μL의 혈청에 40 μL의 20% trichloroacetic acid를 첨가하여 5,800rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액 50 μL에 500 μL의 0.
3 g을 취해 550~600℃ 회 화로에서 15시간 회화시켜 회분을 얻었다. 회분에 3 mL의3 N HCl 용액을 넣어 용해시킨 후 15시간 후 filter paper (ashless, Whatman #40)로 여과한 다음 여과액을 300배 희석하여 inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS, Agilent 750a, USA)로 Na과 K를 분석하였다. Na과 K의 배설량은 24시간당으로 계산하였다.

대상 데이터

12주령 본태성 고혈압 동물인 spontaneously hypertensive rat (SHR, S)과 정상혈압의 Wistar (W) 종 수컷 흰쥐를 중앙 동물센터에서 구입하여 정상적인 실험실조건 (온도 22℃ ± 1, 상대 습도 65 ± 5%, 낮밤주기 12시간) 에서 물과 실험 식이를 자유급식으로 사육하였다.
국내산 무청을 음건한 후 열풍 순환건조기에서 60℃에서 2일간 건조후 80℃에서 다시 1일간 건조하여, 분쇄기로 분쇄한 시료를 사용하였다. 시료는 국립농업과학원 기능성 식품과에서 제조한 것을 제공받아 사용하였다.
국내산 무청을 음건한 후 열풍 순환건조기에서 60℃에서 2일간 건조후 80℃에서 다시 1일간 건조하여, 분쇄기로 분쇄한 시료를 사용하였다. 시료는 국립농업과학원 기능성 식품과에서 제조한 것을 제공받아 사용하였다.

데이터처리

동일한 종내에서 대조군과 무청건조분말 섭취군간의 유의적 차이는 ANOVA 분석후 Duncan의 다중검정에 의해비교하였으며, 동일한 식이를 섭취한 종간의 차이는 student t test로 유의수준 α < 0.05에서 비교하였다.
자료의 값은 평균 ± 표준오차로 표시하였다.

이론/모형

45 μM PVDF membrane으로 filter 한 용액을 빛을 차단시킨 상태에서 10 μL을 HPLC에 injection 한 뒤 fluorescence detector로 excitation 330 nM, Emission 450 nM에서 측정하였다. HPLC의 분석조건은 Lee 등의 방법을 사용하였다.²⁷⁾
5% 무청 건조분말첨가군 (LR)과 5% 무청 건조 분말 첨가군 (HR)으로 나누어 4주간 사육하였다. 실험 식이는 American Institute of Nutrition (AIN-93M)식이를 기준으로 하였으며, 실험군의 식이조성은 Table 1과 같다. 무청건조분말의 첨가량은 우리나라와 식생활이 유사한 일본의플라보노이드 섭취량 63 mg/일 (1.
실험기간 동안 electrosphygomonanometer (Non invasive blood pressure measuring systems, Panlab, Spain)를 사용하여 꼬리동맥의 혈압을 tail cuff 방법에 의해 매주 측정하였다. 안정된 조건에서 혈압을 측정하기 위해 실험동물을 보정틀에 넣은 다음, 37℃에서 15분간 안정시키는 적응훈련을 1주일간 하였다.
혈청의 ACE 활성은 Neels 등의 방법²⁴⁾에 따라 흡광계를 사용하여 분석하였다. 50 mM HEPES, 300 mM NaCl, 400 mM Na2SO4, 30 mM Hip-Gly-Gly를 함유한 용액 100 μL에 10 μL의 혈청을 넣고 37℃에서 30분간 반응시킨 후 100 μL의 sodium tungstate (100 g/L)와 100μL 0.

성능/효과

1,2) 우리나라의 만 30세 이상 인구의 고혈압 유병률은 2007년 24.6%에 비해, 2008년 26.0%로 증가하였으며 50대 35%, 60대 47.5%, 70대 56.8%로 연령이 높을수록 유병률이 높다.³⁾
실험 시작 초기 체중이 각 실험군간 유의적인 차이가 있었던 것은 실험군을 혈압을 기준으로 한 난괴법으로 분류하였기 때문이었다. 2.5% 무청 건조분말 섭취군의 식이섭취량이 높은 경향이었으나 유의적인 차이는 아니었다. 실험 초기 체중은 실험군간 유의적인 차이가 있었지만 실험기간동안 총 식이 섭취량과 식이효율은 유의적인 차이가 없어 2.
³⁰⁾ 최근에는 RAS의 억제를 통해 고혈압을 조절할 수 있어 RAS저해제가 고혈압 치료 및 심혈관계 합병증을 감소시킬 수 있는 약물로 사용되고 있다.³¹⁾ 본 실험결과 폐조직내 ACE 활성은 Wistar종에 비해 SHR 군에서 유의하게 높아 종간의 차이가 있었으며, 높은 ACE 활성이 SHR종의 고혈압유발과 관련이 있었다. Edman 등도 안지오텐신 II는 정상혈압군의 동맥조직에 비해 SHR종의 동맥조직에서 더 강한 수축력을 나타내서 고혈압을 유발한다고 보고하여 본 연구결과와 일치하였다.
Edman 등도 안지오텐신 II는 정상혈압군의 동맥조직에 비해 SHR종의 동맥조직에서 더 강한 수축력을 나타내서 고혈압을 유발한다고 보고하여 본 연구결과와 일치하였다.³²⁾ 무청 건조 분말 섭취시 섭취량에 비례하여 Wistar 종과 SHR 종에서 모두 ACE 활성이 낮아졌으며, 5% 첨가군에서는 Wistar종과 SHR 종에서 유의적인 차이가 없어져 무청 건조분말의 섭취량에 비례하여 ACE 억제 효과가 있음을 알 수 있었다. ACE에 의해 생성되는 안지오텐신 II는 혈관 수축력을 증가 시키고, Na과 체액 보유량을 증가시켜 혈압을 상승시키고 심근비대를 유발하는 물질이다.
³³⁾ 레닌이 RAS의 속도제한효소이나 항고혈압 치료는 RAS의 최종 생성물인 안지오텐신 II를 감소시키는 것을 목표로 하고 있어, ACE 활성을 억제 하여 안지오텐신 II 생성을 억제시키는 방법을 이용하여 혈압을 감소시키고 있다.³⁴⁾ 안지오텐신 II를 생성하는 ACE는 폐의 표피조직과 신장 내피조직 에서 생성되어 순환하는 효소인데 신장과 혈청에서는 무청 건조분말에 따른 ACE 활성에 영향을 주지 않았음으로 미루어 무청 건조분말은 폐에서 생성되는 ACE 활성에 더 영향을 주었다고 볼 수 있다. 정상혈압쥐인 Wistar 종에서도 안지오텐신 전환효소의 활성이 감소되었으나 혈압 감소효과가 없어 안지오텐신 II 생성의 억제는 SHR군에서 혈압 감소를 유도하는 것으로 생각 된다.
4 mmHg로 유의하게 감소하였다. 3주째 수축기 혈압은 SHR 각 실험군에서 다시 상승하여 SCC군과 SRL군간의 유의적인 차이가 없었다. SRH군의 혈압도 상승하였으나 SRL군에 비해 SRH군의 그 상승폭이 작았다.
Qing 등은 총 페놀화합물 함량이 높은 Luobuma 잎의 첨가식이가 정상혈압쥐에서 Na와 K배설을 증가시키고 이뇨효과가 있었다고 보고하였으며, 3/4 신장절제로 고혈압을 유발시킨 동물모델에서 뇨 Na와 K 배설을 증가시켜 혈압을 감소시켰다고 보고한 바 있어 본 연구결과와 유사하였다.^42,43) ACE가 억제될 때 안지오텐신 II의 생성이 감소되며, 동시에 bradykinin을 증가시켜 혈관이 확장되어 Na 배설을 촉진 하여 체내 Na 배설과 함께 이뇨효과가 있다는 연구결과로 미루어 무청 건조 분말 섭취로 인한 Na 배설의 증가도 SHR 에서 혈압을 감소시키는 데 영향을 주었을 것으로 본다.⁵⁾ 그러나 정상혈압쥐에서 Na 배설 증가가 있었음에도 불구하고 혈압에 영향을 주지 않았던 것은 종에 따라 안지오텐신 II에 반응하는 혈관의 수용체수가 달랐다는 점에서 신장의 Na재흡수와 관련된 수용체에도 종간의 차이가 있었을 가능성을 시사하며 관련 연구를 통해 조사할 필요가 있다.
5,6) Hagiwara와 Kubo는 뇌에 존재하는 안지오텐신 II 민감성 뉴런은 안지오텐신에 의해 활성화되면서 혈압을 증가시키며, γ-amino butyric acid (GABA)는 이 뉴런의 활성 및 baroreceptor를 억제하여 혈압을 감소시켜 혈압조절에 있어서 안지오텐신 II와 GABA와의 관련성이 있음을 제시하고 있다.
07 mM로 섭취량에 비례하여 배설량이 증가하였다. SHR군과 Wistar군에서 Na 배설량의 종간의 차이는 없었으며, SHR군에서도 무청 건조분말 섭취량에 비례하여 Na 배설량이 유의하지는 않았으나 증가하는 경향이었다. 뇨를 통한 K배설량도 Wistar군과 SHR군에서 모두 무청건 조분말 섭취군에서 증가하였다.
SHR군과 Wistar군에서 뇨 Na 배설량은 무청건조분말 섭취로 인해 증가하였으며, 특히 5% 섭취군에서 가장 높았다(p <0.05).
WCC는 501.6 mU, SCC군 703.1 mU였으며, WRL군 480.3 mU, SRL 671.5 mU로 폐조직 ACE 활성은 Wistar 종에 비해 SHR 군에서 높았다 (p < 0.05).
05). Wistar 대조군의 Na 배설량은 1.39 mM이었으며, 무청 건조분말 2.5% 섭취군은 2.03 mM, 5% 섭취군의 Na 배설량은 3.07 mM로 섭취량에 비례하여 배설량이 증가하였다. SHR군과 Wistar군에서 Na 배설량의 종간의 차이는 없었으며, SHR군에서도 무청 건조분말 섭취량에 비례하여 Na 배설량이 유의하지는 않았으나 증가하는 경향이었다.
그러나 통계적으로 유의적이지는 않았으나 Wistar 종의 대뇌와 소뇌, SHR종의 소뇌에서 무청 건조 분말 섭취시 섭취량에 비례하여 뇌 GABA함량이 증가하는 경향이었다. Wistar 종에서 무청 건조 분말 섭취량이 증가하면서 뇌간내 GABA 농도가 증가하였으며, WCC군에 비해 WRL군에서 유의적으로 높았다 (5.07 mg 대 7.60 mg). 반면 SHR 종에서는 대뇌와 뇌간내 GABA 수준이 거의 비슷한 값이었다.
국내산 과일 및 무청 건조분말내 총 플라보노이드 및 페놀 함량을 비교 분석한 결과 본 연구에서 사용한 무청 건조분말내 함량이 가장 높았다.
28 mg/100 g으로 무청 건조분말내 K 함량이 높았기 때문으로 생각된다. 그러나 식이내 Na 함량은 대조군 6.24 mg/100 g, 2.5% 섭취군, 5.32 mg/100 g, 5% 섭취군 5.25 mg/100 g으로 각 실험군 식이 내 Na 함량은 오히려 대조군이 높은 편이었음에도 불구하고 뇨를 통한 Na의 배설량이 증가하여 무청 건조분말의 섭취가 뇨를 통한 Na의 배설을 증가시켰음을 알 수 있었다.
신장 및 혈청내 ACE 활성은 각 실험군간의 통계적 유의성이 없었다. 뇌의 GABA 함량은 Wistar종의 뇌간에서 섭취량에 비례하여 증가하였으며 다른 실험군에서는 무청 건조분말 섭취시 섭취량에 비례하여 대뇌, 소뇌 내에서 유의 적인 차이는 없었으나 GABA 농도가 증가하는 경향이었다. 한편 뇨의 Na 배설량도 무청 건조분말 섭취로 인해 증가 하는 경향이었으며, 정상 혈압쥐에서 무청 건조 분말 섭취로 인한 Na 배설량은 통계적으로 유의하였다.
실험 4주째 각 실험 군에서 1주째에 비해 혈압이 감소하였으며, SRL군과 SRH 군의 혈압 감소효과가 커서 SCC군에 비해 유의적으로 혈압이 낮아졌다. 따라서 실험 시작시 혈압에 비해 섭취 4주째 혈압은 무청 건조분말 섭취로 인해 유의적으로 감소하여 SRL군에서 21 mmHg의 수축기 혈압이 감소하였으며, SRH 군에서 약 19 mmHg의 혈압 감소가 있었다. 이 결과에서 볼때 2.
반면 SHR 종에서는 대뇌와 뇌간내 GABA 수준이 거의 비슷한 값이었다. 무청 건조 분말 섭취에 대한 뇌의 GABA 수준의 반응은 Wistar 종에서 더 민감하게 변화를 보이는 경향이었다.
무청 건조 분말 섭취는 뇨를 통한 Na 및 K 배설을 유의하게 증가시켰다. 무청 건조분말 섭취시 Wistar 종이나 SHR 종에서뇨 Na 및 K 배설이 증가하였으며 무청 건조분말 무섭취군에 비해 5% 섭취군에서 가장 배설량이 많았으며, Na, K 배설 효과는 정상혈압쥐에서 더 유의하게 나타났다. Qing 등은 총 페놀화합물 함량이 높은 Luobuma 잎의 첨가식이가 정상혈압쥐에서 Na와 K배설을 증가시키고 이뇨효과가 있었다고 보고하였으며, 3/4 신장절제로 고혈압을 유발시킨 동물모델에서 뇨 Na와 K 배설을 증가시켜 혈압을 감소시켰다고 보고한 바 있어 본 연구결과와 유사하였다.
무청 건조분말의 섭취는 정상혈압종인 Wistar종에서는 혈압에 영향을 주지 않았으나 자연발증적 고혈압 SHR종에서는 실험 3주째 혈압 상승이 있었으나 2주째와 4주째 혈압의 감소가 있었으며 2.5% 섭취군, 5% 섭취군 모두 혈압이 감소하였다. 섭취량에 비례하여 혈압의 감소가 있었을 것으로 기대하였으나 섭취량증가에 의한 더 큰 감소 효과는 나타나지 않았다.
05). 무청건조분말 섭취량에 비례하여 무청건조분말 무섭취 대조군에 비해 ACE 활성이 억제되어 SRH군의 폐조직 ACE는 동일한 식이를 섭취한 정상혈압쥐의 수준으로 낮아졌다. 이는 무청 건조 분말 섭취시 Wistar종과 SHR 종에서 ACE 활성이 낮아졌으며 SRH군에서 ACE 활성 억제가 특히 컸기 때문으로 생각된다.
신장, 혈청의 ACE 활성을 제시하였다. 무청건조분말의 섭취가 폐조직내 ACE 활성에 미치는 영향은 Wistar종과 SHR 종의 실험군에서 모두 관찰되었다. WCC는 501.
한편 뇨의 Na 배설량도 무청 건조분말 섭취로 인해 증가 하는 경향이었으며, 정상 혈압쥐에서 무청 건조 분말 섭취로 인한 Na 배설량은 통계적으로 유의하였다. 본 연구 결과 무청 건조 분말의 섭취는 ACE 활성을 억제하고 뇨 Na 배설량을 증가시키는 효과가 있었으며 이로 인한 혈압 감소는 자연발증적 고혈압 쥐에서 유효하게 나타나 고혈압질환을 개선시킬 수 있는 식품소재로서의 가능성이 있음을 나타내었다.
본 연구결과 무청 건조분말은 고혈압 동물모델에서 항고 혈압 효과가 있으며, 체내 안지오텐신 전환효소 활성을 억제하여 안지오텐신 II의 생성 억제 및 뇨 Na배설 증가를 통해 혈압을 감소시키며, 이들 기전을 통한 혈압감소효과는 고혈압 동물모델에서 유효하였다.
5% 섭취군에 비해 5% 섭취군의 혈압 상승이 가장 낮아 무청 건조분말은 혈압을 감소시키는 효과가 있음을 알 수 있었다. 본 연구에서 사용한 실험군의 플라보노이드 섭취량은 2.5% 첨가군의 경우 1일 1.5 mg/kg 체중, 5% 첨가군은 3 mg/kg 체중 수준으로 우리나라와 식생활이 비슨한 일본인의 1일 총 플라보노이드 섭취량인 63 mg/일 (1.36 mg/kg 체중)과 유사한 수준으로 이보다 2배정도 많이 섭취하였을 때 혈압감소 효과가 더 크지는 않았다.²³⁾
에서 추출된 플라보노이드를 SHR에 (5 mg/kg 체중)을 투여하였을 때 혈압을 강하시켰고 플라보노이드가 뇨를 통한 전해질 제거를 증가시키고, 사구체 여과율을 증가시켜 이뇨작용과 성분이 혈압을 낮추는 데 효과적이었다고 보고하였다. 본 연구에서도 여러 채소 및 과일내 총 페놀함량과 플라보노이드 함량을 측정한 결과 무청 건조 분말내 총 페놀 함량과 총 플라보노이드 함량이 매우 높아 무청 건조분말내 총 페놀 및플라보노이드 성분도 혈압을 낮추는 데 기여하였을 것으로 판단된다.
이는 무청 건조 분말 섭취시 Wistar종과 SHR 종에서 ACE 활성이 낮아졌으며 SRH군에서 ACE 활성 억제가 특히 컸기 때문으로 생각된다. 신장조직내 ACE 활성은 5% 첨가군에서 감소경향이 있었으나 유의성은 없었으며, 정상혈압쥐에 비해 고혈압쥐에서 높았다. 혈청내 ACE 활성은 Wistar 종과 SHR 종에서 모두 유의적인 차이가 없었다.
섭취량에 비례하여 혈압의 감소가 있었을 것으로 기대하였으나 섭취량증가에 의한 더 큰 감소 효과는 나타나지 않았다. 실험 3주째 일시적인 혈압의 상승이 있었을 때, SHR종에서 2.5% 섭취군에 비해 5% 섭취군의 혈압 상승이 가장 낮아 무청 건조분말은 혈압을 감소시키는 효과가 있음을 알 수 있었다. 본 연구에서 사용한 실험군의 플라보노이드 섭취량은 2.
SRH군의 혈압도 상승하였으나 SRL군에 비해 SRH군의 그 상승폭이 작았다. 실험 4주째 각 실험 군에서 1주째에 비해 혈압이 감소하였으며, SRL군과 SRH 군의 혈압 감소효과가 커서 SCC군에 비해 유의적으로 혈압이 낮아졌다. 따라서 실험 시작시 혈압에 비해 섭취 4주째 혈압은 무청 건조분말 섭취로 인해 유의적으로 감소하여 SRL군에서 21 mmHg의 수축기 혈압이 감소하였으며, SRH 군에서 약 19 mmHg의 혈압 감소가 있었다.
5% 무청 건조분말식이 또는 5% 무청 건조분말 식이를 4주간 급여시켰다. 실험 기간 동안 무청 건조 분말 섭취가 식이섭취량 및 체중 증가량에는 영향을 주지 않았으며, 무청 건조분말 섭취한 SHR군에서 유의하게 혈압이 감소되었으며, 2.5% 와 5% 섭취간의 차이는 없었다. 폐조직의 ACE 활성은 Wistar종에 비해 SHR 군에서 높았으며, 무청 건조 분말 섭취시 섭취량에 비례하여 종에 상관없이 억제되었으며 SHR군 5% 섭취군에서 가장 억제가 되었다.
5% 무청 건조분말 섭취군의 식이섭취량이 높은 경향이었으나 유의적인 차이는 아니었다. 실험 초기 체중은 실험군간 유의적인 차이가 있었지만 실험기간동안 총 식이 섭취량과 식이효율은 유의적인 차이가 없어 2.5% 또는 5%의 무청건조분말의 첨가는 체중증가나 식이 섭취량에 영향을 주지 않았음을 알 수 있었다(Table 3).
실험시작 시 수축기 혈압은 Wis-tar 군은 평균 134 mmHg 내외였으며, SHR군은 약 180 mmHg이었다. 실험식이 섭취 후 2주째부터 SHR군에서 무청 무첨가군의 혈압 190 mmHg에 비해 무청건조분말 섭취 시 2.5% 섭취군은 178.8 mmHg, 5% 섭취군 174.4 mmHg로 유의하게 감소하였다. 3주째 수축기 혈압은 SHR 각 실험군에서 다시 상승하여 SCC군과 SRL군간의 유의적인 차이가 없었다.
따라서 실험 시작시 혈압에 비해 섭취 4주째 혈압은 무청 건조분말 섭취로 인해 유의적으로 감소하여 SRL군에서 21 mmHg의 수축기 혈압이 감소하였으며, SRH 군에서 약 19 mmHg의 혈압 감소가 있었다. 이 결과에서 볼때 2.5% 섭취 시에도 혈압 감소효과가 있으며 실험기간 동안의 혈압의 변화를 볼 때 5%섭취와 2.5% 섭취의 효과는 유사한 것으로 나타났다. 정상혈압군인 Wistar 군에서는 실험 3주째 혈압의 상승이 있었으나 전 실험기간 동안 무청 건조 분말섭취는 혈압에 영향을 주지 않았다.
자연발증적 고혈압쥐의 체중은 동일한 주령의 정상혈압 쥐인 Wistar종에 비해 유의하게 낮았다 (p < 0.01).
5% 와 5% 섭취간의 차이는 없었다. 폐조직의 ACE 활성은 Wistar종에 비해 SHR 군에서 높았으며, 무청 건조 분말 섭취시 섭취량에 비례하여 종에 상관없이 억제되었으며 SHR군 5% 섭취군에서 가장 억제가 되었다. 신장 및 혈청내 ACE 활성은 각 실험군간의 통계적 유의성이 없었다.
신장조직내 ACE 활성은 5% 첨가군에서 감소경향이 있었으나 유의성은 없었으며, 정상혈압쥐에 비해 고혈압쥐에서 높았다. 혈청내 ACE 활성은 Wistar 종과 SHR 종에서 모두 유의적인 차이가 없었다.

후속연구

^42,43) ACE가 억제될 때 안지오텐신 II의 생성이 감소되며, 동시에 bradykinin을 증가시켜 혈관이 확장되어 Na 배설을 촉진 하여 체내 Na 배설과 함께 이뇨효과가 있다는 연구결과로 미루어 무청 건조 분말 섭취로 인한 Na 배설의 증가도 SHR 에서 혈압을 감소시키는 데 영향을 주었을 것으로 본다.⁵⁾ 그러나 정상혈압쥐에서 Na 배설 증가가 있었음에도 불구하고 혈압에 영향을 주지 않았던 것은 종에 따라 안지오텐신 II에 반응하는 혈관의 수용체수가 달랐다는 점에서 신장의 Na재흡수와 관련된 수용체에도 종간의 차이가 있었을 가능성을 시사하며 관련 연구를 통해 조사할 필요가 있다.³⁵⁾

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	혈압의 조절 체계는?	혈압은 주로 레닌-안지오텐신 체계 (renin angiotensin system, RAS)와 바소프레신 (vasopressin) 체계에 의해서 조절된다. RAS에서 안지오텐신 I은 안지오텐신 전환효소 (angiotensin converting enzyme, ACE)의 작용에 의해 안지오텐신 II와 디펩타이드인 His-Leu으로 분해된다.
	RAS에서 안지오텐신 I은 어떤 작용에 의해 안지오텐신 II와 디펩타이드인 His-Leu으로 분해되는가?	혈압은 주로 레닌-안지오텐신 체계 (renin angiotensin system, RAS)와 바소프레신 (vasopressin) 체계에 의해서 조절된다. RAS에서 안지오텐신 I은 안지오텐신 전환효소 (angiotensin converting enzyme, ACE)의 작용에 의해 안지오텐신 II와 디펩타이드인 His-Leu으로 분해된다. 안지오텐신 II는 혈관을 둘러싼 근육을 수축시키고, 동시에 ACE는 kinin-kallikrein 체계에서 혈관을 이완시키는 bradykinin을 불활성화시켜 혈압을 상승시킨다.
	고혈압 치료를 위해 화학적으로 합성된 약제들의 장기복용은 어떤 부작용을 초래하는가?	고혈압 치료를 위해 화학적으로 합성된 약제들이 사용되는 데 중등도 이상의 고혈압 치료는 이뇨제, β-차단제, 교감신경 억제제, 혈관 확장제, 칼슘 길항제 및 ACE 저해제가 사용된다. 그러나 이들 약물의 장기복용은 혈액 점도 증가, 칼륨을 비롯한 전해질의 불균형, 신장등의 장기 손상, 심부전증 악화등의 부작용을 초래하므로,11) 고혈압과 관련된 심혈관계 질환을 예방하거나 완화시키기 위해 식용 식물의 성분을 이용하고자 하는 연구들이 진행되어 왔다.12-15) 채소류는 항암, 항산화, 지질대사개선효과 및 다량의 섬유소로 인한 장기능 개선효과등의 기능을 갖고 있음이 보고되었고, 국내산 산채류 추출물의 항산화 효과 등 채소의 기능성 물질 및 생리적 효능에 대한 연구가 보고되고 있어 무청도 생리활성이 있음이 기대되는 식용 채소이다.

참고문헌 (44)

Kearney PM, Whelton M, Reynolds K, Muntner P, Whelton PK, He J. Global burden of hypertension: Analysis of worldwide data. Lancet 2005; 365: 217-223
Ezzati M, Lopez AD, Rodgers A, Vander Hoorn S, Murray CJ, Comparative Risk Assessment Collaborating Group. Selected major risk factors and global and regional burden of disease. Lancet 2002; 360: 1347-1360

상세보기
Ministry of Health and Welfare, KHANES IV 2nd year report; 2008, p.50
Ames RP. Insights from Laragh's review course: the role of the renin-angiotensin system in blood pressure regulation. Am J Hypertens 2001; 15(7): 653-654
Saito Y, Nakamura K, Kawato K, Imayasu S. Angiotensin I converting enzyme inhibitors in sake and its by-products. Nippon Nogeikagaku Kaishi 1992; 66: 1081-1087

상세보기
Okamoto A, Hanagata H, Matsumoto E, Kawamura Y, Koizumi Y, Yanagida F. Angiotensin I converting enzyme inhibitory activities of various fermented foods. Biosci Biotechnol Biochem 1995; 59: 1147-1149

상세보기
Hagiwara Y, Kubo T.γ-Aminobutyric acid in the lateral septal area is involved in mediation of the inhibition of hypothalamic angiotensin II sensitive neurons induced by blood pressure increases in rats. Neurosci Lett 2007; 419: 242-246

상세보기
Shonis CA, Waldrop TG. Augmented neuronal acitivity in the hypothalamus of spontaneously rats. Brain Res Bull 1993; 30: 45-52

상세보기
Shonis CA, Peano CA, Dillon GH, Waldrop TG. Cardiovascular response to blockade of GABA synthesis in the hypothalamus of the spontaneously hypertensive rat. Brain Res Bull 1993; 31: 493- 499

상세보기
Singewald N, Schneider C, Philippu A. Disturbances in blood pressure homeostasis modify GABA release in the locus coeruleus. Neuroreport 1994; 5: 1709-1712

상세보기
Waeber B, Bruner HR. A look through the new therapeutic window. J hypertens 1998; 16(Suppl): S11-S16
Luo LF, Wu WH, Zhou YJ, Yan J, Yang GP, Ouyang DS. Antihypertensive effect of eucommia ulmoides oliv. extracts in spontaneously hypertensive rats. J Ethnopharmacol 2010; 129(2): 238-243.

상세보기
Kwan CY. Vascular effects of selected antihypertensive drugs derived from traditional medicinal herbs. Clin Exp Pharmacol Physiol 1995; 22(1, Suppl): S297-S299.

상세보기
Sutter MC, Wang YX. Recent cardiovascular drugs from Chinese medicinal plants. Cardiovasc Res 1993; 27(11): 1891-1901

상세보기
Gillis CN. Panax ginseng pharmacology: A nitric oxide link? Biochem Pharmacol 1997; 54(1): 1-8

상세보기
Schmidtlein H, Herrmann K. On phenolic acids of vegetables. I. hydroxycinnamic acids and hydroxybenzoic acids of brassicaspecies and leaves of other cruciferae. Z Lebensm Unters Forsch 1975; 159(3): 139-148

상세보기
Sgherri C, Cosi E, Navari-Izzo F. Phenols and antioxidative status of raphanus sativus grown in copper excess. Physiol Plant 2003; 118(1): 21-28

상세보기
Ku KH, Lee KA, Kim YE. Physiological activity of extracts from radish (raphanus sativus L.) leaves. J Korean Soc Food Sci Nutr 2008; 37(3): 390-395

원문보기 상세보기
Han JS, Kim JS, Kim MS, Choi YH, Minamide T, Huh SM. Changes on mineral contents of vegetable by various cooking methods. Korean J Soc Food Sci 1999; 15: 382-387
Ghayur MN, Gilani AH. Gastrointestinal stimulatory and uterotonic activities of dietary radish leaves extract are mediated through multiple pathways. Phytother Res 2005; 19(9): 750-755

상세보기
Gilani AH, Ghayur MN. Pharmacological basis for the gut stimulatory activity of raphanus sativus leaves. J Ethnopharmacol 2004; 95(2-3): 169-172

상세보기
Marinova D, Ribarova F, Atanassova M. Total phenolics and total flavonoids in Bulgarian fruits and vegetables. J Univ Chem Technol Metallurgy 2005; 40(3): 255-260
Chun OK, Chung SJ, Song WO. Estimated dietary flavonoid intake and major food sources of U.S. adults. J Nutr 2007; 137(5): 1244-1252

상세보기
Neels HM, van Sande ME, Scharpe SL. Sensitive colorimetric assay for angiotensin converting enzyme in serum. Clin Chem 1983; 29(7): 1399-1403

상세보기
Clarke G, O'Mahony S, Malone G, Dinan TG. An isocratic high performance liquid chromatography method for the determination of GABA and glutamate in discrete regions of the rodent brain. J Neurosci Methods 2007; 160(2): 223-230

상세보기
Vermeij TA, Edelbroek PM. Simultaneous high-performance liquid chromatographic analysis of pregabalin, gabapectin and vigabatrin in human serum by precolumn derivatization with o-phataldialdehyde an fluorescence detection. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2004; 810(2): 297-303

상세보기
Lee HS, Chang MJ, Kim SH. Effects of poly- ${\gamma}$ -glutamic acid o serum and brain concentrations of glutamate and GABA in dietinduced obese rats. Nutr Res Pract 2010; 4(1): 23-29

원문보기 상세보기
Peach MJ. Renin-angiotensin system: biochemistry and mechanisms of action. Physiol Rev 1977; 57(2); 313-370

상세보기
Soubrier F, Wei L, Hubert C, Clauser E, Alhenc-Gelas F, Corvol P. Molecular biology of the angiotensin I-converting enzyme: II. Structure-function. Gene polymorphism and clinical implications. J Hypertens 1993; 11(6): 599-604

상세보기
de Gasparo M, Catt KJ, Inagami T, Wright JW, Unger TH. International Union of pharmacology. XXIII. The angiotensin receptors. Pharmacol Rev 2000: 52: 415-472

상세보기
Chobanian AV, Bakris GL, Black HR, Cushman WC, Green LA, Izzo JL Jr, Jones DW, Materson BJ, Oparil S, Wright JT Jr, Roccella EJ. Seventh report of the joint national committee on prevention, detection, evaluation, and treatment of high blood pressure. Hypertension 2003; 42(6): 1206-1252

상세보기
Edemann D. Touyz Rm, Li JS, Deng LY, Schiffrin EL. Altered angiotensin II-induced small artery contraction during the development of hypertension in spontaneously hypertensive rats. Am J Hypertens 1999; 12(7): 716-723

상세보기
Remuzzi G, Perico N, Macia M, Ruggenenti P. The role of renin- angiotensin-aldosterone system in the progression of chronic kidney disease, Kidney Int 2005: 99 (Suppl.): S57-S65
Azizi M, Webb R, Nussberger J, Hollenberg NK. Renin inhibition with aliskiren: where are we now, and where are we going? J Hypertens 2006; 24(2): 243-256

상세보기
Arendshorst WJ, Chatziantoniou C, Daniels FH. Role of angiotensin in the renal vasoconstriction observed during the development of genetic hypertension. Kidney Int 1990; 30 (Suppl): S92- S96
Correa FMA, Viswanathan M, CIUFFO GM, Tsutsumi K, Saavedra JM. Kidney angiotensin II receptors and converting enzyme in neonatal and adult wistar-kyoto and spontaneously hypertensive rats. Peptides 1995; 16(1): 19-24

상세보기
Niwa A, Israel A, Saavedra JM. Pindolol decreases plasma angiotensin- converting enzyme activity in young spontaneously hypertensive rats. Eur J Pharmacol 1985; 110(1): 133-136

상세보기
Dillon GH, Shonis CA, Waldrop TG. Hypothalamic GABAergic modulation of respiratory responses to baroreceptor stimulation. Respir Physiol 1991; 85(3): 289-304

상세보기
DiMicco JA, Abshire VM. Evidence of GABAergic inhibition of a hypothalamic sympathoexcitatory mechanism in anesthetized rats. Brain Res 1987; 402: 1-10

상세보기
Hagiwara Y, Kubo T. γ-Aminobutyric acid in the lateral septal area is involved in mediation of the inhibition of hypothalamic angiotensin II-sensitive neurons induced by blood pressure increases in rats. Neurosci Lett 2007; 419(3): 242-246

상세보기
Adachi N, Tomonaga S, Tachibana T, Denbow DM, Furuse M. (-)-Epigallocatechin gallate attenuates acute stress responses through GABAergic system in the brain. Eur J Pharmacol 2006; 531(1-3): 171-175

상세보기
Qinn ZN, Song LH, Gu ZL, Chen BQ, Zhang KP, Li Hz, Peng YK. An experimental observation on the diuretic effect of an extract of Luobuma (Apocynum 6enetum) leaves. Zhong Yao Tong Bao 1988; 13(10): 44-46

상세보기
Kim D, Yokozawa T, Hattori M, Kadota S, Namba T. Effects of aqueous extracts of Apocynum 6enetum leaves on spontaneously hypertensive, renal hypertensive and NaCl-fed-hypertensive rats. J Ethnopharmacol 2000; 72(1-2): 53-59

상세보기
Jouad H, Lacaille-Dubois MA, Lyoussi B, Eddouks M. Effects of the flavonoids extracted from Spergularia purpurea Pers. on arterial blood pressure and renal function in normal and hypertensive rats. J Ethnopharmacol 2001; 76(2): 159-163

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표제어: PCR

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용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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