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문제 정의
- 그러나, 재래종 조선무의 무청에 대한 항균 활성 및 항혈전 활성에 대한 보고는 없으며 활성 분획물 및 활성물질에 대한 연구는 아직 미미한 상태이다[4, 7]. 따라서, 본 연구에서는 무청을 이용한 새로운 건강식품소재 개발을 목표로, 국내에서 가장 많이 생산되면서도 효율적으로 이용되지 못하고 있는 재래종 조선무의 무청을 대상으로 ethanol 추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물을 조제하여, 이들의 유용생리활성들을 검토하였으며, 그 결과 무청 ethanol 추출물, 특히 ethylacetate 분획물에서 매우 강력한 항균, 항산화, 및 항혈전 활성을 확인하였다. 본 연구결과는, 대부분 폐기되고 있는 무청이 영양적인 면에서뿐만 아니라 유용 생리활성면에서도 매우 가치 있는 식품소재이며, 향후 건강식품 개발의 새로운 소재로 활용될 수 있음을 제시하고 있다.
- 그러나, 최근의 도시와 농촌의 격리, 산업화의 정착, 식생활 습관의 변화 등으로 인해, 무청은 대부분 폐기되고 있는 실정이며, 무청의 효율적인 이용 및 유용생리활성에 대한 연구는 미미한 상태이다. 본 연구에서는 무청을 이용한 새로운 건강식품소재 개발 연구의 일환으로 조선무의 무청을 대상으로 ethanol 추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물들을 조제하여, 이들의 항균, 항산화 및 항혈전 활성들을 검토하였다. 그 결과 무청의 ethanol 추출물의 수율은 5.
제안 방법
- 37℃에서 0.5 U 트롬빈(Sigma Co., USA) 50 µl와 20 mM CaCl2 50 µl, 다양한 농도의 시료 추출액 10 µl를 coagulometer의 튜브에 혼합하여 2분간 반응시킨 후, 혈장 100 µl를 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였으며, 시료 대조군으로는 아스피린(Sigma Co., USA)을, 용매 대조군으로는 DMSO를 사용하였다.
- 사용된 인간혈장은 최근 1개월 동안 약물투여를 받지 않은 지원자의 전혈로부터 조제하였으며, 채혈 후 4oC에서 5,000 g로 5분 동안 원심 분리하여 혈장을 분리하고 냉동보관 하였으며(신선동결혈장), 필요시 상온에서 해동하여 사용하였다. PT와 aPTT는 MD Pacific Hemostasis(MD Pacific, China)의 분석시약을 사용하여 측정하였다. 트롬빈 저해 활성은 기존의 보고한 Amelung coagulometer KC-1A (Japan)를 이용하여 혈액 응고시간을 측정하여 평가하였다[21].
- 무청 추출물의 유기용매 분획물 제조를 위해서는, ethanol 추출물을 물에 현탁한 후 n-hexane, ethylacetate 및 butanol을 이용하여 순차적으로 분획하고 물 잔류물을 회수하였으며[21], 각각의 분획물들은 감압 건조하여 분말화 하였다. 각각의 시료 분말은 DMSO에 녹인 후, 적당한 농도로 희석하여 항균, 항산화 및 항혈전 활성 평가에 사용하였다. 기타 사용한 시약은 시약급 이상으로 Sigma Co.
- 대조구로는 항세균제인 ampicillin과 항진균제인 miconazole (Sigma Co., USA)을 각각 1 µg/disc 농도로 사용하였으며, 생육저지환의 크기는 육안으로 생육이 나타나지 않는 부분의 지름을 mm 단위로 측정하였고, 3회 이상 평가 후 대표 결과로 나타내었다.
- 항산화 활성 평가 결과, ethylacetate 분획물에서 우수한 DPPH 소거능, ABTS 소거능, nitrite 소거능 및 환원력을 확인하였다. 또한 항혈전 활성 평가에서도 ethylacetate 분획물에서 양호한 트롬빈 및 프로트롬빈 억제활성과 함께, 강력한 내인성 혈전 생성억제를 확인하였다. 본 연구결과는 무청이 영양적 측면 및 유용생리활성 측면에서 매우 우수한 식품소재임을 제시하고 있으며, 무청을 이용한 기능성 식품 개발 및 ethylacetate 분획을 이용한 유용 소재개발의 기본 자료로 활용될 것이다.
- 먼저 DPPH 음이온 소거능 측정의 경우, 다양한 농도로 희석한 시료 20 µl에 99.5% ethanol에 용해시킨 2 × 10-4 M DPPH 용액 380 µl를 넣고 혼합하여 37℃에서 30분 동안 반응시킨 후, 516 nm에서 microplate reader (Asys Hitech, Expert96, Asys Co., Austria)를 사용하여 흡광도를 측정하였다.
- 먼저, 항세균 활성 평가의 경우, Nutrient broth (Difco Co., USA)에 각각의 세균을 접종하여 37℃에서 24시간 동안 배양한 후, 각 균주를 O.D.600 0.1로 조정하여 Nutrient agar (Difco Co., USA) 배지를 포함하는 멸균 petri dish (90 × 15 mm, Green Cross Co., Ltd., Korea)에 100 µl 도말하고, 각각의 시료 5 µl를 멸균 disc-paper (지름 6.5 mm, Whatsman No.2)에 가하여, 37℃에서 24시간 동안 배양하였으며, 진균 경우에는 Sabouraud dextrose (Difco Co., USA)를 이용하여 동일한 방법으로 30℃에서 24시간 동안 배양 후, 생육저지환의 크기를 측정하여 항균활성을 평가하였다[21, 22].
- 무청 추출물 및 이의 분획물 시료들을 DMSO (dimethylsulfoxide)에 녹인 후 적당한 농도로 희석하여 coagulation parameter인 Thrombin time (TT), Prothrombin time(PT) 및 activated partial thromboplastin time (aPTT)를 측정하였다[11, 21]. 사용된 인간혈장은 최근 1개월 동안 약물투여를 받지 않은 지원자의 전혈로부터 조제하였으며, 채혈 후 4oC에서 5,000 g로 5분 동안 원심 분리하여 혈장을 분리하고 냉동보관 하였으며(신선동결혈장), 필요시 상온에서 해동하여 사용하였다.
- 무청 추출물 및 이의 분획물의 항산화 활성은 DPPH (1,1- diphenyl-2-picryl hydrazyl) 음이온 소거능, ABTS [2,2- azobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate)] 양이온 소거능, nitrite 소거능 및 환원력 측정으로 평가하였다[2, 11, 21]. 먼저 DPPH 음이온 소거능 측정의 경우, 다양한 농도로 희석한 시료 20 µl에 99.
- , USA)를 가하고 혼합하였다. 이후 15분간 실온에서 방치 후 520 nm에서 흡광도를 측정하여 잔존 nitrite 양을 측정하였다. NSA (%)는 다음의 식에 의해 계산하였다[21].
- PT와 aPTT는 MD Pacific Hemostasis(MD Pacific, China)의 분석시약을 사용하여 측정하였다. 트롬빈 저해 활성은 기존의 보고한 Amelung coagulometer KC-1A (Japan)를 이용하여 혈액 응고시간을 측정하여 평가하였다[21]. 37℃에서 0.
- 항혈전 활성은 트롬빈 활성도에 의한 혈전 생성까지 소요되는 시간을 나타내는 TT, 외인계 응고인자의 결핍 및 이상을 검출하는 검사로 혈장에 조직 트롬보플라스틴과 칼슘을 첨가하여 피브린이 생성될 때까지의 시간을 나타내는 PT(외인성 혈전생성), 혈장내 응고인자의 결핍이나 저해 정도에 따라 혈전 생성이 나타나는 시간을 의미하는 aPTT(내인성 혈전생성)로 평가하였다. 본 실험에서는 용매 대조구로 사용된 DMSO의 경우, 33.
- 5 ml를 첨가하여 반응을 종료하고 4000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 회수하였다. 회수한 상등액은 증류수로 2배 희석한 후, 신선하게 조제된 0.1% ferric chloride 용액과 5:1 (v/v) 비율로 혼합하고 700 nm에서 흡광도를 측정하여 평가하였다. 상기의 항산화 실험에서 대조구로는 vitamin C (Sigma Co.
대상 데이터
- 2011년 경북 안동에서 생산된 조선무의 무청을 구입하여 이를 50℃ 건조기에서 2일간 건조한 후, 추출에 적합하도록 분쇄하여 95% ethanol (Daejung Chemicals & Metals Co., Ltd., Korea)을 10배 가하여 상온에서 3회 추출하였다.
- 항혈전 활성은 트롬빈 활성도에 의한 혈전 생성까지 소요되는 시간을 나타내는 TT, 외인계 응고인자의 결핍 및 이상을 검출하는 검사로 혈장에 조직 트롬보플라스틴과 칼슘을 첨가하여 피브린이 생성될 때까지의 시간을 나타내는 PT(외인성 혈전생성), 혈장내 응고인자의 결핍이나 저해 정도에 따라 혈전 생성이 나타나는 시간을 의미하는 aPTT(내인성 혈전생성)로 평가하였다. 본 실험에서는 용매 대조구로 사용된 DMSO의 경우, 33.6초의 TT, 18.6초의 PT 및 40.5초의 aPTT를 나타내었다(Table 4). 현재 항혈전제로 사용되고 있는 아스피린(상품명: 프로덱트)의 경우 1.
- 무청 추출물 및 이의 분획물 시료들을 DMSO (dimethylsulfoxide)에 녹인 후 적당한 농도로 희석하여 coagulation parameter인 Thrombin time (TT), Prothrombin time(PT) 및 activated partial thromboplastin time (aPTT)를 측정하였다[11, 21]. 사용된 인간혈장은 최근 1개월 동안 약물투여를 받지 않은 지원자의 전혈로부터 조제하였으며, 채혈 후 4oC에서 5,000 g로 5분 동안 원심 분리하여 혈장을 분리하고 냉동보관 하였으며(신선동결혈장), 필요시 상온에서 해동하여 사용하였다. PT와 aPTT는 MD Pacific Hemostasis(MD Pacific, China)의 분석시약을 사용하여 측정하였다.
- 1% ferric chloride 용액과 5:1 (v/v) 비율로 혼합하고 700 nm에서 흡광도를 측정하여 평가하였다. 상기의 항산화 실험에서 대조구로는 vitamin C (Sigma Co., USA)를 사용하였으며, 용매 대조구로는 DMSO를 사용하였다. 각각의 활성 평가는 각각 3회 이상 반복한 실험의 평균과 편차로 표시하였으며, 소거능 평가에서 50%의 소거능이 나타나는 시료 농도를 IC50로 나타내었다[21].
- 조제된 무청의 ethanol 추출물 및 이의 분획물의 항균 활성을 평가하기 위해 그람 음성균으로 Escherichia coli KCTC 1682, Proteus vulgaris KCTC 2433, Salmonella typhimurium KCTC 1926, Pseudomonas aeruginosa KACC 10186를, 그람 양성균으로는 Staphylococcus aureus KCTC 1916, Listeria monocytogenes KACC 10550, Bacillus subtilis KCTC 1924를 사용하였다. 한편 항진균 활성 평가를 위해서는 Saccharomyces cerevisiae IF0 0233 및 캔디다증 진균감염증 원인균 Candida albicans KCTC 1940를 사용하였다.
- 총 polyphenol 함량은 추출검액 400 µl에 50 µl의 Folin-ciocalteau, 100 µl의 Na2CO3 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725 nm에서 흡광도를 측정하였다[20]. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총당 정량의 경우에는 phenolsulfuric acid법을, 환원당 정량의 경우에는 DNS 변법을 이용하였다[21].
- 조제된 무청의 ethanol 추출물 및 이의 분획물의 항균 활성을 평가하기 위해 그람 음성균으로 Escherichia coli KCTC 1682, Proteus vulgaris KCTC 2433, Salmonella typhimurium KCTC 1926, Pseudomonas aeruginosa KACC 10186를, 그람 양성균으로는 Staphylococcus aureus KCTC 1916, Listeria monocytogenes KACC 10550, Bacillus subtilis KCTC 1924를 사용하였다. 한편 항진균 활성 평가를 위해서는 Saccharomyces cerevisiae IF0 0233 및 캔디다증 진균감염증 원인균 Candida albicans KCTC 1940를 사용하였다. 먼저, 항세균 활성 평가의 경우, Nutrient broth (Difco Co.
데이터처리
- 이후 65 µl CaCl2 (35 mM)을 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 3회 반복한 실험의 평균과 편차로 나타내었다. aPTT 연장 활성은 3회 이상 반복한 aPTT 실험의 평균치를 용매 대조구인 DMSO의 aPTT 평균치의 비율로 나타내었다.
이론/모형
- 무청의 수분함량은 적외선 수분측정기(HG53 Halogen Moisture Analyzer, Mettler-Toledo International Inc., Zurich, Switzerland)로 측정하였으며, 조단백, 조지방, 및 회분 함량은 AOAC 방법[1]에 따라 분석하였다. 즉 조단백질은 Kjeldahl법, 조지방은 soxhlet 추출법, 회분은 550℃ 직접 회화법으로 분석하였다.
- , Zurich, Switzerland)로 측정하였으며, 조단백, 조지방, 및 회분 함량은 AOAC 방법[1]에 따라 분석하였다. 즉 조단백질은 Kjeldahl법, 조지방은 soxhlet 추출법, 회분은 550℃ 직접 회화법으로 분석하였다. 총 flavonoid의 함량 측정은 기존의 보고한 방법[20, 23]에 따라 측정하였으며, 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고 여과한 추출검액 400 µl에 90% diethylene glycol 4 ml를 첨가하고 다시 1 N NaOH 40 µl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 총 flavonoid의 함량 측정은 기존의 보고한 방법[20, 23]에 따라 측정하였으며, 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고 여과한 추출검액 400 µl에 90% diethylene glycol 4 ml를 첨가하고 다시 1 N NaOH 40 µl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총당 정량의 경우에는 phenolsulfuric acid법을, 환원당 정량의 경우에는 DNS 변법을 이용하였다[21]. 각각의 분석결과는 3회 반복한 실험의 평균과 편차로 나타내었다.
성능/효과
- subtilis에 대해 모두 양호한 항균 활성을 나타내었다. Ethanol 추출물의 분획물 중 항세균 활성은 nhexane, ethylacetate 및 butanol 분획물에서 확인되어 무청 추출물이 다양한 항세균 활성물질을 포함하고 있음을 알 수 있었다. 특히 ethylacetate 분획물의 경우 S.
- Nitrite 소거능의 경우, ethanol 추출물, n-hexane 분획, ethylacetate 분획, butanol 분획 및 물 잔류물이 각각 100 µg/ml 농도에서 31.8 ± 2.8, 30.7 ± 0.3, 63.5 ± 3.9%, 46.4 ± 5.2% 및 11.1 ± 0.3% 소거능을 나타내어, 무청이 다양한 지용성 및 수용성 성분의 nitrite 소거물질을 함유하고 있음을 알 수 있었다(Fig. 1C).
- 무청 ethanol 추출물의 순차적 분획물의 수율 및 이들의 성분분석 결과는 Table 1에 나타내었다. n-hexane, ethylacetate 및 butanol 분획물의 수율은 각각 25.3%, 3.6% 및 19.4%이었으며, 물 잔류물은 51.7%를 차지하여 ethanol 추출물의 50% 이상이 수용성 물질임을 알 수 있었다. 한편 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량 분석결과 ethanol 추출물에서 25 mg/g 및 29.
- 본 연구에서는 무청을 이용한 새로운 건강식품소재 개발 연구의 일환으로 조선무의 무청을 대상으로 ethanol 추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물들을 조제하여, 이들의 항균, 항산화 및 항혈전 활성들을 검토하였다. 그 결과 무청의 ethanol 추출물의 수율은 5.6%이었으며, 이들의 n-hexane, ethylacetate 및 butanol 분획 효율은 각각 25.3, 3.6, 19.4%로 나타났으며, 물 잔류물은 51.7%를 나타내었다. 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량 분석 결과 ethylacetate 분획에서 97.
- aeruginosa에 대해서는 항세균 활성이 나타나지 않았다. 그러나 그람양성균에 대해서는 실험균주 S. aureus, L. monocytogenes, B. subtilis에 대해 모두 양호한 항균 활성을 나타내었다. Ethanol 추출물의 분획물 중 항세균 활성은 nhexane, ethylacetate 및 butanol 분획물에서 확인되어 무청 추출물이 다양한 항세균 활성물질을 포함하고 있음을 알 수 있었다.
- 대조구로 사용된 vitamin C의 경우 50 µg/ml 농도에서 79.9 ± 1.6% DPPH 소거능을 나타내어 강력한 항산화능을 확인하였다.
- 91 mg/g의 매우 높은 함량을 나타내었으며, ethylacetate 분획물은 매우 강력한 항균, 항산화, 및 항혈전 활성을 나타내었다. 먼저 항균 활성의 경우 무청 n-hexane 및 ethylacetate 분획물은 그람 양성균(S. aureus, L. monocytogenes 및 B. subtilis)에 대해 양호한 항균 활성을 나타내었으며, 그람 음성균에서는 E. coli 및 P. aeruginosa를 제외한 P. vulgaris와 S. typhimurium에 대해 생육억제 활성을 나타내었다. 즉, 물 잔류물을 제외한 모든 분획물에서 부분적인 항세균활성이 나타나, 무청 추출물이 다양한 항세균 활성물질을 포함함을 확인하였다.
- 먼저 항세균 활성대조구로 사용된 ampicillin(1 µg/disc)의 경우 8.0-34.5 mm의 생육억제환을 나타내어 강력한 항세균 활성을 확인하였으며, 항진균제인 miconazole(1 µg/disc)의 경우 C. albicans에 대해 20 mm의 생육억제환을 나타내었다.
- 무청 시료 중에서는 ethylacetate 분획물이 500 µg/ml 농도에서 76.6 ± 0.5% DPPH 소거능을 나타내어 가장 우수한 소거능을 나타내었으며, 그 다음으로 butanol 분획은 동일농도에서 51.5 ± 1.5% 소거능을 나타내었다.
- 무청 추출물 및 순차적 유기용매 분획물의 제조 및 성분분석 조선무 지하부가 수분함량 94.3%, 조단백질, 조지방, 탄수화물 및 회분 함량이 각각 0.8 ± 0.2%, 0.1 ± 0.01%, 4.4 ± 0.1%, 및 0.4 ± 0.03%로 나타난 것에 비해, 조선무 무청의 경우 수분함량은 90.5 ± 1.3%이었으며, 조단백질, 조지질, 탄수화물 및 회분 함량은 각각 2.3 ± 0.3%, 0.2 ± 0.05%, 4.5 ± 0.2% 및 1.5 ± 0.1%로 나타나, 무의 지하부에 비해 무청이 영양적으로 우수함을 확인하였다.
- 38배 연장된 aPTT를 나타내어 항혈전 활성을 확인하였다. 분획물 중에서는 ethylacetate 분획물에서 무첨가구에 비해 2.43배 연장된 TT, 2.42배 연장된 PT를 나타내어 아스피린에 필적하는 우수한 항혈전 활성을 확인하였으며, 특히 내인성 혈전 생성을 나타내는 aPTT의 경우 무첨가구에 비해 15배 이상 연장된 응고시간을 나타내어, 무청 ethylacetate 분획물이 내인성 혈전 생성을 매우 강력하게 저해함을 알 수 있었다. 향후 활성물질 분리 및 이의 혈전생성 억제 기작에 대한 추가적인 연구가 필요하리라 판단된다.
- 1D). 전체적인 활성 radical 소거능의 IC50는 Table 3에 나타내었으며, ethylacetate 분획물에서 DPPH 소거능, ABTS 소거능, nitrite 소거능의 IC50는 각각 222.12, 130.84 및 69.44 mg/ml를 나타내어 분획물 중 가장 우수한 항산화능을 나타내었다.
- typhimurium에 대해 생육억제 활성을 나타내었다. 즉, 물 잔류물을 제외한 모든 분획물에서 부분적인 항세균활성이 나타나, 무청 추출물이 다양한 항세균 활성물질을 포함함을 확인하였다. 항산화 활성 평가 결과, ethylacetate 분획물에서 우수한 DPPH 소거능, ABTS 소거능, nitrite 소거능 및 환원력을 확인하였다.
- 7%를 나타내었다. 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량 분석 결과 ethylacetate 분획에서 97.57 및 152.91 mg/g의 매우 높은 함량을 나타내었으며, ethylacetate 분획물은 매우 강력한 항균, 항산화, 및 항혈전 활성을 나타내었다. 먼저 항균 활성의 경우 무청 n-hexane 및 ethylacetate 분획물은 그람 양성균(S.
- 5 mg/g으로 높은 함량을 보였으며, 이는 건강식품으로 알려진 참나물보다는 낮은 함량이나, 산약이나 체리보다 높은 함량을 나타내었다[2, 11]. 특히 무청의 분획물 중 ethylacetate 분획물의 경우 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량이 각각 97.5 mg/g 및 152.9 mg/g으로 매우 높음을 확인하였으며, butanol 및 n-hexane 분획물에서도 각각 20-45 mg/g 및 49-71 mg/g의 높은 함량을 나타내었다. 한편 총당의 경우 물 잔류물 > butanol 분획 > ethylacetate 분획 > n-hexane 분획순으로 나타냈으며, 환원당의 경우도 유사한 패턴으로 나타났다.
- 7%를 차지하여 ethanol 추출물의 50% 이상이 수용성 물질임을 알 수 있었다. 한편 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량 분석결과 ethanol 추출물에서 25 mg/g 및 29.5 mg/g으로 높은 함량을 보였으며, 이는 건강식품으로 알려진 참나물보다는 낮은 함량이나, 산약이나 체리보다 높은 함량을 나타내었다[2, 11]. 특히 무청의 분획물 중 ethylacetate 분획물의 경우 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량이 각각 97.
- 즉, 물 잔류물을 제외한 모든 분획물에서 부분적인 항세균활성이 나타나, 무청 추출물이 다양한 항세균 활성물질을 포함함을 확인하였다. 항산화 활성 평가 결과, ethylacetate 분획물에서 우수한 DPPH 소거능, ABTS 소거능, nitrite 소거능 및 환원력을 확인하였다. 또한 항혈전 활성 평가에서도 ethylacetate 분획물에서 양호한 트롬빈 및 프로트롬빈 억제활성과 함께, 강력한 내인성 혈전 생성억제를 확인하였다.
- 환원력의 경우에도 ethylacetate 분획 > butanol 분획 > n-hexane 분획 > 물 잔류물의 순으로 나타나, ethylacetate 분획이 다양한 항산화력 평가에서 가장 우수함을 알 수 있었다(Fig. 1D).
후속연구
- 향후 활성물질 분리 및 이의 혈전생성 억제 기작에 대한 추가적인 연구가 필요하리라 판단된다. 또한 무청의 항고혈압 활성이 무청의 ethylacetae 추출물에서 나타난다는 최근의 보고[7]를 고려하여, 무청 ethanol 추출물 중 ethylacetate 분획물의 항혈전, 항고혈압 기능성 식품소재로의 개발도 필요하다고 판단된다. 본 결과는, 버려지고 있는 무청이 영양적으로 우수할 뿐만 아니라, 항세균, 항산화 및 항혈전 활성을 가지고 있음을 제시하며, 무청을 이용한 새로운 식품소재 개발 가능성을 제시하고 있다.
- 또한 무청의 항고혈압 활성이 무청의 ethylacetae 추출물에서 나타난다는 최근의 보고[7]를 고려하여, 무청 ethanol 추출물 중 ethylacetate 분획물의 항혈전, 항고혈압 기능성 식품소재로의 개발도 필요하다고 판단된다. 본 결과는, 버려지고 있는 무청이 영양적으로 우수할 뿐만 아니라, 항세균, 항산화 및 항혈전 활성을 가지고 있음을 제시하며, 무청을 이용한 새로운 식품소재 개발 가능성을 제시하고 있다.
- 또한 항혈전 활성 평가에서도 ethylacetate 분획물에서 양호한 트롬빈 및 프로트롬빈 억제활성과 함께, 강력한 내인성 혈전 생성억제를 확인하였다. 본 연구결과는 무청이 영양적 측면 및 유용생리활성 측면에서 매우 우수한 식품소재임을 제시하고 있으며, 무청을 이용한 기능성 식품 개발 및 ethylacetate 분획을 이용한 유용 소재개발의 기본 자료로 활용될 것이다.
- 따라서, 본 연구에서는 무청을 이용한 새로운 건강식품소재 개발을 목표로, 국내에서 가장 많이 생산되면서도 효율적으로 이용되지 못하고 있는 재래종 조선무의 무청을 대상으로 ethanol 추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물을 조제하여, 이들의 유용생리활성들을 검토하였으며, 그 결과 무청 ethanol 추출물, 특히 ethylacetate 분획물에서 매우 강력한 항균, 항산화, 및 항혈전 활성을 확인하였다. 본 연구결과는, 대부분 폐기되고 있는 무청이 영양적인 면에서뿐만 아니라 유용 생리활성면에서도 매우 가치 있는 식품소재이며, 향후 건강식품 개발의 새로운 소재로 활용될 수 있음을 제시하고 있다.
- Ethanol 추출물의 분획물 중 항세균 활성은 nhexane, ethylacetate 및 butanol 분획물에서 확인되어 무청 추출물이 다양한 항세균 활성물질을 포함하고 있음을 알 수 있었다. 특히 ethylacetate 분획물의 경우 S. typhimurium 및 L. monocytogenes의 식중독 유발균에 대해 14.0-16.0 mm의 강력한 생육억제환을 나타내어(Table 2), 향후 이의 활성성분 규명 및 ethylacetae 분획물을 이용한 생물소재 개발연구가 필요하다고 판단된다. 한편 무청 추출물 및 이의 분획물에서 항진균 활성은 모두 나타나지 않았다.
- 42배 연장된 PT를 나타내어 아스피린에 필적하는 우수한 항혈전 활성을 확인하였으며, 특히 내인성 혈전 생성을 나타내는 aPTT의 경우 무첨가구에 비해 15배 이상 연장된 응고시간을 나타내어, 무청 ethylacetate 분획물이 내인성 혈전 생성을 매우 강력하게 저해함을 알 수 있었다. 향후 활성물질 분리 및 이의 혈전생성 억제 기작에 대한 추가적인 연구가 필요하리라 판단된다. 또한 무청의 항고혈압 활성이 무청의 ethylacetae 추출물에서 나타난다는 최근의 보고[7]를 고려하여, 무청 ethanol 추출물 중 ethylacetate 분획물의 항혈전, 항고혈압 기능성 식품소재로의 개발도 필요하다고 판단된다.
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