[논문]야교등(夜交藤)이 흰쥐 뇌와 간에서의 산화 억제에 미치는 영향

이한구; 한효상; 이영종

doi:10.6116/kjh.2010.25.1.013

야교등(夜交藤)이 흰쥐 뇌와 간에서의 산화 억제에 미치는 영향
The Study of the Anti-oxidative Effects of Polygonati Multiflori Caulis on Oxidized Brain and Liver Cells in Rats 원문보기

大韓本草學會誌 = The Korea journal of herbology, v.25 no.1, 2010년, pp.13 - 21

이한구 (경원대학교 한의과대학 본초학교실) , 한효상 (경원대학교 한의과대학 본초학교실) , 이영종 (경원대학교 한의과대학 본초학교실)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : This study was purposed to the anti-oxidative effects of Polygonati Multiflori Caulis(henceforth PMC) on oxidized brain and liver cells in rats. Methods : After extraction of PMC with water, the water extract was divided into five fractions : hexane, ethyl ether, ethyl acetate, butanol and an aqueous fraction. The phenol contents of each fraction were measured. The lipid peroxidation inhibition effect were then investigated. Results : After processing PCM water and PCM fractionations on oxidized brain cells in rats, the SOD (super oxide dismutase) activity and glutathione content were increased, and the NO (nitric oxide) content was decreased. It had much higher SOD activity than liver cells in rats excluded in the n-BuOH and aqueous fractions. In case of oxidized liver cells in rats, the SOD activity and glutathione content increased, while both the NO content and the MDA (malondialdehyde) content decreased. It had much higher glutathione content than brain cells in rats in the every fractions. It had much lower MDA content than brain cells in rats in the Aqueous fractions and brain cells in rats had much lower MDA content than liver cells in rats in the total extract, n-hexane, EtOEt, EtOAc and n-BuOH fractions. Conclusions : PMC has anti-oxidative effect on oxidized liver cells and brain cells in rats, through there are differences in fraction. Additionally, Anti-oxidative effect of brain cells can be relaxed the mental nerve and it is related PMC effect.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

이에 저자는 하수오의 뿌리줄기에서는 항산화효과가 보고되었는데, 줄기에서는 항암효과는 보고되었으나 항산화효과가 보고되지 않았으므로, 夜交藤( <<중화인민공화국약전≫에 근거하여 잎을 제거한 것)이 항산화 효과와 관련이 있을 것으로 생각되어, 산화 쥐의 뇌 및 간세포에서의 항산화 효과를 측정하여 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.

제안 방법

Pre-incubation을 36℃에서 5분 동안 실시한 뒤, GSH standard solution과 sample 세포 배양액을 20㎕/well로 분주하고 36℃에서 10분간 incubation을 실시하였다. 10분후, substrate working solution을 20 ㎕/well로 분주하고, 다시 36℃에서 10분간 incubation을 실시한 뒤 ELISA reader를 이용하여 405 nm에서 O.D.값을 측정하고 GSH 함량으로 환산하였다.
분리한 lymphocyte를 활성화시키기 위하여 anti-CD3와 anti-CD28을 1 ㎍/㎖로 처리하여 24시간 동안 RPMI 1640 media에 10%의 FBS와 antibiotic (penicillin 100 U/㎖, streptomycin 100 ㎍/㎖)을 처리한 complete media를 이용하여 배양을 한다. 24시간 후 세포의 계대배양을 실시하며 분획별로 얻은 건조 추출물을 RPMI 1640 media에 1%로 희석하여 10%의 FBS와 antibiotic (penicillin 100 U/㎖, streptomycin 100 ㎍/㎖)을 함께 처리하여 배양액으로 이용하였으며, 72시간 동안 36℃에서 세포 배양을 실시하였다. 배양된 세포를 harvest하는 시간에서 12～18시간 전에[3H]-thymidine을 1μCi 처리해준다.
AAPH로 산화적 스트레스를 유발한 실험동물에서 간과 뇌를 적출하여 clean bench 내에서 세포를 분리하여 3일간 夜交藤의 분획별로 얻은 건조 추출물을 RPMI 1640 media에 1%로 희석하여 10%의 FBS와 antibiotic (penicillin 100 U/㎖, streptomycin 100 ㎍/㎖)을 함께 처리한 뒤 배양을 실시한다. 3일 후, 원심분리를 실시하여 세포 배양액의 상층액만을 취하여 Super oxide dismutase (이하 SOD)와 glutathione (이하 GSH), Nitric oxide (이하 NO) assay, lipid peroxidation, catalase를 실시하였다.
6주령 수컷의 SD rat의 실험동물에게 AAPH를 매일 50 mg/kg씩 1 주일간 복강에 투여 하여, 산화적 스트레스를 유발하였다.
AAPH로 산화적 스트레스를 유발한 실험동물에서 간과 뇌를 적출하여 clean bench 내에서 세포를 분리하여 3일간 夜交藤의 분획별로 얻은 건조 추출물을 RPMI 1640 media에 1%로 희석하여 10%의 FBS와 antibiotic (penicillin 100 U/㎖, streptomycin 100 ㎍/㎖)을 함께 처리한 뒤 배양을 실시한다. 3일 후, 원심분리를 실시하여 세포 배양액의 상층액만을 취하여 Super oxide dismutase (이하 SOD)와 glutathione (이하 GSH), Nitric oxide (이하 NO) assay, lipid peroxidation, catalase를 실시하였다.
AAPH로 산화적 스트레스를 유발한 실험동물의 간 조직을 사용하였다. EtOEt를 이용하여 실험동물을 마취시킨 후, 대동맥 혈관에 HBSS (Ca²⁺, Mg^2₊ free)를 투여하며 복부의 대동맥을 절단시켜 동물의 혈액을 모두 배출시켜 주었다. 조직을 잘게 잘라서 RPMI 1640 media (with 10% FBS)와 collagenase typeⅣ (300 u/㎖)를 넣고 실온에서 90분간 incubation을 하고, 이때 20분에 한번씩 흔들어 줌으로써 세포가 잘 분리 되도록 하였다.
본 실험모델과 동일한 6주령 수컷의 SD rat의 간 조직을 사용하였다. EtOEt를 이용하여 실험동물을 마취시킨 후, 대동맥 혈관에 HBSS (Ca²⁺, Mg²⁺ free)를 투여하며 복부의 대동맥을 절단하여 동물의 혈액을 모두 배출하였다. 조직을 잘게 잘라서 RPMI 1640 media (with 10% FBS)와 collagenase type Ⅳ (300 u/㎖)를 넣고 실온에서 90분간 incubation을 한다.
AAPH로 산화적 스트레스를 유발한 실험동물의 뇌 조직을 사용하였다. EtOEt를 이용하여 실험동물을 마취시킨 후, 두개골을 절개하여 뇌 조직을 적출하였다. 뇌 조직을 잘게 잘라서 RPMI 1640 media (with 10% FBS)와 collagenase type Ⅳ (300 u/㎖)를 넣고 실온에서 30분간 incubation을 하고, 30분 후 뇌 조직을 RPMI 1640 media (with 10% FBS)를 사용하여 mesh에서 갈아주었다.
夜交藤 전탕에서 얻은 건조추출물을 20g에 증류수 400㎖를 넣어 녹인 후, 분획여두를 이용하여 n-hexane, ethyl ether (이하 EtOEt), ethyl acetate (이하 EtOAc), n-butanol (이하 n-BuOH) 및 증류수로 극성에 따라 분획하여 얻은 각각의 물 전탕 추출물을 각 층별로 모아 감압농축한 후 동결 건조하여 각 분획의 건조 추출물 얻었다. 각 분획별로 9%, 1.
夜交藤을 전탕 추출한 후, 전탕 추출물을 여러 가지 용매로 분획하여 세포 생존율 및 산화 쥐의 뇌 및 간세포에서의 항산화 효과를 측정한 결과, 아래와 같은 결론을 얻었다.
EtOEt를 이용하여 실험동물을 마취시킨 후, 두개골을 절개하여 뇌 조직을 적출하였다. 뇌 조직을 잘게 잘라서 RPMI 1640 media (with 10% FBS)와 collagenase type Ⅳ (300 u/㎖)를 넣고 실온에서 30분간 incubation을 하고, 30분 후 뇌 조직을 RPMI 1640 media (with 10% FBS)를 사용하여 mesh에서 갈아주었다. 이렇게 얻은 시료를 원심 분리하여 세포를 RPMI 1640 media에 washing을 실시하고, cell strainer를 이용하여 지질을 걸러주고, 걸러진 세포들은 RPMI 1640 media에 2회 washing을 실시한 후 사용하였다.
본 실험에서 夜交藤을 전탕 추출한 후, 전탕 추출물을 여러 가지 용매로 분획하였다. Aqueous층을 제외하고는 줄기는 EtOEt층에서 17%로 가장 높은 수득률을 보였고, EtOAc 층에서 2.
본 실험에서는 AAPH를 SD Rat에 주사하여 급성적 산화 스트레스를 유발한 다음, 전탕액을 투여하고, 뇌와 간세포에서 각각 SOD activity, GSH 함량, NO 함량, MDA 함량을 측정하였다.SOD는 superoxide anion을 과산화수소로 전환시키는 효소로서 진핵세포에서는 세포질의 copper and zinc-superoxide dismutase (Cu, Zn-SOD)와 사립체의 maganese-superoxide dismutase (Mn-SOD), 원핵세포에서는 세포질의 Mn-SOD 와 원형질막 외강의 iron-superoxide dismutase (Fe-SOD) 등 여러 가지 동종효소가 알려져 있다²⁵⁾.
본 실험을 위해서 n-hexane (Samchun Chemical, Korea), n-butanol (Samchun Chemical, Korea), Ethyl ether (Samchun Chemical, Korea), Ethyl acetate(Samchun Chemical, Korea), AAPH (Wako, Japan), D-PBS (Sigma, USA), RPMI 1640 media (Sigma, USA), Anti-biotoxs (Sigma, USA), FBS (Logan, USA), SOD assay kit (Dojindo, Japan), Glutathione kit (Dojindo, Japan), NO assay kit (Oxford, USA), Lipid peroxidation assay kit (Oxford, USA), Catalase assay kit (Oxford, USA) 등이 사용 되었다.
분리한 lymphocyte를 활성화시키기 위하여 anti-CD3와 anti-CD28을 1 ㎍/㎖로 처리하여 24시간 동안 RPMI 1640 media에 10%의 FBS와 antibiotic (penicillin 100 U/㎖, streptomycin 100 ㎍/㎖)을 처리한 complete media를 이용하여 배양을 한다. 24시간 후 세포의 계대배양을 실시하며 분획별로 얻은 건조 추출물을 RPMI 1640 media에 1%로 희석하여 10%의 FBS와 antibiotic (penicillin 100 U/㎖, streptomycin 100 ㎍/㎖)을 함께 처리하여 배양액으로 이용하였으며, 72시간 동안 36℃에서 세포 배양을 실시하였다.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 간세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 GSH의 함량을 측정하였다. 모든 분획에서 control에 비하여 GSH 함량이 높게 나타났다(Fig.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 간세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 MDA의 함량을 측정하였다. 모든 분획물에서 control에 비하여 MDA 함량이 감소하였다(Fig.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 간세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 NO 함량을 측정하였다. Control에 비하여 모든 분획에서 NO 함량이 유의하게 감소하였다(Fig.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 간세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 SOD activity를 측정하였다. Control에 비하여 모든 분획에서 SOD activity가 유의하게 증가하였다(Fig.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 뇌세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 GSH의 함량을 측정하였다. 모든 배양액에서 control에 비하여 GSH 함량이 유의하게 증가하였다(Fig.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 뇌세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 MDA의 함량을 측정하였다. 모든 분획물에서 control에 비하여 통계적으로 유의한 변화를 나타내지 않았다(Fig.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 뇌세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 NO 함량을 측정하였다. 모든 분획물에서 control에 비하여 NO 함량이 유의하게 감소하였다(Fig.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 뇌세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 SOD activity를 측정하였다. Control에 비하여 모든 실험군에서 SOD activity가 증가하였다(Fig.
세포 배양을 하는 동안 분획별로 얻은 시료를 1w/v%로 희석하여 세포배양액에 처리하여 세포의 증식을 확인하였다. Control (대조군)에 비해 전탕 및 그 분획 추출물을 처리한 세포의 증식이 증가하는 경향을 나타내었으나 통계적 유의성은 없었다(Fig.
세포를 β-counter (Beckman)에 사용하는 safe cuvette에 500 ㎕씩 분주한 다음 cocktail solution을 2 ㎖첨가 한 후, thymidine의 uptake를 β-counter로 확인하였다.
뇌 조직을 잘게 잘라서 RPMI 1640 media (with 10% FBS)와 collagenase type Ⅳ (300 u/㎖)를 넣고 실온에서 30분간 incubation을 하고, 30분 후 뇌 조직을 RPMI 1640 media (with 10% FBS)를 사용하여 mesh에서 갈아주었다. 이렇게 얻은 시료를 원심 분리하여 세포를 RPMI 1640 media에 washing을 실시하고, cell strainer를 이용하여 지질을 걸러주고, 걸러진 세포들은 RPMI 1640 media에 2회 washing을 실시한 후 사용하였다.
이에 저자는 하수오의 뿌리줄기에서 항산화 효과가 보고되었는데, 줄기에서는 항산화 효과가 보고되지 않았으므로, 夜交藤( 중화인민공화국약전≫에 근거하여 잎을 제거한 것)이 항산화 효과와 관련이 있을 것으로 사료되어, 夜交藤의 항산화 효과를 관찰하였다. 특히 夜交藤이 養心安神의 효능으로 쓰이기 때문에 뇌세포에서의 항산화 효과를 관찰하였다.
EtOEt를 이용하여 실험동물을 마취시킨 후, 대동맥 혈관에 HBSS (Ca²⁺, Mg^2₊ free)를 투여하며 복부의 대동맥을 절단시켜 동물의 혈액을 모두 배출시켜 주었다. 조직을 잘게 잘라서 RPMI 1640 media (with 10% FBS)와 collagenase typeⅣ (300 u/㎖)를 넣고 실온에서 90분간 incubation을 하고, 이때 20분에 한번씩 흔들어 줌으로써 세포가 잘 분리 되도록 하였다. 간 조직을 HBSS (Ca²⁺, Mg²⁺ free)를 사용하여 mesh에서 갈아주고, 이렇게 얻은 시료를 원심 분리하여 획득한 세포는 63%와 36%의 percoll을 이용하여 간세포들 중에서 lymphocyte 만을 분리하여 실험에 사용하였다¹⁴⁾.
이에 저자는 하수오의 뿌리줄기에서 항산화 효과가 보고되었는데, 줄기에서는 항산화 효과가 보고되지 않았으므로, 夜交藤( 중화인민공화국약전≫에 근거하여 잎을 제거한 것)이 항산화 효과와 관련이 있을 것으로 사료되어, 夜交藤의 항산화 효과를 관찰하였다. 특히 夜交藤이 養心安神의 효능으로 쓰이기 때문에 뇌세포에서의 항산화 효과를 관찰하였다.

대상 데이터

AAPH로 산화적 스트레스를 유발한 실험동물의 간 조직을 사용하였다. EtOEt를 이용하여 실험동물을 마취시킨 후, 대동맥 혈관에 HBSS (Ca²⁺, Mg^2₊ free)를 투여하며 복부의 대동맥을 절단시켜 동물의 혈액을 모두 배출시켜 주었다.
AAPH로 산화적 스트레스를 유발한 실험동물의 뇌 조직을 사용하였다. EtOEt를 이용하여 실험동물을 마취시킨 후, 두개골을 절개하여 뇌 조직을 적출하였다.
조직을 잘게 잘라서 RPMI 1640 media (with 10% FBS)와 collagenase typeⅣ (300 u/㎖)를 넣고 실온에서 90분간 incubation을 하고, 이때 20분에 한번씩 흔들어 줌으로써 세포가 잘 분리 되도록 하였다. 간 조직을 HBSS (Ca²⁺, Mg²⁺ free)를 사용하여 mesh에서 갈아주고, 이렇게 얻은 시료를 원심 분리하여 획득한 세포는 63%와 36%의 percoll을 이용하여 간세포들 중에서 lymphocyte 만을 분리하여 실험에 사용하였다¹⁴⁾.
동물은 6주령의 수컷으로 Sprague-Dawley Rat을 (주)대한 바이오링크로부터 공급받아 실험당일까지 고형사료(抗生劑無添加, 삼양사료)와 물을 충분히 공급하고, 실온 22±2℃를 유지하여 1주일간 실험실 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
본 실험모델과 동일한 6주령 수컷의 SD rat의 간 조직을 사용하였다. EtOEt를 이용하여 실험동물을 마취시킨 후, 대동맥 혈관에 HBSS (Ca²⁺, Mg²⁺ free)를 투여하며 복부의 대동맥을 절단하여 동물의 혈액을 모두 배출하였다.
본 실험에 사용된 夜交藤(Polygonati Multiflori Caulis, 이하 PMC)은 2005년 6월, 경원대학교 본초실습원의 재배품을 채취하여 그늘에 말려 사용하였으며, 약재는 초음파세척기를 이용해 불순물을 씻어낸 뒤, 건조 후 사용하였다.
본 실험에 사용된 기기는 Pulverizer (Rong tsong, Taiwan), Rotary evaporator (Eyela, Japan), Air compressor(Tamiya, Japan), Homogenizer (Omni, USA), Centrifuge(Hanil, Korea), Research microscope (Leica, USA), Fume hood (Hanil, Korea), Clean bench (Jeio tech, Korea), Bio-freezer (Sanyo, Japan), Vortex mixer (Vision Scientific Co, Korea), Water bath (iNtRON biotech, Korea), Plate shaker (Lab-Line, USA), Ice-maker (Vision Scientific Co, Korea) 등이다.
간 조직을 HBSS (Ca²⁺, Mg²⁺ free)를 사용하여 mesh에서 갈아준다. 이렇게 얻은 시료를 원심 분리하여 획득한 세포는 63%와 36%의 percoll을 이용하여 세포들 중에서 lymphocyte만을 분리하여 실험에 사용하였다¹³⁾.

데이터처리

본 실험에서 얻은 결과에 대해서는 ANOVA multi t-test (JAVA, Bonferroni Ver II)를 실시하여, p값이 0.05 미만일 경우에 유의성을 인정하였다.

이론/모형

GSH 함량 측정은 kit (Dojindo, Japan)를 이용하였다. Coenzyme working solution을 140 ㎕/well로 분주하고, enzyme working solution을 20 ㎕/well로 분주 하였다.
SOD 활성도는 SOD assay kit (Dojindo, Japan)을 이용하였다. 위에서 분리한 세포의 배양액을 사용하였으며, sample solution을 96 well plate에 각 well과 blank 2에 20 ㎕씩 분주 하였다.

성능/효과

1. 세포 생존율은 1 w/v%에서 세포의 증식이 증가하는 경향이 나타났다.
2. 산화 쥐의 뇌세포에 전탕액 및 전탕액의 분획물을 처리한 결과, SOD activity, GSH 함량이 증가하고, NO 함량이 감소하였다.
3. 산화 쥐의 간세포에 전탕액 및 전탕액의 분획물을 처리한 결과, SOD activity, GSH 함량이 증가하고, NO 함량, MDA 함량이 감소하였다.
4. n-BuOH와 Aqueous를 제외한 모든 분획물에서 간세포에 비하여 뇌세포의 SOD activity가 높게 나타났다.
5. 모든 분획에서 간세포가 뇌세포에 비하여 높은 GSH 함량을 나타내었다.
6. Aqueous 분획에서는 간세포가 뇌세포에 비하여 낮은 MDA 함량을 나타내었으며, total extract, n-hexane, EtOEt, EtOAc 및 n-BuOH 분획에서는 뇌세포가 간세포에 비하여 낮은 MDA 함량을 나타내었다.
夜交藤을 전탕하여 얻은 엑스 20g을 가지고 여러 가지 용매로 분획하여 얻은 양을 %로 환산한 결과이다. Aqueous 층을 제외하고 줄기는 EtOEt층에서 17%로 가장 높은 수득률을 보였고, EtOAc층에서 2.5%로 가장 낮은 수득률을 보였으며 n-BuOH층에서 14.5%를 보였다 (Table 1)
본 실험에서 夜交藤을 전탕 추출한 후, 전탕 추출물을 여러 가지 용매로 분획하였다. Aqueous층을 제외하고는 줄기는 EtOEt층에서 17%로 가장 높은 수득률을 보였고, EtOAc 층에서 2.5%로 가장 낮은 수득률을 보였으며 n-BuOH층에서 14.5%를 보였다.
뇌세포에서 夜交藤의 GSH 농도는 control에 비하여 GSH 함량이 유의하게 증가하였으며 간세포에서는 control에 비해 모든 분획에서 높았고, 특히 EtOEt 분획에서 가장 높게 나타났다. 또한 모든 분획에서 간세포가 뇌세포에 비하여 높은 GSH 함량을 나타내었다.
뇌세포에서 夜交藤의 MDA함량은 모든 분획물에서 control에 비하여 통계적으로 유의한 변화를 나타내지 않은 반면, 간세포에서는 control 보다 감소하였고, 특히 aqueous 분획에서 유의한 감소를 나타냈다.
뇌세포에서 夜交藤의 SOD activity를 측정한 결과 control에 비하여 SOD activity가 증가하였고, EtOAc 분 획에서 높게 나타났으며, 간세포에서는 control에 비하여 SOD activity가 유의하게 증가하였고, 특히 n-BuOH 분 획에서 가장 높게 나타났다. 또한 n-BuOH와 Aqueous를 제외한 모든 분획물에서 간세포에 비하여 뇌세포의 SOD activity가 높게 나타났다.
뇌세포와 간세포에서 夜交藤 전탕액의 NO 함량은 control에 비하여 NO 함량이 유의하게 감소하였고, n-BuOH 분획과 aqueous 분획에서는 낮은 NO 함량을 나타냈다.
따라서 야교등은 산화 쥐의 뇌세포 및 간세포에서 항산화 효능은 분획별로 다소 차이가 있었으나 항산화 효능이 인정되었으며, 특히 뇌세포에서의 항산화 효능은 養心安神의 효능으로 쓰이는 夜交藤의 효능과 관련이 있다고 사료된다.
뇌세포에서 夜交藤의 SOD activity를 측정한 결과 control에 비하여 SOD activity가 증가하였고, EtOAc 분 획에서 높게 나타났으며, 간세포에서는 control에 비하여 SOD activity가 유의하게 증가하였고, 특히 n-BuOH 분 획에서 가장 높게 나타났다. 또한 n-BuOH와 Aqueous를 제외한 모든 분획물에서 간세포에 비하여 뇌세포의 SOD activity가 높게 나타났다.
뇌세포에서 夜交藤의 GSH 농도는 control에 비하여 GSH 함량이 유의하게 증가하였으며 간세포에서는 control에 비해 모든 분획에서 높았고, 특히 EtOEt 분획에서 가장 높게 나타났다. 또한 모든 분획에서 간세포가 뇌세포에 비하여 높은 GSH 함량을 나타내었다.
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 간세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 MDA의 함량을 측정하였다. 모든 분획물에서 control에 비하여 MDA 함량이 감소하였다(Fig. 10).
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 뇌세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 NO 함량을 측정하였다. 모든 분획물에서 control에 비하여 NO 함량이 유의하게 감소하였다(Fig. 5).
산화적 스트레스를 받은 실험동물의 간세포를 분리하여, 전탕 및 분획을 분주하고 3일간 배양을 하여 얻은 세포 배양액에서 GSH의 함량을 측정하였다. 모든 분획에서 control에 비하여 GSH 함량이 높게 나타났다(Fig. 8).
세포생존율에서 분획물의 세포생존율을 비교한 결과 control (대조군)에 비해 전탕 및 그 분획 추출물을 처리한 세포의 증식이 증가하는 경향을 나타내었으나 통계적 유의성은 없었다.
이상의 결과를 종합하면, 산화 쥐의 뇌세포 및 간세포에서 항산화 효능은 분획 별로 다소 차이가 있었으나 夜交藤의 항산화 효능이 인정되었으며, 특히 뇌세포에서의 항산화 효능은 養心安神의 효능으로 쓰이는 夜交藤의 효능과 연관이 있을 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	夜交藤이란 무엇인가?	夜交藤은 마디풀과(Polygonaceae)에 속한 다년생 덩굴식물인 하수오Polygonum multiflorum Thunb.의 蔓莖을 건조한 것으로, 여름과 가을에 채취한다1).
	하수오 식물은 무슨 성분을 함유하는가?	하수오 식물의 성분에 대해서는 뿌리줄기에는 chrysophanol, emodin, rhein, chrysophanol anthrone4)이, 줄기에는 emodin, physcion, β-sitosterol, anthraglycoside, polygoacetophenoside 등이 함유되어 있다6). 최근 밝혀진 하수오 뿌리줄기의 약리 작용으로 뇌혈류 개선효과7), 항산화효과8), 뇌신경의 퇴행성 변화 방지효과9), 동맥경화 방지효과10) 등이 밝혀지고 있고, 하수오 줄기의 효능으로는 진정최면작용3), 抗癌작용11)이 있다.
	夜交藤은 계절에 따라 어떤 부분을 채취하여 사용하는가?	의藤莖을 건조한 것으로, 藤莖만을 지칭하였으나, ≪中華本草≫4)에서는 줄기뿐만 아니라 잎을 같이 지칭하여 수재되어 있다. 또한 채취시기에 따라 여름과 가을에는 줄기와 잎을 같이 채취하고, 가을과 겨울에는 주로 줄기만을 채취하여 건조하는 것으로 혼재되어 사용되고 있다3).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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