블루베리가 인체 유방암세포 MCF7에서 세포 사멸 관련 유전자 발현에 미치는 영향 The Effect of Blueberry Extract on Gene Expressions Related to Apoptosis in Human Breast Cancer MCF7 Cells원문보기
This study was conducted to investigate the effects of blueberry extract on cell death, ROS and gene expression patterns associated with the anti-cancer activity in human breast cancer MCF7 cells. To accomplish this, 20 mg/mL concentration of blueberry extract was added to the cell culture for 0, 6,...
This study was conducted to investigate the effects of blueberry extract on cell death, ROS and gene expression patterns associated with the anti-cancer activity in human breast cancer MCF7 cells. To accomplish this, 20 mg/mL concentration of blueberry extract was added to the cell culture for 0, 6, 12, 24 or 48 h, after which the effects were evaluated by various analyses. MTT assay showed that the cellular activities decreased rapidly during the first 12 h of treatment. During this period, dual staining with Hoechst33322 and propidium iodide also produced a similar trend in which the dead or dying cells increased sharply. Furthermore, evaluation of BrdU incorporation as an index for cell proliferation revealed a marked decrease during the first 12 h of treatment, suggesting that anticancer activity involves the inhibition of cell proliferation and induces cell death. ROS also increased according to the duration of the treatment, indicating intracellular accumulation is associated with the cell death. RT-PCR analysis revealed significant decreases in anti-apoptotic (Bax) and increases in pro-apoptotic gene expressions (Bci-2, caspase- 3, and 9) (p<0.05). Taken these together, blueberry extract induces ROS accumulation in MCF7 cells, causing inhibition of cell proliferation and eventually leading to cell death. This cell death was associated with apoptotic gene expression in blueberry-treated cells for up to 24 h.
This study was conducted to investigate the effects of blueberry extract on cell death, ROS and gene expression patterns associated with the anti-cancer activity in human breast cancer MCF7 cells. To accomplish this, 20 mg/mL concentration of blueberry extract was added to the cell culture for 0, 6, 12, 24 or 48 h, after which the effects were evaluated by various analyses. MTT assay showed that the cellular activities decreased rapidly during the first 12 h of treatment. During this period, dual staining with Hoechst33322 and propidium iodide also produced a similar trend in which the dead or dying cells increased sharply. Furthermore, evaluation of BrdU incorporation as an index for cell proliferation revealed a marked decrease during the first 12 h of treatment, suggesting that anticancer activity involves the inhibition of cell proliferation and induces cell death. ROS also increased according to the duration of the treatment, indicating intracellular accumulation is associated with the cell death. RT-PCR analysis revealed significant decreases in anti-apoptotic (Bax) and increases in pro-apoptotic gene expressions (Bci-2, caspase- 3, and 9) (p<0.05). Taken these together, blueberry extract induces ROS accumulation in MCF7 cells, causing inhibition of cell proliferation and eventually leading to cell death. This cell death was associated with apoptotic gene expression in blueberry-treated cells for up to 24 h.
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문제 정의
본 연구는 블루베리 추출물이 인체유방암세포 MCF7에서 세포의 생존, 증식, ROS 축적과 세포 사멸 관련 유전자 발현에 미치는 영향을 살펴보았다. 블루베리 추출물 20 ug/mL를 MCF7세포에 첨가 후 0, 6, 12, 24 및 48시간 동안 지속시켰다.
유도한 것으로 나타났다. 이러한 결과가 과연 세포내에 축적되는 ROS의 양과 연계되어 있는지를 알기 위하여 ROS를 측정하였다. ROS는 생체 세포를 공격하여 지질과 단백질 핵산을 파괴하고, 여 러가지 효소 기능을 저해하여 암과 같은 질병을 발생시키고 노화를 촉진한다(Sahinoglu et al 1996, Nakamura et cd 2003).
제안 방법
Louis, MO, USA)을 넣은 Dulbecco’s Modified Eagle’s medium(DMEM, GibcoBRL, Grand Island, NY, USA)에서 세포 농도는 2xl05 cells/mL로 10 mL의 배양액에 계대하여 세포가 confluent한 경우 계대 배양하여 유지하였다. 세포 분석을 위하여 gelatin-coated coverslip 위에 drop 형태로 부착한 후 이용하였으며, 2일 후 선행 연구(Lee et al 2009)에서 결과가 가장 좋았던 블루베리 20 "mL를 첨가 후 0, 6, 12, 24 및 48시간 동안 지속하게 한 후 세포 증식과 세포 사멸을 3 반복하여 관찰하였다. 블루베리 처리군에 대한 대조군으로는 vehicle인 DMEM 20 /zL/mL를 사용하였다.
MCF7 세포를 24-well plate에 2시05의 세포 농도로 1 mL씩 분주한후 37℃ 배양기에서 24시간 증식시킨 후 블루베리 20 卜잉 mL를 첨가한 후 0, 6, 12, 24 및 48시간 동안 지속시켰다. 각각의 시간이 지난 후, 각각의 well에 100 유 L의 MTT 용액(5 mg/mL, phosphate buffered saline: PBS, pH 7.
MCF7세포의 증식을 시각화하기 위해 블루베리를 첨가한후 각각의 지속시킨 시간 완료 6시간 전에 10 mM/mM 농도의 BrdU 용액이 되도록 BrdU를 첨가하여 증식 중인 세포로 incorporation시킨 후, 세포 증식을 분석하였다. 염색이 보이게 하기 위하여 anti-BrdU antibody(1:200 희석, Sigma Co, St.
결과는 평균과 표준편차 또는 %로 표시하였다. PCR 산물의 발현 정도를 수치화하기 위하여 Quantity One program 을 이용하여 그 비율을 결정하였다. 실험군 간의 유의성 차이는 SPSS program을 이용하여 Duncan’s multiple range test로 月<0.
RT-PCR 산물을 1.0% agarose(BMA, USA cat No. 50004)gel(lX Tris-acetate-EDTA butter, 1.0% agar, 1 mg/mL ethidium bromide)에서 30분 동안 70 voltage에서 전기영동을 한 후 image analyzer로 관찰하였다.
PBS?} 담긴 세포에 각 처리시간 별로 첨가하여 20분간 반응시킨 후, 즉시 차가운 PBS로 5회 철저히 수세하여 잔여량의 DCFDA를 제거하고 96-well dish(Coming Incorporated Coming, NY, USA)를 Zenyth 3100 rrmltiwell plate reader에서 485 nm(excitation) and 535 nm(emission)에서 각각 측정하여 ROS 값을 구하였다.
4)을 가한 후, 4시간 동안 37 ℃ 배양기에서 반응시켰으며, 4시간 후 배양액을 제거하고, 1 mL의 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 첨가하여 살아있는 세포에 의해 생성된 보라색 formazan을 용해시켰다. 그 후 96-well용 분광광도계 (THERMO max, USA)를 이용하여 540 때의 파장에서 흡광도를 측정하였으며, 세포 생존율은 정상 대조군과 비교하여 백분율(%)로 표시하였다.
RNA를 분리하였다. 분리된 RNA로부터 표적 유전자의 mRNA를 역전사시 켜 cDNA를 합성하고, Bcl-2, Bax, caspase-3, caspase-9 primer 쌍을 첨가하여 PCR을 수행하였다. PCR의 총 부피는 25 aL이고, 1 //L의 "산물, 2.
미치는 영향을 살펴보았다. 블루베리 추출물 20 ug/mL를 MCF7세포에 첨가 후 0, 6, 12, 24 및 48시간 동안 지속시켰다. MTT 분석에 의한 세포 활성은 처리 시간이 증가됨에 따라 점차로 활성이 감소됨을 보여 주었다.
블루베리에 함유된 주요 색소 성분인 anthocyanin 등과 같은 단일 화합물의 항암 작용에 의한 선행 연구는 잘 알려져 있지만 순수한 블루베리 원액이 유방암에 미치는 영향에 대한 연구는 미비하므로, 블루베리 첨가 후 지속 시간에 따라 인체 유방암 MCF7 세포의 증식과 사멸을 다양한 세포염색법에 의하여 관찰하였고, 또한 세포 사멸에 영향을 미치는 유전자인 Bcl-2, Bax, caspase-3 및 caspase-9의 mRNA 발현을 조사하였다.
세포 사멸에 관여하는 유전자 발현을 관찰하기 위하여 블루베리를 첨가한 후 시간별로 지속시킨 MCF7세포로부터 total RNA를 분리하였다. 분리된 RNA로부터 표적 유전자의 mRNA를 역전사시 켜 cDNA를 합성하고, Bcl-2, Bax, caspase-3, caspase-9 primer 쌍을 첨가하여 PCR을 수행하였다.
세포 사멸을 분석하기 위하여 세포를 trypsin으로 분산시켜 Eppendorf tube에 부유세포 및 부착세 포를 수집하여 세포소실을 방지하였다. 이들 각 세포 부유액을 각각 10 mg/mL의 Hoechst 33342와 1 mg/mL의 propidium iodide(PI) 혼합염색액으로 20분 배양하여 염색하였다.
이들 각 세포 부유액을 각각 10 mg/mL의 Hoechst 33342와 1 mg/mL의 propidium iodide(PI) 혼합염색액으로 20분 배양하여 염색하였다. 원심분리로 세포 부유액 내의 과다량의 염색액을 수세한 후 세포 관찰 표본을 만들어 형광현미경으로 분석하였다. 형광 현미경에서 무작위로 선정된 현미경 시야의 세포를 촬영 기록한 후, 세포 수를 측정하였다.
Louis, MO, USA)를 사용하였다. 핵의 배경 염색은 100 /zg/mL 의 propidium iodide로 10분간 염색한 후, 세포를 mounting, sealing하여 형광현미경 (Zeiss, Oberkochen, Germany)으로 관찰하였다.
원심분리로 세포 부유액 내의 과다량의 염색액을 수세한 후 세포 관찰 표본을 만들어 형광현미경으로 분석하였다. 형광 현미경에서 무작위로 선정된 현미경 시야의 세포를 촬영 기록한 후, 세포 수를 측정하였다.
대상 데이터
세포 분석을 위하여 gelatin-coated coverslip 위에 drop 형태로 부착한 후 이용하였으며, 2일 후 선행 연구(Lee et al 2009)에서 결과가 가장 좋았던 블루베리 20 "mL를 첨가 후 0, 6, 12, 24 및 48시간 동안 지속하게 한 후 세포 증식과 세포 사멸을 3 반복하여 관찰하였다. 블루베리 처리군에 대한 대조군으로는 vehicle인 DMEM 20 /zL/mL를 사용하였다.
블루베리는 냉동, 동결 건조시킨 미국산용을 방산시장(Seoul, Korea)으로부터 구입하였다. 대부분의 시 약은 Sigma-Aldrich Co.
후, 세포 증식을 분석하였다. 염색이 보이게 하기 위하여 anti-BrdU antibody(1:200 희석, Sigma Co, St. Louis, MO, USA)를 사용하였다. 핵의 배경 염색은 100 /zg/mL 의 propidium iodide로 10분간 염색한 후, 세포를 mounting, sealing하여 형광현미경 (Zeiss, Oberkochen, Germany)으로 관찰하였다.
인체 유방암 MCF7세포(한국 세포주 은행)는 10% fetal bovin serum(FBS; PAA, Exton PA, USA), penicillin-streptomy-cin(Sigma Co, St. Louis, MO, USA)을 넣은 Dulbecco’s Modified Eagle’s medium(DMEM, GibcoBRL, Grand Island, NY, USA)에서 세포 농도는 2xl05 cells/mL로 10 mL의 배양액에 계대하여 세포가 confluent한 경우 계대 배양하여 유지하였다. 세포 분석을 위하여 gelatin-coated coverslip 위에 drop 형태로 부착한 후 이용하였으며, 2일 후 선행 연구(Lee et al 2009)에서 결과가 가장 좋았던 블루베리 20 "mL를 첨가 후 0, 6, 12, 24 및 48시간 동안 지속하게 한 후 세포 증식과 세포 사멸을 3 반복하여 관찰하였다.
데이터처리
각각의 실험은 독립적으로 3번 이상 실시하였으며, 얻어진 결과는 평균과 표준편차 또는 %로 표시하였다. PCR 산물의 발현 정도를 수치화하기 위하여 Quantity One program 을 이용하여 그 비율을 결정하였다.
PCR 산물의 발현 정도를 수치화하기 위하여 Quantity One program 을 이용하여 그 비율을 결정하였다. 실험군 간의 유의성 차이는 SPSS program을 이용하여 Duncan’s multiple range test로 月<0.05 수준에서 검증하였다.
이론/모형
MCF7세포의 생존률은 MTT(3-^^-dimethylthiazol-Z-yyee-diphenyl tetrazolium bromide) 분석법으로 즉정하였다. MCF7 세포를 24-well plate에 2시05의 세포 농도로 1 mL씩 분주한후 37℃ 배양기에서 24시간 증식시킨 후 블루베리 20 卜잉 mL를 첨가한 후 0, 6, 12, 24 및 48시간 동안 지속시켰다.
성능/효과
MCF7세포의 세포 사멸 진행이 세포 활성의 감소와 관련되어 있는지를 규명하기 위하여 세포 변화와 형태를 Hoechst 33322와 propidium(PI)으로 이 중 염색한 결과, Fig. 2A에서 보듯이 PI(red)(+) 세포수가 블루베리 첨가 후 6시간을 개시로 급격하게 증가되는 것을 보여주고 있어, MTT assay에 의한 세포 활성의 감소는 유방암 세포가 사멸을 진행시키고 있으며, 이는 그 이후로도 지속적으로 유사한 세포 사멸을 보이는 것과 밀접하게 연관되어 있음을 알 수 있다. 또한 핵의 형태도 대조군에 비하여 둥근모습보다는 농축되고 때로는 파편화된 염색체 형태를 보여, 세포가 사멸했거나 사멸 중인세포임을 관찰할 수 있었다(Fig.
블루베리 추출물 20 ug/mL를 MCF7세포에 첨가 후 0, 6, 12, 24 및 48시간 동안 지속시켰다. MTT 분석에 의한 세포 활성은 처리 시간이 증가됨에 따라 점차로 활성이 감소됨을 보여 주었다. 세포 생존율도 Hoechst 33342와 propidium iodide로 이중생사염색으로 분석한 결과, 유사한 경향을 나타내었다.
결론적으로, 블루베리는 인체유방암세포 MCF7의 증식을 억제하고, ROS 축적과 세포 사멸을 증가시키며, Bcl-2, Bax, caspase-3 및 caspase-9의 발현을 통하여 세포 사멸을 유도하는 효과가 있는 것으로 나타났다.
3). 따라서 블루베리를 첨가하여 6시간이 되었을때부터 급격히 ROS를 축적시킴으로써 세포 내의 ROS 농도를 증가시켜 세포에 손상을 주기 시작하며, 결국 12시간 정도의 작용시간을 가지고 세포활성 저하 및 세포 증식 저하활동을 보이는 것으로 추정할 수 있을 것이다.
보인다. 따라서 전체적으로 볼 때, 블루베리 추출물은 유방암 세포의 생존성을 12시간 지속시켰을 때에 급격히 감소시키며, 그 이후 감소 상대가 지속되는 것으로 나타났다(Fig. 1).
Wang et a/(2006)의 연구에 의하면 유방암 발생은 과도한 활성 산소종을 억제할 수 있는 항산화 체계의 불균형에서 야기된 DNA와 세포 조직의 손상때문이라고 보고하였다. 본 실험 결과에서 블루베리를 첨가한 즉시에는(0시간) baseline의 배경 형광만을 보여주지만 블루베리 추출물을 첨가하여 6시간 지남에 따라 ROS가 급격히 증가되며, 이후에는 그 증가 폭이 완만히 되는 것을 볼 수있었다(Fig. 3). 따라서 블루베리를 첨가하여 6시간이 되었을때부터 급격히 ROS를 축적시킴으로써 세포 내의 ROS 농도를 증가시켜 세포에 손상을 주기 시작하며, 결국 12시간 정도의 작용시간을 가지고 세포활성 저하 및 세포 증식 저하활동을 보이는 것으로 추정할 수 있을 것이다.
본 실험의 결과, 블루베리를 유방암세포 MCF7에 첨가 한후 0, 6, 12, 24, 48시간 지속시켰을 때 블루베리는 MCF7의 증식을 억제하고, ROS 축적과 세포 사멸을 증가시키며, Bcl-2, Bax, caspase-3 및 caspase-9의 발현을 통하여 세포 사멸을 유도하는 효과가 있는 것으로 나타났다. 앞으로 in vitro와 in vivo 실험에서 더욱 더 다양한 연구의 필요성이 요구되어진다.
Yang et «/(2001)은 caspase-3은 세포 사멸을 일으키는데 중요한 역할을 하며, 유방암이나 다른 종류의 암에서 caspase-3 이 결핍되거나 감소되었음을 보고하였다. 본 연구에서 caspase-3 의 발현은 블루베리를 첨가하고 24시간이 되었을 때가장 높았으며, 48시간이 되었을 때는 발현이 유의적으로 감소됨을 보였다. Caspase-9의 발현도 caspase-3의 발현과 유사하게 나타나고 있다.
Malik et a/(2005)의 연구에서는 석류 추출물 10-100 g/mL를 48시간 PC3 전립선암세포에 첨가시켜 배양한 경우 석류추출물이 G0/G1 phase 지수를 증가시켜 DNA 합성을 저해하여 전립선암세포의 사멸을 유도하였다고 보고하였다. 본 연구에서도 블루베리 첨가 후 48시간이 되었을 때 대부분의 세포가 G0/G1 phase 수치가 증가하여 S/M기로 넘어가지 못하였으며, 이러한 결과로 인해 세포 증식이 억제됨을 알 수 있었다.
블루베리 20 /zg/mL를 인체 유방암세포 MCF7에 첨가하고 각각 0, 6, 12, 24및 48시간이 지난 후 MTT assay를 한 결과, 블루베리를 첨가하고 12시간이 되었을 때 세포 생존성이 급격히 감소되었으며, 24시간 지속시켰을 시에는 12시간지속시켰을 시보다는 유의성이 높게 나타났지만 6 및 12시간 지속 시에 보이는 세포 생존성의 대조군 대비 감소 비율(각각 약 25 및 50% 감소)에 비하면 미미한 차이로 보인다. 따라서 전체적으로 볼 때, 블루베리 추출물은 유방암 세포의 생존성을 12시간 지속시켰을 때에 급격히 감소시키며, 그 이후 감소 상대가 지속되는 것으로 나타났다(Fig.
상기의 결과에서 세포활성 감소는 세포 사멸과 관련이 있으며, 블루베리 첨가 후 24시간까지는 시간 의존적으로 세포사멸을 유도한 것으로 나타났다. 이러한 결과가 과연 세포내에 축적되는 ROS의 양과 연계되어 있는지를 알기 위하여 ROS를 측정하였다.
세포 사멸 이외에 MCF7세포가 DNA 합성으로 세포 증식활동을 보이는지를 알기 위하여 증식된 세포만을 염색해 주는 BrdU핵 염색법을 이용하여 유방암 세포 증식에 미치는 결과를 분석한 결과, 세포 증식 비율은 블루베리 첨가 후 지속 시간에 따라 점차로 감소됨을 보여 주었으며, 특히 블루베리 첨가 후 12시간이 되었을 때는 0, 6시간 동안 지속시킨 때에 비해 유의적으로 낮아짐을 알 수 있었다. 24시간 지속시켰을 때에는 12시간 지속시켰을 때에 비해 유의적으로 높아졌다가 48시간째에는 12시간 지속시보다 더 낮아졌다<Fig.
세포 사멸을 억제흐}는 기능을 갖는 Bcl-2, 세포 사멸을 유도하는 Bax, 사멸 신호 전달의 마지 막 경로인 caspase-3 및 caspase-9 발현을 분석한 결과, Bcl-2의 발현은 블루베리 첨가 시간이 증가함에 따라 Bcl-2의 발현이 저하됨으로써 세포 사멸이 일어남이 관찰되었다(Fig. 4). 그와 반대로 Bax의 발현은 블루베리를 첨가하고 6, 12 및 24시간까지는 급격히 증가하다가 ⑦<0.
05). 세포 사멸의 지표로 사용되는 Bcl-2 와 Bax의 비율은 첨가시간이 증가할수록 감소하였다.
05), 48시간째에는 유의적으로 낮아졌다. 세포 사멸의 지표로 사용되는 Bcl-2와 Bax의 비율(Fig. 5)은 블루베리를 첨가하고 24시간이 되었을 때 유의적으로 높았고, 48시간에는 감소함을 보였다. Oltvai et a/(1993)은 세포 사멸 과정에서 Bcl-2 family 단백질의 세포 내 균형은 미토콘드리아 막의 유지 여부에 중요한 지표가 된다고 보고하였으며, Antonsson et aZ(2001)은 세포 사멸 시에는 Bcl-2 단백질은 4배 정도 감소하였고, Bax는 7배 정도 증가되었다고 보고하였다.
2A). 이같이, MTT와 이중염색 분석으로 블루베리 추출물이 인체 유방암 MCF7 세포생존성을 저해하며, 이는 세포 사멸과 관련이 있다는 것을 보여 주었다.
세포 생존율도 Hoechst 33342와 propidium iodide로 이중생사염색으로 분석한 결과, 유사한 경향을 나타내었다. 이와 더불어, 세포 증식에 영향을 주는지를 규명하기 위하여 BrdU incorporation 을 이용한 결과, 블루베리 추출물은 세포 사멸을 유도할 뿐 아니라, 세포 증식도 경시적으로 억제함을 보였다. 이 같은 경향은 세포 내에 축적되는 ROS에 의하여 12시간 정도의 ROS 작용시간을 거쳐 급격한 세포 사멸을 블루베리 첨가 후 24시간동안 지속시켰을 때 유도함을 알 수 있었다.
이 같은 경향은 세포 내에 축적되는 ROS에 의하여 12시간 정도의 ROS 작용시간을 거쳐 급격한 세포 사멸을 블루베리 첨가 후 24시간동안 지속시켰을 때 유도함을 알 수 있었다. 지속 시간에 따라 Bcl-2의 발현은 유의적으로 감소하였고(p<0.05), Bax의 발현은 24시간 지속시켰을 때 유의적으로 높았다⑦<0.05). 한편, caspase-3 와 caspase-9도 모두 24시간 지속시 켰을 때 유의 적으로 높았다⑦<0.
후속연구
효과가 있는 것으로 나타났다. 앞으로 in vitro와 in vivo 실험에서 더욱 더 다양한 연구의 필요성이 요구되어진다.
참고문헌 (32)
Adams JM, Cory S (1998) The Bcl-2 protein family: Arbiters of cell survival. Science 281: 1322-1326.
Akoh CC, Yi W, Fischer J, Krewer G (2005) Phenolic compounds from blueberries can inhibit colon cancer cell proliferation and induce apoptosis. J Agric Food Chem 53: 7320-7329.
Antonsson B, Montessuit S, Sanchez B, Martinou JC (2001) Bax is present as a high molecular weight oligomer/complex in the mitochondrial membrane of apoptotic cells. J Bio Chem 276: 11615-11623.
Bagchi D, Sen CK, Bagchi M, Atalay M (2004) Anti-angiogenic, antioxidant, and anti-carcinogenic properties of a novel anthocyanin-rich berry extract formula. Biochem 69: 75-80.
Borek C, Labriola D, Livingston R (2004) Dietary antioxidants and human cancer. Inter Cancer Ther 3: 333-341.
Jhons T, Romeo JT (1999) Functionality of food phytochemicals. Recent Adv Phytochem 33: 133-159.
Kelsey JL (1998) Breast cancer epidemiology. Cancer Res 48: 5615-5623.
Korea National Statistic Office (2005) The Korean cause of death.
Lee SN, Kim KH, Kang KJ (2009) The effect of blueberry on the ROS and apotosis in human breast cancer MCF7 cells. Plant Resou Res Institute Duksung Women's University 8: 51-67.
Malik AS, Afaq F, Sarfaraz S, Adhami VM, Syed DN, Mukhtar H (2005) Pomegranate fruit juice for chemoprevention and chemotherapy of prostate cancer. PNAS 102: 14813-14818.
Ministry of Health and Welfare (2005) 한국인 암 등록 조사자료 분석보고서. 5-7
Nakamura J, Purvis ER, Swenberg JA (2003) Micromolar concentrations of hydrogen peroxide induce oxidative DNA lesions more efficiently than millimolar concentrations in mammalian cells. Nucleic Acids Res 31: 1790-1795.
Nkondjock A, Ghadirian P (2005) Risk factors and risk reduction of breast cancer. Med Sci 21: 175-180.
Olsson ME, Gustavsson KE, Andersson SF, Nilsson A, Duan RD (2004) Inhibition of cancer cell proliferation in vitro by fruit and berry extracts and correlations with antioxidant levels. J Agri Food Chem 52: 7264-7271.
Oltvai ZN, Milliman CL, Korsmeyer SJ (1993) Bcl-2 heterodimerizes in vivo with a conserved homolog, Bax, that accelerates programmed cell death. Cell 80: 609-619.
Osford SM, Dallman CL, Jhonson PW, Ganesan A, Packham G (2004) Current strateigs to target the anti-apoptosis Bcl-2 protein I n cancer cells. Cuee Med Chem 11: 1031-1039.
Reed JC, Korsmeyer SJ, Xiao-Ming Y, Yang E, Zha J, Sedlak T, Oltvai Z (1994) Bcl-2 and the regulation of programmed cell death. Cell 74: 609-619.
Sahinoglu T, Stevens CR, Bhatt B, Sahinoglu T (1996) The role of reactive oxygen species in inflammatory disease: Evaluation of methodology. Enzymology 9: 628-634.
Seeram NP, Adams LS, Zhang YJ, Lee RP, Sand DN. Scheuller HS, Heber DV (2006) Blackberry, black raspberry, blueberry, cranberry, red raspberry and strawberry extracts. inhibit growth and stimulate apoptosis of human cancer cells in vitro. J Agri Food Chem 54: 9329-9339.
Shih PH, Gow-Chin Y (2005) Effects of anthocyanidin on the inhibition of proliferation and induction of apoptosis in human gastric adenocarcinoma cells. Food Chem Toxicol 43: 1557-1566.
Sun J, Liu RH (2006) Cranberry phytochemical extracts induce cell cycle arrest and apotosis in human MCF-7 breast cancer cells. Cancer Letters 241: 124-134.
Vokkala M, Paakko P, Soini Y (1999) Expression of caspase 3, 6, and 8 is increased in parallel with apoptosis and histological aggresiveness of the breast lesion. Br J Cancer 81: 592-599.
Wang X, Yuan S, Wang J, Lin P, Liu G, Lu Y, Zhang J, Wang W, Wei Y (2006) Anticancer activity of litchi fruit pericarp extract against human breast cancer in vitro and in vivo. Toxicol Appl Pharm 215: 168-178.
Wedge DE, Meepagala KM, Magee JB, Smith SH, Huang G, Larcom LL (2001) Anticarcinogenic activity of strawberry, blueberry, and raspberry extracts to breast and cervical cancer cells. J Med Food 4: 49-52.
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