선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구는 갈근의 생리활성 규명 및 그 활용에 대해서는 비교적 많은 연구가 진행되었으나 그 안전성과 독성에 관한 정보는 제한적이므로, 갈근 다당체 분획의 급성독성학적 안전성을 검정하고자 한다.
제안 방법
- − 대조군 및 시험물질 고용량처리군에서 시험물질 투여 24시간후 ethyl ether로 마취하여 안와정맥에서 채혈하여 얻은 혈청에 대하여 alanine transaminase(ALT), aspartate transaminase(AST), total bilirubin (T-bil), creatinine, triglyceride의 항목의 혈액 생화학적 검사를 자동 생화학분석기(Cobas c1111, ROCHE)를 이용하여 측정하였다.
- − 식품의약품안전청의 독성시험기준 및 국제경력협력기구의 급성독성시험 가이드라인 (OECD TEST GUIDELINE)12)에 독성시험기준에 따라 투여 후 처음 6시간 동안 특별한 주의를 가지고 시험동물의 피부, 털, 눈 점막, 호흡기, 순환기, 자율신경계, 신체 운동 활동성, 행동형태 및 시험동물의 진전(tremors), 경련(convulsions), 유연(salivation), 설사(diarrhoea), 기면(lethargy), 수면(sleep), 혼수(coma) 등의 유무를 관찰하였다.
- 사육 환경은 온도 22±2℃, 상대습도 55±10%, 조명시간 12시간(오전 6시~오후 6시) 및 조도 150~300 Lux로 설정 뒤 수행하고, 방사선 조사로 멸균된 실험동물용 고형사료((주)오리엔트)와 정수시스템을 이용한 물(tap water)을 자유로이 섭취하도록 하였다.
- 본 연구에서는 시험물질투여 전 6시간 동안 랫트를 절식하고, 체중을 측정하여 실험물질 5,000 mg/kg을 최고농도로하고, 식품의약품안전청의 독성시험기준11)에 따라 2,000 mg/kg, 500 mg/kg, 50 mg/kg, 5 mg/kg으로 비임상시험물질을 제조하였다. 투여는 임상에서의 주요 적용경로인 경구투여 하였으며, 동물을 경배부 피부 고정법으로 고정 후 금속제 경구투여용 존대를 이용하여 위내에 직접 주입하였다.
- 에 따라 2,000 mg/kg, 500 mg/kg, 50 mg/kg, 5 mg/kg으로 비임상시험물질을 제조하였다. 투여는 임상에서의 주요 적용경로인 경구투여 하였으며, 동물을 경배부 피부 고정법으로 고정 후 금속제 경구투여용 존대를 이용하여 위내에 직접 주입하였다. 1일1회 당일 체중을 기준으로 체중 kg 당 10ml 액량으로 투여하였다.
- 투여는 임상에서의 주요 적용경로인 경구투여 하였으며, 동물을 경배부 피부 고정법으로 고정 후 금속제 경구투여용 존대를 이용하여 위내에 직접 주입하였다. 1일1회 당일 체중을 기준으로 체중 kg 당 10ml 액량으로 투여하였다.
- 에 독성시험기준에 따라 투여 후 처음 6시간 동안 특별한 주의를 가지고 시험동물의 피부, 털, 눈 점막, 호흡기, 순환기, 자율신경계, 신체 운동 활동성, 행동형태 및 시험동물의 진전(tremors), 경련(convulsions), 유연(salivation), 설사(diarrhoea), 기면(lethargy), 수면(sleep), 혼수(coma) 등의 유무를 관찰하였다. 투여 후 14 일 동안 1일 1회씩 일반 임상증상을 관찰하고 시험동물의 개별 체중은 시험물질을 투여하기 전과 후, 시험기간 동안 1 일 1 회씩 측정하였다.
- − 투여 후 14일째에 랫트를 ethyl ether로 마취하고, 방혈 치사시킨 후 주요 장기를 적출하여 시험동물의 육안적 병변 관찰하고 주요 장기의 무게를 측정하였다.
- − 자웅성 랫트의 대조군과 갈근 다당체 분획 투여군에서 피부, 털, 눈, 점막, 신체 운동 활동성, 행동형태 및 시험동물의 진전(tremors), 경련(convulsions) 유연(salivation), 설사(diarrhoea), 기면(lethargy), 수면(sleep), 혼수(coma) 등 일반 임상증상의 유무를 관찰하였다.
- − 뇨검사는 대조군 및 고용량처리군에서 시험물질 투여 후 24시간동안 채뇨하여 얻은 검체에 대해 수행되었다. 유리스켄 10 에스지엘 시험지 (URISCAN, 영동제약)를 이용하여 잠혈(occult blood), 빌리루빈 (bilirubin), 우로빌리노겐(urobilinogen), 케톤체(ketones), 단백질 (protein), 아질산염(nitrite), 포도당(glucose), pH, 비중(specific gravity), 백혈구(leucocyte)를 측정 하였다.
- 본 연구는 여러 약리학적 효과를 나타내는 갈근 다당체 분획의 단회 경구 투여에 의한 급성독성을 식품의약품안전청의 독성시험기준에 근거하여 수행하였다. 시험물질을 단회 경구 투여하고 14일간 사망률, 일반증상, 체중변화, 혈액 생화학적 검사, 뇨검사, 부검소견 및 장기무게를 관찰하였다. 투여된 최고용량인 5,000 mg/kg에서 사망하는 개체가 관찰되지 않았으며, 갈근 다당체 분획의 반수치사량(mean lethal dosage, LD50)은 자웅 랫트 모두에서 5,000 mg/kg을 상회하는 것으로 확인되었다.
대상 데이터
- − 본 실험에서 사용한 갈근은 2009년 6월 익산시 소재 대학 한약국에서 구입하였으며, 시료의 일부를 표준품 (WK6-006)으로 보관하고 있다.
- − 6주령 Sprague-Dawley 계통의 특정병원균 부재(Specific pathogen free, SPF) 랫트를 (주)오리엔트에서 구입 후 1주일간 적응기를 둔 후 체중범위에 따른 무작위법에 의하여 군 분리 후, 본 실험에 사용하였다.
- 이 추출물을 증류수에 현탁시킨 후 3배의 95% 에탄올을 가하여 4℃에서 24시간 두었다가 2,400 rpm에서 10분간 원심분리하여 상층부와 침전물로 나누었다. 침전물은 95% 에탄올로 수회 세척한 다음 동결건조하여 66.8 g의 조다당분획인 시험물질을 얻었다(Fig. 1).
- − 6주령 Sprague-Dawley 계통의 특정병원균 부재(Specific pathogen free, SPF) 랫트를 (주)오리엔트에서 구입 후 1주일간 적응기를 둔 후 체중범위에 따른 무작위법에 의하여 군 분리 후, 본 실험에 사용하였다. 실험에 사용된 동물들은 인수 시 및 순화기간 동안 이상증상이 관찰되지 않았다.
데이터처리
- 대조군과 시험물질 투여군의 측정치의 차이를 Student’s ttest 로 비교하여 유의성을 검정하였다.
이론/모형
- 본 연구는 여러 약리학적 효과를 나타내는 갈근 다당체 분획의 단회 경구 투여에 의한 급성독성을 식품의약품안전청의 독성시험기준에 근거하여 수행하였다. 시험물질을 단회 경구 투여하고 14일간 사망률, 일반증상, 체중변화, 혈액 생화학적 검사, 뇨검사, 부검소견 및 장기무게를 관찰하였다.
성능/효과
- − 시험물질 투여 후 14일간 사망 유무 관찰한 결과 투여된 전 용량에서 자성과 웅성 랫트 모두 시험물질 투여에 기인한 사망은 관찰되지 않았다(Table I).
- − 시험물질 투여 후 14일간 사망 유무 관찰한 결과 투여된 전 용량에서 자성과 웅성 랫트 모두 시험물질 투여에 기인한 사망은 관찰되지 않았다(Table I). 본 실험결과 시험물질의 최소치사량은 자웅성 랫트 모두에서 5,000 mg/kg을 훨씬 상회하는 것으로 나타났다.
- − 측정된 혈액생화학적 지표인 ALT, AST, T-bil, creatinine, TG 모두에서 대조군과 고용량 투여군의 유의적인 차이는 관찰되지 않았다(Table III).
- 시험물질을 단회 경구 투여하고 14일간 사망률, 일반증상, 체중변화, 혈액 생화학적 검사, 뇨검사, 부검소견 및 장기무게를 관찰하였다. 투여된 최고용량인 5,000 mg/kg에서 사망하는 개체가 관찰되지 않았으며, 갈근 다당체 분획의 반수치사량(mean lethal dosage, LD50)은 자웅 랫트 모두에서 5,000 mg/kg을 상회하는 것으로 확인되었다. OECD test guideline은12) 2,000 mg/kg의 용량에서 사망개체가 없는 경우 무독성으로 간주하므로, 갈근 다당체 분획의 안전성을 확인할 수 있었다.
- 갈근 다당체 분획의 투여에 의한 독성은 모든 지표에서 유발되지 않았다. 결론적으로 자웅성 랫트에 단회 경구 투여된 갈근 다당체 분획은 체내에서 안전한 것으로 사료된다.
- − 부검 시 육안적인 소견을 관찰한 결과, 모든 시험군의 자웅 랫트에서 심장, 흉선, 폐, 간, 신장, 비장, 등의 주요 내부 장기에서 어떠한 이상 소견도 관찰되지 않았다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.