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문제 정의
- 고혈압 치료에 대하여 腎正格을 이용한 太白·太谿 瀉法刺鍼이 고혈압에 미치는 영향에 대한 연구는 아직 보고된 바가 없었다. 이에 저자는 고혈압 유발 白鼠에 腎正格의 太白 및 太谿 瀉法 刺鍼을 선택하여 이들에 刺鍼 한 후 뇌혈류역학적 변화를 관찰하고, 혈관 확장 인자인 cyclooxygenase30)와 guanylate cyclase31)의 억제제를 활용하여 그 작용기전을 연구한 후 유의한 결과를 얻었기에 이에 보고하는 바이다.
- 임상에서 고혈압 환자의 腎精不足의 경우 眩暈, 耳鳴, 遠志無力, 失眠健忘, 腰膝酸軟의 증상이 나타나고 그 치료는 足小陰經의 原穴인 太谿를 사용하여 補腎益精 하며1) 足小陰腎經은 泌尿生殖, 神經精神疾患, 呼吸, 消化, 循環系病症 및 腎經이 經過하는 부위의 病症을 主治29)하므로, 腎正格의 구성 穴位 중 太白·太谿의 瀉法 刺鍼이 고혈압에 유의한 영향을 미칠 것으로 생각되어 흰쥐의 국소 뇌혈류량과 평균 동맥압에 미치는 효과를 살펴보고, 이에 관련된 작용 기전을 연구해 보았다.
제안 방법
- 혈관확장인자 억제제 중 prostaglandin의 생합성효소인 cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신(indomethacin 1㎎/㎏, i.p., IDN, Sigma I7378)과 cyclic 3',5'-guanosine monophosphate(cGMP)의 생합성효소인 guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루(methylene blue 0.01㎎/㎏, i.p., MTB, Sigma M9140)를 전처치한 후, 각각의 穴位에 30분 동안 刺鍼한 후 발침한 다음 120분 동안 변화되는 국소 뇌혈류량 및 평균 동맥압을 측정하였다(Fig. 1)30).
- 補瀉法은 迎隨補瀉法을 적용하여 經絡流注 방향을 고려해 瀉法으로 四肢 말단방향으로 鍼尖이 향하도록 하여 30분간 刺鍼하였다6).
- 흰쥐를 750㎎/㎏ 농도의 우레탄(Sigma, USA)으로 복강주사하여 마취시킨 후, stereotaxic frame (DKI, USA)에 고정시키고, 정중선을 따라 두피를 절개하여 두정골을 노출시킨 후, bregma의 4～6㎜ 측방, -2～1㎜ 전방에 직경 5～6㎜의 두개창 수술을 시행하였다. 이 때 두개골의 두께를 최대한 얇게 남겨 경막 외 출혈을 방지하도록 하고, laser doppler flowmeter(Transonic Instrument, USA)용 needle probe를 대뇌 두정엽 피질 표면에 수직이 되도록 뇌연막 동맥에 조심스럽게 근접시켰다.
- 이 때 두개골의 두께를 최대한 얇게 남겨 경막 외 출혈을 방지하도록 하고, laser doppler flowmeter(Transonic Instrument, USA)용 needle probe를 대뇌 두정엽 피질 표면에 수직이 되도록 뇌연막 동맥에 조심스럽게 근접시켰다. 이 후 일정시간 동안 안정시킨 후각 穴位(KI3, SP3)에 30분 동안 刺鍼한 후 발침한 다음 120분 동안 변화되는 국소 뇌혈류량(regional cerebral blood flow, rCBF)을 측정하였다30).
- 5℃로 유지될 수 있도록 heat pad 위에 복와위로 고정시켰다. 각 穴位에 30분 동안 刺鍼한 후 발침한 다음 120분 동안 변화되는 평균 동맥압(mean arterial blood pressure, MABP)은 흰쥐의 대퇴동맥에 삽입된 polyethylene tube에 연결된 pressure transducer(Grass, USA)를 통하여 data acquisition system(Maclab, USA)으로 측정하였다30).
- 각각의 穴位(KI3, SP3) 刺鍼이 흰쥐의 국소 뇌혈류량 및 평균 동맥압 변화에 미친 작용 기전을 알아보기 위하여 두 가지 혈관확장인자 억제제31,34)를 전처치하였다. 혈관확장인자 억제제 중 prostaglandin의 생합성효소인 cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신(indomethacin 1㎎/㎏, i.
- 太谿·太白 刺鍼으로 변화된 흰쥐의 국소 뇌혈류량 변화의 작용 기전을 알아보기 위하여 太谿·太白刺鍼으로 유의성 있게 증가된 흰쥐의 국소 뇌혈류량을 대조군(KI3+SP3)으로 하고, cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신을 전처치한 다음 太谿·太白 자침으로 변화된 흰쥐의 국소 뇌혈류량을 인도메타신 처치군((KI3+SP3)+IDN)으로 하였다.
- 太谿·太白 刺鍼으로 변화된 흰쥐의 국소 뇌혈류량 변화의 작용 기전을 알아보기 위하여 太谿·太白刺鍼 후의 국소 뇌혈류량군 대조군(KI3+SP3)으로 설정하고, guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루를 전처치한 후 太谿·太白 자침으로 변화된 흰쥐의 국소 뇌혈류량을 메틸렌블루 처치군((KI3+SP3)+MTB)으로 하였다.
- 太谿·太白 刺鍼으로 변화된 흰쥐의 평균 동맥압 작용 기전을 알아보기 위하여 太谿·太白을 刺鍼한 흰쥐의 평균 동맥압을 대조군(KI3+SP3)으로 설정하고, cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신을 전처치한 다음 太谿·太白 刺鍼으로 변화된 흰쥐의 평균 동맥압을 인도메타신 처치군((KI3+SP3)+IDN)으로 하였다.
- 太谿·太白 刺鍼으로 변화된 흰쥐의 평균 동맥압 작용 기전을 알아보기 위하여 太谿·太白 刺鍼으로 감소된 흰쥐의 평균 동맥압을 대조군(KI3+SP3)으로 설정하고, guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루를 전처치한 다음 太谿·太白 刺鍼으로 변화된 흰쥐의 평균 동맥압을 메틸렌블루 처치군((KI3+SP3)+MTB)으로 하였다.
- 본 연구에서는 太谿·太白 자침으로 유의성 있게 증가된 국소 뇌혈류량이 혈관 확장에 의한 것인지를 확인하고자 혈관 확장에 관여하는 guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루31)와 cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신34)을 활용하였다.
대상 데이터
- 구입한 흰쥐는 항온항습 장치가 구비된 사육장에서 고형사료와 물을 충분히 공급하면서 1주일 이상 적응(실내온도 24±2℃, 습도 55±5%, 12시간 명암주기)시킨 후 사용하였다.
- 체중 300g 내외의 雄性 Sprague-Dawley계 흰쥐(다물사이언스, 한국)를 구입하여 사용하였다. 구입한 흰쥐는 항온항습 장치가 구비된 사육장에서 고형사료와 물을 충분히 공급하면서 1주일 이상 적응(실내온도 24±2℃, 습도 55±5%, 12시간 명암주기)시킨 후 사용하였다.
- 穴位는 太谿(KI3)와 太白(SP3)에 해당되는 상응 부위를 선정하였다.
데이터처리
- 太谿·太白 刺鍼이 흰쥐의 국소 뇌혈류량 및 평균 동맥압에 미치는 효과는 데이터를 30분 단위로 합산하여 이를 바탕으로 통계처리하였으며, 국소 뇌혈류량 및 평균 동맥압에 미치는 영향에 대한 통계처리 방법으로는 paired sample t-test를 사용하였고, 관련 기전 연구를 위한 국소 뇌혈류량 변화 및 평균 동맥압 비교에는 independent sample t-test를 사용하였다.
이론/모형
- 본 실험에서는 0.20㎜×15㎜ 규격의 호침(동방침구 DB-106, 한국)을 사용하였다.
성능/효과
- 太谿·太白을 刺鍼하지 않은 흰쥐의 국소 뇌혈류량 기저치를 100.00±4.41%로 환산하였을 때, 자침 후 30분 동안 국소 뇌혈류량 변화는 99.28±5.30%로 기저치보다 약간 감소하였고, 拔鍼 후 시간이 경과함에 따라 국소 뇌혈류량 변화는 각각 101.30±6.70%, 108.41±4.68%, 123.17±7.21%, 125.18±9.29%로 기저치보다 증가하였으며, 90분과 120분에서 기저치보다 유의성 있게(p<0.05) 증가하였다(Table 1, Fig. 2).
- 인도메타신을 처치하지 않은 국소 뇌혈류량의 기저치를 100.00±4.04%라 하였을 때, 인도메타신을 처치하였을 때의 국소 뇌혈류량은 102.71±2.06%로 다소 증가하는 경향을 나타내었고, 이 후 시간이 경과함에 따라 각각 100.11±1.86%, 101.86±3.18%, 102.28±3.33%, 99.89±2.68%로 인도메타신을 처치하지 않았을 때와 비교하여 유의한 변화가 나타나지 않았다(Table 3, Fig 4).
- 이 후 시간이 경과함에 따라 101.19±10.00%, 99.28±6.64%, 99.08±10.11%, 101.05±10.40%로 메틸렌블루를 처치하지 않았을 때와 비교하여 유의한 변화는 나타나지 않았다(Table 3, Fig 4).
- 메틸렌블루를 처치하지 않은 국소 뇌혈류량의 기저치를 100.00±9.81%라 하였을 때, 메틸렌블루를 처치하였을 때의 국소 뇌혈류량은 97.83±5.39%로 감소하는 경향을 나타내었다.
- 인도메타신을 처치한 이 후 평균 동맥압은 시간이 경과함에 따라 각각 104.15±3.31%, 100.94±3.22%, 101.11±3.02%, 99.11±3.02%로 인도메타신을 처치하지 않았을 때와 비교하여 유의한 변화는 나타나지 않았다(Table 4, Fig. 5)
- 인도메타신을 처치군의 국소 뇌혈류량 기저치를 100.00±3.62%라 하였을 때, 인도메타신을 전처치한 후 太谿·太白을 30분 동안 刺鍼한 인도메타신 처치군의 국소 뇌혈류량은 97.48±2.73%였고, 拔鍼 후 시간이 경과함에 따라 각각 91.97±4.00%, 90.66±3.36%, 94.19±4.01%, 95.31±4.88%로 대조군의 국소 뇌혈류량 변화에 비해 유의성(p<0.05) 있게 감소하였다(Tabel 5, Fig. 6)
- 메틸렌블루를 처치한 이후 시간이 경과함에 따라 평균 동맥압은 각각 97.76±5.28%, 97.55±3.77%, 96.53±9.81%, 98.57±4.95%로 기저치보다 감소되는 경향을 나타내었으나 유의하지는 않았다(Table 4, Fig. 5).
- 메틸렌블루를 처치하지 않은 평균 동맥압의 기저치를 100.00±4.33%라 하였을 때, 메틸렌블루를 처치하였을 때의 평균 동맥압은 96.87±5.28%로 감소하였다.
- 메틸렌블루를 처치군의 국소 뇌혈류량 기저치를 100.00±4.43%라 하였을 때, 메틸렌블루를 전처치한 후 太谿·太白에 30분 동안 刺鍼한 메틸렌블루 처치군의 국소 뇌혈류량은 99.43±5.84%였고, 시간이 경과함에 따라 각각 96.70±4.72%, 101.66±3.08%, 108.04±6.66%와 108.73±10.40%로 메틸렌블루 처치군의 기저치보다 증가하였다(Table 6, Fig. 7).
- 인도메타신 처치군의 평균 동맥압 기저치를 100.00±5.16%라 하였을 때, 인도메타신을 전처치한 후 太谿·太白을 30분 동안 刺鍼한 인도메타신 처치군의 평균 동맥압은 97.85±4.14%였고, 拔鍼 후 시간이 경과함에 따라 각각 98.54±4.52%, 99.05±5.14%, 101.43±4.91%, 102.18±5.12%로 인도메타신 처치군의 기저치보다 유의성(p<0.05) 있게 증가하였다(Table 7, Fig. 8).
- 메틸렌블루 처치군의 평균 동맥압 기저치를 100.00±5.48%라 하였을 때, 메틸렌블루를 전처치한 후, 太谿·太白을 30분 동안 刺鍼한 후 메틸렌블루 처치군의 평균 동맥압은 96.25±5.39%이었고, 拔鍼 후 시간이 경과함에 따라 각각 88.26±5.42%, 86.88±6.17%, 87.25±5.65%, 85.66±5.67%로 메틸렌블루 처치군의 기저치보다 감소하였다(Table 8, Fig. 9).
- 평균 동맥압의 변화 기전을 관찰하기 위해 두 가지 혈관확장인자 억제제를 전처치 한 결과 guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루 처치군에서는 대조군에 비하여 유의한 변화가 없었고(Fig. 9), cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신 처치군에서 대조군에 비하여 유의성 있게 증가한 것으로 보아(Fig. 8), 이는 太谿·太白 刺鍼으로 변화된 평균 동맥은 cyclooxygenase와 관련된 기전에 의해 평균 동맥압이 감소된 것으로 생각된다.
- 이후 각각의 혈관 확장 억제제를 전처치한 후 太谿·太白에 30분 동안 자침한 인도메타신 처치군의 국소 뇌혈류량은 太谿·太白만을 刺鍼한 대조군에 비해서 유의성 있게(p<0.05) 감소하였다(Fig. 6).
- 본 연구 결과, 太谿·太白을 자침하였을 경우 국소뇌혈류량은 기저치보다 약 125% 정도 유의하게(p<0.05) 증가하였다(Fig. 2).
- 먼저 인도메타신과 메틸렌블루를 각각 처치한 후 刺鍼을 하지 않았을 때의 국소 뇌혈류량(Fig. 4)은 기저치에 비해 유의성 있는 변화가 없었고, 평균 동맥압의 변화(Fig. 5)는 기저치보다 감소하는 경향을 나타내었으나 유의성이 나타나지는 않았다. 이를 통해 볼 때, 혈관 확장 억제제들이 정상 상태 내에서도 약간씩 혈관을 수축시키는 것으로 보이나 그 영향은 미미한 것으로 생각해 볼 수 있다.
- 이상의 결과를 종합해 보면, 太谿·太白 刺鍼은 평균 동맥압이 감소되면서 국소 뇌혈류량을 유의하게 증가시키는 것으로 보아 혈관의 직경이 확장됨으로써 나타난 변화로 생각된다.
- 3. Guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루를 전처치한 후 太谿·太白을 자침한 메틸렌블루 처치군의 국소 뇌혈류량과 평균 동맥압 변화는 대조군에 비해 감소하는 경향이 있었다.
- 2. Cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신을 전처치한 후 太谿·太白을 자침한 인도메타신 처치군의 국소 뇌혈류량 변화는 대조군에 비해 유의하게 감소하였고, 평균 동맥압의 변화도 유의성 있게 증가하였다.
- 1. 흰쥐에 太谿·太白을 자침 시, 국소 뇌혈류량은 유의성 있게 증가하였으며, 평균 동맥압은 감소하였다.
- 이상의 결과, 太谿·太白의 자침은 cyclooxygenase와 관련하여 혈관을 확장시킴으로써 국소 뇌혈류량을 유의성 있게 증가시켰음을 알 수 있었다.
- 太谿·太白을 刺鍼하지 않은 흰쥐의 국소 뇌혈류량 기저치를 100.00±6.07%로 환산하였을 때, 자침 후 30분간의 평균 동맥압 변화는 99.46±5.30%로 나타났고, 拔鍼 후 시간이 경과함에 따라 평균 동맥압의 변화는 각각 94.43±4.36%, 91.47±5.45%, 91.93±3.97%, 92.48±4.97%로 기저치보다 감소하였다(Table 2, Fig. 3).
후속연구
- 이는 太谿·太白의 刺鍼이 향후 고혈압의 치료에 활용될 수 있을 것으로 생각되며 이에 대한 임상 활용 및 연구가 필요하리라 생각된다.
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