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누에배양세포에서 인간형 재조합단백질 각질세포 성장인자 생산
Production of Recombinant Human Keratinocyte Growth Factor from Bombyx mori (Lepidopera: Bombycidae) Bm5 Cells 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.21 no.6 = no.134, 2011년, pp.907 - 911  

한송이 (충남대학교 의학전문대학원 해부학교실) ,  진초이 (충남대학교 의학전문대학원 해부학교실) ,  권기상 (충남대학교 의학전문대학원 해부학교실) ,  윤은영 (농촌진흥청 국립농업과학원) ,  구태원 (농촌진흥청 국립농업과학원) ,  김승환 (충남대병원 응급의학과) ,  최종순 (한국기초과학지원연구원 생명과학연구부) ,  유권 (한국생명공학연구원 장수과학연구센터) ,  권오유 (충남대학교 의학전문대학원 해부학교실)

초록
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인간형 재조합단백질 각질세포 성장인자를 안정적으로 생산하는 누에 배양 세포(Bm5-hKGF cell)을 만들었다. 이 세포에서 분비되어 배지에 포함된 양은 15-20 ng/ml 정도였다. Bm5-hKGF cell에 누에의 PDI를 함께 발현시키면 세포외 분비량이 2배 증가하였다. Wound healing migration assay 결과 누에세포에서 생산된 인간형 재조합단백질 각질세포 성장인자는 세포생장을 촉진하는 활성을 가지고 있었다. 본 실험의 결과는 누에배양세포를 사용하여 저비용으로 양질의 인간형 재조합단백질을 대량생산 할 수 있는 것을 기대한다.

Abstract ▼ AI-Helper 아이콘AI-Helper

Using silkworm Bombyx mori Bm5 cells, we established a stable cell line expressing the human keratinocyte growth factor (hKGF), named by the Bm5-hKGF cell, in which the protein hKGF is synthesized in the cell and secreted in the cell culture supernatant (CCS) at approximately 15-20 ng/ml. When the B...

주제어

#Silkworm Bombyx mori Bm5 cells   #human keratinocyte growth factor   #protein disulfide isomerase  

AI 본문요약
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제안 방법

  • a, treated with serum free medium; b, normal culture medium; c, with CCS containing the secretory form of recombinant hKGF (50 ng/ml) for 24 hr. The wounded region was measured by the program Image J. The wound area of the culture was quantified in four fields in each treatment, and data were calculated from three independent experiments.

이론/모형

  • Blots were developed using the kit for the ECL Western blotting detection system (GE Healthcare, Piscataway, USA) and BioMax Light film (Kodak, Rochester, USA). ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) was performed using the hKGF ELISA kit (KOMA Biotech, Seoul, Korea) in 96-well culture plates. After treatment with the coating antibody recognized by hKGF for 2 hr at room temperature, cell culture supernatant (CCS) containing secreted hKGF was added and reacted.
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참고문헌 (8)

  1. Athar, U. and T. C. Gentile. 2009. Keratinocyte growth factor. Expert Opin. Biol. Ther. 9, 779-787. 

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