선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 이 연구는 울릉도 특산물(참고비, 삼나물, 울릉미역취)의 문헌상의 효능을 바탕으로 하여 화장품 약리 활성을 검증하고, 화장품 천연소재로서의 적용 가능성을 확인하였다.
제안 방법
- 시료 0.1 ㎖에 7 mM 2,2'-Azino-bis (3-ethylbenzoline-6-sulfonic acid) diammonium salt와 2.4 mm potassium persulfate의 1：1 혼합시약 0.1 ㎖을 넣고 차광하여 7분 동안 상온에 반응시킨 다음 734 ㎚에서 측정하였다.
- 1과 같이 열수와 에탄올 추출을 하였다. 각 시료에 정제수와 70% 에탄올을 각각 시료의 10배의 양으로 가하였으며 실온에서 열수추출물의 경우 85℃에서 3시간 환류냉각 추출하여 침전물을 분리하여 3회 반복 추출하였으며, 에탄올 추출의 경우에는 70% 에탄올을 가하여 24시간동안 침지한 상등액만을 여과하였다. 이를 3회 반복한 추출액을 농축하여 동결 건조 후 사용하였다.
- 에 의한 Folin-Ciocalteu colorimetric method로 정량하였다. 시료 1.5 ㎖에 phenol reagent 0.5 ㎖을 넣고 5분 동안 반응 시킨 후 1N-HCl 0.1 ㎖과 10% Na2CO3 0.5 ㎖을 넣어 1시간 정치한 다음 640 ㎚에서 흡광도를 측정하고, 표준물질인 tannic acid로 미리 작성한 표준곡선의 흡광도 값과 비교하여 폴리페놀 함량을 산출하였다.
- 의 방법에 따라 측정하였다. 추출물을 일정 농도가 되도록 조제하여 0.5 mL씩 시험관에 취하고, 50 mM Tris-HCl buffer (pH 8.6)에 녹인 porcine pancreas elastase(2.5U/mL)용액 0.5mL을 가한 후 50 mM Tris-HCl buffer (pH 8.6)에 녹인 기질 N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide (0.5mg/mL)을 첨가 하여 20분간 반응시켜 기질로부터 생성되는 p-nitroanilide의 생성량을 405nm에서 측정하였다. Elastase 저해 활성은 시료 용액의 첨가 군와 무 첨가 군의 흡광도 감소율로 나타내었다.
대상 데이터
- 항산화 관련 실험에는 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH, Sigma chemical Co., USA), 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzo-thiazoline-6sulfonic acid)diammonium salt (Sigma chmical Co., USA), potassium peroxodisulfate (Sigma chemical Co., USA), xantine oxidase (Sigma chemical Co., USA), xanthine (Sigma chemical Co., USA), Nitro Blue Tetrazolium Tablet (Sigma chemical Co., USA), hydrogen peroxide (Junsei chemical Co., Japan), pyrogallol (Sigma chemical Co., USA), 2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol (BHA, Junsei chemical co., Japan) 등을 사용하였다.
- 본 실험에 사용된 시료는 경북 울릉군 자생하는 울릉미역취(Solidago virgaurea var. Gigantea)와 삼나물(눈개승마, Aruncus dioicus var. kamtschaticus Hara), 참고비(Athyrium acutipinnulum)를 채취 후 건조하여 사용하였다.
- 총 폴리페놀 함량 측정에는 Phenol reagent (Folin-Ciocalteu reagent, Junsei chemical Co., Japan)을 사용하였다.
- 항염증 관련 실험에는 sodium nitroferricyanide (Ⅲ)digydrate (Sigma chemical Co., USA), sulanilamide (Sigma chemical Co., USA), N-(1-aphthyl) ethylenendiamine dihydro chloride (Sigma chemical Co., USA) 등을 사용하였다.
- 주름 관련 실험에서는 Elastase (Sigma chemical Co., USA), N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-P-nitroanilide (Sigma chemical Co., USA), Ursolic acid (Sigma chemical Co., USA), Collagenase From clostridium histolyticum (Sigma chemical Co., USA), 4-Phenylazobenzyloxy-carbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (Sigma chemical Co., USA) 등을 사용하였다.
- 본 실험에 사용된 기기 및 기구는 다음과 같다. UV/vis spectrophotometer (Hitachi 200-10, Japan), ELISA reader (Bio rad, Co., Japan), pH meter (Metrohm, Switzerland), B.O.D Incubator (Hanbaek Co., Korea), Autoclave (Hanbaek Co., Korea) 등을 사용하였다.
이론/모형
- 폴리페놀의 정량은 Dorman4)에 의한 Folin-Ciocalteu colorimetric method로 정량하였다. 시료 1.
- 전자공여능(EDA： electron donating abilities)은 Blois5)의 방법으로 다음과 같이 측정하였다. 각 시료용액 100 ㎕에 0.
- ABTS 라디칼 소거능 측정은 Roberta6)의 방법으로 측정하였다. 시료 0.
- Superoxide anion radical 소거능은 Siddhurajun와 Becker7)의 방법으로 측정하였다. 시료 0.
- Hydrogen peroxide 소거 활성은 Jayaprakasha8)의 방법으로 측정하였다. 시료 0.
- Superoxide dismutase 유사활성은 Marklund9)의 방법에 따라 측정하였다. 시료 0.
- Nitro oxide radical 저해 활성은 Marcocci10)등의 방법에 따라 측정하였다. 시료 50 ㎕에 10 mM Sodium nitroprusside 50 ㎕를 넣어 25℃에서 150분간 반응시킨다.
- Collagenase 저해 활성은 Gisslow11)등의 방법으로 측정하였다. 시료 0.
- Elastase 저해활성 측정은 Cannell 등12)의 방법에 따라 측정하였다. 추출물을 일정 농도가 되도록 조제하여 0.
성능/효과
- 참고비 70% 에탄올, 열수추출물은 각각 21.5 g, 28.6 g의 수율을 나타내었고, 삼나물 70% 에탄올, 열수추출물의 수율은 각각 31.9 g, 41.9 g로 나타났으며, 울릉 미역취 70% 에탄올, 열수 추출물의 수율은 각각 42.1 g, 35.1 g으로, 울릉 미역취의 70% 에탄올 추출물의 수율이 제일 높았다.
- . 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 전자공여능을 살펴본 결과는 Fig. 3과 같이 참고비 에탄올 열수추출물과, 삼나물에탄올 추출물의 활성이 높았으며, 각각 100㎍/㎖의 농도에서 50.73%, 55.33%, 57.26%의 활성을 나타내었으며, 그중 삼나물의 에탄올추출물이 활성이 가장 효과가 좋았다.
- ABTS radical의 소거활성과 같이 일반적으로 많이 사용되는 ABTS radical cation 소거능은 2,2'-Azino-bis (3 - ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS)와 potassium persulfate와의 반응으로 ABTS+ radical이 생성되면 특유의 색인 청록색을 띄게 되는데, 시료를 첨가함에 따라 연한녹색으로 decolorization 되는 것을 측정하는 방법이며, hydrogen-donating antioxidant와 chain breaking antioxidant 모두를 측정 할 수 있다. 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 ABTS+ radical cation 소거활성을 살펴본 결과는 Fig. 4와 같으며, 다른 추출물과 비교하여 참고비추출물이 가장 효가가 좋았으며, 참고비의 에탄올 열수추출물의 100 ㎍/㎖의 농도에서 80.2%, 87.28%의 활성을 나타내었으며 대조군 BHA와 유사한 높은 활성을 나타내었다.
- . 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 superoxide anion radical 소거능을 살펴본 결과를 Fig. 5와 같이 100 ㎍/㎖의 농도에서 모든 추출물이 대조군 BHA 보다 높은 활성을 나타내었으며, 미역취 열수추출물과 참고비 에탄올추출물, 열수추출물이 각각 82.36%, 89.04%, 90.16%의 활성을 나타내었으며, 그 중 참고비 열수추출물이 가장 높은 활성을 나타내었다.
- 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 Hydrogen peroxide 소거 활성을 살펴본 결과는 Fig. 6과 같이 500 ㎍/㎖의 농도에서 삼나물의 열수추출물과 미역취의 열추추물을 제외한 모든 추출물에서 높은 활성을 나타내었으며, 참고비의 에탄올추출물과 열수추출물, 삼나물의 에탄올 추출물, 미역취의 에탄올추출물에서 각각 88.66%, 84.97%, 74.52%, 81.27%의 효과를 보였고, 특히 참고비의 에탄올추출물이 대조군과 유사한 높은 활성을 나타내었다.
- SOD 정제시 열안정성이 뛰어나고 SOD와 유사한 활성을 나타내는 물질을 함께 정제하여 이를 SOD와 결합된 phenol류 물질인 것으로 보고한 바 있으며, Vitamin C 그 자체가 높은 SOD 유사활성을 나타낸다고 보고한 바 있다23). 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 superoxide dismutase 유사 활성을 살펴본 결과는 Fig. 7과 같이 활성이 높지 않았지만 10 ㎍/㎖의 저농도에서 참고비의 에탄올추출물과 열수추출물이 각각 27.09%, 26.68%의 활성을 나타내었다.
- Nitric oxide는 Reactive Oxygen Species (ROS)의 하나로서 세포독성이 강하며 염증, 암 그리고 다른 병리학적 조건을 유발하는 것으로 알려져 있으며, 다량의 NO는 nitrozation, nitration과 같은 간접적 영향 및 산화반응을 야기하여 유해한 효과를 나타내게 된다. 넓은 뜻으로 활성산소 (reactive oxygen species)의 하나인 nitric oxide radical(NO)저해활성을 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 측정한 결과는 Fig 8과 같이 모든 추출물에서 높은 활성을 나타내었다. 특히 참고비 열수 추출물, 에탄올추출물과 삼나물 에탄올추출물, 열수추출물이 높은 항염증 효과를 나타내었으며, 50 ㎍/㎖의 농도에서 각각 45.
- 넓은 뜻으로 활성산소 (reactive oxygen species)의 하나인 nitric oxide radical(NO)저해활성을 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 측정한 결과는 Fig 8과 같이 모든 추출물에서 높은 활성을 나타내었다. 특히 참고비 열수 추출물, 에탄올추출물과 삼나물 에탄올추출물, 열수추출물이 높은 항염증 효과를 나타내었으며, 50 ㎍/㎖의 농도에서 각각 45.3%, 38.88%, 48.05%, 53.91%의 높은 항염증효과는 매우 우수한 항염증물질로 볼 수 있다.
- 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 Collagenase 저해활성 측정은 Fig. 9과 같이 삼나물의 에탄올추출물과 열수추출물을 제외한 모든 추출물에서 collagenase저해활성을 나타내었고, 참고비의 에탄올추출물과 열수추출물, 미역취의 에탄올추출물과 열수추출물은 각각 1000㎍/㎖의 농도에서 56.55%, 69.19%, 76.81%, 70.93%로 나타내었다. 특히 미역취의 에탄올추출물과 열수추출물에서 모두70%이상의 활성을 나타내었으며 기능성화장품의 소재로서 개발가능성을 확인 할 수 있었다.
- 93%로 나타내었다. 특히 미역취의 에탄올추출물과 열수추출물에서 모두70%이상의 활성을 나타내었으며 기능성화장품의 소재로서 개발가능성을 확인 할 수 있었다.
- Elastase 저해제는 피부 주름을 개선하는 작용을 나타내고, ursolic acid등이 elastase 저해제로 이용되고 있다12). 이러한 주름 생성과 관련된 울릉도산 참고비, 산나물, 미역취의 열수 및 에탄올 추출물에 대한 elastase 저해 능을 측정결과는 Fig. 10과 같이 미역취와 삼나물추출물 모두 효과가 없었으며, 참고비의 에탄올추출물과 열수추출물은 각각 10 ㎍/㎖의 농도에서 39.63%, 37.94%로 가장 효과가 높게 나타내었다.
- Gigaatea) 3종의 특산물은 한방에서 이뇨와 건위 효과 및 기침, 부종, 식체, 신장염의 치료효과가 있는 것으로 알려져 있다. 화장품 약리활성 연구를 통하여 elastase, Collagenase 저해능 평가법으로 피부의 주름을 저해할 수 있음을 확인 할 수 있었으며, 항산화 실험에서는 특히 대표적인 항산화 지표물질인 BHA(butylated hydroxyanisole)보다 높은 항산화 활성이 있었으며, 특히 ABTS radical 소거능에서는 높은 효능이 있음을 발견 할 수 있었으며, 항염증 효과 실험에서는 낮은농도 10 ug/ml에서도 BHA보다 높은 항염증효과가 있는 것을 발견 할 수 있었다.
- 위 실험결과로 화장품을 합성원료가 아닌 천연의 소재로 안정성을 높이며, 천연 화장품 첨가제으로서의 가능성을 알 수 있었다.
후속연구
- 이 연구는 울릉도 특산물(참고비, 삼나물, 울릉미역취)의 화장품 약리 활성을 검증을 통해, 천연소재를 이용한 기능성 화장품의 천연소재로서 개발이 가능할 것으로 사료된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.