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문제 정의
- 이번 연구에서는 넙치에서 분리된 Edwardsiella tarda에 대한 항균제 MIC 값 분포를 비교하고자 하였다.
제안 방법
- Ampicillin, amoxicillin, oxytetracycline, doxycycline, oxolinic acid, flumequine, ciprofloxacin, norfloxacin (이상 Sigma) 의 8종류의 항균제를 각각 2,560 ㎍/ml의 농도로 증류수에 녹이고 0.22 ㎛ sylinge filter를 통과시켜 멸균한 후 사용하였다.
대상 데이터
- 실험에 사용된 E. tarda는 총 49 균주이며 2004년부터 2008년 사이에 제주, 완도, 해남, 울산, 포항, 울진에서 양식된 넙치에서 분리되었다. 분리된 세균은 API 20E kit를 사용하여 E.
이론/모형
- MIC 값은 CLSI (2006a) 의 broth microdilution 법으로 실시하였고 35℃에서 16-20 시간 동안 배양한 후에 세균이 자라지 않은 최저 농도를 MIC 값으로 측정하였으며 대조균주로 Escherichia coli ATCC 25922를 사용하였다. 항균제 내성과 감수성의 판정은 CLSI의 기준에 따라 해석하였으며 (CLSI, 2006b) (Table 1) 기준이 없는 oxytetracycline, oxolinic acid와 flumequine은 MIC 분포도 상에서 MIC 값이 높은 쪽을 내성group으로 하여 각 균주의 내성 형태를 결정하였다 (Kim, 1999).
- 항균제 내성과 감수성의 판정은 CLSI의 기준에 따라 해석하였으며 (CLSI, 2006b) (Table 1) 기준이 없는 oxytetracycline, oxolinic acid와 flumequine은 MIC 분포도 상에서 MIC 값이 높은 쪽을 내성group으로 하여 각 균주의 내성 형태를 결정하였다 (Kim, 1999). MIC50 값과 MIC90 값은 Hamilton-Miller (1991) 의 방법에 의해 측정하여 MIC50 값은 전체 실험균주 중에서 50% 이상의 증식을 저지하는 최소농도이며 MIC90 값은 90% 이상의 세균의 증식을 저지하는 최소농도로 정하였다.
- MIC 값은 CLSI (2006a) 의 broth microdilution 법으로 실시하였고 35℃에서 16-20 시간 동안 배양한 후에 세균이 자라지 않은 최저 농도를 MIC 값으로 측정하였으며 대조균주로 Escherichia coli ATCC 25922를 사용하였다. 항균제 내성과 감수성의 판정은 CLSI의 기준에 따라 해석하였으며 (CLSI, 2006b) (Table 1) 기준이 없는 oxytetracycline, oxolinic acid와 flumequine은 MIC 분포도 상에서 MIC 값이 높은 쪽을 내성group으로 하여 각 균주의 내성 형태를 결정하였다 (Kim, 1999). MIC50 값과 MIC90 값은 Hamilton-Miller (1991) 의 방법에 의해 측정하여 MIC50 값은 전체 실험균주 중에서 50% 이상의 증식을 저지하는 최소농도이며 MIC90 값은 90% 이상의 세균의 증식을 저지하는 최소농도로 정하였다.
성능/효과
- 1g, 1h). E. tarda에 대한 ciprofloxacin의 MIC50 값은 0.25 ㎍/㎖로 조사된 8 종류의 항균제 가운데에서 가장 낮았고 (Table 2) ciprofloxacin과 norfloxacin에 대한 내성을 갖는 E. tarda는 49균주 중 각각 2개 균주이며 (Fig. 1g, 1h) 내성률은 4.1%로 조사된 8 종류의 항생제 가운데에서 가장 낮았다.
- E. tarda에 대한 quinolones 계열 항생제인 oxolinic acid와 flumequine의 MIC 값은 모두 ≤0.25∼256< ㎍/㎖의 범위 이었고 MIC50 값은 4 ㎍/㎖과 8 ㎍/㎖이었다 (Table 2).
- 이번 연구에서 ampicillin에 대한 E.tarda의 내성률은 38.8%, amoxicillin에 대한 내성률은 61.2% 이었다. 이것은 넙치에서 분리된 E.
- 이번 연구에서는 ciprofloxacin의 MIC 값은 ≤0.125∼64 ㎍/㎖, norfloxacin의 MIC 값은 ≤0.125∼128< ㎍/㎖이며 ciprofloxacin와 norfloxacin에 대하여 4.1%의 내성률을 나타내어 내성균의 출현이 확인되었다.
- 2%이었다. 조사된 E. tarda 49 균주 중에서 35 균주는 tetarcyclin 계열 항생제인 oxytetracycline에 대해 내성을 가지고 있어 내성률은 71.4%이었고 doxycycline에 대하여 31균주인 63.3%가 내성을 가지고 있었다 (Fig. 1c, 1d). Oxytetracycline과 doxycycline에 대한 MIC50 값은 각각 64 ㎍/㎖과 16 ㎍/㎖이었다 (Table 2).
- 에드와드병의 치료를 위해 투여할 항생제의 선정은 항생제 감수성 검사를 통해 감수성 있는 약품을 선정하는 것이 일반적인 방법이며, 약품의 투여방법은 약동학과 약력학의 분석을 통해 설정할 수 있다 (Turnidge and Paterson, 2007). 조사된 E. tarda 49균주의 oxolinic acid에 대한 내성률은 6.1%이었지만 MIC50값 (4 ㎍/㎖) 을 넙치에 경구투여, 복강주사, 약욕법으로 투여한 약동학적 결과와 비교하였을 때 치료효과가 낮을 것으로 생각된다. 정 등 (2009b) 은 국내의 대표적인 양식어류인 넙치에 oxolinic acid를 23℃에서 60 mg/kg의 농도로 경구 투여하였을 때 혈중 최고농도 (Cmax) 는 3.
후속연구
- 13 ㎍/㎖ 이하 (Stock and Wiedemann, 2001) 인 것과 비교하면 높은 수치이다. 국내에서 양식 어류의 세균성 질병 치료를 위하여 ciprofloxacin 과 norfloxacin이 사용되었으나 ciprofloxacin과 norfloxacin은 2009년부터 국내에서 동물에 투여하는 것이 금지 되었기 때문에 향후에 내성률의 변동을 추적하는 것이 필요할 것으로 생각된다.
- , 1999) 넙치에 투여된 oxolinic acid의 에드와드병 치료 효과가 낮을 것으로 생각된다. 그러나 혈청 내 약물 농도가 세균 감염부위의 약물 농도를 의미하지는 않고 (MacGowan, 2001) oxolinic acid를 투여한 나일 틸라피아에서 신장과 간 내의 oxolinic acid의 최고 농도는 혈청 보다 높아 (김 등, 1998) 혈청 내의 항생제 농도만으로 단정 지을 수는 없기 때문에 감염 부위에 대한 약동력학적 분석이 필요할 것으로 생각된다.
- 앞으로 에드와드병을 포함하여 양식 어류에 발생하는 세균성 질병의 치료에 효과가 큰 항균제를 선정하기 위해 양식장에서 사용되고 있는 다양한 항균제의 약동력학적 분석과 비브리오균, 연쇄구균에 대한 항균제의 MIC 값 분포 연구가 필요할 것이라 사료된다.
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