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문제 정의
- 이 증례에서는 식욕부진과 구토 증상을 가진 8개월령의 말티스 암컷에서 발생한 Staph. aureus 감염에 의해 자궁축농증 발병 예를 보고하고자 한다.
제안 방법
- 0)로 농도에 맞게 분주한 후 PCR amplification에 사용될 때까지 -20℃에 저장하였다. PCR 검사를 위하여 추출된 Template DNA (50 ng)와 20 pmol의 각 primer가 PCR mixture tube (AccuPower PCR PreMix; Bioneer Corp., Korea)에 분주하였다. PCR mixture tube (AccuPower PCR PreMix; Bioneer Corp.
- PCR 반응 후 각 sample (8 μl)들은 2 μl loading buffer와 혼합한 후 0.5 mg/ml ethidium bromide로 염색한 2% agarose gel에서 전기영동하여 결과를 확인하였다.
- , Staphy. aureus 그리고 P. fluorescens를 동시에 검출할 수 있는 multiplex polymerase chain reaction (PCR)을 수행하였다. 적출한 자궁 내에서 무균적으로 채취한 내용물 1 g을 AccuPrep Genomic DNA extraction kit (Bioneer Corporation, Korea)를 이용하여 제조사의 지시에 따라 DNA를 추출하였다.
- 고정이 완료된 조직들은 병리조직학적 검사를 위한 통상적인 방법을 사용하여 파라핀 포맷한 후, 4 μm 두께로 절편하여 H&E 염색 후 병리조직학적인 검사를 수행하였다.
- 방사선 검사를 통하여 자궁축농증으로 진단된 환축에 대하여 축주와의 협의로 난소자궁적출술을 실시하였다. 외과적 난소자궁적출술을 통하여 적출된 난소와 자궁은 육안관찰을 수행하였다.
- , Korea)를 사용하여 parvovirus, distemper 그리고 heartworm에 대한 검사를 수행하였다. 복강 내 장기의 이상 유무를 확인하기 위하여 방사선 촬영을 lateral position에서 수행하였다.
- 방사선 검사를 통하여 자궁축농증으로 진단된 환축에 대하여 축주와의 협의로 난소자궁적출술을 실시하였다. 외과적 난소자궁적출술을 통하여 적출된 난소와 자궁은 육안관찰을 수행하였다. 외과적 난소 자궁적출술을 통하여 적출된 자궁은 육안적으로 좌·우측 자궁각이 종대된 소견을 보였다(Fig.
- 적출된 난소와 자궁은 육안 검사 후 10% 중성완충 포르말린용액(neutral buffered formalin)에 고정하였다. 고정이 완료된 조직들은 병리조직학적 검사를 위한 통상적인 방법을 사용하여 파라핀 포맷한 후, 4 μm 두께로 절편하여 H&E 염색 후 병리조직학적인 검사를 수행하였다.
- fluorescens를 동시에 검출할 수 있는 multiplex polymerase chain reaction (PCR)을 수행하였다. 적출한 자궁 내에서 무균적으로 채취한 내용물 1 g을 AccuPrep Genomic DNA extraction kit (Bioneer Corporation, Korea)를 이용하여 제조사의 지시에 따라 DNA를 추출하였다. 추출된 DNA는 Tris-EDTA buffer (pH 8.
- 직장체온 측정과 복부촉진을 수행하고 혈액을 채취하여 혈구수 검사와 혈액생화학 검사를 수행하였으며, 전염성 질환에 대하여 rapid test kits (SD Inc., Korea)를 사용하여 parvovirus, distemper 그리고 heartworm에 대한 검사를 수행하였다. 복강 내 장기의 이상 유무를 확인하기 위하여 방사선 촬영을 lateral position에서 수행하였다.
대상 데이터
- 서울에 소재하고 있는 충무동물병원에 내원한 8개월 말티스 암컷으로 식욕부진, 다음 그리고 간헐적 구토와 같은 임상증상을 보였다. 환축은 발정과 출산을 경험하지 않았다.
- 자궁축농증은 6세 이상의 노령견에서 다발한다(Stone, 2003). 이 연구의 환축은 8개월령으로 어린 연령으로 분류될 수 있으며 발정과 출산경험이 없었다. 이 연구의 자궁축농증은 어린 연령에서 발생한 매우 드문 증례이다.
- 이 증례는 8개월령의 말티스에서 발생한 폐쇄형 자궁축농증으로 발정과 출산 경험이 없는 어린 개에서 발생한 자궁축농증 예이다. 난소자궁적출술을 실시하고 관찰한 적출된 자궁은 육안적으로 좌·우측 자궁각의 종대와 내강에 황갈색의 내용물이 가득 차 있는 것을 확인할 수 있었다.
이론/모형
- 반응조건은 94℃에서 5 분간 pre-denaturation을 실시한 후 94℃에서 20 sec, 58℃에서 20초, 72℃에서 20초를 35주기로 시행하고 마지막으로 72℃에서 7분간 post-polymerization 단계를 거쳐 반응을 마무리한 후, 분석이 이루어질 때까지 4℃에 보관하였다. PCR 반응은 My Genie 32 Thermal Block PCR (Bioneer, Korea)을 이용하여 수행되었다. PCR 반응 후 각 sample (8 μl)들은 2 μl loading buffer와 혼합한 후 0.
성능/효과
- 6 mg/dl이었다. ALP 수치가 증가되어 환축의 간기능 저하를 확인할 수 있었다. 복강 내 장기의 이상 유무를 확인하기 위하여 방사선 촬영을 lateral position에서 수행한 결과 복강 내 자궁의 종대를 확인할 수 있었으며 종대된 자궁에 의해 소장이 밀려있는 것을 관찰할 수 있었다(Fig.
- Multiplex PCR assay를 수행한 결과, 이번 증례의 적출된 자궁 내용물로부터 추출된 DNA가 특이적으로 증폭되는 것을 확인하였다. PCR 결과 2% agarose gels에서 406 bp 크기의 황색포도상구균에 특이적인 증폭산물을 확인할 수 있었다(Fig.
- Multiplex PCR assay를 수행한 결과, 이번 증례의 적출된 자궁 내용물로부터 추출된 DNA가 특이적으로 증폭되는 것을 확인하였다. PCR 결과 2% agarose gels에서 406 bp 크기의 황색포도상구균에 특이적인 증폭산물을 확인할 수 있었다(Fig. 3).
- 난소와 자궁의 병리조직 검사 결과 난소의 이상은 관찰되지 않았으나 자궁은 내막의 괴사, 염증세포 침윤 그리고 내막상피의 탈락 소견이 관찰되었다(Fig. 4).
- 난소자궁적출술을 실시하고 관찰한 적출된 자궁은 육안적으로 좌·우측 자궁각의 종대와 내강에 황갈색의 내용물이 가득 차 있는 것을 확인할 수 있었다.
- ALP 수치가 증가되어 환축의 간기능 저하를 확인할 수 있었다. 복강 내 장기의 이상 유무를 확인하기 위하여 방사선 촬영을 lateral position에서 수행한 결과 복강 내 자궁의 종대를 확인할 수 있었으며 종대된 자궁에 의해 소장이 밀려있는 것을 관찰할 수 있었다(Fig. 1).
- 환축은 마취 회복 후 항생제와 소염제를 기본으로 1주일간의 입원 및 처치를 받았다. 수술 후 1주일간의 처치를 하며 임상증상을 관찰한 결과, 식욕회복 및 구토의 개선 등으로 환축이 회복된 것을 확인하였다.
- 이번 연구의 결과 어린 말티스에서 발생한 자궁축농증의 화농원인균으로서 황색포도상구균이 관여하는 것을 확인하였다. 자궁축농증은 6세 이상의 노령견에서 다발한다(Stone, 2003).
- 병리조직학적으로 자궁벽의 괴사, 염증세포 침윤 그리고 내막상피의 탈락 소견이 관찰되었다. 자궁의 화농 원인균을 알아보고자 종대된 자궁 내용물에 대한 그람염색을 실시한 결과, 그람양성 구균임을 알 수 있었고, 병원체 종류를 확인하기 위한 multiplex PCR의 결과 이번 증례의 자궁축능증 원인균으로 황색포도상구균이 확인되었다. 이번 연구자들은 향후보다 많은 조사를 통하여 국내 개의 자궁축농증 원인균 분포를 확인할 계획이다.
- 적출된 자궁을 무균적으로 절개하여 자궁 내에 차있는 내용물 일부를 슬라이드에 도말하여 Gram 염색을 한 결과 구형의 Gram 양성 세균을 관찰할 수 있었다.
- 초진 시 직장체온 측정 결과 40℃로 매우 높았으며, 심박동과 호흡수는 정상이었고, 복부촉진 시 통증을 호소하였다. 전염성 질환에 대한 rapid test kits (SD Inc., Korea) 결과 parvovirus, distemper 및 heartworm 모두 음성으로 감염되지 않은 것을 알 수 있었다. 혈구수 검사 결과 WBC 81.
- 초진 시 직장체온 측정 결과 40℃로 매우 높았으며, 심박동과 호흡수는 정상이었고, 복부촉진 시 통증을 호소하였다. 전염성 질환에 대한 rapid test kits (SD Inc.
- , Korea) 결과 parvovirus, distemper 및 heartworm 모두 음성으로 감염되지 않은 것을 알 수 있었다. 혈구수 검사 결과 WBC 81.6 (103/ml), RBC 6.45 (106/ml), PCV 38.1%, Hb 12.1 g/dl 그리고 MCV 62.2 fl로 백혈구 수치가 높게 나와 공시동물의 염증 진행과 이로 인한 발열이 추정되었다. 혈액생화학검사 결과 ALP 583 U/L, ALT 54 U/L, Alb 2.
- 2 fl로 백혈구 수치가 높게 나와 공시동물의 염증 진행과 이로 인한 발열이 추정되었다. 혈액생화학검사 결과 ALP 583 U/L, ALT 54 U/L, Alb 2.8 g/dl, TP 8.7 g/dl, Glu 203.0 mg/dl, BUN 35.1 mg/dl 그리고 crea 1.6 mg/dl이었다. ALP 수치가 증가되어 환축의 간기능 저하를 확인할 수 있었다.
- 환축은 발정과 출산을 경험하지 않았다. 환축의 임상증상은 3주 전부터 경미하게 시작되어 내원 당시까지 계속하여 그 병증이 진행된 것으로 확인되었다.
후속연구
- 69%)가 분리되었다고 하였다. 국내 자궁축농증에 이환된 개의 원인 병원체 분포에 대한 체계적인 연구결과는 현재까지 없는 실정이며 이 연구에서 황색포도상구균이 자궁축농증 유발에 관여하는 것을 확인하였고 향후 국내 현황 조사를 수행하여 외국의 자료와 비교분석을 수행하여야 할 것으로 생각하였다.
- 이번 연구자들은 향후보다 많은 조사를 통하여 국내 개의 자궁축농증 원인균 분포를 확인할 계획이다. 또한, 어린 개에서 자궁축농증의 발생 원인의 규명과 연령에 따른 자궁축농증 발병이 화농원인균의 종류와 상관성이 있는지 연구를 수행할 예정이다.
- 국내 자궁축농증 원인 병원체 현황을 알 수 있으면, 국내 주요 원인 병원체에 대한 감수성 있는 항생제 치료의 지침을 세울 수 있고 소동물 임상분야에서 자궁축농증의 내과적 치료의 효과가 극대화될 수 있다. 이 연구에서 자궁축농증의 원인균으로 대장균이 아닌 황색포도상구균이 확인됨에 따라 외국의 자궁축농증의 원인균 분포와 국내 현실의 차이가 있지는 않을까 추정되었고 향후보다 많은 조사를 통하여 국내 개의 자궁축농증 원인균 분포를 확인할 계획이다.
- 자궁의 화농 원인균을 알아보고자 종대된 자궁 내용물에 대한 그람염색을 실시한 결과, 그람양성 구균임을 알 수 있었고, 병원체 종류를 확인하기 위한 multiplex PCR의 결과 이번 증례의 자궁축능증 원인균으로 황색포도상구균이 확인되었다. 이번 연구자들은 향후보다 많은 조사를 통하여 국내 개의 자궁축농증 원인균 분포를 확인할 계획이다. 또한, 어린 개에서 자궁축농증의 발생 원인의 규명과 연령에 따른 자궁축농증 발병이 화농원인균의 종류와 상관성이 있는지 연구를 수행할 예정이다.
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