랫드에서 백두옹과 청호의 경구투여에 의한 반복 투여독성 시험과 면역 활성 평가 Evaluate a Repeated Oral Dose Toxicity and Immunomodulating Activity of $Pulsatilla$$koreana$ and $Artemisiae$$annuae$ in Sprague-Dawley Rats원문보기
본 연구는 Sprague-Dawley 계통의 암컷 랫드에서 백두옹과 청호를 반복경구투여 독성평가와 면역 활성을 평가하기 위해서 시행하였다. 랫드에 처치한 물질은 백두옹과 청호를 0.5 ml/kg, 1 ml/kg, 2 ml/kg를 D.W에 용해시켜 4주 동안 경구투여를 하였다. 백두옹과 청호의 안전성을 확인하기 위해 다음과 같은 관찰 및 검사를 하였다. 검사항목으로는 체중과 사료 섭취량, 임상증상, 안과학적 검사, 혈액학적 검사, 혈청생화학적 검사를 관찰하였다. 또한 랫드에 간과 신장에서의 병리조직학적 변화를 관찰하였다. 백두옹 고용량군의 혈액학적 검사에서 호중구, 림프구, 단핵구의 증가가 관찰되었다. 이러한 증가는 면역세포의 증가로 백두옹 고용량군은 면역 활성이 일어났다고 사료된다. 체중, 사료섭취량, 혈청생화학적 검사, 병리조직학적 변화는 대조군과 비교시 유의적인 변화가 나타나지 않았다. 따라서 백두옹과 청호는 생리대사에 무해하며 면역 활성이 증가된 것으로 사료된다.
본 연구는 Sprague-Dawley 계통의 암컷 랫드에서 백두옹과 청호를 반복경구투여 독성평가와 면역 활성을 평가하기 위해서 시행하였다. 랫드에 처치한 물질은 백두옹과 청호를 0.5 ml/kg, 1 ml/kg, 2 ml/kg를 D.W에 용해시켜 4주 동안 경구투여를 하였다. 백두옹과 청호의 안전성을 확인하기 위해 다음과 같은 관찰 및 검사를 하였다. 검사항목으로는 체중과 사료 섭취량, 임상증상, 안과학적 검사, 혈액학적 검사, 혈청생화학적 검사를 관찰하였다. 또한 랫드에 간과 신장에서의 병리조직학적 변화를 관찰하였다. 백두옹 고용량군의 혈액학적 검사에서 호중구, 림프구, 단핵구의 증가가 관찰되었다. 이러한 증가는 면역세포의 증가로 백두옹 고용량군은 면역 활성이 일어났다고 사료된다. 체중, 사료섭취량, 혈청생화학적 검사, 병리조직학적 변화는 대조군과 비교시 유의적인 변화가 나타나지 않았다. 따라서 백두옹과 청호는 생리대사에 무해하며 면역 활성이 증가된 것으로 사료된다.
This study was designed to evaluate a repeated oral dose toxicity and immunomodulating activity of $Pulsatilla$$koreana$ and $Artemisiae$$annuae$ in Sprague-Dawley rats. The female rats were treated with $Pulsatilla$$koreana$ and <...
This study was designed to evaluate a repeated oral dose toxicity and immunomodulating activity of $Pulsatilla$$koreana$ and $Artemisiae$$annuae$ in Sprague-Dawley rats. The female rats were treated with $Pulsatilla$$koreana$ and $Artemisiae$$annuae$ of control group, low group (0.5 ml/kg), medium group (1 ml/kg), high group (2 ml/kg) for distilled water, intragastrically for 4 weeks, respectively. To ensure the safety of $Pulsatilla$$koreana $ and $Artemisiae$$annuae$ such as the following were observed and tested. We examined the body weight, the feed intake, the clinical signs, the ophthalmological test, the hematological and the serum biochemical analysis. We also observed the histopathological changes of liver and kidney in rats. Hematological results were the increase of neutrophils, lymphocytes and monocytes in the high dose group of $Pulsatilla$$koreana$. The increase immune cells in the high dose group of $Pulsatilla$$koreana$ might immunomodulating activity. No significant differences in body weight, feed intake, serum biochemical analysis and histopathological between control and fed group were found. In conclusion, $Pulsatilla$$koreana$ and $Artemisiae$$annuae$ is physiologically safe and improve immunomodulating activity.
This study was designed to evaluate a repeated oral dose toxicity and immunomodulating activity of $Pulsatilla$$koreana$ and $Artemisiae$$annuae$ in Sprague-Dawley rats. The female rats were treated with $Pulsatilla$$koreana$ and $Artemisiae$$annuae$ of control group, low group (0.5 ml/kg), medium group (1 ml/kg), high group (2 ml/kg) for distilled water, intragastrically for 4 weeks, respectively. To ensure the safety of $Pulsatilla$$koreana $ and $Artemisiae$$annuae$ such as the following were observed and tested. We examined the body weight, the feed intake, the clinical signs, the ophthalmological test, the hematological and the serum biochemical analysis. We also observed the histopathological changes of liver and kidney in rats. Hematological results were the increase of neutrophils, lymphocytes and monocytes in the high dose group of $Pulsatilla$$koreana$. The increase immune cells in the high dose group of $Pulsatilla$$koreana$ might immunomodulating activity. No significant differences in body weight, feed intake, serum biochemical analysis and histopathological between control and fed group were found. In conclusion, $Pulsatilla$$koreana$ and $Artemisiae$$annuae$ is physiologically safe and improve immunomodulating activity.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
문제 정의
본 연구는 Sprague-Dawley 계통의 암컷 랫드에서 백두옹과 청호를 반복경구투여 독성평가와 면역 활성을 평가하기 위해서 시행하였다. 랫드에 처치한 물질은 백두옹과 청호를 0.
이에 본 실험에서는 백두옹과 청호를 사료첨가제로서 활용하기 위한 기초자료를 얻는데 있으며, 이를 위하여 백두옹과 청호를 사용하여 랫드의 여러 장기에 미치는 영향에 대하여 확인하였다. 백두옹과 청호를 각각 투여한 랫드의 몸무게, 사료섭취량, 혈액학적 검사, 혈청생화학적 검사 및 조직학적 검사를 통해 백두옹과 청호의 독성유무를 판단하기 위하여 수행하였다.
제안 방법
백두옹과 청호의 안전성을 확인하기 위해 다음과 같은 관찰 및 검사를 하였다. 검사항목으로는 체중과 사료 섭취량, 임상증상, 안과학적 검사, 혈액학적 검사, 혈청생화학적 검사를 관찰하였다. 또한 랫드에 간과 신장에서의 병리조직학적 변화를 관찰하였다.
검사항목으로는 체중과 사료 섭취량, 임상증상, 안과학적 검사, 혈액학적 검사, 혈청생화학적 검사를 관찰하였다. 또한 랫드에 간과 신장에서의 병리조직학적 변화를 관찰하였다. 백두옹 고용량군의 혈액학적 검사에서 호중구, 림프구, 단핵구의 증가가 관찰되었다.
본 연구는 Sprague-Dawley 계통의 암컷 랫드에서 백두옹과 청호를 반복경구투여 독성평가와 면역 활성을 평가하기 위해서 시행하였다. 랫드에 처치한 물질은 백두옹과 청호를 0.5 ml/kg, 1 ml/kg, 2 ml/kg를 D.W에 용해시켜 4주 동안 경구투여를 하였다. 백두옹과 청호의 안전성을 확인하기 위해 다음과 같은 관찰 및 검사를 하였다.
랫드에서 투여기간 중 각 군당 5마리씩의 동물에 대하여 육안 및 검안경을 이용한 안과학적 검사를 실시하였다.
모든 동물에 대하여 시험개시일로부터 시험종료일 까지 매주 1회 측정하였다.
모든 실험동물에 대하여 간, 신장(좌·우), 폐, 비장, 심장, 부신(좌·우), 난소(좌·우) 등의 체중에 대한 상대장기 중량 및 크기를 측정하였다.
모든 실험동물에 대하여 시험기간 중 1일 1회 실시하였고, 일반 임상증상 항목으로서 anorexia, salivation, diarrhea, vomiting, polyuria, anuria, fecal change의 정도를 기록하였다.
이에 본 실험에서는 백두옹과 청호를 사료첨가제로서 활용하기 위한 기초자료를 얻는데 있으며, 이를 위하여 백두옹과 청호를 사용하여 랫드의 여러 장기에 미치는 영향에 대하여 확인하였다. 백두옹과 청호를 각각 투여한 랫드의 몸무게, 사료섭취량, 혈액학적 검사, 혈청생화학적 검사 및 조직학적 검사를 통해 백두옹과 청호의 독성유무를 판단하기 위하여 수행하였다.
부검 전에 모든 실험동물에 대하여 채혈을 실시하였다. 일반 혈액학적 검사는 혈액자동분석기(Hemavet 850Fs, CDC tech, USA)를 이용하여 백혈구(WBC), 호중구(neutrophil), 임파구(lymphocyte), monocyte, 호산구(eosinophil), 호염구(basophil), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(hemoglobin), hematocrit, MCV, MCH, MCHC, RDW, platelet, MPV수를 측정하였으며, 혈청 생화학적 검사는 채취한 혈액의 일부를 실온에 30분간 방치하여 응고 후 원심분리(3,000rpm, 30min)하여 얻은 혈청에 대해서 혈청자동분석기(BS-400, MINDRAY, China)를 이용하여 총단백(total protein), 총 빌리루빈(total bilirubin), 혈당(blood glucose), 혈액뇨소질소(BUN), creatinine, aspartate transaminase(AST), alanine transaminase(ALT), alkaline phosphatase(ALP), 총 콜레스테롤(total cholesterol)을 측정하였다.
사육상자별로 당일 급여 및 급수총량과 익일 잔량의 차를 시험개시 후 매주 1회 측정하여 일일 사료섭취량 및 음수섭취량으로 하였다.
시험 군의 구성은 대조군(distilled water), 저용량군(0.5 mL/kg), 중간용량군(1 mL/kg), 고용량군(2 mL/kg)으로 분류하였다.
시험물질의 제조는 항상 새롭게 시험물질을 제조하여 투여하였다. 투여는 주 5회(월~금) 일정한 시간에(15:00) 경구투여 하였다.
부검 전에 모든 실험동물에 대하여 채혈을 실시하였다. 일반 혈액학적 검사는 혈액자동분석기(Hemavet 850Fs, CDC tech, USA)를 이용하여 백혈구(WBC), 호중구(neutrophil), 임파구(lymphocyte), monocyte, 호산구(eosinophil), 호염구(basophil), 적혈구(RBC), 헤모글로빈(hemoglobin), hematocrit, MCV, MCH, MCHC, RDW, platelet, MPV수를 측정하였으며, 혈청 생화학적 검사는 채취한 혈액의 일부를 실온에 30분간 방치하여 응고 후 원심분리(3,000rpm, 30min)하여 얻은 혈청에 대해서 혈청자동분석기(BS-400, MINDRAY, China)를 이용하여 총단백(total protein), 총 빌리루빈(total bilirubin), 혈당(blood glucose), 혈액뇨소질소(BUN), creatinine, aspartate transaminase(AST), alanine transaminase(ALT), alkaline phosphatase(ALP), 총 콜레스테롤(total cholesterol)을 측정하였다. 전해질자동분석장치(EAE electrolyres, Medica, USA)를 이용하여 sodium(Na+), potassium(K+), chloride(Cl−)를 측정하였다.
장기중량 측정이 끝난 모든 장기를 10% 중성 포르말린액에 고정시켰고 2주간 충분한 고정을 거친 모든 장기조직은 파라핀 포매기(Shandon Inc, USA)에 포매하여 마이크로톰(Shadon Inc, USA)으로 5 µm절편을 만들어 hematoxylin & Eosin 염색을 하여 광학현미경(× 200)으로 관찰하였다.
전해질자동분석장치(EAE electrolyres, Medica, USA)를 이용하여 sodium(Na+), potassium(K+), chloride(Cl−)를 측정하였다.
시험물질의 제조는 항상 새롭게 시험물질을 제조하여 투여하였다. 투여는 주 5회(월~금) 일정한 시간에(15:00) 경구투여 하였다.
전해질자동분석장치(EAE electrolyres, Medica, USA)를 이용하여 sodium(Na+), potassium(K+), chloride(Cl−)를 측정하였다. 혈액학적 및 혈청 생화학적 검사는 ㈜네오딘벳랩에 의뢰하여 측정하였다.
대상 데이터
(주)신일바이오젠에서 제공한 백두옹과 청호를 시험에 사용하였다.
실험기간 중 사육실 환경조건은 실내온도 25 ± 5oC, 상대습도 40 ± 10%, 환기횟수 10~12회/hr, 조명시간 12시간(08:00 점등, 20:00 소등), 조도는 150~200Lux로 유지하였다. 랫드는 폴리카보네이트제 케이지에서 케이지당 5두씩 사육하였다. 동물의 개체식별은 문신법을 사용하였으며, tag 표시법에 의해서 사육상자를 구분하였다.
실험동물로는 8주령의 Sprague Dawley계통의 암컷 랫드 40마리를 (주)오리엔트바이오(Seong Nam, Gyeong gido, Korea)에서 구입하여 공주대학교 특수동물학과 실험 동물실에서 약 1주간 순화시키면서 일반증상을 관찰하여 건강한 동물 20마리를 실험에 사용하였다. 실험기간 중 사육실 환경조건은 실내온도 25 ± 5oC, 상대습도 40 ± 10%, 환기횟수 10~12회/hr, 조명시간 12시간(08:00 점등, 20:00 소등), 조도는 150~200Lux로 유지하였다.
데이터처리
4주간 반복 투여시험에서 얻은 측정치의 통계학적 분석은 통계처리 computer program인 SAS(Statistical Analysis System)를 이용하여 등분산 검정 후 one-way ANOVA에서 유의한 F값이 관찰되는 항목에 대하여 대조군과 각 투여군 사이에 유의수준 p < 0.05로 Dunnett’s t-test를 이용하여 비교하였다.
또한, 병리조직학적으로 관찰된 병변의 발생빈도는 χ2(Chi-square)검정을 하였다.
이론/모형
랫드는 폴리카보네이트제 케이지에서 케이지당 5두씩 사육하였다. 동물의 개체식별은 문신법을 사용하였으며, tag 표시법에 의해서 사육상자를 구분하였다. 사육 상자는 시험기간, 시험명, 시험 책임자명을 기재한 label을 첨부하였다.
성능/효과
4주간의 시험기간 동안 대조군을 포함한 모든 투여군에서 별다른 특이한 임상증상이 관찰되지 않았으며 실험도중 폐사한 개체도 없었다(Fig. 1).
청호 저용량군에서는 BUN, ALP에서 유의적인 차이를 보였으며, 중간용량군에서는 TProtein, glucose, BUN, CRE, ALP에서 유의적인 차이를 보였다. 고용량군에서는 T-Protein, glucose, BUN, CRE, ALP, NA에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다.
백두옹 저용량군에서는 Glucose, Cholesterol, BUN, Cl에서 유의적인 차이를 보였으며, 중간용량에서는 ALT, BUN, K, Cl에서 유의적인 차이를 보였다. 고용량군에서는 T-protein, Glucose, Cholesterol, BUN, Creatinine, Cl에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다. 청호 저용량군에서는 BUN, ALP에서 유의적인 차이를 보였으며, 중간용량군에서는 TProtein, glucose, BUN, CRE, ALP에서 유의적인 차이를 보였다.
따라서, 랫드를 이용한 백두옹과 청호의 반복 투여독성 시험 결과 전군에서 특이할만한 독성을 나타내지 않았으며 백두옹 고용량군에서 면역 활성이 유발된다고 사료된다.
부검시의 혈액학적 검사에 있어서 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있는 변화를 나타냈다. 백두옹 저용량군에서는 BA, MCHC, RDW에서 중간용량군에서는 NEU, LYM, MONO, RBC, HCT, RDW, PLT에서 유의적인 차이를 보였으며, 고용량군에서는 NEU, LYM, MONO, BA, MCHC, PLT에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다. 청호 저용량군에서는 WBC, EO, BA, RBC, Hb, HCT, MCV, MCH, MCHC에서 중간용량군에서는 MCV, MCH, RDW, PLT에서 유의적인 차이를 보였으며, 고용량군에서는 Hb, PLT에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다.
부검시의 혈청생화학적 검사에 있어서 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있는 변화를 나타냈다. 백두옹 저용량군에서는 Glucose, Cholesterol, BUN, Cl에서 유의적인 차이를 보였으며, 중간용량에서는 ALT, BUN, K, Cl에서 유의적인 차이를 보였다. 고용량군에서는 T-protein, Glucose, Cholesterol, BUN, Creatinine, Cl에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다.
시험결과에 있어서 모든 투여군 및 대조군에서 특이할 만한 임상증상과 체중변화 그리고 사료섭취량은 관찰되지 않았으며, 폐사 및 빈사 동물은 시험 전 기간을 통하여 관찰되지 않았다.
시험종료 후 부검하여 모든 생존동물의 장기를 육안 검사한 결과 모든 투여군에서 시험물질 투여에 기인한 이상 소견은 관찰되지 않았다(Table 3).
일부 혈청 생화학적인 수치에서 유의차가 인정되었으며 T-protein의 증가는 간세포의 손상이나 자가 면역성 질환을 의심할 수 있으며 Cholesterol의 증가는 고지혈증, 고혈압, 당뇨병, 간기능장애, 갑상선기능장애 유발이 의심되며 BUN, Creatinine의 증가는 신부전증, 신장염, 위장관출혈 유발되나 대조군과 비교시 수치에 유의적인 변화가 관찰되었으나 그 수치가 정상범위 안에 들어가기 때문에 이상이 없다고 사료된다(Table 2).
고용량군에서는 T-protein, Glucose, Cholesterol, BUN, Creatinine, Cl에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다. 청호 저용량군에서는 BUN, ALP에서 유의적인 차이를 보였으며, 중간용량군에서는 TProtein, glucose, BUN, CRE, ALP에서 유의적인 차이를 보였다. 고용량군에서는 T-Protein, glucose, BUN, CRE, ALP, NA에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다.
백두옹 저용량군에서는 BA, MCHC, RDW에서 중간용량군에서는 NEU, LYM, MONO, RBC, HCT, RDW, PLT에서 유의적인 차이를 보였으며, 고용량군에서는 NEU, LYM, MONO, BA, MCHC, PLT에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다. 청호 저용량군에서는 WBC, EO, BA, RBC, Hb, HCT, MCV, MCH, MCHC에서 중간용량군에서는 MCV, MCH, RDW, PLT에서 유의적인 차이를 보였으며, 고용량군에서는 Hb, PLT에서 대조군과 비교하였을 때 유의적인 차이를 보였다.
이러한 증가는 면역세포의 증가로 백두옹 고용량군은 면역 활성이 일어났다고 사료된다. 체중, 사료섭취량, 혈청생화학적 검사, 병리조직학적 변화는 대조군과 비교시 유의적인 변화가 나타나지 않았다. 따라서 백두옹과 청호는 생리대사에 무해하며 면역 활성이 증가된 것으로 사료된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
문헌에 쓰인 백두옹의 독성에 관련된 백두옹의 특징은?
또한 일부 서적에서는 부작용이 있으므로 쓰는 양에 주의해야 한다고 기재하고 있다19). 문헌에 의하면 신선한 백두옹을 추출한 물은 protoanemonin을 함유하고 있어서 피부 점막에 강렬한 자극작용이 있고 내복하여도 또한 중독을 일으킬 수 있으므로 사용상 주의해야 된다18). 청호는 국화과 Artemisia속으로 allelopathy효과를 나타내거나 다수의 terpenoid allelochemicals를 생산해 내는 것으로 알려져 있으며20), 쑥속(Artemisia L.
우리나라에 분포하고 있는 할미꽃 종류는?
국화과는 세계적으로 가장 많이 분포하고 있는 식물 중의 하나이고 본 연구에 사용한 시험 물질인 백두옹(白頭翁)은 미나리아제비과(ranunculaceae)에 속하는 다년생 초본인 할미꽃(Pulsatilla koreana)속 식물의 뿌리를 건조한 것으로10,11), 할미꽃은 동아시아와 유럽지역에 약 30여 종이 자생하고 있으며 우리나라에는 가는잎할미꽃(Pulsatilla cernula), 분홍할미꽃(P. davuraca), 산할미꽃(P. nivalis) 등이 분포하고 있다. 할미꽃의 잎은 뿌리에서 뭉쳐서 나며, 새의 털처럼 깊게 갈라지는데 꽃은 적자색으로 4~5월에 피고, 흰색의 긴 털이 붙어 있다12).
백두옹이란?
국화과는 세계적으로 가장 많이 분포하고 있는 식물 중의 하나이고 본 연구에 사용한 시험 물질인 백두옹(白頭翁)은 미나리아제비과(ranunculaceae)에 속하는 다년생 초본인 할미꽃(Pulsatilla koreana)속 식물의 뿌리를 건조한 것으로10,11), 할미꽃은 동아시아와 유럽지역에 약 30여 종이 자생하고 있으며 우리나라에는 가는잎할미꽃(Pulsatilla cernula), 분홍할미꽃(P. davuraca), 산할미꽃(P.
Ahn J, Grun IU and Mustapha A : Effects of plant extracts on microbial growth, color change, and lipid oxidation in cooked beef. Food Microbiol, 24, 7-14 (2007).
Flood MT, Kondo M : Toxicity evaluation of a beta-galactosidase preparation produced by Penicillium multicolor. Regul. Toxicol. Pharmacol. 40, 281-292 (2004).
Flood MT, Kondo M : Safety evaluation of lipase produced from Rhizopus oryzae: summary of toxicological data. Regul. Toxicol. Pharmacol. 37, 293-304 (2003).
Mei N, Arlt VM, Phillips DH, Heflich RH, Chen T : DNA adduxt formation and mutation induction by aristolochic acid in rat kidney and liver. Mutat. Res. 602, 83-91 (2006).
Park GH, Moon JH, MA SJ, Lee YH : Natural Products Organic Chemistry: Isolation and Characterization of 4- Hydroxy-3-methoxycinnamic Acid and 3,4-Dihydroxycinnamic Acid with Antimicrobial Activity from Root of Pulsatilla koreana, Agricultural Chemistry and Biotechnology, 41, 191-196 (1996).
Ye WC, BX Ou, NN Ji, SX Zaho, T Ye, MA Mckervey, P Stevenson : Patensin, a saponin from Pulsatilla patens var. multifida. Phytochemistry, 39, 937-939 (1995).
Kim JG, So EH, Lim SB, Jeong JH : The Effects of Pulsatilla koreana for Anti -Inflammatory and Cellular Activity of Periodontal Tissue. Korean Journal Phamarcogn, 31, 149-167 (2000).
Sofos JN, Beuchat LR, Davison PM, Johnson EA : Naturally occuring antimicrobials in foods. Toxicol. Pharmacol, 28, 71-76 (1998).
서부일, 정국영 : 알기 쉬운 본초학. 대구한의대학교 출판부, 대구, 103 (2007).
楊倉良: 毒藥本草. 北京: 中國中醫出版社, 343-346 (1993).
최옥자: 약초의 성분과 이용. 일월서각, 서울. 238-239 (1991).
Marco JA and O Babera : Natural products from the genus artemisia. stud. Nat. Prod. Chem. 7, 201-264 (1990).
Lodari C, Hattori K and Futsuhara Y : Morphological difference on leaf surface and pollen grains in genus Artemisia. Japanese Journal of Breeding, 39, 9-14 (1989).
Choi SR, You DH, Kim JY, Park CB, Ryu J, Kim DH and Eun JS : Antioxidant and antimicrobial activities of Artemisia capillaris Thunberg. Korean Journal of Medicinal Crop Science, 16, 112-117 (2008).
이기철, 권영한, 김명수, 박수현, 이지숙 : 개똥쑥 종자의 저장 특성. 한국자원 식물학회 학술심포지엄, 10, 28-28 (2010).
Sung JS, Lee JH, Lee JW, Bang KH, Yeo JH, Park CG, Park HK, Seong NS and Moon SH : Phylogenetic analysis of Artemisia spp. by morphological characteristics of reproductive organs in Korea. Korean Journal of Medicinal Crop Science, 16, 218-224 (2008).
Paniego NB and Giuletti AM : Artemisia annua L.: Dedifferentiated and differentiated cultures. Plant Cell Tissue and Organ Culture, 36, 163-168 (1994).
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.