Various types of tea are consumed as a popular beverage worldwide particularly in Asian countries such as Korea, China, and Japan. The purpose of this study was to investigate the mineral contents, antioxidant properties and anticancer activity of Yak-Sun tea that is prepared by six oriental medicin...
Various types of tea are consumed as a popular beverage worldwide particularly in Asian countries such as Korea, China, and Japan. The purpose of this study was to investigate the mineral contents, antioxidant properties and anticancer activity of Yak-Sun tea that is prepared by six oriental medicinal herbs. The results of the mineral contents were as follows; Ca, Mg, and Na contents were higher than those of green tea, whereas Fe, P, and K contents were lower than those of green tea. The total phenolics and flavonoid content of the Yak-Sun tea were higher than those of green and black teas. The $IC_{50}$ values of DPPH radical, hydroxyl radical, hydrogen peroxide radical scavenging of Yak-Sun tea were 0.78, 1.58, and 2.04 $mg/m{\ell}$, respectively, whereas the radical scavenging values of ${\alpha}$-tocopherol was 0.06, 0.05, and 0.09 $mg/m{\ell}$, respectively. When cancer cells were treated with Yak-Sun tea, the anticancer activity increased in a dose dependent manner. HCT116 colon cancer cell lines were dramatically increased, as compared to other cancer cell lines, such as MCF-7, H460, and MKN45 cell lines. The results of this study demonstrated that Yak-Sun tea could function as a tea to enhance health conditions for antioxidant and anticancer activity.
Various types of tea are consumed as a popular beverage worldwide particularly in Asian countries such as Korea, China, and Japan. The purpose of this study was to investigate the mineral contents, antioxidant properties and anticancer activity of Yak-Sun tea that is prepared by six oriental medicinal herbs. The results of the mineral contents were as follows; Ca, Mg, and Na contents were higher than those of green tea, whereas Fe, P, and K contents were lower than those of green tea. The total phenolics and flavonoid content of the Yak-Sun tea were higher than those of green and black teas. The $IC_{50}$ values of DPPH radical, hydroxyl radical, hydrogen peroxide radical scavenging of Yak-Sun tea were 0.78, 1.58, and 2.04 $mg/m{\ell}$, respectively, whereas the radical scavenging values of ${\alpha}$-tocopherol was 0.06, 0.05, and 0.09 $mg/m{\ell}$, respectively. When cancer cells were treated with Yak-Sun tea, the anticancer activity increased in a dose dependent manner. HCT116 colon cancer cell lines were dramatically increased, as compared to other cancer cell lines, such as MCF-7, H460, and MKN45 cell lines. The results of this study demonstrated that Yak-Sun tea could function as a tea to enhance health conditions for antioxidant and anticancer activity.
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문제 정의
본 연구는 한의학적으로 채내 열 및 열독, 노폐물을 제거하고 혈액순환을 증진시키며, 근육, 뼈 및 소화기계통에 효능이 있으리라고 기대되는 생약재를 선택 조합하여 개발한 약선차의 무기질함량, 항산화 활성 및 항암활성을 조사하였다. 약선차의 무기질 중 Ca, Fe, Mg, P, K 및 Na의 함량은 각각 2.
본 연구는 한의학적으로 체내 열 및 열독, 노페물을 제거하고 혈액순환을 증진시키며, 근육, 뼈 및 소화기계통에 효능이 있으리라고 기대되는 6개의 생약기재 생약재를 선택 조합하여(염태환 & 박성수 2005; 이재희 2001) 차의 형태로 조제한 약선차의 항산화 성분 및 항산화 활성을 측정하고, 또한 항암효과를 측정함으로 한약 생약재를 이용한 약선차의 기능적 효과를 알아보고자 하였다.
제안 방법
39 ㎖에 시료 10㎕를 넣고 200 ㎕의 10 mM H2O2 용액으로 라디칼 생성을 유도하여 37℃에서 4시간 반응하였다. 2.8% TCA로 반응을 정지시키고 0.8% TBA 용액을 첨가하여 10분간 끓여 발색한 뒤 반응액을 냉각하여 532 ㎚에서 흡광도를 측정하여 50% 감소시키는 IC50을 구하였다.
1 M) 100 ㎕를 넣어 37℃에서 5분간 반응시켰다. 그 후 1.25 mM ABTS 30 ㎕와 peroxidease (1 unit/㎖)을 첨가하여 37℃에서 10분간 반응시킨 후 405 ㎚에서 흡광도를 측정하여 50% 감소시키는 IC50을 구하였다.
시료 0.5 ㎖에 증류수 6.5 ㎖ 및 Folin-Ciocalteu's phenol reagent 0.5 ㎖를 첨가하고 3분간 실온에서 방치한 후 Na2CO3 포화용액 1 ㎖와 탈이온수 1.5 ㎖를 첨가한 다음 실온에서 1시간 방치한 후 720 ㎚에서 흡광도를 측정한다.
시료를 550℃에서 회화한 후 0.25 N HNO3을 넣고 GF/C 여과지로 여과한 다음 25 ㎖를 정용하여 분석조건은 Table 2와 같고, ICP-AES(Thermo Jarrell Ash, USA)에 주입하여 분석하였다.
약선차의 개발은 한약재 각각의 비율, 입자, 추출시간들을 예비실험인 관능평가를 통하여 가장 선호도가 높은 것을 선정하였다. 약선차 조제는 오가피(Acanthopanax sessiliflorus), 삼백초(Saururus chinensis), 어성초(Houttuynia cordata), 토복령(Smilax china Linne), 우슬(Achuranthes japonica)을 각각 15 g에 감초 5 g을 망에 넣고 물 4ℓ를 넣고 끓기 시작하면서 10분 동안 가열하였다. 회전진공농축기(Eyela N-1000, Tokyo, Japan)로 40℃에서 농축한 후 감압건조(Townson Mercer Ltd.
6가지 한약재는 한의학의 문헌과 한의사의 처방전을 근거로 소화기계통에 효능이 있는 약재로 선정하였다(염태환 & 박성수 2005; 이재희 2001). 약선차의 개발은 한약재 각각의 비율, 입자, 추출시간들을 예비실험인 관능평가를 통하여 가장 선호도가 높은 것을 선정하였다. 약선차 조제는 오가피(Acanthopanax sessiliflorus), 삼백초(Saururus chinensis), 어성초(Houttuynia cordata), 토복령(Smilax china Linne), 우슬(Achuranthes japonica)을 각각 15 g에 감초 5 g을 망에 넣고 물 4ℓ를 넣고 끓기 시작하면서 10분 동안 가열하였다.
5 ㎖를 첨가한 다음 실온에서 1시간 방치한 후 720 ㎚에서 흡광도를 측정한다. 총 폴리페놀 함량은 gallic acid를 사용하여 작성된 표준곡선으로부터 계산하였다.
2 ㎖를 첨가한 후 실온에서 30분 방치하여 520 ㎚에서 흡광도 감소치를 측정하였다. 흡광도를 측정한 후 작성된 검량선을 이용하여 50% 감소시키는 IC50(Inhibition concentration)을 구하여 각 추출물의 수율에 대한 농도로 표현하였다.
대상 데이터
6가지 한약재는 한의학의 문헌과 한의사의 처방전을 근거로 소화기계통에 효능이 있는 약재로 선정하였다(염태환 & 박성수 2005; 이재희 2001).
Cell line은 인체대장암세포(HCT-116), 폐암세포(H-460), 위암세포(MKN-45), 유방암세포(MCF-7) 및 간암세포(Hep-G2)를 사용하였으며, cancer cells는 적정배지를 이용하여 37℃, 5% CO2가 공급되는 incubator에서 배양하였다. 암세포주의 증식 정도를 MTT assay(Ishiyanma 등 1996)를 이용하여 측정하였다.
본 실험에 사용한 Folin-Ciocalteu reagent, gallic acid, DPPH(1,1-diphenyl -2-picrylhydrazyl), hydrogen peroxide, ABTS(2,2'-azino-bis-3- ethylbenzo-thiazoline-6-sulfonic acid), peroxidase, EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid), 2-deoxy ribose, TCA(trichloroacetic acid), TBA(tribromoacetic acid) 등은 Sigma-Aldrich(St. Louis, MO, USA) 제품을 사용하였으며, 모든 시약은 특급시약을 사용하였다.
본 실험에 사용한 한약재는 2009년에 생산된 한국산 오가피, 삼백초, 어성초, 토복령, 우슬 및 감초를 대구 남성로의 한약재 도매시장에 구입하여 실험에 사용하였다. 본 실험에 사용한 Folin-Ciocalteu reagent, gallic acid, DPPH(1,1-diphenyl -2-picrylhydrazyl), hydrogen peroxide, ABTS(2,2'-azino-bis-3- ethylbenzo-thiazoline-6-sulfonic acid), peroxidase, EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid), 2-deoxy ribose, TCA(trichloroacetic acid), TBA(tribromoacetic acid) 등은 Sigma-Aldrich(St.
데이터처리
그룹간의 유의적인 통계차를 분석하기 위하여 p<0.05의 유의수준으로 일원분산분석(one-way ANOVA)을 실시한 후, 각 군 간의 유의성 검증은 Duncan의 다중범위 검정법(Duncan's multiple range test)을 사용하여 분석하였다.
본 연구의 모든 결과는 통계분석용 프로그램인 SPSS(Statistical Package for the Social Science, version 12)를 이용하여 평균과 표준편차를 나타내었다. 그룹간의 유의적인 통계차를 분석하기 위하여 p<0.
이론/모형
각 시료의 총 플라보노이드 함량은 Shen 등(2009)의 방법을 이용하였다. 시료용액과 diethyleneglycol 10 ㎖를 혼합하고, 여기에 1 N-NaOH 용액 1 ㎖를 가하여 잘 혼합한 후 37℃에서 1시간 반응시킨 후 420 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.
시료의 폴리페놀 함량은 Folin-Denis법(Amerine & Ough 1980)에 의해 비색정량하였다.
가 공급되는 incubator에서 배양하였다. 암세포주의 증식 정도를 MTT assay(Ishiyanma 등 1996)를 이용하여 측정하였다. 즉, 암세포주를 96 well plate에 1×104 cells/well이 되게 180 ㎕ 분주하고, 24시간 배양 후 시료를 일정농도로 제조하여 20 ㎕ 첨가하여 37℃의 5% CO2 배양기에서 24시간 배양하였다.
약선차의 DPPH에 의한 전자공여능(electron donating ability, EDA)은 Brand-Willian 등(1995)의 방법에 따라 0.2 mM DPPH 용액 0.8 ㎖에 시료 0.2 ㎖를 첨가한 후 실온에서 30분 방치하여 520 ㎚에서 흡광도 감소치를 측정하였다. 흡광도를 측정한 후 작성된 검량선을 이용하여 50% 감소시키는 IC50(Inhibition concentration)을 구하여 각 추출물의 수율에 대한 농도로 표현하였다.
약선차의 hydrogen peroxide 소거활성은 Müuller의 방법(1995)에 따라 ABTS-peroxidase system을 이용하여 측정하였다.
약선차의 무기성분 함량은 AOAC 방법(1995)에 따라 측정하였다. 시료를 550℃에서 회화한 후 0.
성능/효과
04 ㎎/㎖이었다. 약선차에 대한 항암활성을 알아보기 위하여 대장암세포 (HCT-116), 폐암세포(H-460), 위암세포(MKN-45) 및 유방암 세포(MCF-7)에 처리하여 암 세포 성장억제 정도를 측정한 결과, 대장암 세포주의 1,000 ppm 농도에서 50% 암세포 성장억제를 보였고, 위암, 폐암, 유방암의 순으로 암세포에서는 억제효과를 나타내었다. 이와 같은 결과를 비추어 볼 때 약선차는 적정의 농도에서 다양한 생리활성을 갖고 있으며, 이를 극대화할 수 있는 조건을 찾아 茶로서 뿐만 아니라, 기능성 식품의 부재료로서의 가능성도 있을 것으로 사료되어진다.
DPPH의 환원력은 항산화 활성과 연관성이 높아 다양한 천연소재로부터 항산화 물질을 검색하는데 많이 이용되고 있다. 약선차의 DPPH radical 소거능을 50% 감소시키는 IC50을 산출한 결과, 0.78 ㎎/㎖의 전자공여능을 보였다. 녹차, 홍차보다는 약선차가 낮지만, 두충차, 생강차, 감잎차보다는 높은 전자공여능을 보였다(Choi 등 2003).
본 연구는 한의학적으로 채내 열 및 열독, 노폐물을 제거하고 혈액순환을 증진시키며, 근육, 뼈 및 소화기계통에 효능이 있으리라고 기대되는 생약재를 선택 조합하여 개발한 약선차의 무기질함량, 항산화 활성 및 항암활성을 조사하였다. 약선차의 무기질 중 Ca, Fe, Mg, P, K 및 Na의 함량은 각각 2.35, 32.8, 1.82, 1.03, 15.4 및 2.73 ㎎/236 ㎖이었으며, Ca과 Na의 함량이 green tea에 비하여 다소 높은 결과를 보였다. 약선차의 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량은 녹차와 홍차에 비하여 높은 수치를 나타났으며, 약선차의 DPPH, OH 및 H2O2 radicals 소거능의 IC50 각각 0.
73 ㎎/236 ㎖이었으며, Ca과 Na의 함량이 green tea에 비하여 다소 높은 결과를 보였다. 약선차의 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량은 녹차와 홍차에 비하여 높은 수치를 나타났으며, 약선차의 DPPH, OH 및 H2O2 radicals 소거능의 IC50 각각 0.78, 1.58 및 2.04 ㎎/㎖이었다. 약선차에 대한 항암활성을 알아보기 위하여 대장암세포 (HCT-116), 폐암세포(H-460), 위암세포(MKN-45) 및 유방암 세포(MCF-7)에 처리하여 암 세포 성장억제 정도를 측정한 결과, 대장암 세포주의 1,000 ppm 농도에서 50% 암세포 성장억제를 보였고, 위암, 폐암, 유방암의 순으로 암세포에서는 억제효과를 나타내었다.
약선차의 항암효과는 1,000 ppm 농도에서 대장암, 위암, 폐암, 유방암의 순으로 유의적 차이를 나타내었다(P<0.05).
99%의 소거능을 보였다. 이상의 결과를 종합해보면 약선차의 항산화 활성이 나타나는 것은 식물계에 존재하는 페놀성과 플라보노이드 물질을 함유하고 있기 때문이라고 사료된다. Masahiro 등(1970)은 Magnolia cortex에서 페놀화합물과 관련된 magnolol, honokiol의 높은 항산화활성을 확인하였으며, 이런 성분들이 O2 scavenger나 hydroxyl radical scavenger 작용을 하기 때문이라고 보고하였다.
85 ㎎/100 ㎖의 플라보노이드 함량에 비해 약선차의 플라보노이드 함량이 높은 것으로 나타났다. 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량이 다소 차이가 나는 것은 실험방법, 추출시간 및 방법, 재료 등 여러 요인들이 각기 다르므로 본 실험결과와의 다소 차이는 나타날 수 있으나, 약선차의 항산화성물질은 한약재의 대부분이 폴리페놀화합물을 함유하고 있는 식물에 기인하는 것으로 사료된다.
후속연구
녹차(Hwang 등 2007)의 경우, 전립선암 세포주에서 33%, 비단풀(An 등 2006)의 경우 대장암 세포주에서 40%의 암세포 성장억제를 보였으며, Do 등(2005)의 연구에 의하면 간암세포의 경우 정향, 지유, 호장근에서 각각 69, 50, 45% 암세포 성장억제를 나타내었다. 이상의 결과를 종합해 보면, 본 실험에 사용된 약선차는 항산화 효과 및 항암활성을 보이므로 기능성을 함유한 차로서의 제품 개발에 가능성이 있을 것으로 사료된다.
약선차에 대한 항암활성을 알아보기 위하여 대장암세포 (HCT-116), 폐암세포(H-460), 위암세포(MKN-45) 및 유방암 세포(MCF-7)에 처리하여 암 세포 성장억제 정도를 측정한 결과, 대장암 세포주의 1,000 ppm 농도에서 50% 암세포 성장억제를 보였고, 위암, 폐암, 유방암의 순으로 암세포에서는 억제효과를 나타내었다. 이와 같은 결과를 비추어 볼 때 약선차는 적정의 농도에서 다양한 생리활성을 갖고 있으며, 이를 극대화할 수 있는 조건을 찾아 茶로서 뿐만 아니라, 기능성 식품의 부재료로서의 가능성도 있을 것으로 사료되어진다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
한의학이란 무엇인가?
한의학은 인체의 기능을 종합적으로 보강하여 질병 예방 및 치료하는 동양의학으로 부분적인 메카니즘을 조절하는 서양의학과는 달리 인체의 기능을 정상화시켜 몸의 건강을 유지하는데 더 집중하는 중요한 전통의학이다(박 & 이 2000). 예로부터 민간요법 등을 통하여 질병 치료의 목적으로 널리 이용하는 한약재는 천연재료로 경험적인 선택 및 이용을 통해 인체에 대한 안전성은 대체로 검증된 것이라고 할 수 있으며(염태환 & 박성수 2005; 이재희 2001), 또한 한약재에 함유되어 있는 생리활성 성분에 대한 다양한 연구가 보고되고 있다 (Joo 등 2002; Kim 등 2003; Yoo 등 2005).
차가 중요한 기호음료로 발전해 온 이유는 무엇인가?
차(茶)는 전 세계의 음료 중에서 가장 오래된 역사를 가지고 있으며, 커피, 코코아와 함께 3대 기호음료로서 160여개 나라에서 널리 음용되고 있다(Lee 등 2004). 차가 중요한 기호음료로 발전해온 가장 중요한 이유는 대중적인 기호성을 가지고 있을 뿐만 아니라 생체리듬 조절, 면역력 증가, 질병의 예방이나 회복, 노화 억제 등 신체조절기능을 갖는 기능성 식품으로서 중요성이 강조되고 있기 때문이라고 할 수 있다 (Choi 등 2003; Lee 등 2004). 따라서 전 세계적으로 녹차를 비롯한 차의 소비가 증가하고 있으며, 우리나라에서도 생강, 감잎, 두충, 오미자, 산수유, 두충, 구기자, 신선초 등 다양한 천연 한약재를 주 원료로 한 다류 제품들이 많이 이용되고 있다(Choi 등 2003; Yoo 등 2005).
오가피의 생리학적 효능은 무엇인가?
오가피(五加皮, Acanthopanax sessiliflorus)는 맛이 맵고 쓰며, 성질이 따뜻하고 주로 뿌리와 줄기를 약재로 사용하였고 강장, 신경통, 식욕 부진, 고혈압의 치료와 예방을 위해 오래전부터 사용되어왔다(Wang 등 1986). 생리학적 효능은 항스트레스, 항피로, 항히스타민, 항당뇨, 항산화, 항염증 및 콜레스테롤 저해 효과 등이 연구 보고되어 있다(Choi 등 2011b). 삼백초(三白草, Saururus chinensis)는 맛이 쓰고 매우며, 성질은 차갑고, 수종과 각기를 치료하고, 대소변을 잘 나오게 하는 것은 물론, 가래를 삭이고 막힌 것을 뚫어 주며 뱃속에 있는 딱딱한 덩어리를 풀어 주고, 종기나 종창을 치료하는데 쓰인다(박종희 & 이정규 2000).
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