[논문]독활(Aralia cordata Thunb) 추출물의 Nitric Oxide Synthesis 저해효과

강창호; 구자룡; 소재성

doi:10.9721/kjfst.2012.44.5.621

독활(Aralia cordata Thunb) 추출물의 Nitric Oxide Synthesis 저해효과
Inhibitory Effects of Aralia cordata Thunb Extracts on Nitric Oxide Synthesis in RAW 264.7 Macrophage Cells 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.44 no.5, 2012년, pp.621 - 627

강창호 (인하대학교 생물공학과) , 구자룡 (인하대학교 생물공학과) , 소재성 (인하대학교 생물공학과)

초록
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항염증효과가 있는 기능성 식품 및 의약품 소재의 개발을 위하여 천연 식물 자원으로부터 NOS 저해 활성 물질을 분리하고 그 이화학적인 특성에 대해 알아보기 위해 항염증 효과가 있다고 알려져 있는 58가지의 생약재에서 NO 저해효과를 확인해 본 결과 독활에서 80% 이상의 높은 저해활성을 가진 것을 알 수 있었다. 독활 생약재 에탄올 추출물에서 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, water 순으로 용매 분획을 실시한 후 NO 생성 저해 활성을 측정한 결과, chloroform 분획에서 가장 높은 저해 활성을 보여 최종 분리 시료로 선정하였으며, open column chromatography(silica gel, $C_{18}$)를 이용하여 최종적인 활성 물질(AC8-MV)을 분리할 수 있었다. 분리한 활성 물질(AC8-MV)의 순도를 확인하기 위하여 analytical HPLC와 LC-ESI-mass spectrum를 분석한 결과 순수한 단일 물질로 분리 되었음을 확인할 수 있었으며, 차후 nuclear magnetic resonance spectrometer(NMR)를 통해 구조분석을 실시할 것이다. 또한 AC8-MV와 NO저해효과가 유의적으로 차이가 없던 AC8-MVI 활성물질에 대한 순도 및 구조분석을 연구할 것이다. 이를 통해 독활로부터 분리한 활성물질(AC8-MV)이 NO inhibitor 로서 일반 항염증 약물 및 기능성 식품 소재로 실용화될 수 있는 가능성을 시사하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

Assessment was made of the effects of Aralia cordata Thunb (DH) on the cell proliferation, inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA gene expression and nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 macrophage cells. For the screening of anti-inflammatory activities, ethanolic extracts of 55 species of traditional herbal medicines were examined for inhibitory effects, and it was confirmed that DH possessed inhibitory effects on NO production. As a result, DH significantly decreased the production of NO and iNOS gene expression at a concentration of $250{\mu}g/mL$. The chloroformsoluble fractionates have the strongest No synthesis inhibitory effect. It is presumed that the inhibition of NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells by DH components occurred via the modulation of iNOS and DH, and that the active compound from DH may be useful for therapeutic management of inflammatory-associate diseases.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

독활 Chloroform 분획물의 NO 합성 저해효과가 유전자의 조절에 의한 것인지 확인해 보기 위하여 RT-PCR을 통해 확인해 보았다. iNOS는 평소에는 세포 내에 존재하지 않으나 일단 유도되면 장시간 동안 다량의 NO를 생성하며, 생성된 NO는 병리적인 혈관확장, 세포독성, 조직손상 등과 같은 생체에 유해한 작용을 나타낸다.
본 연구는 항염증효과를 나타내는 기능성 식품 및 의약품 소재 개발을 위한 기초 연구로서 천연 식물 자원으로부터 NO 생성 억제 활성 및 iNOS 발현의 억제효과를 규명하기 위해 문헌 조사를 통해 항 염증 효과가 있는 55여 가지의 한약재를 선택한 후 NO에 대한 저해 활성을 조사하였으며, 가장 유용할 만한 효과를 보인 독활을 선정하여 분리한 후 최종적으로 iNOS 발현 억제효과와 세포독성을 확인하였다.
또한 AC8-MV와 NO저해효과가 유의적으로 차이가 없던 AC8-MVI 활성물질에 대한 순도 및 구조분석을 연구할 것이다. 이를 통해 독활로부터 분리한 활성물질(AC8- MV)이 NO inhibitor 로서 일반 항염증 약물 및 기능성 식품 소재로 실용화될 수 있는 가능성을 시사하였다.

제안 방법

Ac와 As는 각각 대조군과 실험군의 흡광도를 나타내며, 시료 대신 0.1 M acetate buffer(pH 3.5, 5% DMSO)를 첨가하여 처리한 것을 대조군으로 하였다(13-15).
Hyaluronidase(HAse)저해 활성은 Morgan-Elson 법(11)을 변형하여 다음과 같이 측정하였다. Hyaluronic Acid(HA)가 HAse에 의해 분해되어 생성되는 N-acetylglucosamine의 양을 DMAB 시약으로 발색시킨 후 microplate reader를 이용하여 O.D.값을 측정(595 nm)하였고, control에 대한 저해율를 구하였다. 우선 Microplate에 0.
Hyaluronidase(HAse)저해 활성은 Morgan-Elson 법(11)을 변형하여 다음과 같이 측정하였다. Hyaluronic Acid(HA)가 HAse에 의해 분해되어 생성되는 N-acetylglucosamine의 양을 DMAB 시약으로 발색시킨 후 microplate reader를 이용하여 O.
NO 저해 활성에 대해 높은 저해 효과를 보인 독활 에탄올 추출물의 chloroform 분획(AC-C)에 대하여 분리를 실시하였다(Fig. 1). Silica gel이 충진된 column(30×600 mm)에 시료(AC-C)를 loading하고 chloroform-methanol을 이동상으로 하여 methanol의 농도를 높여가며(chloroform-methanol=10:0, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 4:6, 5:5, methanol) 용출하여 용출액의 극성도에 따라 19개의 획분으로 분획한 다음 저해 활성을 측정하였다.
시료의 NO 생성 저해 활성은 Nitrite assay를 사용하여 측정하였다(12). NO합성의 indicator로 사용되는 NO₂ 농도는 Griess reagent(1% Sulfonic acid, 0.1% N-1-napthylethylene-diamine dihydrochloride, 2.5% phosphoric acid)을 이용하여 배양배지에서 측정하였다. RAW264.
RT-PCR을 사용하여 독활 chloroform 추출물의 농도별 mRNA 상에서의 발현 정도를 확인하였다. 다음과 같은 조건으로 RT-PCR을 실시하였다.
cDNA 합성 45℃, 30분 initial denaturation 94℃,5분 denaturation 94℃, 5분 annealing 50-55℃, 1분 elongation 72℃, 2분을 25 cycles한 다음, final elongation step을 72℃에서 5분간 수행하였다. RT-PCR의 생성물은 1% agarose gel을 사용하여 100℃에서 30분간 전기영동하여 UV하에서 관찰하였다. 각 primer의 염기서열은 Table 1에 나타내었다(16-18).
Silica gel이 충진된 column(30×600 mm)에 시료(AC-C)를 loading하고 chloroform-methanol을 이동상으로 하여 methanol의 농도를 높여가며(chloroform-methanol=10:0, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 4:6, 5:5, methanol) 용출하여 용출액의 극성도에 따라 19개의 획분으로 분획한 다음 저해 활성을 측정하였다.
건조 및 마쇄한 시료 50 g에 에탄올(95% EtOH, 시약용 1급)을 가하여 실온에서 24시간 동안 방치하고 여과하여, 다시 잔사에 에탄올을 가하여 침지한 후 여과하는 과정을 3회 반복하여 실행하였다. 얻은 여액은 45℃ 수욕상에서 진공회전 농축기(EYELA Ltd.
독활 분말 15 kg에 에탄올을 가하여 실온에서 24시간 방치 후 여과하여, 다시 잔사에 에탄올을 가하여 침지한 후 여과하는 과정을 3회 반복 실행하여 얻은 여액을 감압 농축하여 추출물(AC)로 조제하였다. 농축한 추출물(AC)을 증류수에 현탁시킨 후 hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol 순으로 분획하여 감압 농축하였다.
Shin(19)의 연구결과에서도 독활을 전탕 엑스분말로 NO 억제 효과를 관찰한 결과, 100 µg/mL 이상의 농도에서 NO 생산량이 유의하게 저하되는 것을 확인하였다. 높은 활성을 나타낸 독활에 대해서는 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, water 순으로 용매 분획하여 NO 저해 활성을 조사하였다(Fig. 2). 그 결과, 250 µg/mL의 농도까지 Chloroform 분획물에서 다른 분획물보다 높은 활성을 보였다(p<0.
독활 분말 15 kg에 에탄올을 가하여 실온에서 24시간 방치 후 여과하여, 다시 잔사에 에탄올을 가하여 침지한 후 여과하는 과정을 3회 반복 실행하여 얻은 여액을 감압 농축하여 추출물(AC)로 조제하였다. 농축한 추출물(AC)을 증류수에 현탁시킨 후 hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol 순으로 분획하여 감압 농축하였다.
, Kyoto, Japan)로 감압 농축한 후 건조하여 냉장 보관하며 에탄올 추출물 시료로 사용하였다. 또한 에탄올 추출물에서 70% 이상의 저해 활성을 나타낸 독활에 대해서는 먼저 증류수로 현탁시킨 후 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, water 순으로 용매 분획을 실시하였다.
에탄올 추출물은 중량을 측정하기 위하여 동결 건조 후 각 시료의 수율을 구하였다(Table 2). 강활, 초용담, 금은화 등은 각각 43, 44, 58%로 가장 높았으며, 산수유, 산사, 향부자, 여정자, 황금, 희첨 등도 20% 이상의 높은 수율을 보였다.
최대 저해활성을 나타낸 획분(AC8-M)을 농축하여 C18(35-75 µ)이 충진된 column(15×300 mm)에 시료를 loading하고 methanol-water를 이동상으로 하여 methanol의 농도를 높여가며(methanol-water=75:25, 85:15, 95:5, MeOH) 용출하여, 7개의 획분으로 분획한 다음 저해 활성을 측정하였다(Fig. 1).
최종 시료인 독활 chloroform(AC-C)을 silica gel 60 column chromatography을 이용하여 chloroform-methanol을 이동상으로 하여 methanol의 농도를 높여가며(chloroform-methanol=10:0, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 4:6, 5:5, methanol) 용출하였다. 용출액의 극성도에 따라 19개의 획분으로 분획하여 저해 활성을 측정한 결과, 80%의 높은 활성을 나타내는 획분(AC8)을 확인하였으며 계속적인 분리를 진행하였다(Fig.
활성물질은 C18 column(Hypersil 5 µ ODS, 4.6×250 mm, HP, Palo Alto, CA, USA)을 사용하여 순도를 확인하였다.
활성물질의 분리/분취는 JAIGEL GS-310 column(20φ×500 mm)이 장착된 Recycling preparative HPLC(JAI LC908, Tokyo, Japan)를 사용하여 분석하였고, 단일성분은 Hypersil 5 µ ODS column(reverse phase type, 4.6ⅹ250 mm)이 장착된 HPLC(Younglin, Anyang, Gyeonggi, Korea)와 LC-ESI-mass spectrum (varian 1200L Quadruple LC/MS system, Palo Alto, CA, USA)을 사용하여 분석하였다.
효소반응을 중지 시키기 위해 0.4 N NaOH 6 µL 및 0.4 M potassium tetraborate 6 µL를 반응 혼합물에 첨가하여 3분 동안 수욕상에서 가열하였다.

대상 데이터

500 µg/mL의 농도에서는 세포 생존력이 ethyl acetate 분획물이 chloroform 분획물에 비해 현저하게 저하되어 최종 분리 시료로 chloroform 분획물을 선정하였다.
Macrophage RAW264.7 세포주를 한국세포주은행(KCTC)에서 구입하여 사용하였다. 세포는 10% FBS, penicillin-streptomycin을 첨가한 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO₂에서 배양하였다.
본 실험에 사용한 55종의 한약재는 서울경동시장 약재도매 상가에서 원산지를 확인한 후 구입하였으며, 모든 원료는 건조 및 마쇄하여 사용하였다. 사용된 시약은 Sulfonic acid, phosphoric acid, N-1-napthylethylene-diamine dihydrochloride, Lipopolysaccharides(LPS), N-monomethyl-L-arginine(L-NMMA), 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT), Fetal bovine serum(FBS), penicillin-streptomycin, Trizol reagent, Hyaluronic acid(Sodium salt, from human umbilical cord), Hyaluronidase (Type I-S, from bovine testes), p-dimethylamino-benzaldehyde, potassium tetraborate, dimethyl sulfoxide(DMSO) 등은 Sigma사(St.
사용된 시약은 Sulfonic acid, phosphoric acid, N-1-napthylethylene-diamine dihydrochloride, Lipopolysaccharides(LPS), N-monomethyl-L-arginine(L-NMMA), 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT), Fetal bovine serum(FBS), penicillin-streptomycin, Trizol reagent, Hyaluronic acid(Sodium salt, from human umbilical cord), Hyaluronidase (Type I-S, from bovine testes), p-dimethylamino-benzaldehyde, potassium tetraborate, dimethyl sulfoxide(DMSO) 등은 Sigma사(St. Louis, MO, USA) 제품을, Dulbeco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)은 Gibco사(Rockville, MD, USA) 제품을, deuterated methanol(CD3OD)는 CIL사(Andover, MA, USA), potassium bromide(KBr)은 Aldrich사(Milan, Italy), silica gel-60은 Merk사 (Darmstadt, Germany)제품을, C18은 Alltech사(Deerfield, IL, USA) 제품을 구입하여 사용하였고, Maxim RT-PCR kit는 intron사(Seongnam, Korea) 제품을, 그 외의 시약과 용매는 일급 또는 특급을 사용하였다.
얻은 여액은 45℃ 수욕상에서 진공회전 농축기(EYELA Ltd., Kyoto, Japan)로 감압 농축한 후 건조하여 냉장 보관하며 에탄올 추출물 시료로 사용하였다.

데이터처리

모든 실험은 3반복으로 측정하여 측정치를 평균값±표준편차로 나타내었으며, 실험결과의 통계적 유의성은 Student’s t-test에 의해 시료간의 유의적 차이(p<0.05)를 검정하였다.

이론/모형

세포 생존성과 세포독성은 MTT assay(10)를 이용하여 96 well plate에서 수행하였다. MTT 용액을 20 µL를 첨가하여 4시간 동안 반응시킨 후 세포에 DMSO 200 µL를 넣어 pipeting해준 다음 흡광도는 546 nm에서 microplate reader로 측정하였다.
시료의 NO 생성 저해 활성은 Nitrite assay를 사용하여 측정하였다(12). NO합성의 indicator로 사용되는 NO₂ 농도는 Griess reagent(1% Sulfonic acid, 0.

성능/효과

55종의 한약재 에탄올 추출물에 대하여 NO 생성 억제 활성을 검색한 결과 독활(DH), 길경(GG), 구절초(CJC) 등이 80% 이상의 높은 활성을 나타내었다(Table 2). Shin(19)의 연구결과에서도 독활을 전탕 엑스분말로 NO 억제 효과를 관찰한 결과, 100 µg/mL 이상의 농도에서 NO 생산량이 유의하게 저하되는 것을 확인하였다.
에탄올 추출물은 중량을 측정하기 위하여 동결 건조 후 각 시료의 수율을 구하였다(Table 2). 강활, 초용담, 금은화 등은 각각 43, 44, 58%로 가장 높았으며, 산수유, 산사, 향부자, 여정자, 황금, 희첨 등도 20% 이상의 높은 수율을 보였다. 독활은 6.
그 결과, 250 µg/mL의 농도까지 Chloroform 분획물에서 다른 분획물보다 높은 활성을 보였다(p<0.05).
항염증효과가 있는 기능성 식품 및 의약품 소재의 개발을 위하여 천연 식물 자원으로부터 NOS 저해 활성 물질을 분리하고 그 이화학적인 특성에 대해 알아보기 위해 항염증 효과가 있다고 알려져 있는 58가지의 생약재에서 NO 저해효과를 확인해 본 결과 독활에서 80% 이상의 높은 저해활성을 가진 것을 알 수 있었다. 독활 생약재 에탄올 추출물에서 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, water 순으로 용매 분획을 실시한 후 NO 생성 저해 활성을 측정한 결과, chloroform 분획에서 가장 높은 저해 활성을 보여 최종 분리 시료로 선정하였으며, open column chromatography(silica gel, C₁₈)를 이용하여 최종적인 활성 물질(AC8- MV)을 분리할 수 있었다. 분리한 활성 물질(AC8-MV)의 순도를 확인하기 위하여 analytical HPLC와 LC-ESI-mass spectrum를 분석한 결과 순수한 단일 물질로 분리 되었음을 확인할 수 있었으며, 차후 nuclear magnetic resonance spectrometer(NMR)를 통해 구조분석을 실시할 것이다.
류머티스 관절염 등의 염증을 일으키게 하는 효소인 hyalu ronidase의 저해에 의한 항염증 효과를 추정할 수 있는 hyaluronidase 저해 실험을 ethanol과 chloroform 분획에 대해서 측정하였으며(Fig. 3), Chloroform 분획물에서 Ethanol 분획물보다 모든 농도에서 더 높은 저해 활성(p<0.05)을 보인 것을 확인할 수 있었다.
분리 시료로 선정된 독활 15 kg을 에탄올을 이용하여 대량 추출한 결과 960 g의 추출물을 얻었으며, 최종 분리 시료인 chloroform 분획물을 얻기 위하여 n-hexane, chloroform과 ethyl acetate로 용매 분획한 결과 각각 723.84, 142.08, 24.96 g의 추출물을, n-butanol과 water 분획물은 각각 36.48, 32.64 g을 얻을 수 있었으며, 142.08 g의 chloroform 분획물을 최종 활성물질 검색 시료로 사용하였다.
따라서 COX-2에 의한 prostagladin의 합성은 염증반응을 매개하는 것으로 여겨진다. 염증발현 유도물질인 LPS 처리군과 억제효과가 우수한 L-NMMA와의 비교해 보았을 때 iNOS와 COX2 gene의 발현이 억제되는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 4).
최종 시료인 독활 chloroform(AC-C)을 silica gel 60 column chromatography을 이용하여 chloroform-methanol을 이동상으로 하여 methanol의 농도를 높여가며(chloroform-methanol=10:0, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 4:6, 5:5, methanol) 용출하였다. 용출액의 극성도에 따라 19개의 획분으로 분획하여 저해 활성을 측정한 결과, 80%의 높은 활성을 나타내는 획분(AC8)을 확인하였으며 계속적인 분리를 진행하였다(Fig. 5). 활성분획(AC8)을 chloroform과 methanol을 이용하여 분리한 다음 methanol에 의해 녹은 fraction을 C₁₈ column chromatography를 이용해 water-methanol을 이동상으로 하여 methanol의 농도를 높여가며(water-methanol=75:25, 85:15, 95:5, MeOH)용출하여, 7개의 분획을 얻은 후 각각 농축하여 활성을 측정한 결과, 모든 분획에서 cytotoxicity를 나타내지 않았으며, 5번째 분획(AC8-MⅤ)에서 80% 이상의 높은 활성을 나타내었다(Fig.
6). 최종 분리한 AC8-MⅤ의 순도 확인을 위해 95% methanol isocratic 조건으로 analytical HPLC를 실시한 결과 단일 peak를 보였으며, 단일물질인지 확인해 보기 위해 활성 물질(AC8- MV)의 LC-ESI-mass spectrum을 통해 분자량을 측정하였으며, 순수한 단일물질로 분리되었음을 확인할 수 있었다(Fig. 7).
항염증효과가 있는 기능성 식품 및 의약품 소재의 개발을 위하여 천연 식물 자원으로부터 NOS 저해 활성 물질을 분리하고 그 이화학적인 특성에 대해 알아보기 위해 항염증 효과가 있다고 알려져 있는 58가지의 생약재에서 NO 저해효과를 확인해 본 결과 독활에서 80% 이상의 높은 저해활성을 가진 것을 알 수 있었다. 독활 생약재 에탄올 추출물에서 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, water 순으로 용매 분획을 실시한 후 NO 생성 저해 활성을 측정한 결과, chloroform 분획에서 가장 높은 저해 활성을 보여 최종 분리 시료로 선정하였으며, open column chromatography(silica gel, C₁₈)를 이용하여 최종적인 활성 물질(AC8- MV)을 분리할 수 있었다.
5). 활성분획(AC8)을 chloroform과 methanol을 이용하여 분리한 다음 methanol에 의해 녹은 fraction을 C₁₈ column chromatography를 이용해 water-methanol을 이동상으로 하여 methanol의 농도를 높여가며(water-methanol=75:25, 85:15, 95:5, MeOH)용출하여, 7개의 분획을 얻은 후 각각 농축하여 활성을 측정한 결과, 모든 분획에서 cytotoxicity를 나타내지 않았으며, 5번째 분획(AC8-MⅤ)에서 80% 이상의 높은 활성을 나타내었다(Fig. 6). 최종 분리한 AC8-MⅤ의 순도 확인을 위해 95% methanol isocratic 조건으로 analytical HPLC를 실시한 결과 단일 peak를 보였으며, 단일물질인지 확인해 보기 위해 활성 물질(AC8- MV)의 LC-ESI-mass spectrum을 통해 분자량을 측정하였으며, 순수한 단일물질로 분리되었음을 확인할 수 있었다(Fig.

후속연구

분리한 활성 물질(AC8-MV)의 순도를 확인하기 위하여 analytical HPLC와 LC-ESI-mass spectrum를 분석한 결과 순수한 단일 물질로 분리 되었음을 확인할 수 있었으며, 차후 nuclear magnetic resonance spectrometer(NMR)를 통해 구조분석을 실시할 것이다. 또한 AC8-MV와 NO저해효과가 유의적으로 차이가 없던 AC8-MVI 활성물질에 대한 순도 및 구조분석을 연구할 것이다. 이를 통해 독활로부터 분리한 활성물질(AC8- MV)이 NO inhibitor 로서 일반 항염증 약물 및 기능성 식품 소재로 실용화될 수 있는 가능성을 시사하였다.
독활 생약재 에탄올 추출물에서 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, water 순으로 용매 분획을 실시한 후 NO 생성 저해 활성을 측정한 결과, chloroform 분획에서 가장 높은 저해 활성을 보여 최종 분리 시료로 선정하였으며, open column chromatography(silica gel, C₁₈)를 이용하여 최종적인 활성 물질(AC8- MV)을 분리할 수 있었다. 분리한 활성 물질(AC8-MV)의 순도를 확인하기 위하여 analytical HPLC와 LC-ESI-mass spectrum를 분석한 결과 순수한 단일 물질로 분리 되었음을 확인할 수 있었으며, 차후 nuclear magnetic resonance spectrometer(NMR)를 통해 구조분석을 실시할 것이다. 또한 AC8-MV와 NO저해효과가 유의적으로 차이가 없던 AC8-MVI 활성물질에 대한 순도 및 구조분석을 연구할 것이다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	염증반응은 무엇인가?	염증반응(inflammation)은 외부의 물리적인 상해 또는 미생물의 체내 감염으로부터 신체를 보호하기 위한 비특이적인 방어작용이다. 이러한 염증반응은 체내의 면역기능을 강화시키고 보호하는 기능을 하지만 불필요한 염증반응이 지속적으로 진행될 경우 세포나 조직의 손상이 진행되고 그로 인해 염증성 질병이 진행되기 때문에 과도한 염증반응을 억제시키는 기능 또한 매우 중요하다(1).
	독활은 무엇인가?	독활(Aralia cordata Thunb)은 두릅나무과의 다년생 초본으로 멧두릅의 뿌리로 가을에 뿌리를 캐서 씻어 건조한 것이다. 10세기 이전에는 독활의 별명을 강활이라 하였고, 강활과 독활의 기원식물이 혼동되어 사실상 같은 약재를 사용한 것으로 알려져 있으나 10세기 이후에는 강활과 독활을 구분하여 사용하였다.
	Nitric oxide는 어떤 매개체로 작용하며 어떤 역할을 하는가?	NO는 생체 내에서 Nitric Oxide synthase(NOS) 라는 효소의 촉매 작용을 통해 L-arginine으로부터 생성되는 반응성이 강한 자유 라디칼이다(2). NO는 생리적인 현상인 혈압조절과 신경전달 매개체로 작용하며, 혈액응고 면역기능 등의 역할을 하는 것으로 알려져 있다.

참고문헌 (23)

Stuehr DJ, Cho HJ, Kwon NS, Weise M, Nathan CF. Purification and characterization of the cytokine-induced macrophage nitric oxide synthase: an FAD- and FMN-containing flavoprotein. P. Natl. Acad. Sci. USA 88: 7773-7777 (1991)

상세보기
Lee HJ, Kim NY, Jang MK, Son HJ, Sohn DH, Lee SH, Ryu JH. A sesquiterpene, dehydrocostus lactone, inhibits the expression of inducible nitric oxide sysnthase and TNF-alpha in LPS-activated macrophage. Planta Med. 65: 104-108 (1999)

상세보기
Busse R, Mlsch A. Induction of nitric oxide synthase by cytokines in vascular smooth muscle cells. FEBS Lett. 275: 87-90 (1990)

상세보기
Bravo MJ, Nakayama K. The role of attention in different visualsearch tasks. Percept. Psychophys. 51: 465-472 (1992)

상세보기
Werner-Felmayer G, Werner ER, Fuchs D, Hausen A, Reibnegger G, Wachter H. Tetrahydrobiopterin-dependent formation of nitrite and nitrate in murine fibroblasts. J. Exp. Med. 172: 1599-1607 (1990)

상세보기
Lancaster JR, Hibbs JB. EPR demonstration of iron-nitrosyl complex formation by cytotoxic activated macrophages. P. Natl. Acad. Sci. USA 87: 1223-1227 (1990)

상세보기
Stuehr DJ, Marletta MA. Mammalian nitrate biosynthesis: Mouse macrophages produce nitrite and nitrate in response to Escherichia coli lipopolysaccharide. P. Natl. Acad. Sci. USA 82: 7738- 7742 (1985)

상세보기
DeRojas-Walker T, Tamir S, Ji H, Wishnok JS, Tannenbaum SR. Nitric oxide induces oxidative damage in addition to deamination in macrophage DNA. Chem. Res. Toxicol. 8: 473-477 (1995)

상세보기
Szab C, Zingarelli B, O'Connor M, Salzman AL. DNA strand breakage, activation of poly (ADP-ribose) synthetase, and cellular energy depletion are involved in the cytotoxicity of macrophages and smooth muscle cells exposed to peroxynitrite. P. Natl. Acad. Sci. USA 93: 1753-1758 (1996)

상세보기
Weisz A, Cicatiello I, Esumi H. Regulation of the mouse inducible- type nitric oxide synthase gene promoter by interferon, bacterial lipopolysaccharide, and $N^{G}$ -monomethyl-L-arginine. J. Biol. Chem. 316: 209-215 (1996)
Padwad Y, Ganju L, Jain M, Chanda S, Karan D, Banerjee PK, Sawhney RC. Effect of leaf extract of seabuckthorn on lipopolysaccharide induced inflammatory response in murine macrophages. Int. Immunopharmacol. 6: 46-52 (2006)

상세보기
Reissig JL, Strominger JL, Leloir LF. A modified colorimetric method for the estimation of N-acetylamino sugars. J. Biol. Chem. 217: 959-966 (1955)
Golberg RL, Huff JP, Lenz ME, Glickman P, Katz R, Thonar EJMA. Elevated plasma levels of hyaluronate in patients with osteoarthritis and rheumatoid arthritis. Arth. Rheum. 34: 799-807 (1991)

상세보기
Kakehi K, Kinoshita M, Yasueda S. Hyaluronic acid: Separation and biological implications. J. Chromatogr. B 797: 347-355 (2003)

상세보기
Yui N, Okano T, Sakurai Y. Inflammation responsive degradation of crosslinked hyaluronic acid gel. J. Control Release 22: 105- 116 (1992)

상세보기
Lopez AS, Alegre E, Diaz A, Mugueta C, Gonzalez A. Earlyresponse gene signaling is induced by angiogenic oligosaccharides of hyaluronan in endothelial cells. Inhibition by non-angiogenic, high-molecular-weight hyaluronan. Immunol. Lett. 106: 163-171 (2006)

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Sakamoto K, Yonoki Y, Kubota Y, Kuwagata M, Saito M, Nakahara T, Ishii K. Inducible nitric oxide synthase inhibitors abolished histological protection by late ischemic preconditioning in rat retina. Exp. Eye Res. 82: 512-518 (2006)

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Hara MR, Cascio MB, Sawa A. GAPDH as a sensor of NO stress. Biochim. Biophys. Acta 1762: 502-509 (2006)

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Shin MS. Comparative studies on the effects of Aralia continentalis root and Angelica pubescens root. PhD thesis, University of Kyungwon, Seongnam, Korea (2006)
Cha BC, Lee EH, Cho JY. Glutathione S-transferase activity and hyaluronidase inhibitory effect of medicinal plants. Korean J. Physiol. Pharmacol. 35: 184-188 (2004)
Kushwah A, Amma MK, Sareen KN. Effect of some anti-inflammatory agents on lysosomal & testicular hyaluronidases. Indian J. Exp. Biol. 16: 222-224 (1978)
Santos-Gomes PC, Seabra RM, Andrade PB, Fernandes-Ferreira M. Determination of phenolic antioxidant compounds produced by calli and cell suspensions of sage (Salvia officinalis L.). J. Plant Physiol. 160: 1025-1032 (2003)

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Tesuka Y, Irikawa S, Kaneko T, Banskota AH, Nagaoka T, Xiong Q, Hase K, Kadota S. Screening of Chinese herval drug extracts for inhibitory activity on nitric oxide production and identification of an active compound of Zanthoxylum bugeanum. J. Ethnopharmacol. 77: 209-217 (2001)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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