[논문]Platycodin D를 포함하는 도라지 추출물이 DNCB 유도 알레르기성 아토피 피부염에 미치는 영향

박세진; 김윤석; 김택중

doi:10.5352/jls.2012.22.10.1339

Platycodin D를 포함하는 도라지 추출물이 DNCB 유도 알레르기성 아토피 피부염에 미치는 영향
Inhibitory Effect of PG-Platycodin D on the Development of Atopic Dermatitis-Like Skin Lesions in ICR Mice 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.22 no.10 = no.150, 2012년, pp.1339 - 1343

박세진 (연세대학교 과학기술대학 생명과학기술학부) , 김윤석 (연세대학교 보건과학대학 임상병리학과) , 김택중 (연세대학교 과학기술대학 생명과학기술학부)

초록
AI-Helper

알레르기성 아토피 피부염은 면역적 반응을 포함하는 복잡한 원인을 가진 염증성 질환이다. 본 연구는 ICR mice의 등쪽 부위에 반복적인 DNCB 도포를 통해 유발시킨 알레르기성 아토피 피부염에 있어서 PG-Platycodin D의 효능에 대해 연구하였다. PG-Platycodin D의 효능은 scratching behavior, skin severity score, 그리고 조직병리학적 관찰을 통해서 확인하였다. PG-Platycodin D가 scratching behavior, skin severity score 수준을 감소시킴을 확인할 수 있었다. 또한, 조직병리학적 관찰에 의해 PG-Platycodin D군에서 피부의 부종이 효과적으로 억제됨을 알 수 있었다. 이러한 결과로부터 알레르기성 아토피 피부염에 있어서 Platycodin D가 포함된 도라지 추출물이 유용한 천연 원료 물질로서 가능성을 가짐을 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

Atopic dermatitis is characterized by chronically pruritic and inflammatory dermatitis. In this study, we investigated the effect of Platycodon grandiflorum including platycodin D (PG-Platycodin D) in an atopic dermatitis-like mouse model. An atopic dermatitis-like skin lesion was induced by repeated treatment of 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB) on the dorsal skin of ICR mice. The efficacy of PG-Platycodin D was tested by observing scratching behavior, the skin severity score, and histopathologic analysis. PG-Platycodin D reduced the DNCB-induced increase in scratching behavior and the skin severity score. In addition, histopathologic analysis revealed a reduction in the thickening of the epidermis in the PG-Platycodin D group. These results may contribute to the development of a therapeutic drug for the treatment of atopic dermatitis.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

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문제 정의

이러한 치료는 장기간 지속될 경우 안정성에 문제가 발생한다. 본 연구에서 PGPlatycodin D를 알레르기성 아토피 피부염이 유발된 피부에 7회 도포할 경우 효과적인 피부 회복능을 나타내고 있기 때문에 알레르기성 아토피 피부염에 대한 제제로서 가능성을 제시 해주고 있다.
본 연구에서는 PG-Platycodin D의 알레르기성 아토피 피부염에 대한 회복능을 조사하기 위하여 normal군과 DNCB로알레르기 접촉피부염을 유발시킨 DNCB군 및 DNCB군에 PG-Platycodin D를 도포한 실험군으로 나누어 실험을 실시하였다. 육안적 관찰에서 DNCB군은 등 부위에 피부 반점, 홍반, 피부 건조, 부종 및 출혈 등이 심하게 나타났다.
본 연구에서는 이러한 항 알러지 효과를 갖는 PGPlatycodin D를 DNCB로 유발된 접촉성 피부염 동물모델에 처치하여, scratching behavior, skin severity score, skin thickness에 PG-Platycodin D가 미치는 영향에 대해서 연구하였다.

제안 방법

1). 1% DNCB 용액 도포 후에 PD 5%+DNCB 군의 경우에는 D.W에 5% PG-Platycodin D 추출물을 녹여서 만든 10 mg/ml 5% PG-Platycodin D를 격일 단위로 처리하여 주었다. DNCB군과 PD 5%+DNCB군에서의 접촉피부염 유발 여부는 직접 육안으로 확인할 수 있었다.
ICR mice의 등쪽 부위를 제모하고 하루 동안 피부를 진정시킨 뒤, 1% DNCB 용액을 등쪽 부위에 도포하여 sensitization한다. 4일 후부터 2주 동안 0.5% DNCB 용액을 반복적으로 도포하여 접촉성 피부염을 유발하였다(Fig. 1). 1% DNCB 용액 도포 후에 PD 5%+DNCB 군의 경우에는 D.
Scratching behavior 측정 실험을 위하여 각각의 Mice는 개별적으로 깨끗한 polycarbonate cage에서 생활하게 하였으며, DNCB에 의해서 sensitization된 mice 및 10 mg/ml의 5% PG-Platycodin D를 처리한 mice의 행동 양식을 2주 동안 60분씩 격일 단위로 video camera를 이용하여 동영상 촬영 하였다. Scraching behavior는 등쪽 부위를 물어뜯거나 뒷발로 긁는 등의 행동양식을 횟수로서 측정하였다.
Scratching behavior 측정 실험을 위하여 각각의 Mice는 개별적으로 깨끗한 polycarbonate cage에서 생활하게 하였으며, DNCB에 의해서 sensitization된 mice 및 10 mg/ml의 5% PG-Platycodin D를 처리한 mice의 행동 양식을 2주 동안 60분씩 격일 단위로 video camera를 이용하여 동영상 촬영 하였다. Scraching behavior는 등쪽 부위를 물어뜯거나 뒷발로 긁는 등의 행동양식을 횟수로서 측정하였다.
실험군은 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB) 를 도포하지 않은 정상 대조군(Normal군), DNCB 단독 도포군 (DNCB군), DNCB와 10 mg/ml의 5% PG-Platycodin D를 도포한 군(PD 5%+DNCB군)으로 나누었다. 각 군에 6마리씩 분리하여 polycarbonate cage에 수용하고, 고형사료와 물을 자유롭게 섭취시키면서 1주 동안 적응시킨 후 사용하였다.
T Compound (SAKURA, USA)로 포매하였다. 그 조직은 부종 여부를 확인할 수 있도록 haematoxylin-eosin 염색법을 이용하여 조직 염색을 하였으며, 광학현미경상에서 40배의 배율로 피부의 전반적인 상태를 관찰하였다.
또한 DNCB에 의해서 sensitization된 mice 및 10 mg/ml의 5% PG-Platycodin D를 처리한 mice의 행동 양식을 2주 동안 60분씩 격일 단위로 video camera를 이용하여 동영상 촬영하였다. 등쪽 부위를 물어뜯거나 뒷발로 긁는 등의 행동양식인 scratching behavior를 횟수로서 측정하였을 때, Scratching behavior 역시 PG-Platycodin D 도포 4회차 이후부터 등쪽 부위를 긁는 횟수가 점진적으로 감소하는 양상을 나타냈다 (Fig.
모든 동물들은 표준화 된 사료와 물을 제공하였으며, 연세대학교의 Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) (Wonju, Korea)가 본 연구의 동물 실험을 승인하였다. 실험군은 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB) 를 도포하지 않은 정상 대조군(Normal군), DNCB 단독 도포군 (DNCB군), DNCB와 10 mg/ml의 5% PG-Platycodin D를 도포한 군(PD 5%+DNCB군)으로 나누었다. 각 군에 6마리씩 분리하여 polycarbonate cage에 수용하고, 고형사료와 물을 자유롭게 섭취시키면서 1주 동안 적응시킨 후 사용하였다.

대상 데이터

2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB)와 olive oil 및 acetone은 Sigma-Aldrich (St. Louis, Mo, USA)에서 구입하였다. 사용한 DNCB는 Acetone과 olive oil 혼합 용액으로 0.
실험종료 후에, 등쪽 부위의 피부를 적출하여 4% paraformaldehyde에서 4시간 동안 고정하고, 30% sucrose 용액에서 안정화 시켜주기 위해 overnight하였다. 그 조직을 Tissue-Tek O.C.T Compound (SAKURA, USA)로 포매하였다. 그 조직은 부종 여부를 확인할 수 있도록 haematoxylin-eosin 염색법을 이용하여 조직 염색을 하였으며, 광학현미경상에서 40배의 배율로 피부의 전반적인 상태를 관찰하였다.
Louis, Mo, USA)에서 구입하였다. 사용한 DNCB는 Acetone과 olive oil 혼합 용액으로 0.5%와 1%의 농도로 용해한 후 사용하였으며, 5%의 Platycodin D를 포함하는 도라지 추출물(PG-Platycodin D)은 표준화되어 (주)비엔씨바 이오팜으로부터 제공받아 실험에 사용하였다.
실험동물은 male ICR mice 6주령을 Orient Bio (Gangneung, Korea)로부터 구매하여 온도 20-22℃와 습도 40-50%의 환경에서 사육하였다. 모든 동물들은 표준화 된 사료와 물을 제공하였으며, 연세대학교의 Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) (Wonju, Korea)가 본 연구의 동물 실험을 승인하였다.
접촉성 피부염을 유발하기 위해 acetone과 olive oil을 3:1로 섞어 만든 기제에 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB)를 녹여서 만든 1% DNCB 용액과 0.5% DNCB 용액을 사용하였다. ICR mice의 등쪽 부위를 제모하고 하루 동안 피부를 진정시킨 뒤, 1% DNCB 용액을 등쪽 부위에 도포하여 sensitization한다.

성능/효과

2,4-Dinitrochlorobenzene (DNCB)로 유발된 알레르기성 접촉피부염은 염증관련 물질을 분비하며, 이들 염증관련 물질은 생체대사에 영향을 미치고 과도하게 생성되었을 경우에는 조직 손상, 지질 과산화, DNA 손상 그리고 효소 불활성화를 유발하며 만성, 급 만성 스트레스와 충격, 염증 등의 복잡한 조건들과 연관되어 있다[4,13].
The evaluated symptoms consisting of (1) Erythma, (2) Pruritus & Dry skin, (3) Edema & Excoriation, (4) Erosion, (5) Lichenification were scored as folows: none=0; mild=1; moderate=2; severe=3.
5). 따라서 PG-Platycodin D가 DNCB로 인하여 발생된 알레르기성 아토피 피부염을 효과적으로 억제해주는 기능을 할 것으로 생각된다.
따라서 이러한 알레르기성 아토피 피부염의 심각성 정도를 홍반(Erythma), 가려움과 건조피부(Pruritus & Dry skin), 부종과 혈종(Edema & Excoriation), 짓무름(Erosion), 태선화(Lichenification)와 같은 5가지 항목을 각각 평가한 점수의 총합으로 나타내었을 때, 2주 동안 PG-Platycodin D를 처리하였을 경우, 4회차 도포 이후부터 DNCB군에 비해서 점차 그 score가 감소되는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 4).
4). 이를 통하여 PG-Platycodin D의 지속적인 처리가 관능적으로도 알러지성 아토피 피부염의 개선에 영향을 미친다는 점을 알 수 있었다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	알레르기성 아토피 피부염은 무엇인가?	알레르기성 아토피 피부염은 면역적 반응을 포함하는 복잡한 원인을 가진 염증성 질환이다. 본 연구는 ICR mice의 등쪽 부위에 반복적인 DNCB 도포를 통해 유발시킨 알레르기성 아토피 피부염에 있어서 PG-Platycodin D의 효능에 대해 연구하였다.
	도라지에 함유된 Platycodin D의 효능은 무엇입니까?	기본적으로 감기, 천식, 페결핵에 거담제로서 유용한 것으로 보고되고 있어서 기관지 천식 치료나 면역증강 및 활성에 효능이 있는 것으로 밝혀지고 있다[9-13]. 도라지에서 약효를 나타내는 주성분들 중 Platycodin D는 도라지 뿌리에 존재하는 트리터펜 사포닌계(triterpenoid saponin) 화합물 중의 하나로 항 염증 효과, 항 비만효과, 콜레스테롤 저하효과, 통각 억제효과가 있는 것으로 보고 되었다[10,18].
	도라지는 지금까지 몇 종의 사포닌이 분리되었습니까?	도라지(Platycodon grandiflorum)는 초롱꽃과(Campanulaceae) 에 속하는 다년생 초본류로서 중국, 일본 및 우리나라 각지에 자생하고 있으며 예로부터 약용과 식용으로 이용되어 최근까지 널리 재배하여 생산되고 있다. 1940년도부터 현재까지 17 종의 saponin 종류가 분리되었고 그 구조도 밝혀졌다. 이외에도 sterol, Platycodin D 등의 조성이 조사되어 있다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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