[논문]몰약, 라타니아, 카모밀레 등의 구강 내 병원균에 대한 항균작용

백한승; 강수경; 어규식; 전양현; 홍정표

doi:10.14476/jomp.2013.38.4.299

[국내논문] 몰약, 라타니아, 카모밀레 등의 구강 내 병원균에 대한 항균작용
Effect of antibacterial effects of myrrh, rhatany, chamomomilla against to oral microorganisms 원문보기

대한구강내과학회지 = Korean journal of oral medicine, v.38 no.4, 2013년, pp.299 - 312

백한승 (경희대학교 치의학전문대학원 안면통증구강내과학교실) , 강수경 (경희대학교 치의학전문대학원 안면통증구강내과학교실) , 어규식 (경희대학교 치의학전문대학원 안면통증구강내과학교실) , 전양현 (경희대학교 치의학전문대학원 안면통증구강내과학교실) , 홍정표 (경희대학교 치의학전문대학원 안면통증구강내과학교실)

초록
AI-Helper

여러 식물의 추출물에 대한 항균효과와 항균작용은 이미 연구되어 있으나, 구강 내 병원균에 대한 연구는 아직 미미한 편이다. 이에 타액에 수 종의 식물 추출물, myrrh, rhatany, chamomomilla를 첨가하여 치주질환과 구취 발생에 중요한 역할을 하는 원인균들에 대한 억제효과를 파악하고자 하였다. 실험에 사용한 생약 추출물은 Myrrh tincture (100 mg/ml), Ratanhia tincture (100 mg/ml), Chamomile tincture (100mg/ml)를 사용하였으며, 충치원인균인 S. mutans GS5, S. sobrinus 6715와 치주염원인균주인 P. gingivalis 2561 및 P. intermedia ATCC 25611, Candida albicans ATCC 18804, E. feacalis ATCC 4083 균주를 대상으로 항균실험하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 본 연구에서 사용한 식물 추출물인 myrrh, rhatany, chamomomilla는 수렴작용과 살균작용, 항염증작용을 가지고 있는 물질로서, P. gingivalis, S. mutans, C. albicans 등의 구강 내 병원균에 대한 항균효과나 항균작용이 구명되었다. 또한 가장강한 항균효과를 보인 rhatany를 처리한 이들 병원균을 투과전자현미경 하에서 관찰하였을 때, 심한 형태적 변형이 관찰되었다. 이는 식물 추출물에 의하여 구강 내 유해균을 억제시킴으로써 치주질환과 충치, 구취 및 구강염의 발생을 예방할 수 있다는 것을 의미하므로, 향후 구강 환경 개선을 위한 임상적 근거가 마련될 수 있을 것으로 생각된다.

Abstract ▼ AI-Helper

Even though there exist a lot of study about antibacterial effects and reactions of extracted materials from plant, few study exist about oral pathogenic bacteria. Therefore we tried to recognize about the suppression effect to the periodontal pathogenic bacteria and halitosis, when add some kinds of plant extracted materials, myrrh, rhatany, chamomolilla to saliva. We used Crude drug : Myrrh tincture (100mg/ml), Ratanhia tincture (100mg/ml), Chamomile tincture(100mg/ml). We inspected about the cariogenic bateriae, S. mutans GS5 and S. sobrinus 6715, periodontal pathogenic bacteria, P. gingivalis 2561, P. intermedia ATCC 25611, Candida albicans ATCC 18804, and E. feacalis ATCC 4083, then the result follow. The plant extracted material, myrrh, rhatany, chamomomilla, which have convergence effect, bacteriocidal effect and anti-inflammation effect, show an antibacterial effect and reaction to the oral pathogenic bacteria. And with treating rhatany that have the most strong antibacterial effect, through transmission electron microscopy we could see a severe morphologic change of bacteria. This means with the plant extracted material, we can suppress the oral harmful bacteria and prevent periodontal diseases, caries, halitosis and oral inflammations. And within the future studies for the improvement of oral hygiene, our result might be a clinical evidence.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

sobrinus 6715는 glucan이 축적된 치아표면에 부착하여 성공적으로 구강 내에 colonization을 하게 하는 세균이다.³³⁾ 본 논문에서는, 식물의 추출물인 몰약, 라타니아, 카모밀레가 구강 내 세균에 미치는 영향을 연구하기 위한 목적으로, 충치원인균인 S .mutans GS5, S.
이에 본 연구에서는 타액에 수종의 식물 추출물인 myrrh, rhatany, chamomilla를 첨가하여 치주질환과 구취 발생에 중요한 역할을 하는 원인균들에 대한 억제효과를 파악하고자 하였다.
여러 식물의 추출물에 대한 항균효과와 항균작용은 이미 연구되어 있으나, 구강 내 병원균에 대한 연구는 아직 미미한 편이다. 이에 타액에 수종의 식물 추출물, myrrh, rhatany, chamomomilla를 첨가하여 치주질환과 구취 발생에 중요한 역할을 하는 원인균들에 대한 억제효과를 파악하고자 하였다.

제안 방법

Myrrh tincture, Ratanhia tincture, Chamomile tincture를 각각 (Myrrh tincture : Chamomile tincture : Ratanhia tincture =1:1:1), (Myrrh tincture : Chamomile tincture = 1:1), (Myrrh tincture : Ratanhia tincture =1:1), (Chamomile tincture : Ratanhia tincture = 1:1)의 비율로 혼합하여 단일 tincture의 효과와 동일하게 실험하고 비교하였다.
Myrrh tincture, Ratanhia tincture, Chamomile tincture를 농도가 순서대로 1/2씩 희석되도록 94 well plate에서 액체배지와 단계희석하여 200ul씩 분주하고 균액이 Optical Density(600 nm) 0.1인 농도에서 37℃조건으로 48시간 혐기적으로 배양하였다. 배양된 P.
feacalis ATCC 4083 균주를 사용하였다. P.gingivalis 2561의 배양을 위해서 half-strenght brain hreat infustion(BHI;BD) 와 yeast extract(5mg/ml;Duchefa Biochemie), hemin(5mg/ml), vitamin K (0.2mg/ml)가 첨가된 액체배지와 Tryptic soy broth (BD)와 yeast extract(5mg/ml;Duchefa Biochemie), hemin (5mg/ml;Sigma), vitamin K (0.2mg/ml; Sigma), 면양 적혈구(50ml/L Sheep blood; Medex)인 고체배지에서 37℃조건으로 혐기적(N₂, 85%, H₂ 10%, CO₂ 5%)으로 배양하였다.
S. mutans GS5(그람양성균)와 P. gingivalis 2561(그람음성균) 그리고 Candida albicans ATCC 18804을 배양하고 optical density가 0.1이 되었을 때, Ratanhia tincture의 MBC 농도의 1/2을 넣고 6시간 배양하였다. 그리고, 이 균액을 10,000 X g로 원심분리하여 얻은 균 pellet을 20 mM 인산완충용액(pH 7.
가장 뚜렷한 항균효과를 보인 라타니아를 선택하여 P. gingivalis 2561, S. mutans GS5, Candida albicans ATCC 18804의 형태에 미치는 영향을 투과전자현미경으로 관찰하였다. 우선 이들 실험균주를 앞서 기술한 각각의 액체배지에 접종하여 37℃ 호기 또는 혐기 상태에서 24시간 배양한 다음 배양액 100㎕를 새로운 액체배지 10 ㎖에 접종한 후 분광광도계(600 ㎚)로 흡광도 0.
라타니아에 의한 P. gingivalis 2561의 형태변화를 투과전자현미경으로 관찰하였다. 라타니아를 첨가하지 않고 배양한 P.
1인 농도에서 37℃조건으로 48시간 혐기적으로 배양하였다. 배양된 P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611, Streptococcus mutans GS5, Streptococcus sobrinus 6715, E.feacalis ATCC 4083, Candida albicans ATCC 18804 균주의 optical density를 측정하고(MIC; Minmal Inhibitory Concentration), 고체배지에 1ul씩 3곳에 적하하고 1~7일 동안 배양하여 형성된 집락수를 생균수(CFUs)로 계산하고 99.9% 사멸효과가 있는 농도(MBC; Minimal Bacteriocidal Concentration)를 관찰하였다.
1이 될 때까지 배양하였다. 배양한 실험균주에 라타니아 추출액을 위에서 확인된 MBC의 1/2 농도로 배양액에 첨가한 실험군과 라타니아 추출물을 첨가하지 않은 대조군을 포함하여 6시간을 추가로 배양하였다. 배양액을 10,000 ×g로 30분간 4℃에서 원침시킨 후 회수된 균 pellet을 PBS (phosphate buffered saline)로 3회 세정한 다음 균 pellet을 0.
mutans GS5, Candida albicans ATCC 18804의 형태에 미치는 영향을 투과전자현미경으로 관찰하였다. 우선 이들 실험균주를 앞서 기술한 각각의 액체배지에 접종하여 37℃ 호기 또는 혐기 상태에서 24시간 배양한 다음 배양액 100㎕를 새로운 액체배지 10 ㎖에 접종한 후 분광광도계(600 ㎚)로 흡광도 0.1이 될 때까지 배양하였다. 배양한 실험균주에 라타니아 추출액을 위에서 확인된 MBC의 1/2 농도로 배양액에 첨가한 실험군과 라타니아 추출물을 첨가하지 않은 대조군을 포함하여 6시간을 추가로 배양하였다.
표본은 ethanol로 탈수시킨 후 Epon 812에 포매하였다. 포매된 표본은 ultrathinsection하여 uranyl acetate와 lead citrate로 염색하여 전자현미경 (TEM)으로 관찰하였다.
1M cacodylate 완충용액으로 3회 세정하고 나서 2% sodium tetroxide로 하룻밤 고정하였다. 표본은 ethanol로 탈수시킨 후 Epon 812에 포매한 다음 초박절(ultrathin-section) 표본을 제작하여 uranyl acetate와 lead citrate로 염색한 후 전자현미경(JEM-1011, JEOL)하에서 관찰하였다.

대상 데이터

Myrrh tincture(100mg/ml), Ratanhia tincture(100mg/ml), Chamomile tincture(100 mg/ml)를 항균효과 실험에 사용하였다.
S.mutans GS5, S.sorbirnus 6715,E.feacalis ATCC 4083는 half-strenght brain hreat infustion(BHI;BD) 액체배지와 MIcro agar(1.5%; Duchefa Biochemie)를 포함한 고체 배지서 혐기적으로 배양하였다. Candida albicans ATCC 18804는 Bacto pepton(10g/ml;BD), Glucose(5g/ml;Sigma)를 포함한 액체배지와 MIcro agar(1.
³³⁾ 본 논문에서는, 식물의 추출물인 몰약, 라타니아, 카모밀레가 구강 내 세균에 미치는 영향을 연구하기 위한 목적으로, 충치원인균인 S .mutans GS5, S. sorbirnus 6715와 치주염원인균주인 P. gingivalis 2561 및 P. intermedia ATCC 25611, 그리고 구강점막의 진균감염균인 C. albicans ATCC 18804를 대상으로 실험하였다.^34-44)
실험에 사용한 생약 추출물은 Myrrh tincture (100 mg/ml), Ratanhia tincture (100 mg/ml), Chamomile tincture (100 mg/ml)를 사용하였으며, 충치원인균인 S. mutans GS5, S. sobrinus 6715와 치주염원인균주인 P. gingivalis 2561 및 P. intermedia ATCC 25611, Candida albicans ATCC 18804, E. feacalis ATCC 4083 균주를 대상으로 항균실험하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
충치원인균인 S.mutans GS5, S.sorbirnus 6715와 치주염원인균주인 P.gingivalis 2561 및 P.intermedia ATCC 25611, Candida albicans ATCC 18804, E.feacalis ATCC 4083 균주를 사용하였다. P.
1 M cacodylate 완충용액으로 3회 세정하고 나서 2% sodium tetroxide로 하룻밤 고정하였다. 표본은 ethanol로 탈수시킨 후 Epon 812에 포매하였다. 포매된 표본은 ultrathinsection하여 uranyl acetate와 lead citrate로 염색하여 전자현미경 (TEM)으로 관찰하였다.

성능/효과

gingivalis는 그람음성 혐기세균이며 태생적으로 일부 항생제에 대하여 저항성을 갖는 동시에 다른 많은 항생제에 저항성을 획득하는 경향을 보이는 세균으로서, 구강 세균 중에서 가장 강하고 많은 독성 인자를 가지고 있는 세균이다.³⁾ P. gingivalis는 치주질환이 있을 때 치주병소 내에서 그 수가 증가되며,⁴⁾ 치주질환이 진행됨에 따라 열구상피에 침투하는 경우가 빈번히 발견된다.⁵⁾ 또한 P.
albicans의 발병률은 신생아에서 45%,²²⁾ 건강한 어린이에서는 45–65%,²³⁾ 건강한 성인에서는 30-45%,^24,25) 가철성 의치를 사용하는 사람에서는 50-65%,²⁵⁾ 급성 질환이 생기고 장기간 치료받는 사람들의 65-88%,^25,26,27,28) 급성 백혈병으로 화학치료를 받고 있는 환자들의 90%,²⁹⁾ 그리고 HIV 환자들의 95% 라고 보고되고 있다.30) C. albicans 는 점막에 친화적으로 군락을 이루며, 기회감염으로 병인요소로 작용할 수 있기 때문에 면역이 억제된 환자들에게 일상적인 점막 감염이 될 뿐만 아니라 삶을 위협하는 침해적인 감염이 될 수 있다.³¹⁾ 충치 유발균인 S.
albicans 는 점막에 친화적으로 군락을 이루며, 기회감염으로 병인요소로 작용할 수 있기 때문에 면역이 억제된 환자들에게 일상적인 점막 감염이 될 뿐만 아니라 삶을 위협하는 침해적인 감염이 될 수 있다.³¹⁾ 충치 유발균인 S. mutans GS5는 glycosyltransferase 활성을 가지고 치아표면에 sucrose-dependent colonization에 관여하며,³²⁾ S. sobrinus는 다만, 혈청학적, 유전적 성상이 약간 다를 뿐 S. mutans와 매우 유사하여 사람의 충치에서 주로 나타나고, 특히 S. sobrinus 6715는 glucan이 축적된 치아표면에 부착하여 성공적으로 구강 내에 colonization을 하게 하는 세균이다.³³⁾ 본 논문에서는, 식물의 추출물인 몰약, 라타니아, 카모밀레가 구강 내 세균에 미치는 영향을 연구하기 위한 목적으로, 충치원인균인 S .
gingivalis는 치주질환이 있을 때 치주병소 내에서 그 수가 증가되며,⁴⁾ 치주질환이 진행됨에 따라 열구상피에 침투하는 경우가 빈번히 발견된다.⁵⁾ 또한 P. gingivalis는 치주치료를 하면 감소되거나 제거되며, 치주질환이 재발되는 병소에서는 또 다시 발견되기도 한다.
gingivalis는 구취의 유발인자로서도 중요한 역할을 하고 있다.⁶⁾ C. albicans는 건강한 사람들의 구강 내에서도 흔히 발견되는데, 이 효모형 진균은 보통 특이한 병변을 일으키지 않으나, 균주가 병변을 일으킬 수준으로 증가하거나 숙주의 국소적 또는 전신적 요인으로 인해 기회감염이 발생 하여 구강 캔디다증을 일으킬 수 있다. 구강 캔디다증의 국소요인은 의치 사용이나 타액선 기능 저하, 스테로이드(steroid) 흡입과 구강 암(oral cancer) 등이 있고, 전신적 요소로는 연령, 흡연, 당뇨, 쿠싱 증후군(Cushing's syndrome), 면역력 저하, 악성 종양, 영양 결핍, 그리고 항생제 사용 등이 있다.
6mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었다.(Table 2) Ratanhia tincture의 경우에는 S. sobrinus 6715와 S. mutans GS5, Candida albicans ATCC 18804, E. feacalis ATCC 4083, P. gingivalis 2561, P. intermedia ATCC 25611 균의 세균억제 및 사멸효과는 모두 3.1mg/ml 이하로 Myrrh tincture, Chamomile tincture 보다 높게 관찰되었다.(Table 2) 또한 Chamomile tincture의 경우에도 S.
S.sobrinus 6715와 S.mutans GS5, Candida albicans ATCC 18804, E.feacalis ATCC 4083, P.gingivalis 2561, P.intermedia ATCC 25611균의 세균억제 및 사멸효과는 모두 3.1mg/ml 이하로 Myrrh tincture, Chamomile tincture 보다 높게 관찰되었다. (Table 2)
S.sobrinus 6715와 S.mutans GS5, Candida albicans ATCC 18804, E.feacalis ATCC 4083의 Myrrh tincture에 대한 세균억제효과는 6.3 mg/ml 이상에서 Myrrh tincture와 동일하게 세균 사멸효과를 보여주었으나 그람음성 균인 P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611는 3.1mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었다. (Table 2)
S.sobrinus 6715와 S.mutans GS5, Candida albicans ATCC 18804, E.feacalis ATCC 4083의 Myrrh tincture에 대한 세균억제효과는 6.3 mg/ml 이상에서 세균사멸효과를 보여주었으나 그람음성 균인 P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611는 1.6mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었다. (Table 2)
S.sobrinus 6715와 S.mutans GS5, E.feacalis ATCC 4083의 3종의 혼합액에 대한 세균억제효과는 6.3 mg/ml 이상에서 세균사멸효과를 보여주었으나, P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611는 0.4 mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었으며 Candida albicans ATCC 18804는 3.1 mg/ml에서 효과가 관찰되었다.
S.sobrinus 6715와 S.mutans GS5, E.feacalis ATCC 4083의 Chamomile: Ratanhia 의 1:1혼합액에 대한 세균억제효과는 6.3 mg/ml 이상에서 세균사멸효과를 보여주었으나, P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611는 0.4 mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었으며, Candida albicans ATCC 18804는 0.4 mg/ml에서 효과가 관찰되었다. 그리고, Ratanhia tincture가 Myrrh와 혼합된 것 보다 Chamomile와 혼합되었을 경우 세균사멸효과가 더 높게 관찰되었다.
S.sobrinus 6715와 S.mutans GS5, E.feacalis ATCC 4083의 Myrrh:Chamomile의 1:1혼합액에 대한 세균억제효과는 6.3 mg/ml 이상에서 세균사멸효과를 보여주었으나, P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611는 0.4 mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었으며, Candida albicans ATCC 18804는 3.1 mg/ml에서 효과가 관찰되었다.
S.sobrinus 6715와 S.mutans GS5, E.feacalis ATCC 4083의 Myrrh:Ratanhia 의 1:1혼합액에 대한 세균억제효과는 6.3 mg/ml 이상에서 세균사멸효과를 보여주었으나, P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611는 0.8 mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었으며, Candida albicans ATCC 18804는 1.5 mg/ml에서 효과가 관찰되었다.
mutans GS5, Candida albicans ATCC 18804, E.feacalis ATCC 4083의 Myrrh tincture에 대한 세균억제효과는 6.3 mg/ml 이상에서 Myrrh tincture와 동일하게 세균 사멸효과를 보여주었으나 그람음성 균인 P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611는 3.1mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었다. (Table 2)
mutans GS5, Candida albicans ATCC 18804, E.feacalis ATCC 4083의 Myrrh tincture에 대한 세균억제효과는 6.3 mg/ml 이상에서 세균사멸효과를 보여주었으나 그람음성 균인 P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611는 1.6mg/ml 이하에서 MBC와 MIC를 관찰할 수 있었다. (Table 2)
mutans GS5는 균 모양이 대조군보다는 구형에 가깝고, 균의 크기가 일정하지 않았으며 세포질의 전자밀도도 다양하게 나타났다. 그러나 세포질 전자밀도는 전체적으로 대조군보다 낮았고, 개개 균을 관찰했을 때 세포질의 전자 밀도도 균등하지 않은 것으로 관찰되었다. 라타니아로 처리한 P.
mutans GS5는 균 모양이 대조군보다는 구형에 가깝고, 균의 크기가 일정하지 않았으며 세포질의 전자밀도도 다양하게 나타났다. 그러나 세포질 전자밀도는 전체적으로 대조군보다 낮았고, 개개 균을 관찰했을 때 세포질의 전자 밀도도 균등하지 않은 것으로 관찰되었다. 라타니아로 처리한 P.
intermedia ATCC 25611인 그람음성 균에서 Myrrh tincture, Ratanhia tincture, Chamomile tincture용액의 세균억제와 사멸효과가 더 높게 관찰되었다. 그러나, Myrrh tincture, Ratanhia tincture, Chamomile tincture 혼합용액은 Ratanhia tincture의 단일용액보다 세균억제와 사멸효과가 높지 않았으며, P.gingivalis 2561의 경우 Chamomile:Ratanhia의 1:1의 혼합용액은 Ratanhia tincture의 사멸과 억제효과가 오히려 1/2로 낮게 관찰되었다.
그리고 S.sobrinus 6715와 S.mutans GS5, E.feacalis ATCC 4083인 그람양성 균보다 P.gingivalis 2561와 P.intermedia ATCC 25611인 그람음성 균에서 Myrrh tincture, Ratanhia tincture, Chamomile tincture용액의 세균억제와 사멸효과가 더 높게 관찰되었다. 그러나, Myrrh tincture, Ratanhia tincture, Chamomile tincture 혼합용액은 Ratanhia tincture의 단일용액보다 세균억제와 사멸효과가 높지 않았으며, P.
4 mg/ml에서 효과가 관찰되었다. 그리고, Ratanhia tincture가 Myrrh와 혼합된 것 보다 Chamomile와 혼합되었을 경우 세균사멸효과가 더 높게 관찰되었다.
albicans 등의 구강 내 병원균에 대한 항균효과나 항균작용이 구명되었다. 또한 가장 강한 항균효과를 보인 rhatany를 처리한 이들 병원균을 투과전자현미경 하에서 관찰하였을 때, 심한 형태적 변형이 관찰되었다. 이는 식물 추출물에 의하여 구강 내 유해균을 억제시킴으로써 치주질환과 충치, 구취 및 구강염의 발생을 예방할 수 있다는 것을 의미하므로, 향후 구강 환경 개선을 위한 임상적 근거가 마련될 수 있을 것으로 생각된다.
특징적으로 대부분의 균에서 리보솜이 세포막에 더 편향되게 나타남으로써 세포막 바로 내측에 전자밀도가 편중되었고, 이 전자밀도는 대조군보다 높게 나타났다. 라타니아를 첨가하고 배양한 실험군 S. mutans GS5의 경우는 균 모양이 대조군보다는 구형에 가깝고, 균의 크기가 일정하지 않았으며 세포질의 전자밀도도 다양하게 나타났다. 그러나 세포질 전자밀도는 전체적으로 대조군보다 낮았고, 개개 균을 관찰했을 때 세포질의 전자밀도도 균등하지 않은 것으로 관찰되었다.
gingivalis 2561의 형태변화를 투과전자현미경으로 관찰하였다. 라타니아를 첨가하지 않고 배양한 P. gingivalis는 뚜렷하게 내막과 외막이 관찰되었고 균세포 내 리보솜 분포, 즉 세포질 전자밀도 균일화 정도에서 리보솜이 세포막 쪽으로 편중된 상태로 균일한 세포질 전자밀도를 갖는 정상적인 형태를 보였다. 핵(nucleoid)도 균 전체에 균등하게 분포하였다.
라타니아를 첨가하지 않고 배양한 대조군 S. mutans GS5는 균이 서로 연결된 연쇄상 형태를 보이면서 동시에 분열이 시작되고 있음을 보여주는 division septum의 균세포 내 함입 현상이 관찰되었고, 리보솜 때문에 나타나는 세포질 전자밀도도 전반적으로 균일하게 나타났다.(Figure 2A) 반면, 라타니아와 함께 배양한 실험군 S.
그러나 세포질 전자밀도는 전체적으로 대조군보다 낮았고, 개개 균을 관찰했을 때 세포질의 전자밀도도 균등하지 않은 것으로 관찰되었다. 마지막으로 C. albicans는 라타니아를 첨가하지 않고 배양한 대조군 세포에 비해 큰 세포는 거의 관찰되지 않았으며, 다양한 크기의 전반적으로 작은 크기의 세포를 관찰할 수 있었다. 대부분 세포에서 세포벽의 형태는 대조군과 비슷한 반면 세포질 전자밀도는 세포 간 매우 큰 차이를 보였다.
본 연구에서 사용한 식물 추출물인 myrrh, rhatany, chamomomilla는 수렴작용과 살균작용, 항염증작용을 가지고 있는 물질로서, P. gingivalis, S. mutans, C. albicans 등의 구강 내 병원균에 대한 항균효과나 항균작용이 구명되었다. 또한 가장 강한 항균효과를 보인 rhatany를 처리한 이들 병원균을 투과전자현미경 하에서 관찰하였을 때, 심한 형태적 변형이 관찰되었다.
본 연구에서는 Myrrh tincture, Ratanhia tincture, Chamomile tincture를 첨가하고 P. gingivalis, S. mutans, C. albicans 를 배양했을때 성장이 크게 억제된 것이 관찰되었다. Myrrh tincture의 경우, S.
대부분 세포에서 세포벽의 형태는 대조군과 비슷한 반면 세포질 전자밀도는 세포간 매우 큰 차이를 보였다. 세포질의 전자밀도가 상대적으로 낮은 세포 대부분에서 리보솜이 균등하게 분포하지 않고 부분적으로 쏠리는(eccentric) 현상이 두드려져 세포의 일부에는 전자밀도가 관찰되지 않는 비염색 부위도 나타났다. 한편, P.
많은 균들에서 세포 내에 공포같은 빈 공간이 나타나는 현상이 관찰되었다. 소포질 내 고밀도과립이 대조군보다는 더 많은 균에서, 그리고 보다 뚜렷하게 관찰되었다. 한편 라타니아로 처리한 P.
albicans는 전반적으로 정상적인 원형의 세포형태를 보였다. 온전한 외형과 함께 세포 외부에 염색되지 않은 두터운 세포벽 공간이 나타났고, 세포 내부는 정상적인 핵, 핵막이 존재하였으며, 모든 세포가 세포질 내 리보솜이 비교적 균등하게 분포하여 균일한 전자밀도를 보였다.(Figure 3A) 라타니아를 첨가하고 배양한 실험군 C.
전자현미경 사진에서는 라타니아를 첨가하고 배양한 실험군 P. gingivalis는 많은 균이 비정상적인 형태를 보였다. 정상적인 coccobacillus의 형태를 갖는 균보다는 대조군보다 크거나 작아 세포 크기가 다양했고, 세균에서 흔히 볼 수 없는 사각형, comma 형태 등 다양하고 비정형적인 형태의 균이 대부분이 었다.
gingivalis는 많은 균이 비정상적인 형태를 보였다. 정상적인 coccobacillus의 형태를 갖는 균보다는 대조군보다 크거나 작아 세포 크기가 다양했고, 세균에서 흔히 볼 수없는 사각형, comma 형태 등 다양하고 비정형적인 형태의 균이 대부분이었다. 이런 비정형적 형태의 균에서는 내막, 외막의 일부가 분해되는 것으로 나타났다.
gingivalis는 많은 균이 비정상적인 형태를 보였다. 정상적인 coccobacillus의 형태를 갖는 균보다는 대조군보다 크거나 작아 세포 크기가 다양했고, 세균에서 흔히 볼 수없는 사각형, comma 형태 등 다양하고 비정형적인 형태의 균이 대부분이었다. 이런 비정형적 형태의 균에서는 내막, 외막의 일부가 분해되는 것으로 나타났다.
이런 비정형적 형태의 균에서는 내막, 외막의 일부가 분해되는 것으로 나타났다. 특징적으로 대부분의 균에서 리보솜이 세포막에 더 편향 되게 나타남으로써 세포막 바로 내측에 전자밀도가 편중되었고, 이 전자밀도는 대조군보다 높게 나타났다. 많은 균들에서 세포 내에 공포같은 빈 공간이 나타나는 현상이 관찰되었다.
이런 비정형적 형태의 균에서는 내막, 외막의 일부가 분해되는 것으로 나타났다. 특징적으로 대부분의 균에서 리보솜이 세포막에 더 편향 되게 나타남으로써 세포막 바로 내측에 전자밀도가 편중되었고, 이 전자밀도는 대조군보다 높게 나타났다. 많은 균들에서 세포 내에 공포같은 빈 공간이 나타나는 현상이 관찰되었다.
세포질의 전자밀도가 상대적으로 낮은 세포 대부분에서 리보솜이 균등하게 분포하지 않고 부분적으로 쏠리는(eccentric) 현상이 두드려져 세포의 일부에는 전자밀도가 관찰되지 않는 비염색 부위도 나타났다. 한편, P. gingivalis 에서 관찰되는 고밀도과립보다 훨씬 크고 뚜렷한 구형의 과립이 대조군보다 많은 세포에서 관찰되었다.(Figure 3B)

후속연구

본 연구결과로 미루어 볼 때, 몰약, 라타니아, 카모밀레의 항균력은 구강 내 병원균주인 S. mutans, P. gingivalis, C. albicans 에 대해 유효하게 작용하며 이를 이용하여 구강 위생용품에 이들을 적용시키면 구강질환의 예방과 치료에 매우 유용하게 사용되리라 생각된다.
또한 가장 강한 항균효과를 보인 rhatany를 처리한 이들 병원균을 투과전자현미경 하에서 관찰하였을 때, 심한 형태적 변형이 관찰되었다. 이는 식물 추출물에 의하여 구강 내 유해균을 억제시킴으로써 치주질환과 충치, 구취 및 구강염의 발생을 예방할 수 있다는 것을 의미하므로, 향후 구강 환경 개선을 위한 임상적 근거가 마련될 수 있을 것으로 생각된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	P. gingivalis는 무엇인가?	P. gingivalis는 그람음성 혐기세균이며 태생적으로 일부 항생제에 대하여 저항성을 갖는 동시에 다른 많은 항생제에 저항성을 획득하는 경향을 보이는 세균으로서, 구강 세균 중에서 가장 강하고 많은 독성 인자를 가지고 있는 세균이다.3) P.
	몰약은 어떤 역할을 하는가?	또한 구강의 국소치료, 인후염, 치은염, 기타 잇몸질환에 사용되며 편도선염, 구강궤양 등에 사용된다. 몰약은 병원균이 몸 안에 침투되어 항체가 만들어져 대응하기 이전에 면역시스템을 작동시켜주는 역할을 한다. 몰약의 gugulsterone성분은 toll-like receptor를 조절하고 병원체로부터 숙주를 보호한다.
	인간의 타액에 존재하는 미생물들은 어떤 문제를 유발할 수 있는가?	인간의 타액에는 많은 종류의 미생물이 존재하고 있으며, 그 중에서도 질환을 일으키는 병원균은 그 종류만 해도 약 500여종에 이른다.1) 이들은 구취를 발생시키고 치아우식증, 치주질환 등의 질환을 일으켜 섭식기능에 장애를 일으키거나 통증을 유발하며 치아상실을 초래하기도 한다. 특히 치아우식증이나 치주질환 같은 구강질환은 한 번 손상이 가해지면 영구손상으로 남는 경향이 높으므로, 이들에 대해서는 치료뿐만 아니라 질환의 예방과 치료 예후 관리가 중요하게 여겨진다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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