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문제 정의
- ABTS 및 DPPH 라디칼 소거 활성, 총 페놀성화합물의 함량을 분석한 결과 에틸아세테이트 분획물의 항산화 활성이 가장 우수한 것으로 나타났으며, 에틸아세 테이트 분획물을 제외한 클로로포름, 부탄올, 물 분획물의 경우 지상부 분획물이 지하부보다 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났다. 각 분획물들이 RAW 264.7 대식세포주에서 LPS 처리에 의한 nitric oxide 생성에 미치는 영향을 검토하였다. 지상부 및 지하부의 에틸아세테이트 분획물이 LPS 처리에 의해 증가한 nitric oxide의 생성을 효과적으로 억제하였으며, 지상부 에틸아세테이트 분획물 20 µg/mL 처리시 LPS 처리에 의해 증가된 NO 생성을 약 50% 저해하는 것으로 나타났으며, 이러한 효과는 지하부 에틸아세테이트 분획물보다 우수한 것으로 분석되었다.
- 민들레 열수추출물의 분획물이 RAW 264.7 대식세포주에서 LPS 처리에 의한 nitric oxide (NO) 생성에 미치는 영향을 검토하였다. NO는 생체내에서 신호전달, 혈압조절, 혈소판응집 등 다양한 작용을 하는 것으로 알려져 있다.
- 현재 민들레는 유용한 식물자원으로 국내에서 엑기스, 티백 등의 식품으로 판매되고 있으나 다양한 형태의 가공식품 개발이 아직 미흡한 것으로 판단되어진다. 본 연구에서는 민들레 부위별 시료의 다양한 추출조건에 따른 추출물 및 분획물의 항산화활성과 RAW 264.7 대식세포주를 이용하여 lipopolysaccharide(LPS) 처리에 의해 증가된 nitric oxide의 생성억제능을 비교분석하여 기능성소재 개발을 위한 기초자료로 이용하고자 실시하였다.
제안 방법
- 02로 희석시켜 사용하였다. ABTS 용액 1 mL와 민들레 시료를 첨가하여 암실에서 10분간 반응시킨 후 734 nm에서 흡광도를 측정하여 ABTS 라디칼 소거율을 분석 하였다. Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) 값을 측정하기 위하여 trolox (Sigma-Aldrich)를 사용하여 농도별 ABTS 라디칼 소거율을 측정하여 표준곡선을 작성하여 slope 값을 얻었으며, 민들레 추출물 및 분획물은 시료농도에 따른 ABTS 라디칼 소거율을 측정하여 각 분석시료에 대한 slope 값을 분석하였다.
- ABTS 용액 1 mL와 민들레 시료를 첨가하여 암실에서 10분간 반응시킨 후 734 nm에서 흡광도를 측정하여 ABTS 라디칼 소거율을 분석 하였다. Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) 값을 측정하기 위하여 trolox (Sigma-Aldrich)를 사용하여 농도별 ABTS 라디칼 소거율을 측정하여 표준곡선을 작성하여 slope 값을 얻었으며, 민들레 추출물 및 분획물은 시료농도에 따른 ABTS 라디칼 소거율을 측정하여 각 분석시료에 대한 slope 값을 분석하였다. 각 시료의 TEAC value는 다음의 식과 같이 계산하였다.
- 2 여과지(Whatman)를 이용하여 감압여과 후 여과액을 회전감압농축기(NN Series, Eyela)를 이용하여 농축하였다. 각 부위의 농축액은 동결건조기(FD-1000, Eyela)을 이용하여 동결건조 후 분석시료로 이용하였다.
- 각 분획물의 시료처리가 세포생존율에 미치는 영향을 검토하기 위하여 100-1000 µg/mL 농도 범위에서 RAW 264.7세포의 세포생존율을 MTT assay를 실시하여 확인하였다.
- 민들레 추출물의 항산화특성을 분획별로 검토하기 위하여 다섯가지의 추출조건중 항산화활성이 가장 우수한 것으로 나타난 열수추출물을 이용하여 극성별 유기용매을 이용한 분획물을 얻어 이들의 항산화활성을 검토하였다. 극성별 분획물을 얻기 위한 유기용매로는 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올을 이용하였으며, 추출물을 분획깔때기를 이용하여 극성별 유기용매를 순차적으로 첨가하여 분획물을 얻었으며, 각 분획단계 및 수율은 Fig. 1에 나타내었다.
- 추출물의 ABTS 라디칼 소거활성을 검토한 결과 지상부 및 지하부의 추출물중 열수추출물이 가장 높은 ABTS 라디칼 소거능을 나타낸 반면 물 추출물은 가장 낮은 소거능을 나타내어 DPPH 라디칼 소거능을 분석한 결과와 유사한 경향을 나타내었다. 또한 항산화활성이 가장 우수한 것으로 나타난 열수추출물을 이용하여 극성별 유기용매(클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올)을 이용한 분획물을 얻어 이들의 항산화활성을 검토하였다. ABTS 및 DPPH 라디칼 소거 활성, 총 페놀성화합물의 함량을 분석한 결과 에틸아세테이트 분획물의 항산화 활성이 가장 우수한 것으로 나타났으며, 에틸아세 테이트 분획물을 제외한 클로로포름, 부탄올, 물 분획물의 경우 지상부 분획물이 지하부보다 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났다.
- 2 여과지(Whatman, Kent, UK)를 이용하여 감압여과 후 여과액을 회전감압농축기(N-N Series, Eyela, Tokyo, Japan)를 이용하여 농축하였다. 또한 환류냉각기가 장착된 가열추출장치를 사용하여 시료(10 g)와 200 mL 증류수를 넣은 후 95℃ 수조에서 6시간씩 3회 반복 추출하여 추출액을 얻었다. 추출액은 No.
- 민들레 부위별 시료의 다양한 추출조건에 따른 추출수율을 비교하기 위하여 물, 50, 70, 100% 에탄올을 추출용매로 사용하는 조건 및 열수추출조건을 포함하는 다섯가지 추출조건을 이용하여 추출수율을 비교분석하였으며 이를 Table 1에 나타내었다. 민들레 지상부는 열수추출법을 이용하는 경우 추출수율이 50.
- 민들레 시료 40 µL와 증류수 1.56 mL를 첨가한 후 0.1 mL Folin-Ciocalteu’s phenol reagent (Sigma-Aldrich)를 첨가하여 혼합한 후 5분간 실온에서 반응시켰으며, 이후 2 M sodium carbonate 용액 0.3 mL를 첨가하여 40℃에서 30분간 동안 반응시켜 750 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 민들레 지상부와 지하부 열수추출물을 분획깔때기에서 극성별 유기용매 클로로포름, 에틸아세테이트, n-부탄올을 순차적으로 분획하여 얻은 용액을 감압농축하여 동결건조한 후 분석시료로 이용하였다. 민들레 지상부 및 지하부 분획물의 제조단계 및 수율은 Fig.
- 민들레 추출물의 항산화특성을 분획별로 검토하기 위하여 다섯가지의 추출조건중 항산화활성이 가장 우수한 것으로 나타난 열수추출물을 이용하여 극성별 유기용매을 이용한 분획물을 얻어 이들의 항산화활성을 검토하였다. 극성별 분획물을 얻기 위한 유기용매로는 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올을 이용하였으며, 추출물을 분획깔때기를 이용하여 극성별 유기용매를 순차적으로 첨가하여 분획물을 얻었으며, 각 분획단계 및 수율은 Fig.
- 민들레의 부위별 항산화활성을 검토하기 위하여 지상부 및 지하부의 물, 50, 70, 100% 에탄올 용액과 열수추출조건을 이용하여 얻은 추출물의 DPPH 및 ABTS 라디칼 소거능을 분석하였다. 민들레 지상부 및 지하부 열수추출물의 DPPH 라디칼 소거능이 가장 우수한 것으로 분석되었으며, 추출물의 DPPH 라디칼 소거력은 열수추출물 > 70% 에탄올 추출물 > 50% 에탄올 추출물 >100% 에탄올 추출물 > 물 추출물 순으로 나타났다.
- 민들레의 줄기 및 잎을 포함하는 지상부와 뿌리를 포함하는 지하부 시료의 추출조건에 따른 수율을 검토하기 위하여 각 부위별 분말시료 10 g을 200 mL의 물, 50% 에탄올 수용액, 70% 에탄올 수용액 그리고 100% 에탄올(purity 96%, SK Chemicals) 용액에 혼합한 후 초음파 추출(DH.D.300H, Daihan, Wonju, Korea) 을 30분씩 3회 반복 추출하여 추출액을 얻었다. 이를 No.
- 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide solution) MTT시약을 5 mg/mL의 농도로 가한뒤 4시간 동안 반응시킨 후 well 바닥에 형성된 formazan이 흩어지지 않게 상등액을 제거하고 DMSO를 200 µL 가하여 30분 방치한 뒤 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료를 넣지 않은 대조구의 흡광도를 100%로 하여 상대적인 세포생존율을 측정하였다.
- 즉, 민들레 추출물 시료를 농도별로 준비하여 150 µM DPPH용액 1 mL을 혼합한 후 암소에서 30분간 반응시킨 후 반응액을 517 nm에서 흡광도를 측정하여 DPPH 라디칼 소거활성을 측정하였다.
- 3 mL를 첨가하여 40℃에서 30분간 동안 반응시켜 750 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질은 gallic acid (Sigma-Aldrich)를 이용하여 농도별 표준곡선을 작성한 후 민들레 분획물의 총 페놀성화합물 함량을 mg gallic acid equivalent (GAE)/g으로 분석하여 나타내었다.
대상 데이터
- 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH), 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS), Folin Ciocalteu’s reagent, Trolox 및 gallic acid는 Sigma-Aldrich사(St. Louis, MO, USA)로부터 구입하여 실험에 이용하였다.
- Dulbecco’s Eagle modified medium (DMEM)과 fetal bovine serum (FBS), phosphate buffered saline (PBS)은 WelGENE사(Daegu, Korea)의 제품을 이용하였다.
- RAW 254.7 세포주는 배양용기에 DMEM, 10% FBS, 100 U/mL penicillin 및 100 µg/mL streptomycine (Sigma-Aldrich)을 첨가한 배양액을 이용하여 배양기(HERAcell 150, Thermo Electron Corp. Waltham, MA, USA)에서 37℃와 5% CO2를 유지하며 배양하였다.
- 마우스의 대식세포 세포주인 RAW 264.7 세포는 ATCC에서 분양을 받아 실험에 이용하였다. RAW 254.
- 본 실험에 이용한 서양민들레는 강원도 양구군 민들레영농조합법인에서 구매하여 사용하였으며, 2010년 5월에 채취한 민들레를 잎 및 줄기의 지상부와 뿌리의 지하부로 구분하여 이물을 제거하고 세척한 후 50℃에서 열풍건조 시켰으며, 이를 40 mesh 크기로 분쇄하여 실험에 사용하였다. 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH), 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS), Folin Ciocalteu’s reagent, Trolox 및 gallic acid는 Sigma-Aldrich사(St.
- 실험에 이용한 에탄올, 메탄올 및 에틸아세테이트는 SK Chemicals (Seongnam, Korea)에서 구입하였으며, n-부탄올 및 클로로포름은 Daejung Chemicals & Metals (Siheung, Korea)에서 구입하여 이용하였다.
데이터처리
- 모든 분석항목은 3회 이상 반복 시험하여 얻은 결과를 평균±표준편차로 나타내었으며, 통계분석을 위하여 SPSS 19.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA)을 이용하여 ANOVA로 분석하였고, 집단 간 비교를 위한 사후분석은 Tukey로 검증하여 p<0.05 이상일 때만 통계적 유의성이 있는 것으로 판단하였다.
이론/모형
- ABTS 라디칼 소거활성을 이용한 항산화력 측정은 ABTS cation decolorization assay 방법(12)에 의하여 측정하였다. 7 mM ABTS와 2.
- DPPH 라디칼 소거활성은 Blois 방법(11)에 따라 DPPH (1,1- diphenyl-2-picryl-hydrazyl)에 대한 전자공여능(electron donating ability)으로 분석시료에 대한 환원력을 측정하였으며, 민들레 추출물과 분획물이 DPPH 라디칼을 50% 소거하는데 필요로 하는 농도(EC50)를 측정하였다. 즉, 민들레 추출물 시료를 농도별로 준비하여 150 µM DPPH용액 1 mL을 혼합한 후 암소에서 30분간 반응시킨 후 반응액을 517 nm에서 흡광도를 측정하여 DPPH 라디칼 소거활성을 측정하였다.
- 민들레 분획물의 총 페놀성 화합물 함량은 Singleton과 Rossi의 방법(13)을 이용하여 측정하였다. 민들레 시료 40 µL와 증류수 1.
- 배양액내의 nitrite의 농도는 Griess 방법을 이용한 nitric oxide detection kit (iNtRON, Sungnam, Korea)를 이용하여 측정하였다. 민들레 시료가 RAW 264.7 세포의 생육에 미치는 영향을 검토하기 위하여 MTT assay를 실시하였다. RAW 264.
- 이후 각 well 은 PBS를 이용하여 세척 후 FBS-free DMEM 배지를 이용하여 시료를 처리하였으며, 1시간 배양 후 각 well에 LPS (Sigma-Aldrich) 1 µg/mL 농도로 처리하여 24시간 배양하였다. 배양액내의 nitrite의 농도는 Griess 방법을 이용한 nitric oxide detection kit (iNtRON, Sungnam, Korea)를 이용하여 측정하였다. 민들레 시료가 RAW 264.
성능/효과
- 또한 항산화활성이 가장 우수한 것으로 나타난 열수추출물을 이용하여 극성별 유기용매(클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올)을 이용한 분획물을 얻어 이들의 항산화활성을 검토하였다. ABTS 및 DPPH 라디칼 소거 활성, 총 페놀성화합물의 함량을 분석한 결과 에틸아세테이트 분획물의 항산화 활성이 가장 우수한 것으로 나타났으며, 에틸아세 테이트 분획물을 제외한 클로로포름, 부탄올, 물 분획물의 경우 지상부 분획물이 지하부보다 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났다. 각 분획물들이 RAW 264.
- 2에 나타내었다. RAW 264.7 세포주에 LPS 단독 처리에 의해 NO의 생성이 증가하는 것을 확인 할 수 있었 으며, LPS 처리에 의해 증가한 NO가 분획물의 처리에 의해 이의 생성이 감소하는 것을 확인하였다. 지상부 시료의 경우 에틸아세테이트 분획물 20-200 µg/mL 농도 범위에서 LPS 처리에 의해 증가한 nitric oxide의 생성이 농도의존적으로 감소하는 것을 확인 할 수 있었으며, 20 µg/mL 처리시 LPS 처리에 의해 증가된 NO 생성을 약 50% 저해하는 것으로 나타났다.
- 7세포의 세포생존율을 MTT assay를 실시하여 확인하였다. 각 부위별 4가지 분획물의 cell viability는 약 93-98%로 분석되어 시료의 처리농도에서는 세포독성을 크게 나타내지 않은 것을 확인 할 수 있었다. Lee와 Im(16)은 흰민들레(Taraxacum coreanum) 추출물의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물이 우수한 NO 생성 억제 활성을 가지는 것으로 보고하였으며, Koh 등(21)은 민들레의 효소처리를 이용한 항염증 활성이 증진된 추출물 제조조건을 보고한 바 있다.
- 각 분획물별 ABTS 라디칼 소거능은 에틸아세테이트 > 부탄올 > 클로로포름 ≥ 물 순으로 분석되었으며, 에틸아세테이트 분획물을 제외한 클로로포름, 부탄올, 물 분획물의 경우 지상부 분획물이 지하부 보다 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났다.
- 05 µg/mL로 부위별 분획물의 유의적 차이는 나타나지 않았다. 그러나 부탄올, 클로로포름 및 물 분획물의 경우 지상부의 분획물이 지하부 보다 우수한 DPPH 라디칼 소거력을 가지는 것으로 나타났다.
- 50% 및 70% 에탄올 추출물의 라디칼 소거능의 유의적 차이는 나타나지 않았다. 라디칼 소거능이 가장 높은 민들레 열수추출물의 지상부와 지하부의 ABTS 라디칼 소거능을 비교하면 지상부의 추출물이 지하부에 비하여 약 2.7배 우수한 것으로 나타났다.
- 민들레 지상부 시료의 경우 열수추출물의 라디칼 소거능이 가장 우수한 것으로 나타났다. 물을 이용하여 추출한 것보다 추출온도를 증가시킨 열수추출조건에서 얻은 추출물의 라디칼 소거능이 약 3.9배 증가하였다. 민들레 지하부도 지상부와 유사한 경향으로 열수추출물이 가장 우수한 라디칼 소거력을 가지는 것으로 분석되었으며, 추출물의 DPPH 라디칼 소거력은 열수추출물 > 70% 에탄올 추출물 > 50% 에탄올 추출물 > 100% 에탄올 추출물 > 물 추출물 순으로 나타났다.
- TEAC value는 민들레 추출물 및 분획물 시료의 농도에 따른 ABTS 라디칼 소거율을 측정하여 얻은 회귀식의 slope와 trolox의 표준곡선에서 얻은 slope의 비율로 계산하였으며, 이때 수용성 vitamin E analogue인 trolox의 TEAC value는 1로 나타내었다. 민들레 부위별 추출용매를 달리하여 얻은 추출물의 ABTS 라디칼 소거활성을 검토한 결과 지상부 및 지하부의 추출물중 열수추출물이 가장 높은 ABTS 라디칼 소거능을 나타낸 반면 물 추출물은 가장 낮은 소거능을 나타내어 DPPH 라디칼 소거능을 분석한 결과와 유사한 경향을 나타내었다. 50% 및 70% 에탄올 추출물의 라디칼 소거능의 유의적 차이는 나타나지 않았다.
- 민들레 지상부 및 지하부 시료의 경우 에틸아세테이트 분획물이 가장 높은 DPPH 라디칼 소거력을 가지는 것으로 분석되었으며, 각 분획물별 라디칼 소거능은 에틸아세테이트 > 부탄올 > 물 ≥ 클로로포름 순으로 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났다.
- 민들레 지상부 및 지하부 열수추출물의 DPPH 라디칼 소거능이 가장 우수한 것으로 분석되었으며, 추출물의 DPPH 라디칼 소거력은 열수추출물 > 70% 에탄올 추출물 > 50% 에탄올 추출물 >100% 에탄올 추출물 > 물 추출물 순으로 나타났다.
- ABTS 라디칼 소거력을 측정한 결과는 Table 5에 나타내었다. 민들레 지상부 및 지하부의 분획물 중 에틸아세테이트 분획물의 ABTS 라디칼 소거력이 가장 우수하였으며, 지하부 분획물이 지상부보다 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났다. 각 분획물별 ABTS 라디칼 소거능은 에틸아세테이트 > 부탄올 > 클로로포름 ≥ 물 순으로 분석되었으며, 에틸아세테이트 분획물을 제외한 클로로포름, 부탄올, 물 분획물의 경우 지상부 분획물이 지하부 보다 라디칼 소거능이 우수한 것으로 나타났다.
- 민들레 지하부도 지상부와 유사한 경향으로 열수추출물이 가장 우수한 라디칼 소거력을 가지는 것으로 분석되었으며, 추출물의 DPPH 라디칼 소거력은 열수추출물 > 70% 에탄올 추출물 > 50% 에탄올 추출물 > 100% 에탄올 추출물 > 물 추출물 순으로 나타났다.
- 지상부와 지하부의 분획물별 페놀성 화합물의 함량을 비교하면 에틸아세테이트 > 부탄올 > 클로로포름 ≥ 물 분획물의 순으로 나타났다. 분획물의 수율을 고려하여 지상부와 지하부의 총 페놀성 함량을 분석한 결과 지상부의 페놀성 화합물의 함량이 약 1.8배 많은 것으로 나타났다. 식물체에 함유되어 있는 페놀성 화합물은 라디칼 소거, 금속 킬레이터 및 singlet oxygen quencher 등의 다양한 기능을 가지고 있다(17).
- 22%로 제시한 바 있다. 이러한 결과들로부터 민들레의 경우 열수를 이용한 추출법이 추출수율을 증대시키는데 효과적인 방법으로 확인 할 수 있었다.
- Lee와 Im(16)은 흰민들레(Taraxacum coreanum) 추출물의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물이 우수한 NO 생성 억제 활성을 가지는 것으로 보고하였으며, Koh 등(21)은 민들레의 효소처리를 이용한 항염증 활성이 증진된 추출물 제조조건을 보고한 바 있다. 이러한 연구보고와 본 실험의 결과를 바탕으로 민들레의 기능성 소재개발의 가능성을 확인 할 수 있었다.
- 지상부 및 지하부의 에틸아세테이트 분획물이 LPS 처리에 의해 증가한 nitric oxide의 생성을 효과적으로 억제하였으며, 지상부 에틸아세테이트 분획물 20 µg/mL 처리시 LPS 처리에 의해 증가된 NO 생성을 약 50% 저해하는 것으로 나타났으며, 이러한 효과는 지하부 에틸아세테이트 분획물보다 우수한 것으로 분석되었다.
- 지상부 시료의 경우 에틸아세테이트 분획물 20-200 µg/mL 농도 범위에서 LPS 처리에 의해 증가한 nitric oxide의 생성이 농도의존적으로 감소하는 것을 확인 할 수 있었으며, 20 µg/mL 처리시 LPS 처리에 의해 증가된 NO 생성을 약 50% 저해하는 것으로 나타났다.
- 민들레 부위별 열수추출물을 용매 분획한 분획물들의 총 페놀성 화합물을 분석하여 Table 6에 나타내었다. 지상부와 지하부의 분획물 중 에틸아세테이트 분획물의 총 페놀성화합물의 함량이 가장 높은 것으로 나타났으며, DPPH 및 ABTS 라디칼 소거력을 분석한 결과에서 에틸아세테이트 분획물의 라디칼 소거능이 가장 우수하게 나타난 것은 페놀성 화합물이 라디칼 소거에 주요한 역할을 한 것으로 확인 할 수 있었다. 에틸아세테이트 분획물에 함유되어 있는 페놀성 화합물은 다른 분획물에 비하여 지상부의 경우 약 5-11배, 지하부는 약 7-36배 높게 함유되어 있는 것으로 분석되었다.
- 지상부와 지하부의 분획물별 페놀성 화합물의 함량을 비교하면 에틸아세테이트 > 부탄올 > 클로로포름 ≥ 물 분획물의 순으로 나타났다.
- 지하부의 경우 에틸아세테이트 분획물 20 µg/mL 처리시 nitric oxide 생성을 약 17% 저해하는 것으로 분석되어 NO 생성억제는 지상부 분획물이 우수한 것으로 나타났다.
- TEAC value는 민들레 추출물 및 분획물 시료의 농도에 따른 ABTS 라디칼 소거율을 측정하여 얻은 회귀식의 slope와 trolox의 표준곡선에서 얻은 slope의 비율로 계산하였으며, 이때 수용성 vitamin E analogue인 trolox의 TEAC value는 1로 나타내었다. 민들레 부위별 추출용매를 달리하여 얻은 추출물의 ABTS 라디칼 소거활성을 검토한 결과 지상부 및 지하부의 추출물중 열수추출물이 가장 높은 ABTS 라디칼 소거능을 나타낸 반면 물 추출물은 가장 낮은 소거능을 나타내어 DPPH 라디칼 소거능을 분석한 결과와 유사한 경향을 나타내었다. 50% 및 70% 에탄올 추출물의 라디칼 소거능의 유의적 차이는 나타나지 않았다.
- 클로로포름, 부탄올 및 물 분획물은 100-1,000 µg/mL 범위에서 NO 생성이 농도 의존적으로 감소하는 것을 확인하였으며, 에틸아세테이트 분획물에 비하여 NO 생성 억제효과는 낮은 것으로 나타났다.
후속연구
- 지상부 및 지하부의 에틸아세테이트 분획물이 LPS 처리에 의해 증가한 nitric oxide의 생성을 효과적으로 억제하였으며, 지상부 에틸아세테이트 분획물 20 µg/mL 처리시 LPS 처리에 의해 증가된 NO 생성을 약 50% 저해하는 것으로 나타났으며, 이러한 효과는 지하부 에틸아세테이트 분획물보다 우수한 것으로 분석되었다. 본 연구는 민들레 부위별 다양한 추출조건에서 획득한 추출물들의 총 항산화활성을 비교분석하여 제시함으로써 소재개발을 위한 추출조건을 설정하는데 활용될 수 있을 것으로 판단되며, 또한 각 분획물들의 총 항산화활성 및 RAW 264.7 대식세포주를 이용하여 LPS 처리에 의해 증가된 nitric oxide의 생성억제능을 비교분석하여 제시함으로써 기능성 소재개발에 있어서 기초자료로 활용 할 수 있을 것으로 판단된다.
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