최근 5년간 인천지역 설사환자에서 분리한 Salmonella Enteritidis와 Salmonella Typhimurium의 항생제 내성 양상 Antimicrobial Resistance Patterns of Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium Isolated from Diarrhea Patients in Incheon between 2008 and 2012원문보기
Objectives: Antimicrobial resistance and multidrug resistance patterns have been studied with a total of 189 samples of Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium isolated from diarrhea patients in Incheon from 2008 to 2012. Methods: Antimicrobial resistance tests were determined by Disc Diff...
Objectives: Antimicrobial resistance and multidrug resistance patterns have been studied with a total of 189 samples of Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium isolated from diarrhea patients in Incheon from 2008 to 2012. Methods: Antimicrobial resistance tests were determined by Disc Diffusion method. Results: The serological distribution of Salmonella spp. showed 108 strains (30.1%) of S. Enteritidis, 81 strains (22.6%) of S. Typhimirium, eight strains (8.0%) of S. Typhi, 11 strains ( 3.1% ) of S. Paratyphi, and the 151 other strains (42.1%). The separation rate of Salmonella spp. by year showed 14.5% (52 strains) in 2008, 13.6% (49 strains) in 2009, 22.8% (82 strains) in 2010, 25.3% (91 strains) in 2011, and 23.7% (85 strains) in 2012. Additionally, the separation rate of S. Enteritidis and S. Typhimirium in 2010 was the highest. The Salmonella spp. isolated from diarrhea patients showed significant differences according to age (p<0.05), gender (p<0.01) and medical institution (p<0.05). The highest resistance was found to the following antimicrobial agents: imipenem 77 strains, ampicillin 47 strains, ciprofloxacin 34 strains, nalidixic acid 29 strains for S. Enteritidis, and ampicillin 45 strains, nalidixic acid 45 strains for S. Typhimurium. Separated S. Enteritidis and S. Typhimurium resistance to the antibiotics by the year showed significant differences (p<0.05). The patterns of multidrug resistance rates were 43.1% (47 strains) for one drug, 8.3% (9 strains) for two drugs, 11.0% (12 strains) for three drugs, 15.62% (17 strains) for four drugs, and 13.7% (15 strains) for five or more drugs for S. Enteritidis. For S. Tyhpimurium, the rates were 15.0% (12 strains) for one drug, 10.0% (8 strains) for two drugs, 6.3% (five strains) for three drugs, 18.7% (15 strains) for four drugs, and 23.8% (19 strains) for five or more drugs. Conclusion: The antibiotic resistance issue is directly related to people's lives. Thus, the usage of antibiotics should be reduced in order to manage antibiotic resistance.
Objectives: Antimicrobial resistance and multidrug resistance patterns have been studied with a total of 189 samples of Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium isolated from diarrhea patients in Incheon from 2008 to 2012. Methods: Antimicrobial resistance tests were determined by Disc Diffusion method. Results: The serological distribution of Salmonella spp. showed 108 strains (30.1%) of S. Enteritidis, 81 strains (22.6%) of S. Typhimirium, eight strains (8.0%) of S. Typhi, 11 strains ( 3.1% ) of S. Paratyphi, and the 151 other strains (42.1%). The separation rate of Salmonella spp. by year showed 14.5% (52 strains) in 2008, 13.6% (49 strains) in 2009, 22.8% (82 strains) in 2010, 25.3% (91 strains) in 2011, and 23.7% (85 strains) in 2012. Additionally, the separation rate of S. Enteritidis and S. Typhimirium in 2010 was the highest. The Salmonella spp. isolated from diarrhea patients showed significant differences according to age (p<0.05), gender (p<0.01) and medical institution (p<0.05). The highest resistance was found to the following antimicrobial agents: imipenem 77 strains, ampicillin 47 strains, ciprofloxacin 34 strains, nalidixic acid 29 strains for S. Enteritidis, and ampicillin 45 strains, nalidixic acid 45 strains for S. Typhimurium. Separated S. Enteritidis and S. Typhimurium resistance to the antibiotics by the year showed significant differences (p<0.05). The patterns of multidrug resistance rates were 43.1% (47 strains) for one drug, 8.3% (9 strains) for two drugs, 11.0% (12 strains) for three drugs, 15.62% (17 strains) for four drugs, and 13.7% (15 strains) for five or more drugs for S. Enteritidis. For S. Tyhpimurium, the rates were 15.0% (12 strains) for one drug, 10.0% (8 strains) for two drugs, 6.3% (five strains) for three drugs, 18.7% (15 strains) for four drugs, and 23.8% (19 strains) for five or more drugs. Conclusion: The antibiotic resistance issue is directly related to people's lives. Thus, the usage of antibiotics should be reduced in order to manage antibiotic resistance.
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문제 정의
이에 본 연구는 2008년 1월부터 2012년 12월까지 인천지역에 설사증상으로 입원 또는 내원한 환자의 분변에서 분리한 189주의 Salmonella Enteritidis와 Salmonella Typhimurium을 대상으로 항생제 내성 및 다제 내성 양상을 조사하였고, 또한 이들 변수간의 관련성을 분석하여 항생제 치료와 내성관리를 위한 자료로 제공하고자 수행하였다.
제안 방법
O항원 혈청형 분석을 위하여 균액에 항혈청을 떨어뜨려 혼합한 후 30초 이내에 응집을 일으키는 혈청형을 O혈청형으로 동정하였다. H항원 결정시험은 Motility GI (10 ml)에 천자 접종하여 37℃에서 16-18시간 배양한 후 배지의 um 부분을 루프를 이용하여 버리고 아래로 자라 내려간 살모넬라균의 덩어리 일부를 Veal Infusion Broth(VIB, Difco, USA)에 접종하여 37℃에서 6-8시간 배양하여 0.6% formalin saline 동량을 배양액에 넣어 30분 동안 반응하여 균을 고정시키고 50℃ 항온수조에서 1-2시간 정치 반응한 후 응집 여부를 확인해서 phase 1을 결정했다. phase 2 항원의 결정시험은 이미 만들어 둔 Motility GI 배지를 끊는 물에 중탕하여 gel 상태로 만든 후, 45-50℃로 식히고 phase 1에서 먼저 확인된 항원의 항혈청 농축액 10 μl를 GI 배지 tube 사면에 떨어뜨리고, 잘 교반하여 고르게 섞어 굳인 후 실험 균주를 접종하여 37에서 18시간 정도 배양한 후 배지 윗부분을 덜어내고, phase 1 항원 결정 시험과 동일하게 수행하였다.
phase 2 항원의 결정시험은 이미 만들어 둔 Motility GI 배지를 끊는 물에 중탕하여 gel 상태로 만든 후, 45-50℃로 식히고 phase 1에서 먼저 확인된 항원의 항혈청 농축액 10 μl를 GI 배지 tube 사면에 떨어뜨리고, 잘 교반하여 고르게 섞어 굳인 후 실험 균주를 접종하여 37에서 18시간 정도 배양한 후 배지 윗부분을 덜어내고, phase 1 항원 결정 시험과 동일하게 수행하였다. Kauffmann White scheme에 의한 O 항원형, H 항원 phase 1 및 phase 2 항원형에 따라 S. Enteritidis, S. Typhimiruim, S. Typhi, S. Paratyphi 혈청형을 최종 확인했다.16)
생화학적 동정에 의해 살모넬라로 확인된 균주에 대해서 살모넬라 진단용항혈청을 이용하여 혈청형을 동정하였다. O항원 혈청형 분석을 위하여 균액에 항혈청을 떨어뜨려 혼합한 후 30초 이내에 응집을 일으키는 혈청형을 O혈청형으로 동정하였다. H항원 결정시험은 Motility GI (10 ml)에 천자 접종하여 37℃에서 16-18시간 배양한 후 배지의 um 부분을 루프를 이용하여 버리고 아래로 자라 내려간 살모넬라균의 덩어리 일부를 Veal Infusion Broth(VIB, Difco, USA)에 접종하여 37℃에서 6-8시간 배양하여 0.
과 VITEK II compact(bioMeriex, France) AST-N169 항생제 카드를 사용하였다. Triptic soy agar (Difco, USA)에 접종하여 37℃에서 24시간씩 2회 계대하여 순수 분리되었음을 확인한 후 MHB (Muller Hinton Broth, Difco, USA)에 McFarland No. 0.5가 되도록 현탁하였다. 면봉으로 균액을 묻혀 MHA (Muller Hinton Agar, Difco, USA) 배지 표면에 골고루 바른 다음 실온에 10분간 방치한 후 항생제 disc(BBL, Becton Dickinson)를 올려놓았다.
phase 2 항원의 결정시험은 이미 만들어 둔 Motility GI 배지를 끊는 물에 중탕하여 gel 상태로 만든 후, 45-50℃로 식히고 phase 1에서 먼저 확인된 항원의 항혈청 농축액 10 μl를 GI 배지 tube 사면에 떨어뜨리고, 잘 교반하여 고르게 섞어 굳인 후 실험 균주를 접종하여 37에서 18시간 정도 배양한 후 배지 윗부분을 덜어내고, phase 1 항원 결정 시험과 동일하게 수행하였다.
5가 되도록 현탁하였다. 면봉으로 균액을 묻혀 MHA (Muller Hinton Agar, Difco, USA) 배지 표면에 골고루 바른 다음 실온에 10분간 방치한 후 항생제 disc(BBL, Becton Dickinson)를 올려놓았다. Plate를 37℃에서 24시간 배양한 후 억제환의 크기를 mm 단위로 측정하여 CLSI 기준에 따라 판정하였다.
생화학적 동정에 의해 살모넬라로 확인된 균주에 대해서 살모넬라 진단용항혈청을 이용하여 혈청형을 동정하였다. O항원 혈청형 분석을 위하여 균액에 항혈청을 떨어뜨려 혼합한 후 30초 이내에 응집을 일으키는 혈청형을 O혈청형으로 동정하였다.
설사환자에서 채취한 분변을 Tetrathionate Broth Base(TTB, Difco, USA) 5 ml에 접종하고 37℃에서 하룻밤 진탕배양 한 후 Xylose-Lysine Desoxycholate agar(XLD agar, Difco, USA) 배지 및 Salmonella Shigella agar(SS agar, Difco, USA)에 도말 접종하여 37℃에서 24시간 배양하였다. 전형적인 무색투명한 집락 또는 흑색 집락을 선별하여 Kligler Iron Agar(KIA, Difco, USA) 에 접종한 후 사면이 적색이고, 고층부가 흑색이며 urease 시험에서 음성인 균을 살모넬라균으로 추정하였다. 살모넬라균으로 추정된 집락은 Tryptic soy agar(Difco)에 도말하여 37℃에서 24시간 배양함으로써 순수 배양되었음을 확인하였다.
대상 데이터
2008년 1월부터 2012년 12월까지 인천지역에 설사증상으로 입원 또는 내원한 환자의 분변에서 분리한 189주의 S. Enteritidis와 S. Typhimurium을 실험 균주로 사용하였다.
데이터처리
각 실험 항목에 따라 빈도, 백분율을 구하여 전반적인 경향을 파악하고, 변수간의 유의성 검증은 χ2-test를 실시하였다.
본 연구 결과는 통계분석 프로그램인 SPSS(version 21)를 이용하여 분석을 하였다. 각 실험 항목에 따라 빈도, 백분율을 구하여 전반적인 경향을 파악하고, 변수간의 유의성 검증은 χ2-test를 실시하였다.
이론/모형
면봉으로 균액을 묻혀 MHA (Muller Hinton Agar, Difco, USA) 배지 표면에 골고루 바른 다음 실온에 10분간 방치한 후 항생제 disc(BBL, Becton Dickinson)를 올려놓았다. Plate를 37℃에서 24시간 배양한 후 억제환의 크기를 mm 단위로 측정하여 CLSI 기준에 따라 판정하였다.18) 사용한 항생제는 Ampicillin, Amoxicillin/ Clavalanic acid, Ampicillin/Sulbactam, Cephalothin, Cefotaxime, Cefotetan, Cefoxitin, Cefazolin, Cefriaxzone, Imipenem, Chloramphenicol, Gentamicin, Amikacin, Nalidixic acid, Ciprofloxacin, Tetracycline, Trimethoprim/ Sulfamethoxazole 등 17종이다.
항생제에 대한 내성은 Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI)의 방법에 따라 디스크 확산법17)과 VITEK II compact(bioMeriex, France) AST-N169 항생제 카드를 사용하였다. Triptic soy agar (Difco, USA)에 접종하여 37℃에서 24시간씩 2회 계대하여 순수 분리되었음을 확인한 후 MHB (Muller Hinton Broth, Difco, USA)에 McFarland No.
성능/효과
5%이었다.22) 2000년에서 2002년까지 터키에서 분리된 살모넬라균 중 S. Enteritidis가 47.7%, S.Typhimurium이 34.7%이었으며,23) 동북부 인도에서 분리된 살모넬라균 중 S. Enteritidis가 37.9%였으며, 벨기에에서 분리된 살모넬라균 중 S. Enteritidis와 S.Typhimurium이 각각 20.4%를 차지하였다고 보고한 바24) 본 연구와 유사한 결과를 보였다.
4,5) 유럽 국가의 경우 항생제의 연간 소비량은 약 50%, 미국인 경우 80% 이상을 동물의 치료에 사용하고 있으며, 우리나라 경우 항생제 사용량은 2006년 이후 항생제 사용량이 줄고 있지만 OECD 가입국들과 비교하면 항생제의 남용과 부적절한 항생제로 인한 항생제 내성률도 세계 최고라는 보고가 있어6-7) 이로인해 지역사회에 내성 세균의 발현이 증가되고 있으며, 동물로부터 사람에게 내성세균과 내성유전자가 직간접적으로 전파되어 심각한 사회문제가 되고 있다고 한다.8-10)
Table 1은 연도별 인천지역 설사환자에서 분리한 살모넬라균의 분포를 나타낸 표이다. Table 1에서 보는 바와 같이 살모넬라균의 혈청학적 동정 분포는 S. Enteritidis가 108주 (30.1%)로 가장 많이 분리되었으며, S. Typhimirium 81주 (22.6%), S.Typhi 8주 (8.0%), S. Paratyphi 11주 (3.1%) 그리고 기타 살모넬라속균이 151주 (42.1%)를 차지하였으며, 연도별로 2011년이 91주(25.3%)로 가장 많이 분리되었으며, 2008년 52주 (14.5%), 2009년 49주 (13.6%), 2010년 82주 (22.8%), 2012년 85주 (23.7%)로 나타났으며, 이 중 S. Enteritidis는 2010 년 32주 (29.6%)로 가장 높았으며, 2011년 25주 (23.1%), 2009년 23주 (21.3%), 2012년 17주 (15.7%), 2008년 11주 (10.2%)순으로 분리되었으며, S.Typhimirium은 2010년 21주 (25.9%)로 가장 높았 으며, 2011년 20주 (24.7%), 2008년 16주 (19.8%), 2009년 12주 (14.8%), 2012년 12주 (14.8%) 순으로 분리되었다.
최소 1종류 이상의 약제에 대해 최고 9종류의 약제에 대해 내성을 나타내는 다양한 내성형을 보였다. 내성 유형을 살펴보면 S. Enteritidis인 경우 전체적으로 1제 내성이 47주(43.1%), 2제 내성 9주(8.3%), 3제 내성 12주(11.0%), 4제 내성 17주(15.62%), 그리고 5제 이상 내성은 15주(13.7%)로 나타났으며, S. Typhimurium인 경우 전체적으로 1제 내성이 12주(15.0%), 2제 내성 8주(10.0%), 3제 내성 5주(6.3%), 4제 내성 15주(18.7%), 그리고 5제 이상 내성은 19주(23.8%)로 나타났다. 또한 연도별 S.
또한 연도별로 보면 2008년은 tetracycline, ampicillin, 2009년 nalidixic acid, ampicillin, tetracycline이, 2010년 ampicillin, nalidixic acid가, 2011년 nalidixic acid, ampicillin, 2012년 ampicillin, nalidixic acid이 가장 높게 나타나 연도별로 비교한 결과 뚜렷한 유의한 차이를 나타났다(p<0.05).
분리된 S. Enteritidis의 항생제 내성결과 imipenem 77주, ampicillin 47주, ciprofloxacin 34주, nalidixic acid 29주 순이었다. 또한 연도별로 보면 2008년은 ampicillin와 nalidixic acid, 2009년 imipenem, ampicillin와 tetracycline, 2010년 imipenem, ampicillin와 nalidixic acid, 2011년 imipenem, nalidixic acid와 ampicillin, 2012년 imipenem, ampicillin와 ciprofloxacin이 가장 높게 나타나 연도별로 유의한 차이를 나타났다(p<0.
분리된 S. Typhimurium의 항생제 내성결과 ampicillin과 nalidixic acid 모두 45주, chlorampheicol 25주, tetracycline 24주, imipenem 20주 순이었다. 또한 연도별로 보면 2008년은 tetracycline, ampicillin, 2009년 nalidixic acid, ampicillin, tetracycline이, 2010년 ampicillin, nalidixic acid가, 2011년 nalidixic acid, ampicillin, 2012년 ampicillin, nalidixic acid이 가장 높게 나타나 연도별로 비교한 결과 뚜렷한 유의한 차이를 나타났다(p<0.
살모넬라균의 혈청 학적 동정 분포는 S. Enteritidis가 108주(30.1%)로 가장 많이 분리되었으며, S. Typhimirium 81주(22.6%), S. Typhi 8주(8.0%), S. Paratyphi 11주(3.1%) 그리고 기타 살모넬라속균이 151주(42.1%)를차지하였다.
살모넬라균으로 추정된 집락은 Tryptic soy agar(Difco)에 도말하여 37℃에서 24시간 배양함으로써 순수 배양되었음을 확인하였다. 순수 배양된 균을 API 20E(bioMerieux, France)에 접종하여 37℃, 18시간 배양한 후 결과를 판독하여 살모넬라균임을 최종 확인하였다.15)
7%(5주/12주)로 나타났다. 이 연구결과로 S. Enteritidis보다 S. Typhimurium의 다제 내성률이 높은 것으로 나타났다.
Typhimurium의 다제내성 양상은 Table 5와 6과 같다. 최소 1종류 이상의 약제에 대해 최고 9종류의 약제에 대해 내성을 나타내는 다양한 내성형을 보였다. 내성 유형을 살펴보면 S.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
분리된 S. Enteritidis의 항생제 내성결과를 연도별로 보았을 때 어떤 차이를 보이는가?
Enteritidis의 항생제 내성결과 imipenem 77주, ampicillin 47주, ciprofloxacin 34주, nalidixic acid 29주 순이었다. 또한 연도별로 보면 2008년은 ampicillin와 nalidixic acid, 2009년 imipenem, ampicillin 와 tetracycline, 2010년 imipenem, ampicillin와 nalidixic acid, 2011년 imipenem, nalidixic acid와 ampicillin, 2012년 imipenem, ampicillin와 ciprofloxacin이 가장 높게 나타나 연도별로 유의한 차이를 나타났다(p<0.05).
항생제란 무엇인가?
항생제는 세균이 다른 미생물의 생장, 번식을 억제하거나 파괴하기 위하여 생산하는 물질로 동물 질환의 치료와 발육촉진을 위해 사료에 첨가하기도 하고, 각종 생활용품에서 사용하는 등 산업적으로 다양하게 이용하고 있는 실정이다.4,5) 유럽 국가의 경우 항생제의 연간 소비량은 약 50%, 미국인 경우 80% 이상을 동물의 치료에 사용하고 있으며, 우리나라 경우 항생제 사용량은 2006년 이후 항생제 사용량이 줄고 있지만 OECD 가입국들과 비교하면 항생제의 남용과 부적절한 항생제로 인한 항생제 내성률도 세계 최고라는 보고가 있어6-7) 이로인해 지역사회에 내성 세균의 발현이 증가되고 있으며, 동물로부터 사람에게 내성세균과 내성유전자가 직간접적으로 전파되어 심각한 사회문제가 되고 있다고 한다.
항생제는 어떻게 이용하고 있는가?
항생제는 세균이 다른 미생물의 생장, 번식을 억제하거나 파괴하기 위하여 생산하는 물질로 동물 질환의 치료와 발육촉진을 위해 사료에 첨가하기도 하고, 각종 생활용품에서 사용하는 등 산업적으로 다양하게 이용하고 있는 실정이다.4,5) 유럽 국가의 경우 항생제의 연간 소비량은 약 50%, 미국인 경우 80% 이상을 동물의 치료에 사용하고 있으며, 우리나라 경우 항생제 사용량은 2006년 이후 항생제 사용량이 줄고 있지만 OECD 가입국들과 비교하면 항생제의 남용과 부적절한 항생제로 인한 항생제 내성률도 세계 최고라는 보고가 있어6-7) 이로인해 지역사회에 내성 세균의 발현이 증가되고 있으며, 동물로부터 사람에게 내성세균과 내성유전자가 직간접적으로 전파되어 심각한 사회문제가 되고 있다고 한다.
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