본 연구에서는 2004년 1월부터 2008년 12월까지 인천지역 5개 종합 병 의원에 설사증상으로 입원 또는 내원한 환자의 대변에서 분리한 115주의 S. Enteritidis의 항생제 내성 및 다제내성 양상을 모니터링하였다. 그 결과, 가장 내성율이 높은 항생제는 nalidixic acid (54.8%)이었고, ampicillin (40.0%), ticarcillin (38.3%), chloramphenicol (20.9%), tetracycline (17.4%) 순이었다. 분리균의 91.3%는 1제 이상의 항생제에 내성이 있었다. 항생제 내성 유형을 살펴본 결과 nalidixic acid 단일 내성이 44.3%로 가장 높았으며, ampicillin-chloramphenicol-ticarcillin (11.3%) 및 ampicillin-ticarcillin (10.4%) 순이었다. 전체적으로 1제 내성이 51.9%, 2제 내성 18.2%, 3제 내성 14.5%, 4제 내성 5.8% 그리고 5제 이상 내성은 9.7%이었다.
본 연구에서는 2004년 1월부터 2008년 12월까지 인천지역 5개 종합 병 의원에 설사증상으로 입원 또는 내원한 환자의 대변에서 분리한 115주의 S. Enteritidis의 항생제 내성 및 다제내성 양상을 모니터링하였다. 그 결과, 가장 내성율이 높은 항생제는 nalidixic acid (54.8%)이었고, ampicillin (40.0%), ticarcillin (38.3%), chloramphenicol (20.9%), tetracycline (17.4%) 순이었다. 분리균의 91.3%는 1제 이상의 항생제에 내성이 있었다. 항생제 내성 유형을 살펴본 결과 nalidixic acid 단일 내성이 44.3%로 가장 높았으며, ampicillin-chloramphenicol-ticarcillin (11.3%) 및 ampicillin-ticarcillin (10.4%) 순이었다. 전체적으로 1제 내성이 51.9%, 2제 내성 18.2%, 3제 내성 14.5%, 4제 내성 5.8% 그리고 5제 이상 내성은 9.7%이었다.
This study describes the antimicrobial susceptibility and multidrug resistance patterns in 115 isolates of Salmonella enterica serovar Enteritidis from diarrhea patients in Incheon from Jan. 2004 to Dec. 2008. Overall, the highest rate of resistance was found to the following antimicrobial agents: n...
This study describes the antimicrobial susceptibility and multidrug resistance patterns in 115 isolates of Salmonella enterica serovar Enteritidis from diarrhea patients in Incheon from Jan. 2004 to Dec. 2008. Overall, the highest rate of resistance was found to the following antimicrobial agents: nalidixic acid 54.8%, ampicillin 40.0%, ticarcillin 38.3%, chloramphenicol 20.9%, and tetracycline 17.4%. 91% (104 isolates) were resistant to one or more antimicrobial agents tested. Among the described antimicrobial resistant patterns, the predominant patterns were only nalidixic acid (44.3%), ampicillin-chloramphenicol-ticarcillin (11.3%,) and ampicillin-ticarcillin (10.4%). Overall, the resistant rate to one drug was 51.9%, two drugs 18.2%, three drugs 14.5%, four drugs 5.8%, and five or more drugs 9.7%.
This study describes the antimicrobial susceptibility and multidrug resistance patterns in 115 isolates of Salmonella enterica serovar Enteritidis from diarrhea patients in Incheon from Jan. 2004 to Dec. 2008. Overall, the highest rate of resistance was found to the following antimicrobial agents: nalidixic acid 54.8%, ampicillin 40.0%, ticarcillin 38.3%, chloramphenicol 20.9%, and tetracycline 17.4%. 91% (104 isolates) were resistant to one or more antimicrobial agents tested. Among the described antimicrobial resistant patterns, the predominant patterns were only nalidixic acid (44.3%), ampicillin-chloramphenicol-ticarcillin (11.3%,) and ampicillin-ticarcillin (10.4%). Overall, the resistant rate to one drug was 51.9%, two drugs 18.2%, three drugs 14.5%, four drugs 5.8%, and five or more drugs 9.7%.
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문제 정의
하지만 최근의 항생제 내성균주의 증가로 인하여 항생제의 선택에 어려움을 겪고 있다(6). 본 연구는 2004년 1월부터 2008년 12월까지 인천지역 병의원에 내원한 설사질환자의 분변에서 분리한 S. Enteritidis 115주에 대해 16개의 항생제 내성 및 다제내성 양상을 살펴보았다. 항생제 내성 시험결과 nalidixic acid (54.
본 연구는 인천지역 5개 종합 병의원에 설사증상으로 내원한 환자의 분변에서 분리된 S. Enteritidis의 항생제 내성 및 다제내성 양상을 살펴보았다. 세균의 항생제 내성 발생의 기전은 선택의 압력, 내성의 출현 및 전파 등 여러 가지로 이해되고 있기 때문에 그 접근 방법 또한 세포학적, 유전학적, 임상적 및 인구에 대한 역학적 연구 등 다양하다(12).
이에 본 연구에서는 2004년 1월부터 2008년 12월까지 인천지역 5개 종합 병·의원에 설사증상으로 입원 또는 내원한 환자의 대변에서 분리한 115주의 S. Enteritidis 대상으로 항생제 내성 및 다제내성 양상을 조사하였고, 이를 항생제 치료와 내성관리를 위한 기초 자료로 제공하고자 하였다.
제안 방법
O항원 혈청형 분석을 위하여 균액에 항혈청을 떨어뜨려 혼합한 후 30초 이내에 응집을 일으키는 혈청형을 O혈청형으로 동정하였다. H항원 결정시험은 Motility GI (10 ml)에 천자 접종하여 37℃에서 16~18시간 배양한 후 배지의 윗부분을 루프를 이용하여 버리고 아래로 자라 내려간 살모넬라균의 덩어리 일부를 Veal Infusion broth (VIB, Difco)에 접종하여 37℃에서 6~8시간 배양하여 0.6% formalin saline 동량을 배양액에 넣어 30분 동안 반응하여 균을 고정시키고 50℃ 항온수조에서 1~2시간 정치 반응한 후 응집 여부를 확인해서 phase 1을 결정했다. phase 2 항원의 결정 시험은 이미 만들어 둔 Motility GI 배지를 끊는 물에 중탕하여 gel 상태로 만든 후, 45~50℃로 식히고 phase 1에서 먼저 확인된 항원의 항혈청 농축액 10 µl를 GI 배지 tube 사면에 떨어뜨리고, 잘 교반하여 고르게 섞어 굳인 후 실험 균주를 접종하여 37℃에서 18시간 정도 배양한 후 배지 윗부분을 덜어내고, phase 1 항원 결정 시험과 동일하게 수행하였다.
O항원 혈청형 분석을 위하여 균액에 항혈청을 떨어뜨려 혼합한 후 30초 이내에 응집을 일으키는 혈청형을 O혈청형으로 동정하였다. H항원 결정시험은 Motility GI (10 ml)에 천자 접종하여 37℃에서 16~18시간 배양한 후 배지의 윗부분을 루프를 이용하여 버리고 아래로 자라 내려간 살모넬라균의 덩어리 일부를 Veal Infusion broth (VIB, Difco)에 접종하여 37℃에서 6~8시간 배양하여 0.
항생제에 대한 감수성은 Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)의 방법에 따라 디스크 확산법으로 실시하였다(8). Triptic Soy agar (Difco)에 접종하여 37℃에서 24시간씩 2회 계대하여 순수 분리되었음을 확인한 후 Muller Hinton Broth(MHB, Difco)에 McFarland No. 0.5가 되도록 현탁하였다. 면봉으로 균액을 묻혀 Muller Hinton Agar (MHA, Difco) 배지 표면에 골고루 바른 다음 실온에 10분간 방치한 후 항생제 disc(BBL, Becton Dickinson)를 올려놓았다.
phase 2 항원의 결정 시험은 이미 만들어 둔 Motility GI 배지를 끊는 물에 중탕하여 gel 상태로 만든 후, 45~50℃로 식히고 phase 1에서 먼저 확인된 항원의 항혈청 농축액 10 µl를 GI 배지 tube 사면에 떨어뜨리고, 잘 교반하여 고르게 섞어 굳인 후 실험 균주를 접종하여 37℃에서 18시간 정도 배양한 후 배지 윗부분을 덜어내고, phase 1 항원 결정 시험과 동일하게 수행하였다.
5가 되도록 현탁하였다. 면봉으로 균액을 묻혀 Muller Hinton Agar (MHA, Difco) 배지 표면에 골고루 바른 다음 실온에 10분간 방치한 후 항생제 disc(BBL, Becton Dickinson)를 올려놓았다. Plate를 37℃에서 24시간 배양한 후 억제환의 크기를 mm 단위로 측정하여 CLSI 기준에 따라 판정하였다(9).
생화학적 동정에 의해 살모넬라로 확인된 균주에 대해서 살모넬라 진단용 항혈청을 이용하여 혈청형을 동정하였다. 시험균의 O군, Vi 항혈청은 국립보건원에서 공급 받은 것을 사용하였으며 기타의 살모넬라 항혈청은 Difco 및 Denka Seiken (Japan)사의 살모넬라 검사용 항혈청을 사용하였다.
전형적인 무색투명한 집락 또는 흑색 집락을 선별하여 Kligler Iron agar (KIA, Difco)에 접종한 후 사면이 적색이고 고층부가 흑색이며 Urease 시험에서 음성인 균을 살모넬라균으로 추정하였다.
대상 데이터
2004년 1월부터 2008년 12월까지인천지역 5개 종합 병·의원(3개 종합병원, 2개 소아과)에 설사증상으로 입원 또는 내원한 환자의 분변을 2004년 2053건, 2005년 2049건, 2006년 2288건, 2007년 2183건, 2008년 2228건 수거하여 총 10,801건에서 분리한 115주의 S. Enteritidis균을 대상으로 하였다.
Plate를 37℃에서 24시간 배양한 후 억제환의 크기를 mm 단위로 측정하여 CLSI 기준에 따라 판정하였다(9). 본 실험에 사용한 항생제 디스크는 Table 1과 같이 총 16종을 사용하였다.
생화학적 동정에 의해 살모넬라로 확인된 균주에 대해서 살모넬라 진단용 항혈청을 이용하여 혈청형을 동정하였다. 시험균의 O군, Vi 항혈청은 국립보건원에서 공급 받은 것을 사용하였으며 기타의 살모넬라 항혈청은 Difco 및 Denka Seiken (Japan)사의 살모넬라 검사용 항혈청을 사용하였다.
이론/모형
면봉으로 균액을 묻혀 Muller Hinton Agar (MHA, Difco) 배지 표면에 골고루 바른 다음 실온에 10분간 방치한 후 항생제 disc(BBL, Becton Dickinson)를 올려놓았다. Plate를 37℃에서 24시간 배양한 후 억제환의 크기를 mm 단위로 측정하여 CLSI 기준에 따라 판정하였다(9). 본 실험에 사용한 항생제 디스크는 Table 1과 같이 총 16종을 사용하였다.
항생제에 대한 감수성은 Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)의 방법에 따라 디스크 확산법으로 실시하였다(8). Triptic Soy agar (Difco)에 접종하여 37℃에서 24시간씩 2회 계대하여 순수 분리되었음을 확인한 후 Muller Hinton Broth(MHB, Difco)에 McFarland No.
성능/효과
4%)순으로 내성을 보였다. 5년 동안 항생제 내성 추이를 살펴본 결과, 연도별로 뚜렷한 유의성은 없었다. 이는 특정 연도에 분리 균주수가 적어 연도별 분리 균주수가 일정하지 않은 것도 한 원인으로 작용했을 것으로 사료되며, 2005년에 분리된 S.
7%) 순이었다. 가장 높은 내성을 보인 항생제는 nalidixic acid (54.8%)이었고, ampicillin (40.0%), ticarcillin (38.3%), chloramphenicol (20.9%), tetracycline (17.4%) 순이었다(Fig. 1).
공시약제에 대한 분리주의 항생제 내성 유형은 20종이었으며, 최소 1종류 이상의 약제에 대해 최고 8종류의 약제에 대해 내성을 나타내는 다양한 내성형을 보였다. 내성 유형을 살펴보면 nalidixic acid 단일 내성이 44.
공시약제에 대한 분리주의 항생제 내성 유형은 20종이었으며, 최소 1종류 이상의 약제에 대해 최고 8종류의 약제에 대해 내성을 나타내는 다양한 내성형을 보였다. 내성 유형을 살펴보면 nalidixic acid 단일 내성이 44.3%로 가장 높았으며, ampicillinchloramphenicol-ticarcillin (11.3%) 및 ampicillin-ticarcillin (10.4%) 순이었다. 전체적으로 1제 내성이 51.
본 실험에서 2가지 이상의 항생제에 대해 내성을 보이는 다제내성은 48.2%이었으며, 4제 이상의 내성은 15.5%였다. 박 등은 1996년부터 2001년까지 서울시내 설사환자에서 분리한 S.
2%(20)였다. 본 연구와 박 등의 연구를 비교해 본 결과, nalidixic acid, ampicillin, ticarcillin, chloramphenicol 항생제 내성이 본 연구결과에서 높게 나타났다. 박 등의 연구는 본 연구와 대상자가 동일한 설사환자에서 분리한 S.
분리된 S. Enteritidis의 항생제 내성현황을 디스크확산법으로 측정한 결과, 가장 높은 감수성을 보인 항생제는 ciprofloxacin (100.0%)이었으며 cefotetan (99.1%), sulfamethoxazole/trimethoprim (98.3%), cefepime (97.4%), cefazolin (95.7%) 순이었다. 증등도 내성은 ampicillin/sulbactam (8.
7%의 분리율을 보였다. 살모넬라속균의 혈청학적 동정 분포를 살펴본 결과, S. Enteritidis가 115주(38.7%)로 가장 많이 분리되었으며, S. Typhimiruim 62주 (20.9%), S. Infantis 19주(6.4%), S. Braenderup 10주(3.4%) 그리고 기타 살모넬라속균이 91주 (30.6%)를 차지하였다. 연도별 살모넬라균속 분리율을 보면 2007년이 90주(30.
살모넬라균으로 추정된 집락은 Tryptic Soy agar (Difco)에 도말하여 37℃에서 24시간 배양함으로써 순수 배양되었음을 확인하였다. 순수 배양된 균을 API 20E(bioMerieux, France)에 접종하여 37℃, 18시간 배양한 후 결과를 판독하여 살모넬라균임을 최종 확인하였다(3).
연령별 특성을 살펴보면, 전체 설사질환자와 S. Enteritidis가 분리된 설사질환자 모두 10대 미만의 연령층 비중이 50% 이상을 차지하는 분포를 보였다(Table 3).
0%로 증가하였다고 보고하였다(25). 이는 본 연구의 48.2%가 2제 이상의 항생제 내성을 보인 것 보다 훨씬 낮은 다제내성율을 보여 전 세계적으로 매우 다양한 항생제 내성패턴을 나타내고 있었다.
인천지역 5개 종합 병·의원에 내원한 환자 중 설사증상을 나타내는 10,801명의 분변 중 297명에게서 살모넬라균이 분리되어 2.7%의 분리율을 보였다.
4%) 순이었다. 전체적으로 1제 내성이 51.9%, 2제 내성 18.2%, 3제 내성 14.5%, 4제 내성 5.8% 그리고 5제 이상 내성은 9.7%이었다 (Table 5).
내성양상을 연도별로 비교한 결과 뚜렷한 유의성은 없었다. 즉, 2005년도에 분리된 S. Enteritidis는 ampicillin, ticarcillin등의 항생제 내성이 다른 연도에 비해 비특이적으로 높게 나오는 등 연도별 항생제 내성의 증감에 있어 유의성 있는 차이는 없는 것으로 나타났다. 단, 특징적인 것은 2008년 이전까지 cefotetan, cefepime, sulfamethoxazole/trimethoprim 항생제에 내성을 가진 균주가 없었으나 2008년부터 이들 항생제에 대해 내성이 있는 균주가 나타났으며, imipenem, amikacin, ciprofloxacin 항생제는 5년 동안 100% 감수성을 나타내었다(Table 4).
Enteritidis 115주에 대해 16개의 항생제 내성 및 다제내성 양상을 살펴보았다. 항생제 내성 시험결과 nalidixic acid (54.8%)의 내성이 가장 높았으며, ampicillin (40.0%), ticarcillin (38.3%), chloramphenicol (20.9%), tetracycline (17.4%)순으로 내성을 보였다. 5년 동안 항생제 내성 추이를 살펴본 결과, 연도별로 뚜렷한 유의성은 없었다.
후속연구
Enteritidis 균주가 ampicillin 등의 항생제에 대해 내성이 다른 연도에 비해 높았는데, 이에 대한 원인을 규명하기 위해서는 임상 역학적 자료조사 등을 통해 향후 추가 분석이 필요하다고 판단된다. 또한, 앞으로 정확한 연도별 추이 분석을 위해서는 분리 균주수가 더 확보되고 장기간에 걸친 데이터 축적이 필요할 것으로 사료된다.
그러므로, 우리나라의 항생제 내성관리를 위해 우선적으로 항생제 사용량을 줄여야 할 것이며 이를 위해서는 지속적인 항생제 관리가 매우 필요하다고 생각되다. 앞으로 장기간의 걸친 데이터를 축적하고 항생제 내성 획득에 기여하는 위험요인 규명에 대한분자역학적인 연구가 필요하다. 즉, pulsed field gel electrophoresis (PFGE) typing을 이용하여 유전적 양상 및 특성을 연구하고, S.
5년 동안 항생제 내성 추이를 살펴본 결과, 연도별로 뚜렷한 유의성은 없었다. 이는 특정 연도에 분리 균주수가 적어 연도별 분리 균주수가 일정하지 않은 것도 한 원인으로 작용했을 것으로 사료되며, 2005년에 분리된 S. Enteritidis 균주가 ampicillin 등의 항생제에 대해 내성이 다른 연도에 비해 높았는데, 이에 대한 원인을 규명하기 위해서는 임상 역학적 자료조사 등을 통해 향후 추가 분석이 필요하다고 판단된다. 또한, 앞으로 정확한 연도별 추이 분석을 위해서는 분리 균주수가 더 확보되고 장기간에 걸친 데이터 축적이 필요할 것으로 사료된다.
앞으로 장기간의 걸친 데이터를 축적하고 항생제 내성 획득에 기여하는 위험요인 규명에 대한분자역학적인 연구가 필요하다. 즉, pulsed field gel electrophoresis (PFGE) typing을 이용하여 유전적 양상 및 특성을 연구하고, S. Enteritidis에 의한 질병발생시 역학의 기초 자료로 활용하기 위해서는 PFGE 패턴 및 다른 분자역학적 방법으로 얻은 결과와의 비교 분석 등도 필요하다고 생각된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
살모넬라균 중 운동성이 없는 균은 무엇인가?
살모넬라균은 그람음성의 비아포성 통성혐기성 간균으로 주모를 가지고 있어 대부분 운동성이 있지만 S. Gallinarum과 S. Pullorum은 운동성이 없다. 대장균과 달리 lactose 분해능이 없으며 사람, 온혈동물, 냉혈 동물 및 식품과 환경에서도 분리된다.
식중독의 원인으로 식품 유래 살모넬라증의 주된 원인균은 무엇인가?
살모넬라균속에 감염될 경우, 어린 동물은 주로 설사를 동반한 전신증상으로 폐사하는 등 이환율과 치사율이 높은 반면, 성숙한 동물은 대부분이 불현성 감염으로 보균하게 되나 사람에게는 구토, 발열, 수양성 설사, 복통, 장염 등을 일으키는 식중독의 원인이 되어 공중 보건학상 매우 중요하며 특히 S. Enteritidis와 S. Typhimurium는 사람에 있어 식품유래 살모넬라증의 주된 원인균이다(3).
2004년 1월부터 2008년 12월까지 인천지역 5개 종합 병 의원에서 설사 증상으로 입원 또는 내원한 환자의 대변에서 분리한 S. Enteritidis의 항생제 내성 및 다제내성 양상을 관찰한 결과는 어떻게 나타나는가?
Enteritidis의 항생제 내성 및 다제내성 양상을 모니터링하였다. 그 결과, 가장 내성율이 높은 항생제는 nalidixic acid (54.8%)이었고, ampicillin (40.0%), ticarcillin (38.3%), chloramphenicol (20.9%), tetracycline (17.4%) 순이었다. 분리균의 91.3%는 1제 이상의 항생제에 내성이 있었다. 항생제 내성 유형을 살펴본 결과 nalidixic acid 단일 내성이 44.3%로 가장 높았으며, ampicillin-chloramphenicol-ticarcillin (11.3%) 및 ampicillin-ticarcillin (10.4%) 순이었다. 전체적으로 1제 내성이 51.9%, 2제 내성 18.2%, 3제 내성 14.5%, 4제 내성 5.8% 그리고 5제 이상 내성은 9.7%이었다.
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