[논문]간성상세포에서 상엽(桑葉) 추출물의 섬유화 억제 효과

변성희; 박상미; 김상찬; 조일제

doi:10.6116/kjh.2013.28.4.49.

간성상세포에서 상엽(桑葉) 추출물의 섬유화 억제 효과
Anti-fibrotic Effect of Mori Folium Extract in Hepatic Stellate Cells 원문보기

大韓本草學會誌 = The Korea journal of herbology, v.28 no.4, 2013년, pp.49 - 55

변성희 (대구한의대학교 한의과대학) , 박상미 (대구한의대학교 한의과대학) , 김상찬 (대구한의대학교 한의과대학) , 조일제 (대구한의대학교 한의과대학)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : Mori Folium was popularly used as one of the traditional medicinal herbs. Although M. Folium has been cultivated for rearing silkworm historically, it's use has been expanded as natural therapeutic agent for the treatment of filariasis, diabetes and dropsy in East Asia. However, little has been known about the effect of M. Folium on liver fibrosis. Therefore, we would like to explore an anti-fibrogenic potential of M. Folium extract (MFE) using immortalized human hepatic stellate cell line, LX-2 cells. Methods : We examined the effects of MFE on the transforming growth factor ${\beta}1$ ($TGF{\beta}1$)-induced liver fibrosis in LX-2 cells. Cell viability, Smad binding element-driven luciferase activity, phosphorylations level of Smad 2/3, and expression level of $TGF{\beta}1$-dependent target genes were monitored in the MFE-treated LX-2 cells. Results : Up to 30 ${\mu}g/ml$ MFE treatment did not show any possible toxic effect in LX-2 cells. MFE inhibited $TGF{\beta}1$-inducible Smad binding element-driven luciferase activity and decreased the $TGF{\beta}1$-inducible phosphorylations of Smad 2 and Smad 3 in hepatic stellate cell in a dose dependent manner. Furthermore, increases of plasminogen activator inhibitor type 1, $TGF{\beta}1$ and matrix metalloproteinases 2 genes by $TGF{\beta}1$ were also attenuated by MFE treatment. Conclusions : These findings suggested that MFE would be used as a potential therapeutic agent for the treatment liver fibrosis, which might be mediated by the inhibition of $TGF{\beta}1$-inducible Smad 2/3 transactivation and target genes expression.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

Human PAI-1 프로모터를 함유한 reporter plasmid (pGL-phPAI-798), Smad 3 과발현 plasmid (pCDNA-Flag-Smad3), Smad binding element를 함유한 reporter plasmid (pGL3-(CAGA)9-MLP-luciferase), transfection efficiency를 보정하기 위한 pRL-SV는 기존 문헌 보고에 따라 본 연구실에서 기 확보하였다⁸⁾. 12 well plate에 배양한 LX-2 세포에 Fugene HD (Promega Co.
따라서 MFE의 항섬유화 효능에 상엽 내 존재하는 주요 활성성분의 효능에 기인한 것인지 확인하기 위하여 TGFβ1 의존적 PAI-1 발현에 미치는 영향을 관찰하였다.
따라서 본 연구에서는 상엽 에탄올 추출물 (M. Folium extract, MFE)의 간섬유화 예방 및 치료의 효능을 평가하기 위하여 질환 진행과정의 핵심적 역할을 담당하는 간성상세포에서 MFE를 전처치한 후, TGFβ1으로 유도된 표적유전자들의 발현을 관찰하였고, 그 분자 기전으로서 Smad 분자의 인산화 및 활성화 과정에 미치는 영향을 평가하였다.
본 연구는 상엽 에탄올 추출물 (MFE)이 TGFβ 1의 작용 저해 및 섬유화 신호 전달 과정 차단을 통하여 간 섬유화 과정 및 간성상세포의 활성을 제어할 수 있는지 살펴 보았다.
본 연구에서는 Smad 신호를 억제할 수 있는 한의약물학 적 소재의 발굴을 위한 연구로서 상엽 에탄올 추출물을 발 굴하였다. 본 연구에서는 TGFβ1에 의하여 활성화되는 대 표적 전사인자인 Smad 분자의 활성화에 미치는 MFE의 영향을 평가하기 위하여 Smad 결합영역인 SBE를 포함한 리포터 유전자의 발현을 조사하였다.
본 연구에서는 TGFβ1에 의하여 활성화되는 대 표적 전사인자인 Smad 분자의 활성화에 미치는 MFE의 영향을 평가하기 위하여 Smad 결합영역인 SBE를 포함한 리포터 유전자의 발현을 조사하였다.
본 연구에서는 상엽 에탄올 추출물 (MFE)이 간성상세포주에서 TGFβ1 의존성 Smad 신호 전달 및 표적유전자 발현 조절을 통하여 간섬유화 및 간경화에 대한 억제 효과를 나타낼 수 있는지 평가하여 다음과 같은 결과를 얻었다.

제안 방법

, Piscataway, NJ, USA)를 사용하여 단백질의 발현 정도를 확인하였다. Densitometric analysis는 image analyzing system (Ultra-Violet Products Ltd., Upland, CA, USA)을 사용하였다.
MFE에 의한 Smad 분자의 활성 억제가 TGFβ1 의존적 표적 유전자의 발현을 직접적으로 억제할 수 있는지 확인하기 위하여 프로모터 내 SBE를 가지고 있는 대표적인 표적 유전자인 PAI-1의 프로모터 활성, mRNA 발현 및 단백질 발현을 관찰하였다6,7).
PAI-1, TGFβ1 및 MMP-2 유전자는 각 유전자 특이적 primer (Table 1)와 SYBR Primix Ex Taq (Takara)을 사용한 realtime PCR (Realtime PCR System 7500, Applied biosystems, Foster, CA)에 의해 정량하였다.
정량한 단백질 50 µg을 취하여 10% SDS-PAGE에 전기영동시킨 후 NC membrane으로 단백질을 전이시켰다. Smad 2/3, p-Smad 2, p-Smad 3, PAI-1 및 actin 1차 항체와 반응시킨 후 horseradish peroxidase가 결합된 2차 항체와 반응시키고 ECL detection reagents (Amersham Biosciences Corp., Piscataway, NJ, USA)를 사용하여 단백질의 발현 정도를 확인하였다. Densitometric analysis는 image analyzing system (Ultra-Violet Products Ltd.
간성상세포에서 MFE의 ECM 재배열 관련 유전자의 발현 조절을 확인하기 위하여 TGFβ1에 의해 유도되는 TGFβ1 및 MMP-2 mRNA의 발현을 realtime PCR 분석에 의해 관찰하였다.
간성상세포주인 LX-2 세포에서 MFE의 세포독성을 평가 하기 위하여, 3-100 µg/ml MFE를 24시간 처치한 후 MTT assay를 통하여 세포생존율을 측정하였다 (Figure 1).
다음으로 MFE가 TGFβ1에 의한 Smad 분자의 활성화를 직접적으로 억제할 수 있는지 여부를 평가하기 위하여 TGFβ1 자극 대신 LX-2 세포에 Smad 3를 직접적으로 과발현시켜 Smad 신호를 활성화시켰다.
따라서 MFE가 반복적 간손상 조직에서 증가하는 TGFβ1에 의한 Smad 분자의 활성화에 미치는 영향을 평가하기 위하여, Smad 분자의 DNA 결합에 의한 표적유전자 발현능을 지표할 수 있는 Smad 결합영역 (SBE)을 포함한 리포터 유전자를 LX-2 세포에 도입한 후, TGFβ1 및 MFE에 의한 상대적 luciferase 활성을 측정하였다.
따라서 TGBβ1에 의해 활성화된 간성상세포에서 MFE가 Smad 분자의 활성화 억제에 Smad 분자의 인산화 조절이 관여하는지 평가하기 위하여 TGFβ1와 MFE를 처치하고 Smad 3와 Smad 2의 인산화를 immunoblot 분석을 통하여 관찰하였다 (Figure 2B).
따라서 세포독성이 관찰된 MFE 100 µg/ml의 농도를 제외하고 실험 을 진행하였다.
따라서 이후 실험에서는 세포독성이 관찰되지 않는 30 µg/ml 농도 이하의 MFE를 이용하여 LX-2 세포에서 TGFβ1 하위 신호네트워크에 미치는 영향과 TGFβ1에 의해 유도되는 표적유전자의 발현을 평가하였다.
0 프로그램 (Applied biosystems)을 이용하여 보정하였다. 또한 melting curve 분석을 통하여 증폭된 PCR 산물의 특이성을 확인하였다.
세포에 MFE (10, 30 µg/ml)를 30분 동안 전처치하고 5 ng/ml TGFβ1을 18시간 동안 처치한 후 passive lysis buffer (Promega)를 이용하여 용해하고 dual luciferase reporter assay system (Promega)을 이용하여 제조사의 방법에 따라 리포터 유전자 활성을 측정하였다.
전세포 추출액 (whole cell lysates)은 본 연구실에서 기확립된 방법에 따라 제조하였다¹⁰⁾. 정량한 단백질 50 µg을 취하여 10% SDS-PAGE에 전기영동시킨 후 NC membrane으로 단백질을 전이시켰다.
처치된 세포로부터 total RNA의 분리는 Trizol reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)를 사용하여 추출하였다. 추출된 total RNA (2 µg)와 d(T)16 primer 및 AMV 역전사효소 (reverse transcriptase)를 사용하여 cDNA를 얻었다.
실험 결과 TGFβ1으 로 유도된 SBE의 유전자 활성이 MFE 10, 30 µg/ml에 의 하여 농도 의존적으로 감소한 것을 확인할 수 있었고, TGFβ1에 의해 증가한 Smad 2와 Smad 3의 인산화 또한 10, 30 µg/ml MFE에 의하여 통계적으로 유의한 수준으로 감소하였음을 immunoblot 분석을 통하여 확인하였다. 활성 화된 간성상세포에서는 Smad 2에 비해 Smad 3의 지속적 인산화가 관찰되며²¹⁾, 간섬유화 과정에서 Smad 3의 활성 을 직접적으로 억제할 수 있는지 관찰하기 위하여 Smad 3 단백질을 과발현하였다. Figure 3에서 제시하는 바와 같이 LX-2 세포에서 MFE는 Smad 3 과발현에 의한 리포터 유 전자 활성을 직접적으로 억제하였다.

대상 데이터

L-glutamine은 Invitrogen (Carlsbad, CA, USA)으로부터 구입하였고, TGF β1은 R&D Systems (Minneapolis, MN, USA)에서 구입하였다. 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT), dimethylsulfoxide (DMSO), lupeol, morin, myo-inositol, quercetin, rutin, scopoletin, umbelliferone은 Sigma (St. Louis, MO, USA)에서 구입하였다. Phosphorylated Smad 2 (p-Smad 2), phosphorylated Smad 3 (p-Smad 3) 및 Smad 2/3 항체는 Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA), actin과 PAI-1 항체는 Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)로부터 구입하였다.
Dulbecco's modified eagle's medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS), penicillin, streptomycin은 GibcoBRL (Eggenstein, Germany)에서 구입하였다.
L-glutamine은 Invitrogen (Carlsbad, CA, USA)으로부터 구입하였고, TGF β1은 R&D Systems (Minneapolis, MN, USA)에서 구입하였다.
Louis, MO, USA)에서 구입하였다. Phosphorylated Smad 2 (p-Smad 2), phosphorylated Smad 3 (p-Smad 3) 및 Smad 2/3 항체는 Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA), actin과 PAI-1 항체는 Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)로부터 구입하였다.
사람의 불멸화 간성상세포주인 LX-2 세포는 Dr. Friedman S.L. (Mount Sinai School of Medicine, USA)로부터 제공받아 10% FBS, 100 U/ml penicillin, 100 µg/ml streptomycin및 1% L-glutamine이 함유된 DMEM 배지를 이용하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다.
추출된 total RNA (2 µg)와 d(T)16 primer 및 AMV 역전사효소 (reverse transcriptase)를 사용하여 cDNA를 얻었다.

데이터처리

실험 결과는 mean ± S.D로 나타내었으며 student t-test 방법으로 통계적 유의성 검정을 조사하였다.
PAI-1, TGFβ1 및 MMP-2 유전자는 각 유전자 특이적 primer (Table 1)와 SYBR Primix Ex Taq (Takara)을 사용한 realtime PCR (Realtime PCR System 7500, Applied biosystems, Foster, CA)에 의해 정량하였다. 유전자의 상대정량은 각 유전자의 C_T 값을 GAPDH 유전자의 CT 값으로 gene express 2.0 프로그램 (Applied biosystems)을 이용하여 보정하였다. 또한 melting curve 분석을 통하여 증폭된 PCR 산물의 특이성을 확인하였다.

성능/효과

1.상엽 에탄올 추출물은 간성상세포에서 TGFβ1에 의해 증가하는 SBE 리포터 유전자 활성 및 Smad 3 및 Smad 2의 인산화를 농도 의존적으로 억제하였다.
2.상엽 에탄올 추출물은 Smad 3 유도성 SBE 리포터 유전자 활성을 억제하였다.
3.상엽 에탄올 추출물은 TGFβ1 의존적 PAI-1의 리포터 유전자 활성, mRNA 발현 및 단백질 발현을 억제하였으며, TGFβ1 의존적 TGFβ1과 MMP-2 mRNA를감소시켰다.
4.상엽에 보고된 주요 활성성분들은 TGFβ1에 의해 증가한 PAI-1 단백질 발현을 억제하였다.
LX-2 세포에 1시간 동안 처치한 5 ng/ml TGFβ1은 Smad 3와 Smad 2의 인산화를 증가시켰고, 10 및 30 µg/ml MFE 전처치는 TGFβ1에 의해 증가하는 Smad 3와 Smad 2의 인산화를 통계적으로 유의한 수준으로 각각 억제하였다.
LX-2 세포에 24시간 동안의 3-30 µg/ml MFE 처치는 대 조군 세포에 비하여 세포 생존율의 변화를 관찰할 수 없었고, 100 µg/ml MFE는 대조군 세포 대비 74.3 ± 1.77%로 세포 독성을 확인할 수 있었다.
MFE에 의한 Smad 신호의 제어가 궁극적으로 표적 유전자의 발현을 억제할 수 있는지 여부를 평가한 결과 MFE는 TGFβ1에 의해 증가되는 PAI-1 mRNA, 단백질 및 프로모터 활성을 모두 억제하였다 (Figure 4 A-C).
MFE의 LX-2 세포에 대한 세포독성을 평가하기 위 하여 MTT assay를 이용하여 세포생존율을 측정하였고, 실험 결과 MFE 3, 10, 30 µg/ml의 농도에서는 거의 세포독성을 나타내지 않았으며, 100 µg/ml의 농도에서는 대조군 세포와 비교하여 약 25.7% 내외의 세포 독성을 나타내었다.
상엽 에탄올 추출물의 간성상세포의 활성제어 효능에 있어 상엽 내 존재하는 주요 활성 성분의 효과를 평가하기 위하여 lupeol, morin, myo-inositol, quercetin, rutin, scopoletin, umbelliferone이 TGFβ1에 의하여 유도된 PAI-1의 단백질 발현에 미치는 영향을 관찰한 결과, 세포독성을 나타내지 않는 최고 농도 (100 µM)에서 상엽에포함된 것으로 보고된 주요 활성 성분은 모두 TGFβ1으로 증가된 PAI-1의 단백질 발현을 억제하였다 (Figure 5).
상엽에는 flavones, steroids, triterpenes, 아미노산, 비타민 및 다량의 미네랄 성분이 존재하고 있으며 칼슘, 칼륨 등의 전해질과 펙틴, 셀룰로오스 등의 식이섬유나 아미노산, 단백질 등이 풍부하다. 상엽은 혈당 강하, 혈압 강하, 이뇨, 및 항균 효능이 있음이 규명되었으며, filaria에 의한 림프관염에 치료 효과가 있고, 하지의 象皮腫 연화, 부종 제거 작용이 있음이 증명되었다. 최근에는 상엽의 LPS에 의해 활성화된 대식세포의 염증매개인자 억제, 지방 사이토카인 (adipokine) 억제, 항동맥경화 (anti-atherogenic) 효과 및 항우울 (anti-depressant) 효과 등이 보고되고 있으나^10-14), 상엽의 만성 간질환에 대한 효능 평가 및 분자 기전에 대한 연구는 부족한 실정이다.
실험 결과 TGFβ1으 로 유도된 SBE의 유전자 활성이 MFE 10, 30 µg/ml에 의 하여 농도 의존적으로 감소한 것을 확인할 수 있었고, TGFβ1에 의해 증가한 Smad 2와 Smad 3의 인산화 또한 10, 30 µg/ml MFE에 의하여 통계적으로 유의한 수준으로 감소하였음을 immunoblot 분석을 통하여 확인하였다.
이러한 결과는 MFE가 LX-2 세포에서 TGFβ1에 의해 유도되는 신호를 전달하는 Smad의 인산화를 저해하여 Smad 의존적 표적 유전자의 발현을 억제할 수 있음을 시사한다.
이러한 결과는 MFE가 TGFβ1 의존적 표적유전자의 발현 억제를 통하여 간성상세포의 활성을 제어할 수 있음을 시사한다.
이상의 결과는 MFE 가 LX-2 세포에서 TGFβ1에 의해 유도되는 신호를 핵 안 으로 전달하는 Smad의 인산화를 저해하여 Smad 의존적 표적 유전자의 발현을 억제할 수 있음을 시사한다.
이상의 결과는 MFE가 TGFβ1 의존적 표적 유전자의 발현 억제를 통하여 성상세포의 활성화를 통한 간섬유화를 억제할 수 있음을 시사한다.
이와 더불어 TGFβ1 자극에 의해 간성상세포의 활성화 및 ECM 축적을 위한 재배열에 관여하는 TGFβ1 의존적 TGF β1과 MMP-2 mRNA 또한 MFE의 처치에 의하여 억제될 수 있음을 확인하였다.

후속연구

따라서 MFE의 항섬유화 효능은 상엽 내 존재하는 여러 활성 성분들의 복합적인 약리작용에 기인한 것으로 추측된다. 따라서 상엽의 항섬유화 기전 및 효능을 이해한 본 연구와 더불어 적절한 후속 연구가 이루어진다면, 상엽을 간섬유화 및 간경화를 효과적으로 억제할 수 있는 신규 한의약물로 개발할 수 있는 학문적 배경을 제시할 수 있을 것으로 기대한다.
비록 MFE 내에 존재하는 주요 활성성분의 농도 및 MFE 처치 시 세포 내 존재하는 주요 활성성분 농도와 본 연구에서 활용한 주요 활성성분의 농도 사이의 상호 관련성에 있어 후속연구가 필요하나, 상엽 내 주요 활성성분인 lupeol, morin, myo-inositol, quercetin, rutin, scopoletin, umbelliferone 등은 TGFβ1으로 증가된 PAI-1의 단백질 발현을 감소시켰다.
이러한 상엽 에탄올 추출물의 항섬유화 효능은 간섬유화 질환을 효과적으로 제어할 수 있는 약물 개발 가능성을 제시한다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	상엽 에탄올 추출물 (MFE)이 간성상세포주에서 TGFβ1 의존성 Smad 신호 전달 및 표적유전자 발현 조절을 통하여 간섬유화 및 간경화에 대한 억제 효과를 나타낼 수 있는지 평가하여 얻은 결과는?	1.상엽 에탄올 추출물은 간성상세포에서 TGFβ1에 의해증가하는 SBE 리포터 유전자 활성 및 Smad 3 및Smad 2의 인산화를 농도 의존적으로 억제하였다. 2.상엽 에탄올 추출물은 Smad 3 유도성 SBE 리포터 유전자 활성을 억제하였다. 3.상엽 에탄올 추출물은 TGFβ1 의존적 PAI-1의 리포터 유전자 활성, mRNA 발현 및 단백질 발현을 억제하였으며, TGFβ1 의존적 TGFβ1과 MMP-2 mRNA를감소시켰다. 4.상엽에 보고된 주요 활성성분들은 TGFβ1에 의해 증가한 PAI-1 단백질 발현을 억제하였다.
	간섬유화란?	간섬유화는 만성적인 염증으로 인해 정상적인 간조직이 광범위하게 파괴된 결과로 섬유조직의 증식과 재생성 결절 형성의 형태학적 특징을 보이며, 2차적으로 간 내 혈관의 변형 및 간기능의 저하가 초래되는 비가역적 질병이며1), 간 섬유화로의 진행과정에 있어 간성상세포 (hepatic stellate cell)가 핵심적 역할을 수행하는 세포로 보고되고 있다2). 반복적 간손상으로 인한 염증과 회복과정의 반복은 휴지기 (quiescent) 간성상세포를 활성화하여 세포외기질 (extracelluar matrix, ECM)과 다양한 사이토카인 (cytokine) 및 케모카인 (chemokine)들을 분비하며, 이 중 형질전환성장인자 베타1 (transforming growth factor β1, TGFβ1)의 분비는 plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1) 및 matrix metalloproteinases (MMP)의 발현 조절을 통하여 ECM (예, collagen) 축적을 촉진하는 핵심 사이토카인이다3).
	간의 특징은?	간은 체외에서 들어온 물질 및 체내의 물질대사에서 중추적인 역할을 담당하는 생체기관이며, 한국 내의 만성 질병 중에서 간염, 간섬유화 및 간암이 차지하는 비중은 순환기계 질환과 함께 큰 비중을 차지하고 있다. 특히 우리나라의 경우, 선진국에 비하여 음주인구가 상대적으로 높고 폭음에 의한 간 손상 발생이 높은 만큼 간질환에 대한 관심도 지대하다.

참고문헌 (26)

Bataller B, Brenner DA. Hepatic Fibrosis. In : Arias IM, Alter HJ, Boyer JL, Cohen DE, Fausto N, Shafritz DA, Wolkoff AW, eds. The liver biology and pathobiology. 5th ed. Oxford : Wiley-Blackwell. 2009 : 433-52.
Lee JS, Kim JH. The role of activated hepatic stellate cells in liver fibrosis, portal hypertension and cancer angiogenesis. Korean J Hepatol. 2007 ; 13 : 309-19.

상세보기
Sanderson N, Factor V, Nagy P, Kopp J, Kondaiah P, Wakefield L, Roberts AB, Sporn MB, Thorgeirsson SS. Hepatic expression of mature transforming growth factor b1 in transgenic mice results in multiple tissue lesions. Proc Natl Acad Sci USA. 1995 ; 92 : 2572-6.

상세보기
Liu C, Gaca MD, Swenson E, Vellucci VF, Reiss M, Wells RG. Smads 2 and 3 are differentially activated by transforming growth factor- $\beta$ (TGF- $\beta$ ) in quiescent and activated hepatic stellate cells. Constitutive nuclear localization of Smads in activated cells is TGF- $\beta$ independent. J Biol Chem. 2003 ; 278 : 11721-8.

상세보기
Jablonska E, Markart P, Zakrzewicz D, Preissner KT, Wygrecka M. Transforming growth factor- $\beta1$ induces expression of human coagulation factor XII via Smad3 and JNK signaling pathways in human lung fibroblasts. J Biol Chem. 2010 ; 285 : 11638-51.

상세보기
Dennler S, Itoh S, Vivien D, ten Dijke P, Huet S, Gauthier JM. Direct binding of Smad3 and Smad4 to critical TGF $\beta$ -inducible elements in the promoter of human plasminogen activator inhibitortype 1 gene. EMBO J. 1998 ; 17 : 3091-100.

상세보기
Cho IJ, Kim SH, Kim SG. Inhibition of $TGF\beta1$ -mediated PAI-1 induction by oltipraz through selective interruption of Smad 3 activation. Cytokines. 2006 ; 35 : 284-94.

상세보기
Cho IJ, Kim YW, Han CY, Kim EH, Anderson RA, Lee YS, Lee CH, Hwang SJ, Kim SG. E-cadherin antagonizes transforming growth factor $\beta1$ gene induction in hepatic stellate cells by inhibiting RhoA-dependent Smad3 phosphorylation. Hepatology. 2010 ; 52 : 2053-64.

상세보기
The Korean Medical Dictionary Compliation Committee. The Korean Medical Dictionary. Seoul : Jungdam. 1998 : 727.
Park SM, Byun SH, Kim YW, Cho IJ, Kim SC. Inhibitory effect of Mori Folium ethanol extract on pro-inflammatory mediator in lipopolysaccharide-activated RAW 264.7 cells. Kor J Herbology. 2012 ; 27 : 31-8.

원문보기 상세보기
Jang MH, Kim H, Shin MC, Lim BV, Lee TH, Jung SB, Kim CJ, Kim EH. Administration of Folium Mori extract decreases nitric oxide synthase expression in the hypothalamus of streptozotocininduced diabetic rats. Jpn J Pharmacol. 2002 ; 90 : 189-92.

상세보기
Sugimoto M, Arai H, Tamura Y, Murayama T, Khaengkhan P, Nishio T, Ono K, Ariyasu H, Akamizu T, Ueda Y, Kita T, Harada S, Kamei K, Yokode M. Mulberry leaf ameliorates the expression profile of adipocytokines by inhibiting oxidative stress in white adipose tissue in b/db mice. Atherosclerosis. 2009 ; 204 : 388？94.

상세보기
Harauma A, Murayama T, Ikeyama K, Sano H, Arai H, Takano R, Kita T, Hara S, Kamei K, Yokode M. Mulberry leaf powder prevents atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice. Biochem Biophys Res Commun. 2007 ; 358 : 751-6.

상세보기
Sattayasai J, Tiamkao S, Puapairoj P. Biphasic effects of Morus alba leaves green tea extract on mice in chronic forced swimming model. Phytother Res. 2008 ; 22 : 487-92.

상세보기
Dooley S, Delvoux B, Streckert M, Bonzel L, Stopa M, ten Dijke P, Gressner AM. Transforming growth factor beta signal transduction in hepatic stellate cells via Smad2/3 phosphorylation, a pathway that is abrogated during in vitro progression to myofibroblasts. TGF beta signal transduction during transdifferentiation of hepatic stellate cells. FEBS Lett. 2001 ; 502 : 4-10.

상세보기
Piek E, Ju WJ, Heyer J, Escalante-Alcalde D, Stewart CL, Weinstein M, Deng C, Kucherlapati R, Bottinger EP, Roberts AB. Functional characterization of transforming growth factor beta signaling in Smad2- and Smad3-deficient fibroblasts. J Biol Chem. 2001 ; 276 : 19945-53.

상세보기
Massague J, Chen YG. Controlling TGF-beta signaling. Genes Dev. 2000 ; 14 : 627-44.
Liu X, Wang W, Hu H, Tang N, Zhang C, Liang W, Wang M. Smad3 specific inhibitor, naringenin, decreases the expression of extracellular matrix induced by TGF-beta1 in cultured rat hepatic stellate cells. Pharm Res. 2006 ; 23 : 82-9.

상세보기
Kang KW, Kim YG, Cho MK, Bae SK, Kim CW, Lee MG, Kim SG. Oltipraz regenerates cirrhotic liver through CCAAT/enhancer binding protein-mediated stellate cell inactivation. FASEB J. 2002 ; 16 : 1988？90.

상세보기
Dooley S, Hamzavi J, Breitkopf K, Wiercinska E, Said HM, Lorenzen J, Ten Dijke P, Gressner AM. Smad7 prevents activation of hepatic stellate cells and liver fibrosis in rats. Gastroenterology. 2003 ; 125 : 178-91.

상세보기
Inagaki Y, Mamura M, Kanamaru Y, Greenwel P, Nemoto T, Takehara K, Ten Dijke P, Nakao A. Constitutive phosphorylation and nuclear localization of Smad 3 are correlated with increased collagen gene transcription in activated hepatic stellate cells. J Cell Physiol. 2001 ; 187 : 117-23.

상세보기
Doi K, Kojima T, Makino M, Kimura Y, Fujimoto Y. Studies on the constituents of the leaves of Morus alba L. Chem Pharm Bull (Tokyo). 2001 ; 49 : 151-3.

상세보기
Hernandez-Ortega LD, Alcantar-Diaz BE, Ruiz-Corro LA, Sandoval-Rodriguez A, Bueno-Topete M, Armendariz-Borunda J, Salazar-Montes AM. Quercetin improves hepatic fibrosis reducing hepatic stellate cells and regulating pro-fibrogenic/anti-fibrogenic molecules balance. J Gastroenterol Hepatol. 2012 ; 27 : 1865-72.

상세보기
Marcolin E, San-Miguel B, Vallejo D, Tieppo J, Marroni N, Gonzalez-Gallego J, Tunon MJ. Quercetin treatment ameliorates inflammation and fibrosis in mice with nonalcoholic steatohepatitis. J Nutr. 2012 ; 142 : 1821-8.

상세보기
Kanter M. Protective effect of quercetin on liver damage induced by biliary obstruction in rats. J Mol Histol. 2010 ; 41 : 395-402.

상세보기
Lee HS, Jung KH, Park IS, Kwon SW, Lee DH, Hong SS. Protective effect of morin on dimethylnitrosamine-induced hepatic fibrosis in rats. Dig Dis Sci. 2009 ; 54 : 782-8.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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