[국내논문]활성화된 렛트 비만세포와 마우스 소양증에 대한 한약재로 조성된 WSY-1075의 항염증 및 항소양 효과 Anti-inflammatory and Anti-Pruritonic Effects of WSY-1075 composited with Medicinal Plants on the Activated Rat Peritoneal Mast cells and Mouse Pruritus원문보기
Objectives : This study was to evaluate the anti-inflammatory and anti-pruritic effects of WSY-1075 composited with Corni Fructus, Angelica gigantis Radix, Lycii Fructus, Ginseng Radix, Cervi parvum Cornu and Cinnamomi Cortex in rat peritoneal mast cells (RPMCs) and scratching mouse model. Methods :...
Objectives : This study was to evaluate the anti-inflammatory and anti-pruritic effects of WSY-1075 composited with Corni Fructus, Angelica gigantis Radix, Lycii Fructus, Ginseng Radix, Cervi parvum Cornu and Cinnamomi Cortex in rat peritoneal mast cells (RPMCs) and scratching mouse model. Methods : WSY-1075 was prepared by extracting with 30% ethanol. In the present study, we investigated the effect of WSY-1075 on the production of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) and histamine in rat peritoneal mast cells (RPMCs) activated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187, and on the scratching behavior in mice treated with pruriogens. Results : WSY-1075 was not cytotoxic effect in used all concentration. PMA plus A23187 treatment significantly increased TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$ and IL-6 production compared with media control in RPMCs. However, TNF-${\alpha}$, $IL1{\beta}$ and IL-6 production increased by PMA plus A23187 treatment were significantly inhibited by WSY-1075 (200 ${\mu}g/mL$ and 400 ${\mu}g/mL$). WSY-1075 also inhibited the histamine release from RPMCs stimulated by compound 48/80, which promotes histamine release. Moreover, WSY-1075 administration had an inhibitory effects on the scratching behavior induced by pruritogen (compound 48/80, histamine, serotonin and substence P) in ICR mice. Conclusion : These results suggest that WSY-1075 administration (200 mg/kg or 400 mg/kg) has the anti-inflammatory and anti-pruritic effects on the activated rat peritoneal mast cell and mouse pruritus. WSY-1075 has a potential use as a composition of medicinal plants for treatment against inflammation- and pruritus-related disease.
Objectives : This study was to evaluate the anti-inflammatory and anti-pruritic effects of WSY-1075 composited with Corni Fructus, Angelica gigantis Radix, Lycii Fructus, Ginseng Radix, Cervi parvum Cornu and Cinnamomi Cortex in rat peritoneal mast cells (RPMCs) and scratching mouse model. Methods : WSY-1075 was prepared by extracting with 30% ethanol. In the present study, we investigated the effect of WSY-1075 on the production of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) and histamine in rat peritoneal mast cells (RPMCs) activated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187, and on the scratching behavior in mice treated with pruriogens. Results : WSY-1075 was not cytotoxic effect in used all concentration. PMA plus A23187 treatment significantly increased TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$ and IL-6 production compared with media control in RPMCs. However, TNF-${\alpha}$, $IL1{\beta}$ and IL-6 production increased by PMA plus A23187 treatment were significantly inhibited by WSY-1075 (200 ${\mu}g/mL$ and 400 ${\mu}g/mL$). WSY-1075 also inhibited the histamine release from RPMCs stimulated by compound 48/80, which promotes histamine release. Moreover, WSY-1075 administration had an inhibitory effects on the scratching behavior induced by pruritogen (compound 48/80, histamine, serotonin and substence P) in ICR mice. Conclusion : These results suggest that WSY-1075 administration (200 mg/kg or 400 mg/kg) has the anti-inflammatory and anti-pruritic effects on the activated rat peritoneal mast cell and mouse pruritus. WSY-1075 has a potential use as a composition of medicinal plants for treatment against inflammation- and pruritus-related disease.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
문제 정의
따라서 본 연구는 山茱萸(Corni Fructus), 當歸(Angelica gigantis Radix), 枸杞子(Lycii Fructus), 鹿茸(Ginseng Radix), 紅蔘(Cervi parvum Cornu), 肉桂(Cinnamomi Cortex) 등 한약재로 조성된 WSY-1075을 대상으로 phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)와 calcium ionophore A23187로 자극하여 활성화된 렛트 복강 비만세포(rat peritoneal mast cells, RPMCs)의 전 염증성 사이토카인의 생성 및 가려움 유발물질 (prurotogen)로 처리된 마우스의 소양증 억제에 대한 효과를 조사하여 그 결과를 보고하고자 한다.
본 연구는 WSY-1075가 RPMCs의 생존율에 미치는 영향을 조사하였다. 그 결과 Fig.
본 연구는 WSY-1075가 소양증 억제에 미치는 영향을 알아보기 위하여 WSY-1075 (25-400 µg/mL)을 ICR 마우스에 경구투여하고 1시간 후에 가려움 유발물질을 마우스 등의 양쪽 어깨 사이 높이에 피하주사 하였다.
본 연구는 한약재로 조성된 WSY-1075의 면역능 조절 효능을 평가하기 위해서 먼저 렛트의 복강 비만세포인 RPMCs를 대상으로 세포독성에 미치는 영향을 알아보았다. 그 결과 본 실험에서 사용한 WSY-1075의 모든 농도에서 세포 독성이 없었을 뿐만 아니라 mL 당 800 µg의 고농도에서도 세포독성이 없었다(자료는 제시하지 않았음).
본 연구에서는 이와 같은 문헌적 근거를 바탕으로 렛트의 1차 비만세포인 RPMCs을 대상으로 PMA와 A23187로 동시에 자극하여 TNF-α, IL-1β 및 IL-6의 생성량을 조사하였다.
또한 PMA와 23187로 자극된 RPMCs에서 전연븡성 사이토카인의 생성 및 히스타민의 방출을 억제하는 효과가 있었다. 더욱이 가려움 유발물질로 유도된 소양증을 억제하는 효과가 있음을 본 연구에서 밝혔다.
그 결과 TNF-α와 IL-1β는 비교적 많은 량이 유도되었고, IL-6는 이들 사이토카인에 비해서 상대적으로 적은 량이 유도되었다. 그러므로 본 연구는 활성화된 RPMCs에서 이들 사이토카인의 생성에 미치는 WSY-1075의 효과를 조사하였다. 그 결과 100 µg/mL 이하의 농도에서는 약간 증가하는 경향을 보였지만, 대조군과 큰 차이는 없었다.
본 연구는 山茱萸, 當歸, 枸杞子, 鹿茸, 紅蔘, 肉桂 등 한약재로 조성된 WSY-1075의 면역조절에 대한 효과를 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
제안 방법
무균환경에서 사육된 10주령의 수컷 Sprague Dawley 렛트는 중앙실험동물(주)(서울시, 대한민국)에서 구입하였고, 사료와 물을 충분히 공급하면서 1주일간 순화시킨 후 실험에 사용하였다. 사육환경은 낮과 밤의 주기를 12시간씩 하였고, 온도(20-22℃)와 습도(50-60%)는 일정하게 유지하였으며, 실험동물위원회의 규정에 준하여 실험하였다.
그 후 대조군은 생리식염수를 경구투여 하였고, 실험군은 WSY-1075 (25-400 mg/kg)을 경구투여하고 60분 후에 compound 48/80 (50 µg/site), histamine (100 µg/site), serotonin (100 µg/site) 또는 substence P (100 µg/site)의 농도로 100 µL씩 마우스 등의 양쪽 어깨 사이 높이에 피하주사 하였다.
요약하면, 세포상층액 또는 5배 희석 혈청 100 µL을 각각의 항체가 코팅된 plate에 주입하고 반응시킨 후 잘 세척한 다음 horseradish peroxidase 가 부착된 2차 항체를 주입하고 반응시킨 후 발색 기질을 주입하고 반응시켜 ELISA reader로 측정하였으며, 각 물질에 대한 정량은 각각의 물질을 농도별로 처리하여 반응시켜 표준곡선을 정하고 세포상층액 또는 혈청에 함유된 물질의 량을 계산하였다.
즉, TNF-α, IL-1β와 IL-6 등은 anti-mouse TNF-α, anti-mouse IL-1β, anti-mouse IL-6 등 항체를 사용하여 각각에 특이적으로 작용하는 ELISA kit (R&D Systems)을 사용하여 측정하고 정량하였다.
RPMCs로부터 사이토카인의 측정은 WSY-1075 (25-400 µg/mL)를 2시간동안 전 처리한 후 PMA (30 ng/mL)와 A23187 (10 µM)로 동시에 자극한 다음 12시간 후에 세포상층액으로부터 TNF-α, IL-1β와 IL-6를 측정하였다.
여러 가지 농도의 WSY-1075 추출물은 RPMCs (5×105)에 2시간 동안 전 처리한 후 PMA와 A23187로 동시에 자극하여 전염증성 사이토카인 측정과 compound 48/80으로 자극하여 히스타민 측정에 사용하였다.
요약하면, RPMCs (5×105/mL) 세포를 24 well 배양용기에 접종하고 상기와 같이 여러 가지 농도로 DLE을 처리한 후에 PMA 및 A23187를 자극한 후 12시간 후에 MTT 용액(5 mg/mL)을 주입하고 4시간동안 37℃에서 방치한 후 상층액을 제거하고 formazan 산물을 DMSO로 용해하여 96 well plate로 옮겨 540 nm ELISA reader (Molecular Divices, USA)로 흡광도를 측정하였다.
의 방법에 따라 분리하였다. 요약하면, 에테르(ether)로 마취시킨 다음 calcium-free HEPES-Tyrode buffer(10 mM Hepes, 113 mM NaCl, 4.7 mM KCl, 2.13 mM MgCl2, 0.6 mM NaH2PO4, 10 mM glucose, pH 7.4) 10 mL를 복강에 주입시켜 약 90초간 복강을 부드럽게 맛사지한 후 복강을 주의 깊게 열어 Pasteur pipette을 사용하여 세포 부유액을 취하고 percoll density gradient법으로 RPMCs를 얻었다. 특별히 본 실험 목적에 따라 충분한 세포를 확보하기 위해서 5-10마리 렛트에서 얻은 복강비만세포를 혼합하여 사용하였다.
5 µg/mL)으로 자극하여 30분간 방치 반응을 중지시키기 위하여 배양튜브를 빙수에 넣어 충분히 냉각시킨 후 1,200 rpm으로 15분간 원심침전시키고 상층액을 얻었다. 상층액으로부터 히스타민을 측정하였다. 요약하면, anti-histamine antibody (ab)를 활용하여 상기와 같이 얻은 상층액 시료에 반응시키고, anti-histamine ab에 특이적으로 작용하는 기질효소가 부착된 2차 항체를 주입한 후 발색시켜 R&D사가 제공하는 histamine ELISA 방법에 준하여 측정하고 정량하였다.
본 연구는 WSY-1075가 활성화된 RPMCs의 전염증성 사이토카인의 생성 억제에 대한 효과를 알아보기 위하여 RPMCs를 접종하고 WSY-1075 (25-400 µg/mL)를 2시간 전 처리한 다음 PMA와 A23187을 동시에 처리하고 12시간 배양 후 배양액에 축척된 TNF-α, IL-1β 및 IL-6양을 측정하였다.
한편 본 연구는 WSY-1075가 소양증 유발 핵심 물질인 histamine 방출에 대한 억제 영향을 알아보기 위하여 RPMCs를 접종하고 WSY-1075 (25-400 µg/mL)를 주입하고 37℃에서 10분간 전 처리한 다음 compound 48/80 (0.5 µg/mL)으로 자극하여 histamine의 양을 측정하였다.
외에 김22)은 가미공진단처방이 Balb/c 마우스에서 Ovalbumin 면역반응에 대해 억제효과가 입증을 밝혔고 다른 논문23)에서는 Acetaminophen 유도 마우스 간손상에 대한 加減拱辰丹 추출물의 간보호효과를 관찰하여 보고한 바 있다. WSY-1075는 이러한 공진단 처방에 한의학적인 사용과 실험적 근거를 바탕으로 하여 사향을 제외하고 기존에 면역기능의 조절이나 항산화효과가 있다고 알려진 구기자, 홍삼, 육계로 처방을 구성하였다.
이러한 물질들은 소양증을 유발하는데, 아토피 피부염 등 알레르기성 피부질환 환자에서 흔히 발견되는 소양증과 유사한 증상을 유발한다. 이들 물질에 대한 가려움 유발 모델동물은 주로 ICR, ddY, NC/Nga, hairless 등의 마우스가 사용되고 있는데36), 본 연구는 ICR 마우스를 선택하여 WSY-1075을 1시간 전에 경구투여한 후 compound 48/80, 히스타민, 세로토닌 또는 물질 P를 등쪽 피하에 주사하여 60분 동안 뒷발로 긁는 누적 횟수를 조사하였다. 그 결과 200 mg/kg 또는 400 mg/kg의 WSY-1075 농도에서 소양증을 억제하는 효과가 있었다.
무균환경에서 사육된 10주령의 수컷 Sprague Dawley 렛트는 중앙실험동물(주)(서울시, 대한민국)에서 구입하였고, 사료와 물을 충분히 공급하면서 1주일간 순화시킨 후 실험에 사용하였다. 사육환경은 낮과 밤의 주기를 12시간씩 하였고, 온도(20-22℃)와 습도(50-60%)는 일정하게 유지하였으며, 실험동물위원회의 규정에 준하여 실험하였다.
추출액은 0.45 µm syringe filter (Advantec, Japan)를 통해 여과하고 여액을 60 ℃이하에서 감압농축 (Model, EYELA ROTARY EVAPORATOR NE-2001, JAPAN)한 후 동결건조(Model, ILSHIN Freeze Dryer FD8508, KOREA)하여 건조엑스 249.5 g(평균수득율 24.95 %) 을 얻어 –20℃에 보관하면서 실험에 사용하였다.
4) 10 mL를 복강에 주입시켜 약 90초간 복강을 부드럽게 맛사지한 후 복강을 주의 깊게 열어 Pasteur pipette을 사용하여 세포 부유액을 취하고 percoll density gradient법으로 RPMCs를 얻었다. 특별히 본 실험 목적에 따라 충분한 세포를 확보하기 위해서 5-10마리 렛트에서 얻은 복강비만세포를 혼합하여 사용하였다. 여러 가지 농도의 WSY-1075 추출물은 RPMCs (5×105)에 2시간 동안 전 처리한 후 PMA와 A23187로 동시에 자극하여 전염증성 사이토카인 측정과 compound 48/80으로 자극하여 히스타민 측정에 사용하였다.
소양증 유발물질을 주사한 마우스는 곧바로 Mihara17)의 방법을 따라 micro-camera (ONCCTV, 서울, 대한민국)를 사용하여 60분 동안 녹화하였으며, 뒷발로 소양증 유발물질이 주입된 부위를 긁는 횟수를 이중맹검법으로 계수하여 평가하였다. 각 유발물질에 따른 실험은 각각 다른 날에 진행되었으며 매 실험에 사용된 마우스는 1회 사용되었다.
데이터처리
모든 실험값은 평균±표준편차(mean ± SD)로 표시했으며, 통계분석은 SPSS 프로그램을 활용하여 ANOVA와 Student’s t-test로 처리했으며, 유의성 한계는 p<0.05로 정하였다.
이론/모형
요약하면, anti-histamine antibody (ab)를 활용하여 상기와 같이 얻은 상층액 시료에 반응시키고, anti-histamine ab에 특이적으로 작용하는 기질효소가 부착된 2차 항체를 주입한 후 발색시켜 R&D사가 제공하는 histamine ELISA 방법에 준하여 측정하고 정량하였다.
RPMCs 세포 생존율은 MTT assay 방법에 의해 측정하였다. 요약하면, RPMCs (5×105/mL) 세포를 24 well 배양용기에 접종하고 상기와 같이 여러 가지 농도로 DLE을 처리한 후에 PMA 및 A23187를 자극한 후 12시간 후에 MTT 용액(5 mg/mL)을 주입하고 4시간동안 37℃에서 방치한 후 상층액을 제거하고 formazan 산물을 DMSO로 용해하여 96 well plate로 옮겨 540 nm ELISA reader (Molecular Divices, USA)로 흡광도를 측정하였다.
건강한 수컷 Sprague Dawley 렛트로부터 복강비만세포(rat peritoneal mast cells, RPMCs)의 분리는 Martynova 등16)의 방법에 따라 분리하였다. 요약하면, 에테르(ether)로 마취시킨 다음 calcium-free HEPES-Tyrode buffer(10 mM Hepes, 113 mM NaCl, 4.
그 후 대조군은 생리식염수를 경구투여 하였고, 실험군은 WSY-1075 (25-400 mg/kg)을 경구투여하고 60분 후에 compound 48/80 (50 µg/site), histamine (100 µg/site), serotonin (100 µg/site) 또는 substence P (100 µg/site)의 농도로 100 µL씩 마우스 등의 양쪽 어깨 사이 높이에 피하주사 하였다. 소양증 유발물질을 주사한 마우스는 곧바로 Mihara17)의 방법을 따라 micro-camera (ONCCTV, 서울, 대한민국)를 사용하여 60분 동안 녹화하였으며, 뒷발로 소양증 유발물질이 주입된 부위를 긁는 횟수를 이중맹검법으로 계수하여 평가하였다. 각 유발물질에 따른 실험은 각각 다른 날에 진행되었으며 매 실험에 사용된 마우스는 1회 사용되었다.
RPMCs cells (5×105/mL) were pre-treated with or without WSY-1075 at indicated concentrations for 2 h, and then stimulated with or without PMA (30 ng/mL) plus A23187 (10 µM) for 12 h. Cytokine concentrations were measured in cell supernatants using the ELISA method. Values represent the means ± S.
5 µg/mL). Histamine assay was performed by ELISA method on supernatant from RPMCs. Values represent the means ± S.
성능/효과
본 연구는 WSY-1075가 RPMCs의 생존율에 미치는 영향을 조사하였다. 그 결과 Fig. 1A과 같이 WSY-1075는 본 연구에서 사용한 모든 농도에서 세포독성이 없었다. RPMCs에 PMA와 A23187로 처리할 경우 약 78%로 정상군에 비해서 세포 생존율이 저하 되었으나(p<0.
그 결과 Fig. 3과 같이 RPMCs를 compound 48/80로 자극할 경우 histamine 방출량은 68.5±7.8 ng/mL으로 정상군에 비해서 현저히 증가하였다(p<0.001).
그 결과 Fig. 2와 같이 PMA와 A23187를 처리한 대조군은 정상군에 비해서 TNF-α (995±97 pg/mL), IL-1β (685±86 pg/mL)와 IL-6 (361±83 pg/mL)가 현저히 증가하였다(p<0.001).
그 결과 본 실험에서 사용한 WSY-1075의 모든 농도에서 세포 독성이 없었을 뿐만 아니라 mL 당 800 µg의 고농도에서도 세포독성이 없었다(자료는 제시하지 않았음).
그 결과 Fig. 4와 같이 정상군에 비해 compound 48/80은 222.7±17.2회, 히스타민은 80.3±5.1회, 세로토닌은 113.4±6.7회 및 물질 P는 106.7±7.2회로 긁는 횟수가 현저히 증가하였다(p<0.001).
Compound 48/80, 세로토닌 및 물질 P에 의해 유도되는 긁는 횟수는 400 µg/mL의 WSY-1075 처리농도에서 각각 123.2±16.3, 62.1±15.2 및 56.8±3.8로 유의하게 억제되었다(p<0.05).
그 결과 본 실험에서 사용한 WSY-1075의 모든 농도에서 세포 독성이 없었을 뿐만 아니라 mL 당 800 µg의 고농도에서도 세포독성이 없었다(자료는 제시하지 않았음). 일반적으로 비만세포에 PAM와 A23187로 자극하면, 세포독성이 발생될 수 있는데, 본 연구에서 사용한 PAM와 A23187의 농도에서는 평균 78%정도 세포생존율을 보였다. 그러나 200 µg/mL과 400 µg/mL의 WSY-1075 농도에서 PAM와 A23187에 의해 유도되는 세포 독성을 제거하는 효과가 있었다.
그러나 200 µg/mL과 400 µg/mL의 WSY-1075 농도에서 PAM와 A23187에 의해 유도되는 세포 독성을 제거하는 효과가 있었다. 또한 PMA와 23187로 자극된 RPMCs에서 전연븡성 사이토카인의 생성 및 히스타민의 방출을 억제하는 효과가 있었다. 더욱이 가려움 유발물질로 유도된 소양증을 억제하는 효과가 있음을 본 연구에서 밝혔다.
2. WSY-1075는 PMA와 A23187에 의해 활성화된 RMPCs에서 TNF-α, IL-1β 및 IL-6을 억제하는 효과가 있었다.
이러한 결과는 활성화된 RPMCs에서 염증관련 물질을 억제하는 WSY-1075의 농도는 최소한 200 µg/mL이라는 것을 알 수 있었다.
그 결과 100 µg/mL 이하의 농도에서는 약간 증가하는 경향을 보였지만, 대조군과 큰 차이는 없었다.
그 결과 TNF-α와 IL-1β는 비교적 많은 량이 유도되었고, IL-6는 이들 사이토카인에 비해서 상대적으로 적은 량이 유도되었다.
그러나 200 µg/mL와 400 µg/mL의 WSY-1075 농도에서는 효과적으로 이들 사이토카인을 억제하는 효과가 있었다. 또한 compound 48/80으로 활성화된 RPMCs에서 WSY-1075의 농도에 의존적으로 히스타민이 억제되는 효과가 있었다. 이러한 결과는 활성화된 RPMCs에서 염증관련 물질을 억제하는 WSY-1075의 농도는 최소한 200 µg/mL이라는 것을 알 수 있었다.
이들 물질에 대한 가려움 유발 모델동물은 주로 ICR, ddY, NC/Nga, hairless 등의 마우스가 사용되고 있는데36), 본 연구는 ICR 마우스를 선택하여 WSY-1075을 1시간 전에 경구투여한 후 compound 48/80, 히스타민, 세로토닌 또는 물질 P를 등쪽 피하에 주사하여 60분 동안 뒷발로 긁는 누적 횟수를 조사하였다. 그 결과 200 mg/kg 또는 400 mg/kg의 WSY-1075 농도에서 소양증을 억제하는 효과가 있었다. 이와 같이 소양증을 완화시키는 WSY-1075의 농도는 200 mg/kg이상 경구투여할 때 효과를 볼 수 있는 것으로 사료된다.
이상의 결과를 종합해볼 때 WSY-1075는 세포독성이 없을 뿐만 아니라 PMA와 A2317 처리에 의한 세포 손상을 보호하는 효과가 있었다. 또한 WSY-1075는 PMA와 A2317 또는 compound 48/80으로 활성화된 RPMCs의 전염증성 사이토카인뿐만 아니라 가려움 유발 매개물질인 histamine 방출에 대한 억제 효과가 있었다.
이상의 결과를 종합해볼 때 WSY-1075는 세포독성이 없을 뿐만 아니라 PMA와 A2317 처리에 의한 세포 손상을 보호하는 효과가 있었다. 또한 WSY-1075는 PMA와 A2317 또는 compound 48/80으로 활성화된 RPMCs의 전염증성 사이토카인뿐만 아니라 가려움 유발 매개물질인 histamine 방출에 대한 억제 효과가 있었다. 특히 compound 48/80, 히 스타민, 세로토닌 또는 물질 P로 유도한 ICR 마우스에서 WSY-1075는 가려음증을 완화시킬 수 있는 물질임을 확인할 수 있었다.
또한 WSY-1075는 PMA와 A2317 또는 compound 48/80으로 활성화된 RPMCs의 전염증성 사이토카인뿐만 아니라 가려움 유발 매개물질인 histamine 방출에 대한 억제 효과가 있었다. 특히 compound 48/80, 히 스타민, 세로토닌 또는 물질 P로 유도한 ICR 마우스에서 WSY-1075는 가려음증을 완화시킬 수 있는 물질임을 확인할 수 있었다. 따라서 WSY-1075는 인체의 면역능조절에 관여하고 있음을 확인할 수 있었다.
특히 compound 48/80, 히 스타민, 세로토닌 또는 물질 P로 유도한 ICR 마우스에서 WSY-1075는 가려음증을 완화시킬 수 있는 물질임을 확인할 수 있었다. 따라서 WSY-1075는 인체의 면역능조절에 관여하고 있음을 확인할 수 있었다.
1. WSY-1075는 세포독성이 없었고, PMA와 A23187에 의한 세포손상을 보호하는 효과가 있었다.
3. WSY-1075는 compound 48/80에 의해 활성화된 RMPCs에서 히스타민을 방출 억제 효과가 있었다.
4. WSY-1075는 compound 48/80, 히스타민, 세로토닌 또는 물질 P로 유도한 ICR 마우스의 소양증을 억제하는 효과가 있었다.
위와 같이 WSY-1075는 RPMCs의 활성에 따른 염증 매개물의 억제와 마우스 소양증 완화에 효과적인 한약조성물로, 효과적인 경구투여 농도는 200 mg/kg 이상인 것으로 나타났다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
WSY-1075의 면역조절에 대한 효과를 조사하여 얻은 결론은 무엇인가?
1. WSY-1075는 세포독성이 없었고, PMA와 A23187에 의한 세포손상을 보호하는 효과가 있었다.
2. WSY-1075는 PMA와 A23187에 의해 활성화된 RMPCs에서 TNF-α, IL-1β 및 IL-6을 억제하는 효과가 있었다.
3. WSY-1075는 compound 48/80에 의해 활성화된 RMPCs에서 히스타민을 방출 억제 효과가 있었다.
4. WSY-1075는 compound 48/80, 히스타민, 세로토닌 또는 물질 P로 유도한 ICR 마우스의 소양증을 억제하는 효과가 있었다.
WSY-1075란?
WSY-1075는 공진단(拱辰丹)을 모방으로 면역조절을 목적으로 가감한 처방으로 공진단은 송(宋)대 왕구(王璆)가 저술한 『시재백일선방(是齋百一選方)』1)에서 최초로 수록되어진 것으로 보여지며 이후 『동의보감(東醫寶鑑)2)을 비롯한 다수의 의서에서 활용된 장부허손(臟腑虛損)을 예방하고 치료하는 것을 목적으로 활용된 처방이다. 공진단은 녹용(鹿茸, Cervi parvum Cornu), 산수유(山茱萸, Corni Fructus), 당귀(當歸, Angelica gigantis Radix), 사향(麝香, Moschus)의 네가지 약재로 구성되어 있으나 고가의 약재의 사용과 일부 약재의 진위 논란 등으로 다른 대체 약물을 가감하거나 흑원(黑元)과 같이 단순화하여 동일 목적으로 사용되어진 처방이 활용되어지고 있다.
공진단이란?
WSY-1075는 공진단(拱辰丹)을 모방으로 면역조절을 목적으로 가감한 처방으로 공진단은 송(宋)대 왕구(王璆)가 저술한 『시재백일선방(是齋百一選方)』1)에서 최초로 수록되어진 것으로 보여지며 이후 『동의보감(東醫寶鑑)2)을 비롯한 다수의 의서에서 활용된 장부허손(臟腑虛損)을 예방하고 치료하는 것을 목적으로 활용된 처방이다. 공진단은 녹용(鹿茸, Cervi parvum Cornu), 산수유(山茱萸, Corni Fructus), 당귀(當歸, Angelica gigantis Radix), 사향(麝香, Moschus)의 네가지 약재로 구성되어 있으나 고가의 약재의 사용과 일부 약재의 진위 논란 등으로 다른 대체 약물을 가감하거나 흑원(黑元)과 같이 단순화하여 동일 목적으로 사용되어진 처방이 활용되어지고 있다.
참고문헌 (36)
Wang Gu. Sijaebaekilseonbang. Shanghai : Publishing house of Shanghai University of Traditional Chinese Medicine. 1991 : 280.
Heo Joon(writing), translating department of orintal medical books(translator). New translation printed side by side with original Donguibogam. Seoul : Beopinmoonhwasa. 2007 : 1251.
Nakae S, Suto H, Kakurai M, Sedgwick JD, Tsai M, Galli SJ. Mast cells enhance T cell activation: Importance of mast cell-derived TNF. Proc Natl Acad Sci USA. 2005 ; 102 : 6467-72.
Sismanopoulos N, Delivanis DA, Alysandratos KD, Angelidou A, Therianou A, Kalogeromitros D, Theoharides TC. Mast cells in allergic and inflammatory diseases. Curr Pharm Des. 2012 ; 18 : 2261-77.
Aoki R, Kawamura T, Goshima F, Ogawa Y, Nakae S, Nakao A, Moriishi K, Nishiyama Y, Shimada S. Mast Cells Play a Key Role in Host Defense against Herpes Simplex Virus Infection through TNF- $\alpha$ and IL-6 Production. J Invest Dermatol. 2013 : in press.
Choi IY, Kim SJ, Kim MC, Kim HL, Shin HJ, Kang TH, Jeong HJ, Shim JS, Kim JH, Yang DC, Hong SH, Kim HM, Um JY. Inhibitory effects of the transgenic Panax ginsengs on phorbol ester plus A23187-induced IL-6 production and cyclooxygenase-2 via suppression of NF- $\kappa{B}$ and MAPKs in HMC-1. Immunopharmacol Immunotoxicol. 2011 ; 33 : 205-10.
Lasic D, Cvitanovic MZ, Uglesic B, Visic V, Hlevnjak I. Exanthema medicamentosum as a side effect of promazine. Psychiatr Danub. 2011 ; 23 : 194-71.
Martynova MG, Bystrova OA, Moiseeva OM, Evdonin AL, Kondratov KA, Medvedeva ND. The presence of ANP in rat peritoneal mast cells. Cell Res. 2005 ; 15 : 811-6.
Mihara K, Kuratani K, Matsui T, Nakamura M, Yokota K. Vital role of the itch-scratch response in development of spontaneous dermatitis in NC/Nga mice. Br J Dermato. 2004 ; 151 : 335？45.
Chang YH. (The)experimental study on the effect of Kongjindan on the Kangjeongboki action in rats. Daegu Haany University. 1989.
Jung HC, Jang HJ, Sung WY, Lee SH, Son JH, Han SH. A study of Gongjin-dan in patients with mild Dementia of Alzheimer type. J Orient Neuropsychiatry. 2004 ; 15(2) : 141-8.
Hwang SM, Chung DK. The Effects of KongJin-Dan(KJD) on the Alzheimer's Disease Model Induced by CT105. J Orien Neuropsychiatry. 2004 ; 15(2) : 103-18.
Choi KH, Park CS. An analysis of the Gongjindan's ingredients and its efficacy on anti-oxidation. Korea J Herbology. 2007 ; 22(2) : 51-63.
Kim HJ, Hwang SY, Mok JY, Hwang BS, Jeong SI, Jang SI. Gagam-Gongjin-dan Extract Attenuates Immune Responses to Ovalbuminin Balb/c Mice. Kor J Herbology. 2009 ; 24(4) : 127-35.
Kim HJ, Mok JY, Park KH, Jeong SI, Hwang BS, Hwang SY, Cho JK, Jang SI. Hepatoprotective Effect of Gagam-GongJin-dan extract against Acetaminophen-Induced Liver Injury in Mice. Kor J Herbology. 2010 ; 25(3) : 149-57.
Kim OK. Antidiabetic and Antioxidative Effect of Lycii fructus in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats. Kor J Pharmacogn. 2009 ; 40(2) : 128-36.
Cho YJ, Chun SS, Cha WS, Park JH, Lee KH, Kim JH, Kwon HJ, Yoon SO. Antioxidative and Antihypertensive Effects of Lycii fructus Extracts. J Kor Soc Food Sci Nutr. 2005 ; 34(9) : 1308-13.
Park YC, Lim JD, Kim JB, Lee SD. Review of Red Ginseng in terms of Mechanisms for Pharmacodynamics and Toxicity. J Kor Orient med. 2012 ; 33(3) : 200-30.
Oh YC, Kang OH, Kim SB, Mun SH, Park CB, Kim YG, Kim YI, Lee YS, Han SH, Keum JH, Shin DW, Ma JY, Kwon DY. Anti-inflammatory effect of sinomenine by inhibition of pro-inflammatory mediators in PMA plus A23187-stimulated HMC-1 Cells. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2012 ; 16 : 1184-91.
Kim SJ, Jeong HJ, Yi BJ, Kang TH, An NH, Lee EH, Yang DC, Kim HM, Hong SH, Um JY. Transgenic Panax ginseng inhibits the production of TNF-alpha, IL-6, and IL-8 as well as COX-2 expression in human mast cells. Am J Chin Med. 2007 ; 35 : 329-39.
Moller A, Henz BM, Grutzkau A, Lippert U, Aragane Y, Schwarz T, Kruger-Krasagakes S. Comparative cytokine gene expression: regulation and release by human mast cells. Immunology. 1998 ; 93(2) : 289-95.
Hosoda M, Yamaya M, Suzuki T, Yamada N, Kamanakam M, Sekizawa K, Butterfield, JH, Watanabe T, Nishimura H, Sasaki H. Effects of rhinovirus infection on histamine and cytokine production by cell lines from human mast cells and basophils. J Immunol. 2002 ; 169 : 1482-91.
Bradding P, Roberts JA, Britten KM, Montefort S, Djukanovic R, Mueller R, Heusser CH, Howarth PH, Holgate ST. Interleukin -4, -5, -6 and tumour necrosis factor-a in normal and asthmatic airways: evidence for the human mast cell as a source of these cytokines. J Respir Cell Mol Biol. 1994 ; 10 : 471-80.
Plaut M, Pierce JH, Watson CJ, Hanley-Hyde J, Nordan RP, Paul WE. Mast cell lines produce lymphokines in response to cross-linkage of Fc epsilon RI or calcium ionophores. Nature. 1989 ; 339 : 64-7.
Benyon RC, Robinson C, Church MK. Differential release of histamine and eicosanoids from human skin mast cells activated by IgE-dependent and non-immunological stimuli. Br J Pharmacol. 1989 ; 97 : 898-904.
Takubo M, Ueda Y, Yatsuzuka R, Jiang S, Fujii Y, Kamei C. Characteristics of scratching behavior induced by some chemical mediators in hairless mice. J Pharmacol Sci. 2006 ; 100 : 285-8.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.