진피 메탄올 추출물의 활성산소종 생성을 통한 인체 백혈병 세포의 apoptosis 유발 Induction of Apoptosis by Citri Pericarpium Methanol Extract through Reactive Oxygen Species Generation in U937 Human Leukemia Cells원문보기
진피(Citri Pericarpium)의 항암작용 기전 해석을 위하여 U937 백혈병 세포의 apoptosis 유발에 미치는 메탄올 추출물(EMCP)의 영향을 조사하였으며, apoptosis 조절에 중요한 몇 가지 유전자들의 발현 및 활성 변화, ROS의 생성 변화를 조사하였다. EMCP 처리에 의한 U937 세포의 증식 억제는 apoptosis 유도와 연관성이 있음을 DAPI 염색을 통한 apoptotic body 출현의 증가 및 Flow cytometry 분석에 의한 Sub-G1기 세포 빈도의 증가로 확인하였다. EMCP 처리에 의한 apoptosis 유도에서 Bax 발현 증가, caspases의 활성 및 PARP의 단편화 등이 동반되었으며, ROS 생성의 증가와 연관성이 있었다. 산화적 손상에 대해 세포나 조직을 보호하는 역할을 하는 것으로 알려진 세포 내 항산화 효소인 HO-1의 발현이 EMCP의 처리에 의해 증가되었으나 ROS 생성 억제제인 NAC의 전처리에 의해 감소된 HO-1의 발현은 전사인자인 Nrf2의 핵으로의 이동 억제와 관련되어 있었다. 이상의 결과에서 EMCP 처리에 의한 U937 세포의 apoptosis 유발에는 ROS 생성의 증가와 pNrf2에 의해 조절되는 HO-1의 발현 증가가 중요한 기전으로 작용한다는 것을 알 수 있었다. 이러한 자료는 진피의 항암기전 해석을 이해하는데 중요한 기초자료로서 활용될 수 있을 것으로 생각된다.
진피(Citri Pericarpium)의 항암작용 기전 해석을 위하여 U937 백혈병 세포의 apoptosis 유발에 미치는 메탄올 추출물(EMCP)의 영향을 조사하였으며, apoptosis 조절에 중요한 몇 가지 유전자들의 발현 및 활성 변화, ROS의 생성 변화를 조사하였다. EMCP 처리에 의한 U937 세포의 증식 억제는 apoptosis 유도와 연관성이 있음을 DAPI 염색을 통한 apoptotic body 출현의 증가 및 Flow cytometry 분석에 의한 Sub-G1기 세포 빈도의 증가로 확인하였다. EMCP 처리에 의한 apoptosis 유도에서 Bax 발현 증가, caspases의 활성 및 PARP의 단편화 등이 동반되었으며, ROS 생성의 증가와 연관성이 있었다. 산화적 손상에 대해 세포나 조직을 보호하는 역할을 하는 것으로 알려진 세포 내 항산화 효소인 HO-1의 발현이 EMCP의 처리에 의해 증가되었으나 ROS 생성 억제제인 NAC의 전처리에 의해 감소된 HO-1의 발현은 전사인자인 Nrf2의 핵으로의 이동 억제와 관련되어 있었다. 이상의 결과에서 EMCP 처리에 의한 U937 세포의 apoptosis 유발에는 ROS 생성의 증가와 pNrf2에 의해 조절되는 HO-1의 발현 증가가 중요한 기전으로 작용한다는 것을 알 수 있었다. 이러한 자료는 진피의 항암기전 해석을 이해하는데 중요한 기초자료로서 활용될 수 있을 것으로 생각된다.
Citri Pericarpium is one of the most commonly used traditional herbal medicines in Korea, China, and Japan. Its extracts have many properties including the treatment of indigestion and inflammatory respiratory syndromes such as bronchitis and asthma. However, the underlying molecular mechanisms of a...
Citri Pericarpium is one of the most commonly used traditional herbal medicines in Korea, China, and Japan. Its extracts have many properties including the treatment of indigestion and inflammatory respiratory syndromes such as bronchitis and asthma. However, the underlying molecular mechanisms of anti-cancer activity and molecular targets are not fully understood. In this work, we investigated the anti-proliferative activity of Citri Pericapium (EMCP) methanol extract on reactive oxygen species (ROS) production and the association of these effects with apoptotic cell death using U937 human leukemia cells in vitro. EMCP treatment decreased cell proliferation in a dose-dependent manner following an increase of the sub-G1 phase, the down-regulation of Bax proteins, the activation of caspases, the degradation of poly (ADP-ribose) polymerase proteins (PARP), and the induction of ROS generation. However, the quenching of ROS generation by N-acetyl-L-cysteine administration, a scavenger of ROS, reversed the EMCP-induced apoptosis effects. In addition, heme oxygenase-1 expression also recovered by inhibiting the nuclear translocation of phosphorylated NF-E2-related factor 2. Taken together, our data indicate that ROS are involved as key mediators in the early molecular events in the EMCP-induced apoptotic pathway.
Citri Pericarpium is one of the most commonly used traditional herbal medicines in Korea, China, and Japan. Its extracts have many properties including the treatment of indigestion and inflammatory respiratory syndromes such as bronchitis and asthma. However, the underlying molecular mechanisms of anti-cancer activity and molecular targets are not fully understood. In this work, we investigated the anti-proliferative activity of Citri Pericapium (EMCP) methanol extract on reactive oxygen species (ROS) production and the association of these effects with apoptotic cell death using U937 human leukemia cells in vitro. EMCP treatment decreased cell proliferation in a dose-dependent manner following an increase of the sub-G1 phase, the down-regulation of Bax proteins, the activation of caspases, the degradation of poly (ADP-ribose) polymerase proteins (PARP), and the induction of ROS generation. However, the quenching of ROS generation by N-acetyl-L-cysteine administration, a scavenger of ROS, reversed the EMCP-induced apoptosis effects. In addition, heme oxygenase-1 expression also recovered by inhibiting the nuclear translocation of phosphorylated NF-E2-related factor 2. Taken together, our data indicate that ROS are involved as key mediators in the early molecular events in the EMCP-induced apoptotic pathway.
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문제 정의
본 실험에서는 진피 추출물의 항암활성 기전을 조사하기 위하여 인체 백혈병세포인 U937 세포를 대상으로 진피 메탄올 추출물(methanol extract of Citri Pericarpium, MECP)의 암세포 성장억제 효과, apoptosis 유발에 미치는 영향을 조사하였으며, 이러한 과정에 ROS의 발생과 이와 관련되어 있는 유전자의 발현 조절이 중요한 인자로 작용하고 있음을 제시하였다.
제안 방법
(A) U937 cells were seeded at 3×105 cells per well in a 6-well plate. Cells were treated with diverse concentration of EMCP for 24 h and MTT assay was performed. The significance was determined by a Student’s t-test (*p<0.
EMCP의 처리에 따른 U937 세포의 성장억제 정도를 알아보기 위하여 적정 농도의 EMCP를 24 시간 동안 처리한 후 MTT assay를 실시하였으며, Fig. 1A에 나타낸 바와 같이 EMCP 처리 농도 의존적으로 U937의 세포 증식이 억제되었음을 확인하였다. 동일 조건에서 U937 세포의 전체적인 형태변화를 관찰한 결과, EMCP 처리농도가 증가할수록 전체적인 세포의 밀도가 유의적으로 감소함을 알 수 있었으며(Fig.
EMCP의 처리에 의한 U937 세포의 apoptosis 유발에 ROS생성과 연관성의 여부를 H2DCFDA probe를 이용하여 유세포분석기로 조사하였다. H2DCFDA는 형광 염색시약으로 세포 내의 esterase에 의해 DCFH로 가수분해되는데, DCFH는 ROS가 존재하는 경우 DCF로 산화되어 형광을 나타내므로 ROS의 생성량은 DCF의 발현량에 상응하는 것으로 생각할 수 있다[9].
EMCP의 처리에 의한 U937 세포의 증식 억제가 apoptosis유발과 관련성이 있는지의 여부를 조사하기 위하여 핵의 형태적 변화와 flow cytometry 분석을 실시하였다. 우선 apoptosis의 직접적인 증거를 제시하기 위하여 정상 및 EMCP가 처리된 배지에서 24 시간 동안 배양한 U937 세포를 대상으로 핵산에 특이적으로 결합하는 DAPI 염색을 통하여 핵의 형태학적 변화를 관찰하였다.
DCFDA, Molecular Probes, Leiden, Netherlands) 10 μM로 20분간 염색 후 DNA flow cytometer를 사용하여 분석을 하였다. ROS 억제를 위한 ROS scavenger인 N-ace-tylcysteine(NAC, Sigma-Aldrich) 처리는 EMCP을 처리하기 1 시간 전처리하였다.
ROS의 양적 변화를 확인하기 위하여 준비된 세포들을 fluorescent probe 인 2'7'-di-chlorodihydrofluorescein diacetate(H2DCFDA, Molecular Probes, Leiden, Netherlands) 10 μM로 20분간 염색 후 DNA flow cytometer를 사용하여 분석을 하였다.
U937 세포에서 EMCP가 유발하는 apoptosis 정도를 정량적으로 분석하기 위하여 정상 및 EMCP가 24 시간 동안 처리된 세포들을 모은 다음 2,000 rpm으로 5 분간 원심분리하여 상층액을 제거한 후 PBS를 이용하여 2~3회 정도 세척하였다. 준비된 세포는 Cycle TEST PLUS DNA REAGENT Kit(Becton Dickinson, San Jose, CA, USA)를 이용하여 고정 및 염색을 하여 4°C, 암실에서 30 분 동안 반응을 시켰다.
준비된 세포는 Cycle TEST PLUS DNA REAGENT Kit(Becton Dickinson, San Jose, CA, USA)를 이용하여 고정 및 염색을 하여 4°C, 암실에서 30 분 동안 반응을 시켰다. 반응시킨 세포를 35-mm mesh를 이용하여 단일세포로 분리한 후 FACS Calibur (Becton Dickinson)를 적용시켜 형광반응에 따른 Cellular DNA content 및 histogram을 CellQuest software 및 ModiFit LT (Becton Dickinson) 프로그램을 이용하여 분석하였다.
분리된 단백질이 전이된 nitrocellulose membrane을 5% skim milk를 1 시간 처리하여 비특이적인 단백질들에 대한 blocking을 실시하고 1 차 antibody를 처리하여 상온에서 2 시간 이상 또는 4°C에서 over night시킨 다음 PBS-T로 세척(10 분간 3번)하고 처리된 1차 antibody에 맞는 2차 antibody (PBS-T로 1:1,500으로 희석하여 사용)를 사용하여 상온에서 1 시간 정도 반응시켰다. 반응이 끝난 후 암실에서 Enhanced Chemiluminoesence solution(Amersham Life Science Corp., Arlington Heights, IL, USA)을 적용시킨 다음 X-ray film에 감광시켜 특정 단백질의 발현양을 분석하였다.
분리된 단백질이 전이된 nitrocellulose membrane을 5% skim milk를 1 시간 처리하여 비특이적인 단백질들에 대한 blocking을 실시하고 1 차 antibody를 처리하여 상온에서 2 시간 이상 또는 4°C에서 over night시킨 다음 PBS-T로 세척(10 분간 3번)하고 처리된 1차 antibody에 맞는 2차 antibody (PBS-T로 1:1,500으로 희석하여 사용)를 사용하여 상온에서 1 시간 정도 반응시켰다.
세포가 부착된 slide glass를 PBS로 2~3 회 정도 세척하고 PBS가 마르기 전에 0.2%의 Triton X-100 (Amresco, Solon, OH, USA)를 첨가하여 상온에서 10분간 고정한 후 2.5 μg/ml 농도의 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI, Sigma-Aldrich) 용액을 처리하여 상온에서 15 분간 염색하였다.
조건 하에서 배양하였다. 세포수의 증식에 따른 과밀도 현상과 적정수의 세포를 유지하기 위하여 성장배지의 교환을 매 24 시간마다 실시하였다.
5 μg/ml 농도의 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI, Sigma-Aldrich) 용액을 처리하여 상온에서 15 분간 염색하였다. 염색이 끝난 후 DAPI 용액을 충분하게 세척하고 mounting solution을 처리한 후 형광현미경을 이용하여 400배의 배율로 각 농도에 따른 암세포의 핵의 형태 변화를 관찰한 다음 Axio Vision 프로그램을 이용하여 사진 촬영을 하였다.
EMCP의 처리에 의한 U937 세포의 증식 억제가 apoptosis유발과 관련성이 있는지의 여부를 조사하기 위하여 핵의 형태적 변화와 flow cytometry 분석을 실시하였다. 우선 apoptosis의 직접적인 증거를 제시하기 위하여 정상 및 EMCP가 처리된 배지에서 24 시간 동안 배양한 U937 세포를 대상으로 핵산에 특이적으로 결합하는 DAPI 염색을 통하여 핵의 형태학적 변화를 관찰하였다. Fig.
준비된 세포는 Cycle TEST PLUS DNA REAGENT Kit(Becton Dickinson, San Jose, CA, USA)를 이용하여 고정 및 염색을 하여 4°C, 암실에서 30 분 동안 반응을 시켰다.
핵과 세포질 단백질을 분리하기 위하여 NE-PER® kit(PIERCE, Rockford, IL, USA)를 사용하였으며, 준비된 적정량의 세포에 cytosolic extraction reagent (CER)Ⅰ을 처리하고 약 15초간 부유시킨 후 10 분간 4°C에 보관했다.
대상 데이터
본 연구에 사용된 진피는 대한생약㈜(부산, 한국)에서 구입하여 흐르는 물에 수회 세척하고 그늘에서 하루 동안 건조시켜 사용하였다. MECP를 얻기 위하여 건조된 진피 200 g에 메탄올을 1.
실험에 사용한 인체 백혈병 세포(U937)는 생명공학연구소(KRIBB, 대전, 한국)에서 분양 받았으며, 암세포의 배양을 위해 RPMI-1640 배지(Gibco BRL, Grand Island, NY, USA)와 10%의 우태아혈청(fetal bovine serum, FBS, Gibco BRL) 및 1%의 penicillin이 포함된 성장배지를 사용하였으며, 37°C, 5% CO2 조건 하에서 배양하였다.
데이터처리
The significance was determined by a Student’s t-test (*p<0.05, compared with control).
모든 실험결과는 평균값으로 표시하였고 SigmaPlot을 이용하여 Student t-test를 이용하여 통계적 유의성을 얻었다.
이론/모형
HO-1은 산화적 손상 억제, 염증 반응 감소 및 세포 증식 조절을 통해 조직의 항상성 유지에 주용한 역할을 수행한다[6]. 따라서 EMCP에 의한 U937 세포의 apoptosis 유발에서 HO-1의 역할을 조사하기 위하여 HO-1의 발현 정도를 Western blot분석법으로 조사하였다. 그 결과 EMCP가 처리한 세포에서 현저히 증가되었던 HO-1의 발현은 NAC의 전처리에 의해 EMCP를 처리하지 않은 대조군과 비슷한 수준으로 감소되었다(Fig.
최종적으로 16,000 rpm에서 10 분간 원심분리를 시행하여 핵의 단백질로 이루어진 상층액을 얻어냈다. 분리된 상층액에서 단백질을 정량법에 의해 정량하였다.
성능/효과
우선 apoptosis의 직접적인 증거를 제시하기 위하여 정상 및 EMCP가 처리된 배지에서 24 시간 동안 배양한 U937 세포를 대상으로 핵산에 특이적으로 결합하는 DAPI 염색을 통하여 핵의 형태학적 변화를 관찰하였다. Fig. 2A의 결과에서 알 수 있듯이 정상 조건에서 배양된 세포와는 다르게 EMCP가 처리된 배지에서 배양된 세포에서는 apoptosis가 일어난 세포에서 전형적으로 관찰되는 DNA 단편화에 의한 apoptotic body의 형성[5]이 처리 농도의존적으로 증가되었음을 확인하였다. 다음은 propidium iodide (PI) 염색을 통한 세포주기 빈도 변화를 조사하였으며, Fig.
H2DCFDA는 형광 염색시약으로 세포 내의 esterase에 의해 DCFH로 가수분해되는데, DCFH는 ROS가 존재하는 경우 DCF로 산화되어 형광을 나타내므로 ROS의 생성량은 DCF의 발현량에 상응하는 것으로 생각할 수 있다[9]. Fig. 4A에서 나타낸 바와 같이 ROS 생성은 EMCP 처리 후 30 분부터 증가하여 6 시간 후에는 약 10배 이상 증가되었으며, 이러한 ROS 생성의 증가가 ROS scavenger인 NAC의 전처리에 의하여 완벽하게 억제되었다(Fig. 4B). 따라서 EMCP처리에 의한 ROS 생성이 apoptosis 유발에 직접적으로 관여하는지를 조사한 결과, Fig.
따라서 EMCP에 의한 U937 세포의 apoptosis 유발에서 HO-1의 역할을 조사하기 위하여 HO-1의 발현 정도를 Western blot분석법으로 조사하였다. 그 결과 EMCP가 처리한 세포에서 현저히 증가되었던 HO-1의 발현은 NAC의 전처리에 의해 EMCP를 처리하지 않은 대조군과 비슷한 수준으로 감소되었다(Fig. 6A). 또한 HO-1의 발현을 조절하는 전사인자인 Nrf2의 세포질에서 핵으로의 이동을 조사한 결과, 인산화되어 핵으로 이동하였던 Nrf2가 전처리한 NAC에 의해 이동이 억제되었다(Fig.
2A의 결과에서 알 수 있듯이 정상 조건에서 배양된 세포와는 다르게 EMCP가 처리된 배지에서 배양된 세포에서는 apoptosis가 일어난 세포에서 전형적으로 관찰되는 DNA 단편화에 의한 apoptotic body의 형성[5]이 처리 농도의존적으로 증가되었음을 확인하였다. 다음은 propidium iodide (PI) 염색을 통한 세포주기 빈도 변화를 조사하였으며, Fig. 2B에 나타낸 바와 같이 apoptosis 유발 집단에 해당하는 sub-G1기의 세포 빈도가 EMCP 처리 농도 의존적으로 유의적으로 증가하였음을 알 수 있었다. 따라서 EMCP 처리에 의한 인체 백혈병세포의 증식억제는 apoptosis과 직접적인 연관성이 있음을 알 수 있었다.
1A에 나타낸 바와 같이 EMCP 처리 농도 의존적으로 U937의 세포 증식이 억제되었음을 확인하였다. 동일 조건에서 U937 세포의 전체적인 형태변화를 관찰한 결과, EMCP 처리농도가 증가할수록 전체적인 세포의 밀도가 유의적으로 감소함을 알 수 있었으며(Fig. 1B), membrane blebbing 현상과 같은 apoptosis 유발 시 특이하게 관찰되는 형태적 변형[14]이 관찰되었다. 이러한 결과를 바탕으로 EMCP에 의한 U937 세포 증식억제가 apoptosis의 유발과 관계가 있을 것으로 예상되어 추후 실험을 진행하였다.
2B에 나타낸 바와 같이 apoptosis 유발 집단에 해당하는 sub-G1기의 세포 빈도가 EMCP 처리 농도 의존적으로 유의적으로 증가하였음을 알 수 있었다. 따라서 EMCP 처리에 의한 인체 백혈병세포의 증식억제는 apoptosis과 직접적인 연관성이 있음을 알 수 있었다.
4B). 따라서 EMCP처리에 의한 ROS 생성이 apoptosis 유발에 직접적으로 관여하는지를 조사한 결과, Fig. 5A에서 알 수 있듯이 EMCP가 처리된 세포에서 NAC의 전처리에 의하여 Sub-G1에 해당되는 세포의 빈도가 유의적으로 감소되었으며, caspase-3의 표적 단백질인 PARP의 단편화 감소 및 pro-apoptotic 단백질인 Bax의 발현 저하가 뚜렷하게 나타났다. 이상의 결과는 EMCP에 의한 apoptosis 유발이 ROS 생성 의존적임을 보여주는 것이다.
Caspase는 세포의 apoptosis 유발에 핵심적인 역할을 하는 인자로서 불활성 상태로 세포내의 핵과 mitochondria의 외막에 존재하다가 apoptosis를 유도하는 여러 자극에 의하여 활성화된다. 따라서 caspase의 활성화는 apoptosis 유도에 대한 증거로써 많은 선행연구에서 검증되어 왔으며[4, 14], 본 실험에서 조사된 3가지의 caspase 단백질의 비활성형 발현이 모두 현저하게 감소되어, EMCP 처리에 의해 그들의 활성이 증가되었음을 알 수 있었다. 또한 활성화된 caspase-3의 대표적인 표적 단백질인 PARP 및 β-catenin의 단편화 및 발현 저하는 EMCP 처리에 의하여 caspase가 활성화되었을 것이라는 추측을 뒷받침하여 주는 결과이다.
6A). 또한 HO-1의 발현을 조절하는 전사인자인 Nrf2의 세포질에서 핵으로의 이동을 조사한 결과, 인산화되어 핵으로 이동하였던 Nrf2가 전처리한 NAC에 의해 이동이 억제되었다(Fig. 6B). 이상의 결과는 EMCP에 의한 apoptosis 유발에는 ROS의 생성 증가가 깊이 관여되어 있으며, 이러한 산화적 스트레스에 대응하기 위한 HO-1의 발현이 pNrf2의 핵으로의 이동에 의해 조절 받고 있음을 보여주는 것이다.
또한 활성화된 caspase-3의 대표적인 표적 단백질인 PARP 및 β-catenin의 단편화 및 발현 저하는 EMCP 처리에 의하여 caspase가 활성화되었을 것이라는 추측을 뒷받침하여 주는 결과이다.
6B). 이상의 결과는 EMCP에 의한 apoptosis 유발에는 ROS의 생성 증가가 깊이 관여되어 있으며, 이러한 산화적 스트레스에 대응하기 위한 HO-1의 발현이 pNrf2의 핵으로의 이동에 의해 조절 받고 있음을 보여주는 것이다.
5A에서 알 수 있듯이 EMCP가 처리된 세포에서 NAC의 전처리에 의하여 Sub-G1에 해당되는 세포의 빈도가 유의적으로 감소되었으며, caspase-3의 표적 단백질인 PARP의 단편화 감소 및 pro-apoptotic 단백질인 Bax의 발현 저하가 뚜렷하게 나타났다. 이상의 결과는 EMCP에 의한 apoptosis 유발이 ROS 생성 의존적임을 보여주는 것이다.
이상의 결과들을 바탕으로 하여 EMCP 처리에 의한 apoptosis 유발 현상과 연관된 몇 가지 기본적인 기전 해석의 일환으로 apoptosis 유발과 관련된 단백질의 발현을 Western blotting으로 확인해 보았다. Bax는 Bcl-2 family에 속하는 유전자 중, 대표적인 pro-apoptotic 유전자로 anti-apoptotic Bcl-2와 dimer를 이루고 있지만, Bax의 발현이 증가 또는 Bcl-2의 상대적인 발현 감소는 mitochondria로부터 cytochrome c의 유리를 촉진시켜 종양 억제 유전자인 p53, caspase 및 DNA 단편화와 연관된 endonuclease 등의 활성을 증가시키는 것으로 알려져 있다[15, 20].
후속연구
1B), membrane blebbing 현상과 같은 apoptosis 유발 시 특이하게 관찰되는 형태적 변형[14]이 관찰되었다. 이러한 결과를 바탕으로 EMCP에 의한 U937 세포 증식억제가 apoptosis의 유발과 관계가 있을 것으로 예상되어 추후 실험을 진행하였다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
진피란?
진피(陳皮, Citri Pericarpium)는 운향과(Rutaceae)에 속한 상록 소교목인 귤나무(Citrus unshiu Markovich) 및 같은 속 근연 식물의 성숙한 과실의 열매껍질을 건조한 것으로 한국, 중국 및 일본에서 전통적으로 가장 많이 쓰이는 약재 중 하나이다[13, 17]. 동의보감에는 ‘가슴에 기가 뭉친 것을 풀리게 하고, 입맛을 당기게 하며, 소화를 잘 시키고 이질을 멎게 해준다.
caspases의 역할은?
Apoptosis 조절 기전에 apoptosis의 유도와 억제를 동시에 조절하는 인자들로 구성되어있는 Bcl-2 family 단백질의 발현 변화가 중요한 역할을 하는 경우가 많다[20]. 또한, caspases는 다양한 자극에 발현이 증가하거나 활성화되어 암세포의 apoptosis를 유발시키는 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있어, 항암 치료의 표적 유전자로 주목을 받고 있다[4]. 이들은 정상적으로 증식 중인 세포에서는 pro-enzyme 형태로 존재하고 있다가, apoptosis 유도신호에 의해 활성화되어 직접 또는 간접적으로 세포 내 존재하는 poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) 등과 같은 많은 표적 단백질의 분해에 관여한다고 알려져 있다[18].
진피에 관한 실험적 연구 결과로 보고된 진피의 효능은?
또한 가래를 삭히고 기침을 낫게 한다’고 진피의 효능을 기재하고 있다[8]. 진피에 관한 실험적 연구 결과로는 진피에 함유된 alkaloid 성분의 천식 완화 기능[16], 고지혈증 흰쥐의 지질 저하 효과[19], 진피 에탄올 추출물의 콜라겐 유도 관절염 마우스에서 관절염 개선 효과[8] 및 진피 에탄올 추출물의 HIT-T15 세포의 산화적 손상 억제 효과[7] 등이 보고되어 있으나 암세포 성장 억제나 그 기전에 대한 연구는 미흡한 실정이다.
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