[논문]Genome shuffling을 이용한 에탄올 생산 및 내성 효모 균주의 육종

박아황; 김연희

doi:10.5352/jls.2013.23.10.1192

Genome shuffling을 이용한 에탄올 생산 및 내성 효모 균주의 육종
Breeding of Ethanol-producing and Ethanol-tolerant Saccharomyces cerevisiae using Genome Shuffling 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.23 no.10 = no.162, 2013년, pp.1192 - 1198

박아황 (동의대학교 바이오물질제어공학과) , 김연희 (동의대학교 바이오물질제어공학과)

초록
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바이오 에탄올 생산을 위한 최적 효모균주의 개량을 위해 효모 genome shuffling 법을 이용하여 에탄올내성, 내열성 및 ${\beta}$-1,3-glucanase 활성을 가진 효모균주의 육종을 계획하였다. 본 연구에서는 세포 외 ${\beta}$-1,3-glucanase 활성을 가진 Saccharomyces cerevisiae $BY4742{\Delta}exg1$/pAInu-exgA 균주와 에탄올내성 및 내열성을 가진 S. cerevisiae YKY020 균주를 효모 protoplast fusion을 통하여 융합시켰다. 세포융합에 의해 $40^{\circ}C$에서 내열성을 보이는 네 개의 후보 균주(No. 3, 9, 11, 12)를 선별한 다음, 7% 에탄올 농도에서의 에탄올내성 및 ${\beta}$-1,3-glucanase 활성을 조사하였다. 두 모균주의 모든 표현형을 보이는 하나의 균주(No. 11)가 선별되었고, 이 균주를 BYK-F11이라고 명명하였다. BYK-F11 융합균주는 $BY4742{\Delta}exg1$/pAInu-exgA와 YKY020균주에 비해서 증가된 세포성장속도, 에탄올 내성, ${\beta}$-1,3-glucanase 활성 및 에탄올 생산성을 보임을 알 수 있었다. 따라서 본 연구에서는 다양한 특성을 가지지만 같은 접합형을 가진 효모균주들을 protoplast fusion법을 사용하여 손쉽게 새로운 산업용 효모균주로 육종시킬 수 있다는 것을 증명하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

To improve yeast strains for bioethanol production, yeasts with ethanol tolerance, thermotolerance, and ${\beta}$-1,3-glucanase activity were bred using yeast genome shuffling. Saccharomyces cerevisiae $BY4742{\Delta}exg1$/pAInu-exgA, which has extracellular ${\beta}$-1,3-glucanase activity, and the Aspergillus oryzae and S. cerevisiae YKY020 strains, which exhibit ethanol tolerance and thermotolerance, were fused by yeast protoplast fusion. Following cell fusion, four candidate cells (No. 3, 9, 11, and 12 strains) showing thermotolerance at $40^{\circ}C$ were selected, and their ethanol tolerance (7% ethanol concentration) and ${\beta}$-1,3-glucanase activity were subsequently analyzed. All the phenotypes of the two parent cells were simultaneously expressed in one (No. 11) of the four candidate cells, and this strain was called BYK-F11. The BYK-F11 fused cell showed enhanced cell growth, ethanol tolerance, ${\beta}$-1,3-glucanase activity, and ethanol productivity compared with the $BY4742{\Delta}exg1$/pAInu-exgA and YKY020 strains. The results prove that a new yeast strain with different characters and the same mating type can be easily bred by protoplast fusion of yeasts.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

하지만 지금까지 에너지 자원으로서 활용도가 낮았던 해조류 바이오매스를 이용하기 위해서는 해조류 바이오에탄올의 생산성을 높이는 것이 시급한데, 해조다당을 에탄올 생산을 위한 발효당으로 당화(saccharification)시키는 것이 필요하게 된다. 따라서 본 연구에서는 해조류 바이오매스 중 갈조류의 저장성고분자 다당류인 laminaran [12]에 주목하였다. 주로 β-1,3 linked D-glucose로 되어있는 polymer (glucan)인 laminaran 은 β-1,3-glucanase 효소에 의해 에탄올 생성을 위한 발효당 glucose로 변환이 가능하며, 생산된 β-1,3-glucanase는 맥주 생산, 과일의 glucosidic 전구체로부터의 향기로운 화합물 합성 및 발효 등을 포함하여 바이오공정공학 프로세스에도 폭넓게 사용될 수 있다[5, 16, 19].
또한 YKY020 균주는 laminaran 분해능이 떨어짐으로 첨가한 glucose에 의한 에탄올 생산만이 가능하여 상대적으로 laminaran으로부터 에탄올 수율이 낮음을 알 수 있다. 최근에는 배양 온도의 증가에 따른 에탄올 생산율의 증가도 보고되어있어[13], BYK-F11균주에 대해 40℃의 배양온도에서의 에탄올 생산성을 조사해보았다. YPD (1% dextrose)에 1%의 laminaran이 함유된 배지에서 48시간 동안 40℃에서 진탕 배양하여 성장속도 및 에탄올 생산성을 측정한 결과, 30℃에서 배양했을 때보다 성장속도는 약 23% 정도 감소하였지만 에탄올 수율은 0.

제안 방법

2차로 선별된 6개의 균주를 대상으로 에탄올 내성을 확인해 보았다. 7% 에탄올이 첨가된 YPD 고체배지에 각각의 균주를 동일한 농도로 spot 하여 30℃에서 3일 동안 배양하였다.
선별배지에서 자란 colony를 선별하여, hybrid된 균주(fusant)가 두 모균주, YKY020과 BY4742Δexg1/pAInu-exgA의 특성을 모두 가지는지 비교 조사하였다. Fusant의 에탄올 내성 확인을 위해 7% 또는 8% 에탄올이 포함된 YPD 고체배지를 사용하여 30℃에서 3일 동안 배양하였으며, 내열성 확인을 위해서는 YPD 고체배지를 사용하여 40℃에서 2일 동안 배양하여 확인하였다. 모든 균은 액체배지에서 배양한 다음 세포농도(OD₆₀₀)를 1로 맞추고 10배씩 희석하여 모두 동일한 농도로 spot하여 그 성장 정도를 비교 관찰하였다.
Genome shuffling을 하기에 앞서 효모 균주들을 원형질체 상태로 만들기 위해 zymolase 처리 조건을 조사하였다. 사용한 zymolase는 20,600 units/g (Bioshop)을 사용하였으며, 3 mg/ml의 농도로 반응시간 0분, 10분, 20분, 30분, 40분, 50분, 60분, 90분, 120분 동안 처리하였다.
S. cerevisiae YKY020과 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주를 각각 YPD 배지에 접종하여 30℃에서 하루 동안 배양하여 자란 균체(약 2×108 cells)를 원심분리하여 회수하였다.
YKY020 균주와 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주 및 fusant 인 BYK-F11 균주를 YPD (1% dextrose) 에 1%의 laminaran이 함유된 배지로 30℃에서 48시간 동안 진탕배양하여 성장속도, 잔존환원당 및 에탄올 생산성을 측정하였다.
YPD배지에 각각의 균주를 동일한 농도로 spot하여 30℃에서 1일 배양하고, 0.04% MUG 용액을 분주 한 후 UV 램프 위에서 β-glucanase활성을 비교하였다.
이 두 균주를 zymolase를 사용하여 원형질체화하였는데, 효소처리 60분까지는 원형질체가 관찰되지 않았으며, 90분이 경과되었을 때 부터 균체의 약 40% 이상의 원형질체가 확인이 됨을 알 수 있었다(data not shown). Zymolase 처리 120분 후, 각각의 원형질체를 융합시키고 leucine과 histidine이 첨가된 SD 선별배지에서 배양 후, 자란 37개의 colony 중 growth가 좋은 hybrid 균주 13개를 1차 선별하였다. 선별된 균주를 YPD배지로 옮기고 hybrid 의 유무를 알아보기 위해 내열성, 에탄올 내성 및 β-glucanase의 활성을 조사해 보았다
그러므로 본 연구에서는 Aspergillus oryzae 유래의 exo-β-1,3-glucanase인 EXGA 유전자를 이용하여 laminaran의 당화를 유도하였다[11].
따라서 모균주 및 BYK-F11 균주의 β-glucanase의 활성을 정량 분석해보았다.
하지만 대부분의 genome shuffling법은 야생 균주(wild type strain)를 이용한 protoplast의 UV 처리 및 mutagen에 의한 돌연변이의 유도를 동반하는 경우가 대부분이고[2, 18], 재조합 균주의 융합 및 특정 유전자의 발현 증가를 위한 genome shuffling은 거의 보고된 적이 없다. 따라서 본 연구에서는 원형질체 융합을 통한 genome shuffling 방법을 이용하여 에탄올 내성 및 내열성을 가진 균주와 laminaran 분해 활성을 가지는 재조합 균주로부터 새로운 재조합 융합 균주의 육종을 시도하였다. 또한 개량된 균주를 이용하여 해조류 유래의 바이오매스로부터 바이오 에탄올 생산성을 조사하였다.
또한 β-glucanase의 발현을 위한 배지로는 YPD배지를, 에탄올 내성을 조사하기 위한 배지는 에탄올이 첨가된 YPD배지를 사용하였다.
따라서 본 연구에서는 원형질체 융합을 통한 genome shuffling 방법을 이용하여 에탄올 내성 및 내열성을 가진 균주와 laminaran 분해 활성을 가지는 재조합 균주로부터 새로운 재조합 융합 균주의 육종을 시도하였다. 또한 개량된 균주를 이용하여 해조류 유래의 바이오매스로부터 바이오 에탄올 생산성을 조사하였다.
사용한 zymolase는 20,600 units/g (Bioshop)을 사용하였으며, 3 mg/ml의 농도로 반응시간 0분, 10분, 20분, 30분, 40분, 50분, 60분, 90분, 120분 동안 처리하였다. 매 시간마다 원형질체 sample을 취하여 현미경을 통해 원형질체 형성 유무를 관찰하였다.
Fusant의 에탄올 내성 확인을 위해 7% 또는 8% 에탄올이 포함된 YPD 고체배지를 사용하여 30℃에서 3일 동안 배양하였으며, 내열성 확인을 위해서는 YPD 고체배지를 사용하여 40℃에서 2일 동안 배양하여 확인하였다. 모든 균은 액체배지에서 배양한 다음 세포농도(OD₆₀₀)를 1로 맞추고 10배씩 희석하여 모두 동일한 농도로 spot하여 그 성장 정도를 비교 관찰하였다. 융합체의 β-glucanase 활성을 보기 위해서 YPD 고체배지를 사용하여 plate assay를 수행하였다.
배양상등액에 DNS 용액(1.6% NaOH, 30% K·Na·Tartrate 4H2O, 0.5% DNS)을 첨가하여 3분 동안 boiling 후 5분 동안 cooling시킨 뒤 550 nm에서 흡광도를 측정하여 잔존환원당을 확인하였고, β-glucanase 효소 활성 측정을 위해서는 1% laminaran을 기질로 하여 40℃에서 10분간 반응시킨 후 DNS법에 의해 활성을 측정하였다.
Genome shuffling을 하기에 앞서 효모 균주들을 원형질체 상태로 만들기 위해 zymolase 처리 조건을 조사하였다. 사용한 zymolase는 20,600 units/g (Bioshop)을 사용하였으며, 3 mg/ml의 농도로 반응시간 0분, 10분, 20분, 30분, 40분, 50분, 60분, 90분, 120분 동안 처리하였다. 매 시간마다 원형질체 sample을 취하여 현미경을 통해 원형질체 형성 유무를 관찰하였다.
선별된 균주를 YPD배지로 옮기고 hybrid 의 유무를 알아보기 위해 내열성, 에탄올 내성 및 β-glucanase의 활성을 조사해 보았다
선별배지에서 자란 colony를 선별하여, hybrid된 균주(fusant)가 두 모균주, YKY020과 BY4742Δexg1/pAInu-exgA의 특성을 모두 가지는지 비교 조사하였다.
융합체의 β-glucanase 활성을 보기 위해서 YPD 고체배지를 사용하여 plate assay를 수행하였다.
전기영동 후 0.5 μg/ml의 ethidium bromide (EtBr)로 염색 후 UV상에서 karyotype을 확인하였다.
해조 다당을 이용한 에탄올 생산성을 확인하기 위해 배양된 시료를 원심분리 후 상등액을 gas chromatograph (GC)를 이용하여 분석하였다. GC는 HP 5890 series Ⅱ를 사용하였고, 컬럼은 HP-FFAP capillary column (Agilent technologies, Canada, Cross-Linked PEG-TPA 30 m/ 0.
해조류 바이오매스로부터 바이오에탄올을 효율적으로 생산하기 위한 균주의 육종을 위해 genome shuffling법을 이용하여 S. cerevisiae BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주와 YKY020균주의 융합을 시도하였다.

대상 데이터

GC는 HP 5890 series Ⅱ를 사용하였고, 컬럼은 HP-FFAP capillary column (Agilent technologies, Canada, Cross-Linked PEG-TPA 30 m/ 0.25 mm/ 0.25 µl)을 사용하였다.
3, 9, 11, 12)에서 내열성이 확인되었다. 그리고 내열성을 조금 보였던 2개의 균주(No. 10과 13)도 추가적으로 선별하였다. 6개의 균주를 동일한 농도로 spot하여 40℃에서 2일 동안 배양한 결과, 모균주인 YKY020 균주는 내열성이 있어 40℃에서 자라는 것을 확인하였지만, 또 다른 모균주인 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주는 내열성이 없어 배양 온도 40℃에서는 거의 자라지 못함을 알 수 있다.
본 연구에 사용한 효모 균주는 에탄올 내성과 내열성이 뛰어난 Saccharomyces cerevisiae YKY020 (MATα leu2-3Δ0 his3-Δ200, Δ1) 균주와 S. cerevisiae BY4742Δexg1 균주에 Aspergillus oryzae 유래의 exo-β-1,3-glucanase 유전자(EXGA)가 도입되어 β-glucanase 활성을 가지는 BY4742Δexg1/pAInu-exgA (MAT α leu2-Δ0 ura3-Δ0 his3Δ1 lys2-Δ0 G418, pAInu-exgA : ADH1pexgA-ADH3t ) 균주이다[11].
효모의 성장배지로는 YPD (1% yeast extract, 2% peptone, 2% dxtrose) 배지를 사용하였으며, 원형질체 융합을 선별하기 위한 선별배지로는 영양요구성 아미노산(leucine, histidine)이 함유된 SD (0.67% yeast nitrogen without base amino acids, 2% dextrose, 2% agar) 배지에 원형질체의 삼투압 유지를 위해 1.2 M sorbitol을 넣은 배지(SD-sorbitol)를 사용하였다. 또한 β-glucanase의 발현을 위한 배지로는 YPD배지를, 에탄올 내성을 조사하기 위한 배지는 에탄올이 첨가된 YPD배지를 사용하였다.

데이터처리

분리비는 70 : 1로 했으며 내부 표준물질로 1% (v/v)의 isopropanol을 이용하였다. 각각의 실험은 3번의 independent 실험을 수행하였으며 그 평균값을 산출하였다.

이론/모형

S. cerevisiae YKY020과 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주의 chromosomal DNA는 Sheehan and Weiss [17]에서 사용된 방법으로 1% low melting agarose (Sigma)를 사용하여 DNA plug를 만들어 준비하였다.
따라서 다른 모균주의 특성인 β-glucanase의 활성이 있는지를 plate 활성법을 이용하여 조사하였다.
액체 배양 후 배지 중에 남아 있는 환원당을 확인하기 위해서 DNS (3,5-dinitrosalicylic acid)법을 실시하였다[3, 14]. 배양액을 13,000 rpm으로 1분간 원심분리 후 상등액과 pellet을 분리하여 상등액을 가지고 배지 중에 남아 있는 잔존환원당을 측정하였다.

성능/효과

6개의 균주를 동일한 농도로 spot하여 40℃에서 2일 동안 배양한 결과, 모균주인 YKY020 균주는 내열성이 있어 40℃에서 자라는 것을 확인하였지만, 또 다른 모균주인 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주는 내열성이 없어 배양 온도 40℃에서는 거의 자라지 못함을 알 수 있다. 4개의 균주(No. 3, 9, 11, 12)에서는 모균주인 YKY020 균주와 비슷한 정도의 내열성을 보임을 확인 할 수 있었다(Fig. 2A).
그 결과 모균주인 YKY020은 에탄올에 내성이 있어 YPDE (7%) 배지에서 잘 자라는 것을 확인하였지만, 또 다른 모균주인 BY4742Δexg1/pAInu-exgA는 YKY020 균주보다 에탄올 내성이 낮아 YPDE (7%) 배지에서 잘 자라지 못하는 것을 확인하였다. 6개의 균주 중 내열성을 보이는 4개의 균주(No. 3, 9, 11, 12)에서 마찬가지로 에탄올 내성을 나타냄을 확인 할 수 있었고 그 중에서 No. 3과 11 균주가 에탄올 내성이 뛰어남을 알수 있었다(Fig. 2B).
6개의 균주를 동일한 농도로 spot하여 40℃에서 2일 동안 배양한 결과, 모균주인 YKY020 균주는 내열성이 있어 40℃에서 자라는 것을 확인하였지만, 또 다른 모균주인 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주는 내열성이 없어 배양 온도 40℃에서는 거의 자라지 못함을 알 수 있다.
최근에는 배양 온도의 증가에 따른 에탄올 생산율의 증가도 보고되어있어[13], BYK-F11균주에 대해 40℃의 배양온도에서의 에탄올 생산성을 조사해보았다. YPD (1% dextrose)에 1%의 laminaran이 함유된 배지에서 48시간 동안 40℃에서 진탕 배양하여 성장속도 및 에탄올 생산성을 측정한 결과, 30℃에서 배양했을 때보다 성장속도는 약 23% 정도 감소하였지만 에탄올 수율은 0.33 g/g로 30℃에서와 비교하여 큰 차이를 보이지 않았다 (Table 1). 이는 세포의 성장이 멈추더라도 어느 정도는 에탄올을 생산 할 수 있음을 시사한다.
각각의 균주를 YPD배지에서 24시간 동안 배양한 후, β-glucanase 활성을 조사해 본 결과, BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주에서 4.3 unit/ml이었던 효소활성이 BYK-F11 균주에서는 4.92 unit/ml로 약 15% 정도 활성이 증가되었음을 확인하였다.
그 결과 모균주인 YKY020은 에탄올에 내성이 있어 YPDE (7%) 배지에서 잘 자라는 것을 확인하였지만, 또 다른 모균주인 BY4742Δexg1/pAInu-exgA는 YKY020 균주보다 에탄올 내성이 낮아 YPDE (7%) 배지에서 잘 자라지 못하는 것을 확인하였다.
3A). 다음으로 PFGE 분석을 통해 각 균주들의 karyotype을 분석 해 본 결과, BYK-F11 균주에서 두 모균주의 karyotype이 혼합된 형태를 보였고, 원형질 융합에 의해 두 genome이 잘 융합되었음을 확인 할 수 있었다(Fig. 3B).
따라서 No.11 균주가 내열성, 에탄올 내성 및 β-glucanase의 활성을 동시에 가지는 융합 균주임을 확인하였으며, 이 균주를 S. cerevisiae BYK-F11 (MATα leu2-3Δ0 ura3-Δ0 his3-Δ200, Δ1 lys2-Δ0 G418, pAInu-exgA)이라고 명명하였다.
92 unit/ml로 약 15% 정도 활성이 증가되었음을 확인하였다. 또한 8%에탄올 배지에서 에탄올 내성을 비교해 본 결과, BYK-F11균주에서 에탄올 내성이 조금 증가된 것을 확인할 수 있었다(Fig. 3A). 다음으로 PFGE 분석을 통해 각 균주들의 karyotype을 분석 해 본 결과, BYK-F11 균주에서 두 모균주의 karyotype이 혼합된 형태를 보였고, 원형질 융합에 의해 두 genome이 잘 융합되었음을 확인 할 수 있었다(Fig.
일배체인 다른 모균주와 비교해서 이배체인 BYK-F11 균주는 성장속도에서 부터 모균주와 비교하여 약 2배의 차이를 보였다(Table 1). 또한 배양 24시간째에는 배지 중에 존재하던 10 g/l의 dextrose 및 laminaran으로 부터의 단당도 거의 다 소모하여 0.5 g/l만 남아있음을 확인하였다. 배양 24시간째에 배양 상등액에 존재하는 에탄올의 농도는 6.
반면에 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주는 원래 BY4742 균주 내에 존재하는 EXG1유전자를 결실(exg1)시키고 EXG1유전자보다 활성이 더 높은 A. oryzae 유래의 β-glucanase 유전자인 EXGA유전자를 재조합 시킨 균주로 활성 염색에 의해 균 주변까지 넓은 범위의 형광이 관찰됨을 확인 할 수 있었다.
선별된 13개의 균주들을 2차 선별하기 위해 우선 40℃에서 내열성을 조사 해 본 결과, 4개의 균주(No. 3, 9, 11, 12)에서 내열성이 확인되었다. 그리고 내열성을 조금 보였던 2개의 균주(No.
선별된 6개의 균을 조사해 본 결과, No. 11 과 13균주에서 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주 정도의 활성을 보임을 알 수 있었다(Fig. 2C).
1). 이 두 균주를 zymolase를 사용하여 원형질체화하였는데, 효소처리 60분까지는 원형질체가 관찰되지 않았으며, 90분이 경과되었을 때 부터 균체의 약 40% 이상의 원형질체가 확인이 됨을 알 수 있었다(data not shown). Zymolase 처리 120분 후, 각각의 원형질체를 융합시키고 leucine과 histidine이 첨가된 SD 선별배지에서 배양 후, 자란 37개의 colony 중 growth가 좋은 hybrid 균주 13개를 1차 선별하였다.
YKY020 균주와 BY4742Δexg1/pAInu-exgA 균주 및 fusant 인 BYK-F11 균주를 YPD (1% dextrose) 에 1%의 laminaran이 함유된 배지로 30℃에서 48시간 동안 진탕배양하여 성장속도, 잔존환원당 및 에탄올 생산성을 측정하였다. 일배체인 다른 모균주와 비교해서 이배체인 BYK-F11 균주는 성장속도에서 부터 모균주와 비교하여 약 2배의 차이를 보였다(Table 1). 또한 배양 24시간째에는 배지 중에 존재하던 10 g/l의 dextrose 및 laminaran으로 부터의 단당도 거의 다 소모하여 0.

후속연구

al의 보고[13]에서처럼 specific ethanol production rate (g-ethanol/ kg-cell mass/h)로 환산하면, 30℃에서 배양한 것 보다 약 25%의 에탄올 수율이 향상되었다고 할 수 있다. 따라서 본 연구에서는 재조합 균주를 genome shuffling법을 통해 새로운 형질을 가진 재조합 균주로 육종 할 수 있음을 확인하였고, 목적에 따른 반복적인 융합에 의해 산업적 이용가치가 높은 균주 및 특정 유전자 발현 cassette를 가진 균주의 개량에도 응용 가능할 것이라 기대된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	효모 균주의 특성을 개량하는 방법은 무엇이 있는가?	에탄올 내성 및 내열성 향상 등 효모 균주의 특성을 개량하기 위해서 여러 가지 선택돌연변이, 교배(hybridization), 원형질체 융합(protoplast fusion), 형질전환(transformation) 등의 방법이 있다. 대부분의 일배체(haploid) 효모들은 α type과 a type의 mating factor를 가지고 있어 쉽게 서로 접합하여 이배체(diploid) 효모를 형성할 수 있다[9].
	에탄올 생산 균주의 육종을 위해 산업적 균주의 에탄올 내성의 증가 과정이 필요한 이유는 무엇인가?	그렇지만 효모는 생산공정 동안의 삼투압 증가 또는 에탄올 및 이산화탄소의 축적 등과 같은 몇 가지 환경적 변화에도 종종 노출되고 있다[1]. 그 중에서 에탄올은 세계 여러 많은 분야에서 사용되고 있지만 미생물 생장의 주저해제로 알려져 있기 때문에 배양 중 에탄올의 축적은 세포 성장과 목적 제품의 생산율 감소와 같은 효모 세포에 스트레스를 준다고 알려져 있다. 따라서 산업적 균주의 에탄올 내성의 증가는 에탄올을 생산할 수 있는 균주의 육종을 위해서도 반드시 필요한 과정이라고 할 수 있다.
	효모는 어디에 사용되는 미생물인가?	효모(Saccharomyces cerevisiae)는 오래 전부터 발효 및 양조 산업에 주로 사용되어진 전통 미생물로서, 최근에는 starch나 cellulose와 같은 바이오매스로부터 바이오에탄올의 생산에도 이용되어 지고 있다. 그렇지만 효모는 생산공정 동안의 삼투압 증가 또는 에탄올 및 이산화탄소의 축적 등과 같은 몇 가지 환경적 변화에도 종종 노출되고 있다[1].

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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