[논문]물과 주정을 이용한 삼채 뿌리와 잎 추출물의 항산화 활성 및 항염증 효과 비교

이관욱; 김연숙; 박표잠; 정재현

doi:10.3746/jkfn.2014.43.12.1808

물과 주정을 이용한 삼채 뿌리와 잎 추출물의 항산화 활성 및 항염증 효과 비교
Comparison of Effect of Water and Ethanolic Extract from Roots and Leaves of Allium hookeri 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.43 no.12, 2014년, pp.1808 - 1816

이관욱 (한국교통대학교 식품공학과) , 김연숙 (건국대학교 생명공학과) , 박표잠 (건국대학교 생명공학과) , 정재현 (한국교통대학교 식품공학과)

초록
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본 연구는 삼채의 뿌리와 잎을 물과 주정을 이용하여 추출하여 항산화 활성 및 항염증 효과를 비교 평가하였다. 삼채의 추출물에 포함된 총 폴리페놀 함량과 전자스핀공명기기를 이용한 DPPH, alkyl, hydroxyl 라디칼 소거능, ABTS를 이용한 라디칼 소거 활성 및 FRAP 및 ORAC을 이용한 항산화 활성을 평가하였는데, 삼채뿌리 추출물보다는 삼채잎 추출물의 항산화 활성이 높았으며 이는 잎에 포함된 총 폴리페놀 함량과 관련이 있을 것으로 판단된다. 물 추출의 경우가 뿌리와 잎 모두 수율이 높았으며 폴리페놀 함량과 ORAC value와 alkyl 라디칼 소거 활성은 비슷한 경향을 나타내었으나 DPPH와 hydroxyl 라디칼 소거 활성과는 다른 결과를 나타내었다. 또한 간세포를 이용한 세포 독성 평가 실험 수행 결과, 0.25 mg/mL의 농도까지는 삼채의 뿌리와 잎의 물 추출물 및 주정 추출물 모두 독성을 나타내지 않았다. RAW264.7 세포를 이용하여 독성을 나타내지 않는 농도인 0.2 mg/mL 이하에서 항염증 활성 평가를 수행한 결과 삼채뿌리 및 삼채잎의 물과 주정 추출물은 모두 NO의 생성을 농도 의존적으로 감소시키는 경향을 나타내었다. 뿐만 아니라 삼채 추출물은 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-${\alpha}$의 생성을 감소시켰으며, 특히 삼채뿌리 물 추출물은 가장 높은 IL-6와 TNF-${\alpha}$의 생성 억제를 나타내었다. 또한 삼채 추출물이 LPS로 유도한 세포내 활성산소종을 농도 의존적으로 억제하는 것을 확인하였으며, 위의 결과로 삼채잎 추출물은 항산화 활성이 우수하고 삼채뿌리 추출물은 항염증 활성이 높음을 확인하였다. 따라서 삼채 추출물이 우수한 항산화 및 항염증 활성을 가지고 있는 것으로 판단되며, 이와 관련된 항산화 및 항염증 생리활성 물질에 관한 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

Abstract ▼ AI-Helper

The aim of this study was to evaluate the antioxidant activities and anti-inflammatory effects of water and ethanolic extracts from Allium hookeri roots and leaves. Antioxidant activities of Allium hookeri extracts were determined based on various radical scavenging activities using an ESR spectrophotometer, ferric reducing antioxidant power, 2,2'-azinobis-(3-ethybenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical scavenging activity, and oxygen radical absorbance capacity assays. In addition, we investigated anti-inflammatory effects of Allium hookeri extract on lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammation in RAW264.7 cells. We also explored the effects of extract from Allium hookeri root on suppression of pro-inflammatory mediators such as nitric oxide (NO) and pro-inflammatory cytokines such as IL-6 and TNF-${\alpha}$ against LPS-induced activation of RAW264.7 cells. Our results demonstrated superior antioxidant activity for leaf extract of Allium hookeri compared to extract from root of Allium hookeri. On the other hand, root extract of Allium hookeri showed better anti-inflammatory activity compared to leaf extract. Our study suggests that Allium hookeri extract exhibits strong antioxidant activity and anti-inflammatory effects and can be developed as a potential therapeutic candidate for diseases involving oxidative stress and inflammation.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

특히 삼채뿌리 추출물은 대식세포를 이용한 실험에서 HO-1을 유도하고, p38의 활성을 억제하고 nitrite와 IL-1β의 생성을 억제하여 높은 항염증 효과가 있음이 보고되었다(7,13). 그러나 삼채에 관한 생리활성 규명 및 기능성 제품화에 관한 연구가 아직 부족한 실정이기에 본 연구는 삼채의 뿌리와 잎을 물과 주정으로 추출한 추출물 간의 항산화 활성 및 항염증 효과를 비교 분석하여 삼채의 항산화 및 항염증 소재개발의 기초자료로 제공하고자 하였다.
본 연구는 삼채의 뿌리와 잎을 물과 주정을 이용하여 추출하여 항산화 활성 및 항염증 효과를 비교 평가하였다. 삼채의 추출물에 포함된 총 폴리페놀 함량과 전자스핀공명기기를 이용한 DPPH, alkyl, hydroxyl 라디칼 소거능, ABTS를 이용한 라디칼 소거 활성 및 FRAP 및 ORAC을 이용한 항산화 활성을 평가하였는데, 삼채뿌리 추출물보다는 삼채잎 추출물의 항산화 활성이 높았으며 이는 잎에 포함된 총 폴리페놀 함량과 관련이 있을 것으로 판단된다.

제안 방법

20 μL의 PBS, 20 μL의 농도별 시료, 20 μL의 40 mM AAPH, 20 μL의 40 mM 4-POBN을 차례로 첨가하여 10초간 강하게 교반한 후 37℃ 항온 수조에서 30분간 반응시킨 다음, capillary tube로 옮겨 ESR spectrometer로 alkyl radical 발생량을 측정하였다.
ABTS 라디칼을 이용한 항산화능의 측정은 potassium persulfate와의 반응에 의해 생성된 ABTS 유리 라디칼이 추출물 내의 항산화 물질에 의해 제거되어 라디칼 특유의 색인 청록색이 탈색되는 것을 이용한 방법으로 Park과 Kim (17)의 방법을 약간 변형하여 사용하였다. 7 mM ABTS 용액과 2.
Chang 세포를 48-well plates에 7×103 cells/well 농도로 분주한 뒤 24시간 동안 배양한 후, 각 시료를 최종 농도(0, 0.125, 0.25 0.5, 1.0 mg/mL)가 되도록 세포에 처리하여 24시간 동안 배양하였다.
Gallic acid (Sigma-Aldrich Co.)를 0~200μg/mL의 농도로 제조하여 시료와 동일한 방법으로 분석하여 얻은 표준 검량선으로부터 시료 추출물의 총 페놀 함량을 산출하였고 gallic acid equivalents(mg GAE/g extract)로 나타내었다.
RAW264.7 대식세포에서 LPS로 ROS를 유도하였을 때 삼채 추출물이 세포내 ROS에 미치는 영향을 확인하였다. 삼채 뿌리 및 잎의 물 추출물과 주정 추출물을 한 시간 전처리하고 LPS를 처리하여 유도된 ROS를 측정한 결과는 Fig.
각 사이토카인에 반응하는 항체가 코팅된 96 well plate에 각 standard와 샘플들을 각 50 μL씩 분주하여 overnight 하였다.
농도별 시료 0.2 mL에 0.3 M의 DMPO(5,5-dimethyl1-pyrroline N-oxide) 0.2 mL, 10 mM의 FeSO₄ 0.2 mL 및 10 mM의 H₂O₂ 0.2 mL를 차례로 첨가한 후 10초간 강하게 교반한 다음, 2.5분간 실온에서 반응시키고 반응 혼합물을 capillary tube로 옮겨 ESR spectrometer에서 하이드록실 라디칼 발생량을 측정하였다. 이때 측정 조건은 central field 3475 G, modulation frequency 100 kHz, modulation amplitude 2 G, microwave power 1 mW, gain 6.
과다한 NO의 생성은 염증반응을 심화시켜 조직의 손상 및 신경손상 등을 일으킨다(25). 따라서 RAW264.7 대식세포에서 삼채 추출물을 한 시간 전처리한 후 LPS를 20시간 처리하여 삼채 추출물이 LPS에 의해 유도되는 염증매개인자인 NO의 생성에 미치는 영향을 살펴보았다. Fig.
삼채 추출물의 항산화 활성을 과산화 라디칼의 생성과 소멸에 의한 fluorescent의 감소율로 측정하였다. 과산화 라디칼의 생성을 위해 2,2'-azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride(AAPH)를 사용하였고, 항산화 활성 비교표준액으로 20 μM trolox를 사용하였다.
세포를 회수한 후 유세포 분석기로 측정하고 CellQuest software(Becton & Dickinson Co., Franklin Lakes, NJ, USA)를 이용하여 분석하였다.
시료액 250μL에 5% NaNO2 75μL를 첨가하여 상온에서 5분간 반응시킨 후에 10% AlCl3 150μL를 첨가하였다.
Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였으며, 그 외에 사용된 시약은 특급 및 일급을 구입하여 사용하였다. 실험에 사용된 시료 추출은 동결건조된 삼채를 잎과 뿌리로 나누고, 물 추출은 건조 분말 시료 100 g을 3차 증류수 1L를 첨가하여 95℃에서 120분 동안 추출하였다. 주정 추출은 건조 분말 시료 100 g을 80% 주정 1 L에 넣어 95℃에서 8시간 환류냉각 추출방법으로 추출하였다.
이 용액에 1M NaOH 0.5 mL와 증류수 275μL를 첨가한 후에 510 nm에서 흡광도를 측정하였으며, catechin(Sigma-Aldrich Co.)을 표준물질로 하여 0~1 mg/mL의 농도 범위에서 얻어진 표준 검량선으로부터 추출물의 총 플라보노이드 함량을 계산하였다.
이후 배양액을 회수하여 TNF-α 및 IL-6의 사이토카인 측정에 사용하였으며 측정방법은 다음과 같다.
실험에 사용된 시료 추출은 동결건조된 삼채를 잎과 뿌리로 나누고, 물 추출은 건조 분말 시료 100 g을 3차 증류수 1L를 첨가하여 95℃에서 120분 동안 추출하였다. 주정 추출은 건조 분말 시료 100 g을 80% 주정 1 L에 넣어 95℃에서 8시간 환류냉각 추출방법으로 추출하였다. 추출물은 여과지(No.
FRAP 측정은 Benzie와 Strain(18)의 방법을 사용하였다. 즉 300 mM acetate buffer(pH 3.6), 40 mM HCl에 용해한 10 mM TPTZ 및 20 mM FeCl₃･6H₂O를 각각 10:1:1(v/v/v)의 비율로 혼합하여 FRAP 시약을 제조하였다. 이어서 여러 가지 농도의 시료액 0.
총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis법(14)을 약간 변형하여, 추출물 1.0mL에 1.0N Folin-Ciocalteau 시약 및 20% Na₂CO₃ 용액을 각 1.0mL씩 차례로 가한 다음 실온에서 30분 정치한 후 분광광도계(SECOMAM, Ales, France)를 이용하여 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. Gallic acid (Sigma-Aldrich Co.
총 플라보노이드 함량(total flavonoid content)은 Jia 등 (15)의 방법을 약간 변형하여 측정하였다. 시료액 250μL에 5% NaNO₂ 75μL를 첨가하여 상온에서 5분간 반응시킨 후에 10% AlCl₃ 150μL를 첨가하였다.
항산화 활성의 측정은 1 mg/mL 농도의 삼채 추출물과 표준액 50 μL에 fluorescent 표준용액 50 μL를 가하고, 과산화 라디칼 유발물질인 AAPH를 인산완충액에 가해 221 mM로 희석한 후 25 μL를 가하여 반응시킨 후, spectrofluorometer(SpectraMax M2/M2e, Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 사용하여 excitation 485 nm, emission 538 nm에서 2시간 동안 5분마다 형광을 측정하였다.
회수한 세포 배양액 100 μL와 Griess 시약 100 μL를 혼합 하여 상온에서 10분 동안 반응시킨 후, microplate reader (SECOMAM)를 이용하여 550 nm에서 흡광도를 측정하였고 sodium nitrate로 표준 곡선을 작성하여 NO 함량을 산출하였다(21).

대상 데이터

과산화 라디칼의 생성을 위해 2,2'-azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride(AAPH)를 사용하였고, 항산화 활성 비교표준액으로 20 μM trolox를 사용하였다.
본 연구에 사용한 삼채는 청원삼채영농조합법인에서 2014년 4월에 수확한 것을 제공받아 사용하였다. Folin-Ciocalteu's reagent, ferrous chloride(FeCl₂), 1,1-diphenyl2-picrylhydrazyl(DPPH), potassium persulfate, lipopolysaccharide(LPS), 2,4,6-tripyridyl-S-triazine(TPTZ), 2,2-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS)는 Sigma-Aldrich Co.
정상 간세포(human liver cells, Chang) 및 RAW264.7 대식세포는 불활성화한 10% fetal bovine serum(FBS)과 1.0% penicillin-streptomycin이 첨가된 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM) 배지에서 37℃ 및 5% CO2 조건하에서 배양하였다.

데이터처리

각 군 간의 유의성의 검증은 GraphPad Prism 5.0 version(San Diego, CA, USA)을 이용하여 One-way ANOVA 중 Tukey test 및 Dunnett test로 검증하여 P값이 0.05미만을 유의한 것으로 간주하였다.

이론/모형

FRAP 측정은 Benzie와 Strain(18)의 방법을 사용하였다. 즉 300 mM acetate buffer(pH 3.
Fluorescent 표준 용액은 Ou 등(19)의 방법에 따라 fluorescein sodium salt(Sigma-Aldrich Co.)를 75 mM phosphate buffer에 가하여 78 μM 농도로 제조하였다.
간세포를 이용한 세포독성 측정은 MTT(3-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide, Sigma-Aldrich Co.) 방법을 이용하여 세포의 생존율로 측정하였다(20). Chang 세포를 48-well plates에 7×10³ cells/well 농도로 분주한 뒤 24시간 동안 배양한 후, 각 시료를 최종 농도(0, 0.
라디칼 소거능 측정은 Lee 등(16)의 방법에 따라 메탄올에 용해시킨 60 μM DPPH 60 μL와 농도별로 준비한 시료 60 μL를 섞은 후 10초간 강하게 교반하여 2분간 실온에서 반응시킨 후 capillary tube에 옮겨 ESR spectrometer (Jeol Co., Ltd., Tokyo, Japan)에서 측정하였으며, 그 측정 조건은 central field 3475 G, modulation frequency 100 kHz, modulation amplitude 2 G, microwave power 5 mW, gain 6.3×105, temperature 298 K였다.
삼채 추출물의 독성 평가는 정상 간세포주인 Chang 세포를 이용하여 MTT assay로 측정하였다. 삼채뿌리의 물 추출물과 주정 추출물 및 삼채잎의 주정 추출물은 1.

성능/효과

ORAC assay를 통하여 AAPH에 의해 생성된 free radical에 대한 항산화 물질의 소거 활성을 형광도로 측정한 결과, 삼채 추출물의 항산화 활성은 Table 3에 나타낸 바와같이 삼채뿌리 물 추출물의 ORAC는 77.04±3.61 μM TE (trolox equivalents)/mg extract, 삼채뿌리 주정 추출물은 92.63±4.68 μM TE/mg extract를 나타냈다.
25 mg/mL의 농도까지는 삼채의 뿌리와 잎의 물 추출물 및 주정 추출물 모두 독성을 나타내지 않았다. RAW264.7 세포를 이용하여 독성을 나타내지 않는 농도인 0.2 mg/mL 이하에서 항염증 활성 평가를 수행한 결과 삼채뿌리 및 삼채잎의 물과 주정 추출물은 모두 NO의 생성을 농도 의존적으로 감소시키는 경향을 나타내었다. 뿐만 아니라 삼채 추출물은 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-α의 생성을 감소시켰으며, 특히 삼채뿌리 물 추출물은 가장 높은 IL-6와 TNF-α의 생성 억제를 나타내었다.
66%로 현저히 증가하였다. 그러나 삼채 뿌리 및 잎의 물 추출물과 주정 추출물을 전처리한 군은 모두 7.36%에서 0.49%로 ROS의 양이 모두 농도 의존적으로 감소됨을 보여주었으며, 양성대조군으로 사용한 dexamethasone과도 비슷한 효과를 나타내었다. Jeong 등(28)은 소목 추출물이 세포내 ROS 억제를 통하여 NO 생성을 저해한다고 보고하였는데, 삼채 추출물은 세포내 ROS를 효과적으로 소거하지만 NO 생성 억제와 일치하지는 않았다.
그러나 삼채 추출물은 IL-6보다는 TNF-α의 생성을 훨씬 감소시켰으며, 삼채뿌리물 추출물> 삼채잎의 주정 추출물> 삼채뿌리의 주정 추출물> 삼채잎의 물 추출물 순으로 사이토카인을 억제하였다.
그러나 삼채 추출물을 한 시간 전 처리하였을 때 IL-6와 TNF-α가 감소하였으며, 시료 농도가 높을수록 IL-6와 TNF-α가 유의적으로 억제되었다.
7 세포의 NO 생성 억제능에 미치는 영향을 살펴본 결과, 삼채뿌리의 물 추출물> 삼채잎의 주정 추출물> 삼채뿌리의 주정 추출물> 삼채잎의 물 추출물 순으로 NO 생성 억제능이 우수하다는 것을 확인할 수 있었다. 또한 0.2 mg/ mL의 농도까지 세포의 생존율에 영향을 미치지 않았기 때문에 RAW264.7 세포에 독성을 나타내지 않은 것을 확인하였다(Fig. 3).
또한 hydroxyl 라디칼 소거 활성을 비교한 결과 삼채뿌리물 추출물과 주정 추출물의 IC50 값이 각각 5.086±0.152 mg/mL, 6.762±0.226 mg/mL를 나타내었으며, 삼채잎 물 추출물과 주정 추출물의 hydroxyl 라디칼 소거 활성 IC50 값은 각각 4.501±0.262 mg/mL, 6.429±0.314 mg/mL를 각각 나타내었다.
물 추출의 경우가 뿌리와 잎 모두 수율이 높았으며 폴리페놀 함량과 ORAC value와 alkyl 라디칼 소거 활성은 비슷한 경향을 나타내었으나 DPPH와 hydroxyl 라디칼 소거 활성과는 다른 결과를 나타내었다. 또한 간세포를 이용한 세포 독성 평가 실험 수행 결과, 0.25 mg/mL의 농도까지는 삼채의 뿌리와 잎의 물 추출물 및 주정 추출물 모두 독성을 나타내지 않았다. RAW264.
뿐만 아니라 삼채 추출물은 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-α의 생성을 감소시켰으며, 특히 삼채뿌리 물 추출물은 가장 높은 IL-6와 TNF-α의 생성 억제를 나타내었다. 또한 삼채 추출물이 LPS로 유도한 세포내 활성산소종을 농도 의존적으로 억제하는 것을 확인하였으며, 위의 결과로 삼채잎 추출물은 항산화 활성이 우수하고 삼채뿌리 추출물은 항염증 활성이 높음을 확인하였다. 따라서 삼채 추출물이 우수한 항산화 및 항염증 활성을 가지고 있는 것으로 판단되며, 이와 관련된 항산화 및 항염증 생리활성 물질에 관한 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.
본 실험에서 RAW264.7 대식세포에 LPS를 처리하였을때 LPS 무처리군에 비하여 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-α가 현저히 증가하였다.
뿐만 아니라 삼채 추출물은 염증성 사이토카인인 IL-6와 TNF-α의 생성을 감소시켰으며, 특히 삼채뿌리 물 추출물은 가장 높은 IL-6와 TNF-α의 생성 억제를 나타내었다.
3 mg GAE/g extract를 각각 나타내었다. 삼채 뿌리 및 잎 모두 주정 추출물에서 총 폴리페놀 함량이 높게 나타났다.
삼채뿌리 물 추출물과 주정 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 측정한 결과, IC50 값이 각각 1.828±0.022 mg/mL, 0.485±0.026 mg/mL를 나타내었다.
삼채뿌리 물 추출물은 10 mg/mL의 농도에서 29.32±0.02%의 ABTS 라디칼 소거활성을 나타내었으며, 삼채뿌리 주정 추출물은 64.58±0.12%의 소거 활성을 나타내었다.
삼채뿌리물 추출물과 주정 추출물의 alkyl 라디칼 소거활성 IC50 값은 각각 0.457±0.023 mg/mL, 0.297±0.021 mg/mL를 나타내었으며, 삼채잎의 물 추출물과 주정 추출물의 alkyl 라디칼 소거 활성 IC50 값은 0.218±0.014 mg/mL, 0.199±0.004 mg/mL를 각각 나타내었다.
삼채뿌리의 주정 추출물과 삼채잎의 물 추출물은 농도의존적으로 NO 생성을 억제하였으며, 삼채뿌리의 물 추출물이 가장 높은 NO 생성 억제를 나타내었다. 삼채뿌리의 경우는 물 추출물이 주정 추출물보다 NO 생성 억제가 우수하였으며, 삼채잎의 경우는 주정 추출물이 물 추출보다 NO 생성 억제가 우수하였다.
특히 IL-6와 TNF-α는 삼채뿌리의 물 추출물의 경우가 가장 높은 억제력을 보여주었다. 삼채뿌리의 경우는 물 추출물이 주정 추출물에 비해 염증성 사이토카인의 억제력이 높았으며 삼채잎의 경우는 주정 추출물이 물 추출물에 비해 염증성 사이토카인의 억제력이 높게 나타났는데, 이는 NO 생성 억제 결과와 같은 경향을 나타내었다. Kwak과 Lee(27)는 LPS를 처리한 RAW264.
삼채 추출물의 독성 평가는 정상 간세포주인 Chang 세포를 이용하여 MTT assay로 측정하였다. 삼채뿌리의 물 추출물과 주정 추출물 및 삼채잎의 주정 추출물은 1.0 mg/mL 의 농도 이하에서 간세포의 생존율이 100% 이상을 나타내어 전혀 독성이 나타나지 않았다(Fig. 1). 그러나 삼채잎 물 추출물을 농도별로 처리한 결과 0.
삼채뿌리의 물 추출물과 주정 추출물의 수율은 56.09%, 20.78%, 삼채잎의 물 추출물과 주정 추출물의 수율은 31.79%, 27.40%를 나타내었다. 삼채의 뿌리 및 잎 모두 물 추출물의 수율이 높게 나타났다.
특히 삼채뿌리의 물 추출물과 주정 추출물 모두 높은 NO 생성 억제 효과를 나타내었다. 삼채뿌리의 물 추출물은 0.05 mg/mL의 농도에서 50% 이상의 NO 생성을 억제하였으며, 삼채잎의 주정 추출물 또한 0.2 mg/mL의 농도에서 약 50% 정도 NO 생성을 억제하였다. 삼채뿌리의 주정 추출물과 삼채잎의 물 추출물은 농도의존적으로 NO 생성을 억제하였으며, 삼채뿌리의 물 추출물이 가장 높은 NO 생성 억제를 나타내었다.
2 mg/mL의 농도에서 약 50% 정도 NO 생성을 억제하였다. 삼채뿌리의 주정 추출물과 삼채잎의 물 추출물은 농도의존적으로 NO 생성을 억제하였으며, 삼채뿌리의 물 추출물이 가장 높은 NO 생성 억제를 나타내었다. 삼채뿌리의 경우는 물 추출물이 주정 추출물보다 NO 생성 억제가 우수하였으며, 삼채잎의 경우는 주정 추출물이 물 추출보다 NO 생성 억제가 우수하였다.
삼채의 뿌리와 잎의 추출 방법에 따라 LPS로 유도된 RAW264.7 세포의 NO 생성 억제능에 미치는 영향을 살펴본 결과, 삼채뿌리의 물 추출물> 삼채잎의 주정 추출물> 삼채뿌리의 주정 추출물> 삼채잎의 물 추출물 순으로 NO 생성 억제능이 우수하다는 것을 확인할 수 있었다.
본 연구는 삼채의 뿌리와 잎을 물과 주정을 이용하여 추출하여 항산화 활성 및 항염증 효과를 비교 평가하였다. 삼채의 추출물에 포함된 총 폴리페놀 함량과 전자스핀공명기기를 이용한 DPPH, alkyl, hydroxyl 라디칼 소거능, ABTS를 이용한 라디칼 소거 활성 및 FRAP 및 ORAC을 이용한 항산화 활성을 평가하였는데, 삼채뿌리 추출물보다는 삼채잎 추출물의 항산화 활성이 높았으며 이는 잎에 포함된 총 폴리페놀 함량과 관련이 있을 것으로 판단된다. 물 추출의 경우가 뿌리와 잎 모두 수율이 높았으며 폴리페놀 함량과 ORAC value와 alkyl 라디칼 소거 활성은 비슷한 경향을 나타내었으나 DPPH와 hydroxyl 라디칼 소거 활성과는 다른 결과를 나타내었다.
삼채잎 물 추출물은 10 mg/mL의 농도에서 71.12±0.23%, 삼채잎 주정 추출물은 60.89±0.16%의 ABTS 라디칼 소거 활성을 나타내었다.
삼채잎의 물 추출물과 주정 추출물의 DPPH 라디칼 소거능은 IC50 값이 각각 0.418±0.023 mg/mL, 0.633±0.012 mg/mL를 나타내었으며, 삼채잎 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성이 삼채뿌리 추출물보다 높게 나타났다.
실험 결과 삼채잎의 주정 추출물> 삼채잎의 물 추출물> 삼채뿌리의 주정 추출물> 삼채뿌리의 물 추출물 순으로 FRAP value가 높았다.
6과 같다. 아무 것도 처리하지 않은 무처리군의 ROS의 양에 비해 LPS를 처리한 대조군의 ROS의 양은 22.66%로 현저히 증가하였다. 그러나 삼채 뿌리 및 잎의 물 추출물과 주정 추출물을 전처리한 군은 모두 7.
이상의 결과는 삼채잎 추출물이 뿌리의 추출물보다 라디칼 소거 활성이 높은 것으로 나타났으며, 이는 삼채잎 추출물이 뿌리 추출물보다 총 폴리페놀 함량이 높기 때문인 것으로 판단된다.
총 폴리페놀의 함량을 비교한 결과 삼채뿌리의 물 추출물은 6±0.2 mg GAE/g extract, 주정 추출물은 21±0.1 mg GAE/g extract, 삼채잎의 물 추출물은 23±0.3 mg GAE/g extract, 주정 추출물은 30±0.3 mg GAE/g extract를 각각 나타내었다.
총 플라보노이드 함량을 측정한 결과, 삼채 추출물에서는 총 플라보노이드 함량이 없는 것으로 나타났으며, 이는 삼채 추출물에는 비플라보노이드계 폴리페놀이 함유되어 있기 때문인 것으로 판단된다.
2의 결과에서 알 수 있듯이 100 ng/mL의 LPS 처리에 의해 10배 이상 증가된 NO 양이 삼채 추출물의 전처리에 의해 억제되었다. 특히 삼채뿌리의 물 추출물과 주정 추출물 모두 높은 NO 생성 억제 효과를 나타내었다. 삼채뿌리의 물 추출물은 0.

후속연구

또한 삼채 추출물이 LPS로 유도한 세포내 활성산소종을 농도 의존적으로 억제하는 것을 확인하였으며, 위의 결과로 삼채잎 추출물은 항산화 활성이 우수하고 삼채뿌리 추출물은 항염증 활성이 높음을 확인하였다. 따라서 삼채 추출물이 우수한 항산화 및 항염증 활성을 가지고 있는 것으로 판단되며, 이와 관련된 항산화 및 항염증 생리활성 물질에 관한 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

질의응답

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	활성산소종의 특징은?	생체 대사 과정 중에 끊임없이 발생하는 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)은 산화적 스트레스(oxidative stress)를 유발하여 노화, 암, 심장질환, 동맥경화, 염증 등 다양한 질병을 유발한다(1). 특히 산화적 스트레스는 체내 염증의 진행과정의 원인으로 알려져 있는데, 이와 관련된 ROS와 염증성 사이토카인은 염증성 질병의 매개체로서 중요한 역할을 한다(2).
	항산화 물질중 합성 항산화제에 비해 부작용이 적은 물질은 무엇인가?	항산화 물질(antioxidant)은 불포화지방산의 자동산화에 의해 생성되는 지질과산화물을 억제하고, 생체 대사 과정 중에 생성되는 각종 활성산소종에 의한 지질과산화반응을 억제하여 암, 동맥경화증, 염증, 당뇨 및 노화를 예방해주는 생리활성 물질로서 크게 각광을 받고 있다(3). 특히 천연에서 유래한 phytochemical은 합성 항산화제에 비해 부작용이 적을 뿐만 아니라 다양한 생리활성을 가지고 있기 때문에 이를 이용하여 기능성 소재로서 활용을 하고자 하는 많은 연구가 수행되고 있다(4-6).
	항산화 물질이 암, 동맥경화증, 염증, 당뇨 및 노화 예방에 도움을 주는 방법은?	항산화 물질(antioxidant)은 불포화지방산의 자동산화에 의해 생성되는 지질과산화물을 억제하고, 생체 대사 과정 중에 생성되는 각종 활성산소종에 의한 지질과산화반응을 억제하여 암, 동맥경화증, 염증, 당뇨 및 노화를 예방해주는 생리활성 물질로서 크게 각광을 받고 있다(3). 특히 천연에서 유래한 phytochemical은 합성 항산화제에 비해 부작용이 적을 뿐만 아니라 다양한 생리활성을 가지고 있기 때문에 이를 이용하여 기능성 소재로서 활용을 하고자 하는 많은 연구가 수행되고 있다(4-6).

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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