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문제 정의
- 이에 저자들은 위중과 족삼리의 자침이 국소뇌혈류량과 혈압에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 흰쥐에 두개창 시술을 시행하고 Laser-Doppler flowmeter를 활용하여 국소뇌혈류를 측정하면서 평균혈압의 변화를 관찰하였다. 또한 뇌혈류의 변화에 유의성이 관찰된 후 이러한 뇌혈류의 변화 기전을 규명하기 위하여 cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신과 guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루를 전처치 하여 그 기전을 규명하고자 하였으며 그 결과는 다음과 같았다.
- 본 연구는 위중과 족삼리의 사법 적용이 생체에 어떠한 영향을 끼치는 가를 실험적으로 규명하기 위하여 이들의 자침이 흰쥐의 뇌혈류 변화를 관찰하고자 하였다. 족삼리와 위중이 뇌혈류 변화에 영향을 미칠 것으로 판단한 이유는 족삼리는 방광정격에 있어서 瀉하는 타경의 天符穴이 되고, 위중은 瀉하는 자경의 경혈에 해당되어 족태양방광경에 직간접적으로 영향을 미칠 것이며, 족태양방광경락이 두면부에서 기시한 후 후면부를 따라 주행하므로8) 뇌와 직접적인 관계가 있을 것으로 판단되었고, 아울러 기존의 연구들을 고려해보건데 방광정격의 일부인 족삼리와 위중의 사법 또한 뇌혈류 변화에 어느 정도 영향을 미칠 수 있을 것이라 판단되었기 때문이었다.
- 본 연구는 족삼리와 위중을 병행하여 자침할 경우 유발되는 뇌혈류 및 평균혈압의 변화를 통해 이들 자침으로 발생하는 생체의 영향을 관찰하기 위하여 진행되었다.
- 이에 저자들은 위중과 족삼리의 병행자침이 국소뇌혈류량과 혈압에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 흰쥐를 이용하여 뇌혈류 및 평균혈압을 측정하였고, 이러한 뇌혈류의 변화가 cyclooxygenase와 guanylate cyclase에 어떠한 관련성이 있는지에 대하여 관찰한 결과 유의성이 있어 보고하는 바이다.
- 하지만 족태양방광경의 유주가 두개골을 지나가고 있음에도 불구하고 방광정격의 일부분인 위중과 족삼리를 병행 자침한 연구는 없었고, 瀉法을 적용한 연구도 없었기에 본 연구에서는 위중과 족삼리의 사법 적용이 생체에 어떠한 영향을 끼치는 가를 실험적으로 규명해 보는 것을 목적으로 하였으며 이를 위해 위중과 족삼리의 사법 자침이 흰쥐의 뇌혈류 변화에 어떠한 영향을 끼치는 가를 실험하고자 하였다.
제안 방법
- 뇌혈류량 증가의 기전을 확인하기 위하여 혈관확장 억제제인 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 MTB 처리군(MTB+(BL40+ST36))과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 뇌혈류량을 비교하였다.
- 뇌혈류량 증가의 기전을 확인하기 위하여 혈관확장 억제제인 인도메타신을 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 IDN 처리군(IDN+(BL40+ST36))과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 뇌혈류량을 비교하였다.
- 이처럼 흰쥐에서 위중과 족삼리를 자침한 경우 국소 뇌혈류는 증가하면서 혈압은 다소 감소하였기에 이들 혈위의 자침으로 뇌혈류가 증가한 것은 혈관의 확장과 연관이 되어 있음을 유추할 수 있었고 이러한 혈관확장의 기전을 규명하기 위하여 혈관확장 억제제인 cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신20)과 guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루21)를 전처치하였으며, 이의 결과는 다음과 같았다.
- 委中․足三里 자침이 흰쥐의 국소 뇌혈류량 및 평균 혈압 변화에 미친 작용 기전을 알아보기 위하여 혈관 확장 인자 억제제인 인도메타신(indomethacin IDN)24)과 메틸렌블루(methylene blue, MTB)25)을 각각 1 ㎎/㎏, 10 ㎍/㎏의 용량으로 복강주사하여 혈관확장을 저해시킨 후 다시 자침하였다. 자침하기 전 20분에 전처치약물을 주사한 후 30분간 자침하여 변화되는 국소 뇌혈류량 및 평균 혈압을 150분 동안 측정하였다.
- 국소 뇌혈류량 변화 측정을 위해 흰쥐를 750 ㎎/㎏ 농도의 urethane(Sigma, U.S.A.)의 복강주사(i.p.)를 통해 마취한 후 stereotaxic frame(DKI, U.S.A.)에 고정시킨 후 정중선을 따라 두피를 절개시켰다. 이 후 두개창 수술을 시행하여 Laser-Doppler flowmeter(Transonic Instrument, U.
- )용 needle probe를 대뇌 두정엽 피질 표면에 수직이 되도록 근접시켰다. 수 분간 안정시킨 후 각각의 혈위에 자침한 후 150분 동안 변화되는 국소 뇌혈류량(regional cerebral blood flow, rCBF)을 측정하였다.
- 실험군의 분류는 委中․足三里를 자침하지 않은 대조군, 委中․足三里을 자침한 군(BL40+ST36), Indomethacin 전처치 후 자침군(IDN+(BL40+ST36)), Methylene blue 전처치 후 자침군(MTB+(BL40+ST36))으로 구분하였다.
- 위중(BL40)은 膝窩橫紋의 중앙부위로 취혈하였고, 족삼리(ST36)는 前脛骨筋과 長趾伸筋과의 사이로 취혈하였으며10), 보사법은 迎隨補瀉法을 적용하여 경락의 유주방향과 반대되는 방향으로 자침하여 瀉法을 시행하였고 양측을 30분 동안 자침하였다.
- )에 고정시킨 후 정중선을 따라 두피를 절개시켰다. 이 후 두개창 수술을 시행하여 Laser-Doppler flowmeter(Transonic Instrument, U.S.A.)용 needle probe를 대뇌 두정엽 피질 표면에 수직이 되도록 근접시켰다. 수 분간 안정시킨 후 각각의 혈위에 자침한 후 150분 동안 변화되는 국소 뇌혈류량(regional cerebral blood flow, rCBF)을 측정하였다.
- 이에 저자들은 위중과 족삼리의 자침이 국소뇌혈류량과 혈압에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 흰쥐에 두개창 시술을 시행하고 Laser-Doppler flowmeter를 활용하여 국소뇌혈류를 측정하면서 평균혈압의 변화를 관찰하였다. 또한 뇌혈류의 변화에 유의성이 관찰된 후 이러한 뇌혈류의 변화 기전을 규명하기 위하여 cyclooxygenase의 억제제인 인도메타신과 guanylate cyclase의 억제제인 메틸렌블루를 전처치 하여 그 기전을 규명하고자 하였으며 그 결과는 다음과 같았다.
- 각각 1 ㎎/㎏, 10 ㎍/㎏의 용량으로 복강주사하여 혈관확장을 저해시킨 후 다시 자침하였다. 자침하기 전 20분에 전처치약물을 주사한 후 30분간 자침하여 변화되는 국소 뇌혈류량 및 평균 혈압을 150분 동안 측정하였다.
- 자침할 혈위는 위중(BL40)과 족삼리(ST36)이었고, 해당되는 부위를 rat 해부서적22)과 rat 혈위 연구문헌23) 등을 참고하여 취혈하였다.
- 평균혈압을 측정하기 위해서 흰쥐를 마취시킨 후 대퇴동맥에 polyethylene tube를 삽입한 후 pressure transducer(Grass, U.S.A.)를 연결하고 이를 통해 혈압을 실시간으로 data acquisition system(Maclab, U.S.A.)으로 전송하여 혈압을 입력받고 이를 평균으로 하였다.
- 혈관확장 억제제인 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 MTB 처리군(MTB+(BL40+ST36))과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 평균혈압을 비교하였다. MTB 처리군의 평균혈압은 대조군과 유사한 패턴으로 시간에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 대조군과의 비교에서도 통계적으로 유의성이 관찰되지 않았다(Table 4, Fig.
- 혈관확장 억제제인 인도메타신을 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 실험군(IDN+(BL40+ST36))과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 평균혈압을 비교하였다. 정상 자침군의 평균 혈압 기저치를 100.
대상 데이터
- 본 실험에 사용된 동물은 7주령된 체중 300 ± 20g 내외의 수컷 Sprague-Dawley계 흰쥐로, 동물전문공급업체인 샘타코를 통해 구입하였다.
- 구입한 후 항온항습 장치가 완비된 사육장에서 고형사료와 물을 공급하면서 1주일 동안 적절한 환경(온도 24 ± 2 ℃, 습도 55±5 %, 12시간 명암주기)에서 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
- 자침에 사용한 침은 동방침구(0.20㎜×15㎜, DB-106)에서 구입하여 사용하였다.
데이터처리
- 0)를 사용하여 분석하였다. 군이 3개 이상인 경우는 one-way ANOVA 시행 후 Tukey 방법으로 사후검정하여 유의성을 파악하였고, 군이 2개이고 다중 분석이 필요한 경우의 유의성 검증은 repeated measure ANOVA를 시행하였고 유의한 차이가 있는 경우 Bonferroni test를 시행하였으며 모두p-value가 0.05 미만인 경우에만 유의성을 인정하였다.
성능/효과
- 01) 등에서 보였다. IDN 처리군의 국소 뇌혈류량이 시간이 경과함에 따라 감소하는 경향을 보였다. 두 군간의 차이를 Repeated measure ANOVA 결과는 그룹 간에는 유의한 차이를 보였으며(F=92.
- 00%로 환산하여 비교하였을 때, 평균혈압은 시간이 경과할수록 감소하는 경향을 보였으나 통계적으로 유의성 있는 감소는 아니었다. IDN 처리군의 평균혈압은 대조군과 유사한 패턴으로 시간에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 대조군과의 비교에서도 통계적으로 유의성이 관찰되지 않았다(Table 2, Fig. 2).
- 뇌혈류량 증가의 기전을 확인하기 위하여 혈관확장 억제제인 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 MTB 처리군(MTB+(BL40+ST36))과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 뇌혈류량을 비교하였다. MTB 처리군의 국소 뇌혈류량이 경과함에 따라 증가하다가 감소하는 경향을 보였다. 두 군간의 차이를 Repeated measure ANOVA 결과는 그룹 간에는 유의한 차이를 보였으며(F=18.
- 혈관확장 억제제인 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 MTB 처리군(MTB+(BL40+ST36))과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 평균혈압을 비교하였다. MTB 처리군의 평균혈압은 대조군과 유사한 패턴으로 시간에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 대조군과의 비교에서도 통계적으로 유의성이 관찰되지 않았다(Table 4, Fig. 4).
- 국소뇌혈류의 경우 실험 결과 委中․足三里에 자침(BL40+ST36)하였을 때 국소 뇌혈류량은 시간에 따라 증가하는 경향을 보였으며 특히 60분(p<0.05), 90분(p<0.01), 120분(p<0.01) 등에서 통계적으로 유의한 증가를 보였다(Table 1, Fig. 1).
- 이는 동물이나 인체에서 족삼리의 효과를 객관적으로 밝힌 결과로 본 연구결과와도 일맥상통하다고 판단된다. 그리하여 이 委中․足三里 자침의 결과를 종합해보면 국소뇌혈류는 증가하면서 혈압은 감소하였는데, 혈류량이 증가하면서 혈압이 감소한 경우는 혈관이 확장되어 발생한 경우임을 추측할 수 있었다.
- 위의 결과를 총괄해보면, 委中․足三里의 자침으로 국소뇌혈류는 증가하면서 혈압은 감소하였으므로 국소 뇌혈류량 변화는 뇌혈관의 직경을 확장시켜 발생한 것으로 판단되며, 이러한 혈관확장의 기전을 파악하기 위해 전처치한 혈관확장 억제제인 cyclooxygenase, guanylate cyclase 모두에 반응한 것으로 보아 이들 모두의 기전과 연관이 있는 것으로 판단된다. 다만 인도메타신 전처치에서 대조군과의 차이가 더욱 명확한 것으로 보아 cyclooxygenase계가 보다 더 밀접하게 연관되어 있음을 추측할 수 있었다.
- 이러한 결과들을 종합해보면 委中․足三里 자침은 뇌혈관 직경을 확장시킴으로써 뇌혈류량을 증가시킨 것으로 판단되며, 인도메타신과 메틸렌블루 모두에서 유의하게 반응한 것으로 보아 cyclooxygenase, guanylate cyclase 기전 모두와 관련되어 있는 것으로 사료된다. 다만, 실험결과상으로 보았을 때 인도메타신과 연관된 실험에서 유의한 차이가 보다 분명한 것으로 나타나 cyclooxygenase 기전과 보다 밀접한 관련된 있는 것으로 판단된다.
- 두 군간의 차이를 Repeated measure ANOVA 결과는 그룹 간에는 유의한 차이를 보였으며(F=18.60, p<.001), 시간에 따라서는 유의한 차이를 보이지 않았다(F=1.19, p=.323).
- 두 군간의 차이를 Repeated measure ANOVA 결과는 그룹 간에는 유의한 차이를 보였으며(F=92.82, p<.001), 시간에 따라서는 유의한 차이를 보이지 않았다(F=0.27, p=.762).
- 흰쥐에 委中․足三里 자침을 시행한 후, 국소 뇌혈류량은 유의성있게 증가하였으며, 이의 기전을 확인하기 위해 혈관확장 억제제인 인도메타신과 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里에 자침한 결과, 국소 뇌혈류량은 전처치하지 않고 委中․足三里에 자침한 정상자침군에 비해 유의하게 감소하였다. 또한 흰쥐에 委中․足三里 자침을 시행한 후, 평균혈압은 감소하는 경향을 보였고, 인도메타신과 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里에 자침한 결과, 평균혈압은 전처치하지 않고 委中․足三里에 자침한 정상 자침군과 유의성 있는 차이는 없었다.
- 메틸렌블루 전처치군의 평균혈압을 비교해 본 결과 MTB 처리군의 평균혈압은 대조군과 유사한 패턴으로 시간에 따라 감소하는 경향을 보였으나 정상 자침군과의 비교에서는 통계적으로 유의성이 없었다(Table 4, Fig. 4).
- 위와 같은 결과를 종합해 보면 委中․足三里 자침은 뇌혈류량을 증가시키는 작용을 하고 cyclooxygenase와 guanylate cyclase 기전 모두와 연관성이 있음을 알 수 있으며 委中․足三里 자침이 뇌혈관의 직경을 확장시킴으로써 국소 뇌혈류량이 증가되었음을 유추할 수 있다. 이는 족삼리와 뇌혈류에 관한 기존 연구10,14)와도 유사한 결과를 보였으며, 기존의 연구와 다른 결과가 나타나지 않았음을 알 수 있었다.
- 위의 결과를 총괄해보면, 委中․足三里의 자침으로 국소뇌혈류는 증가하면서 혈압은 감소하였으므로 국소 뇌혈류량 변화는 뇌혈관의 직경을 확장시켜 발생한 것으로 판단되며, 이러한 혈관확장의 기전을 파악하기 위해 전처치한 혈관확장 억제제인 cyclooxygenase, guanylate cyclase 모두에 반응한 것으로 보아 이들 모두의 기전과 연관이 있는 것으로 판단된다. 다만 인도메타신 전처치에서 대조군과의 차이가 더욱 명확한 것으로 보아 cyclooxygenase계가 보다 더 밀접하게 연관되어 있음을 추측할 수 있었다.
- 이러한 결과들을 종합해보면 委中․足三里 자침은 뇌혈관 직경을 확장시킴으로써 뇌혈류량을 증가시킨 것으로 판단되며, 인도메타신과 메틸렌블루 모두에서 유의하게 반응한 것으로 보아 cyclooxygenase, guanylate cyclase 기전 모두와 관련되어 있는 것으로 사료된다. 다만, 실험결과상으로 보았을 때 인도메타신과 연관된 실험에서 유의한 차이가 보다 분명한 것으로 나타나 cyclooxygenase 기전과 보다 밀접한 관련된 있는 것으로 판단된다.
- 인도메타신을 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 IDN 처리군과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 평균혈압을 비교한 결과 IDN 처리군의 평균혈압은 정상 자침군과 유사한 패턴으로 시간에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 대조군과의 비교에서도 통계적으로 유의성이 없었다(Table 2, Fig. 2).
- 뇌혈류량 증가의 기전을 확인하기 위하여 혈관확장 억제제인 인도메타신을 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 IDN 처리군(IDN+(BL40+ST36))과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 뇌혈류량을 비교하였다. 정상 자침군의 국소 뇌혈류량 기저치를 100.00%로 환산하여 비교하였을 때, 委中․足三里를 자침한 흰쥐(BL40+ST36)의 국소 뇌혈류량은 시간이 경과할수록 증가하다가, 90분이 되는 시점에서 잠시 감소한 후 다시 상승과 감소를 반복하는 패턴을 보였다. 통계적 유의성은 60분(p<0.
- 혈관확장 억제제인 인도메타신을 전처치한 후 委中․足三里를 자침한 실험군(IDN+(BL40+ST36))과 혈관확장제를 전처치하지 않은 정상 자침군의 평균혈압을 비교하였다. 정상 자침군의 평균 혈압 기저치를 100.00%로 환산하여 비교하였을 때, 평균혈압은 시간이 경과할수록 감소하는 경향을 보였으나 통계적으로 유의성 있는 감소는 아니었다. IDN 처리군의 평균혈압은 대조군과 유사한 패턴으로 시간에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 대조군과의 비교에서도 통계적으로 유의성이 관찰되지 않았다(Table 2, Fig.
- 1). 평균혈압의 경우 委中․ 足三里를 자침한 실험군(BL40+ST36)의 평균혈압은 시간이 경과할수록 감소하는 경향을 보였으나 통계적으로 유의성 있는 감소는 아니었다(Table 2, Fig. 2). 하지만 시간 경과에 따라 지속적으로 혈압이 떨어지는 경향이 관찰되었고 이는 뇌혈류를 측정하기 위한 시술로 발생한 출혈이 원인이 될 수도 있으리라 생각한다.
- 흰쥐에 委中․足三里 자침을 시행한 후, 국소 뇌혈류량은 유의성있게 증가하였으며, 이의 기전을 확인하기 위해 혈관확장 억제제인 인도메타신과 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里에 자침한 결과, 국소 뇌혈류량은 전처치하지 않고 委中․足三里에 자침한 정상자침군에 비해 유의하게 감소하였다. 또한 흰쥐에 委中․足三里 자침을 시행한 후, 평균혈압은 감소하는 경향을 보였고, 인도메타신과 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里에 자침한 결과, 평균혈압은 전처치하지 않고 委中․足三里에 자침한 정상 자침군과 유의성 있는 차이는 없었다.
- 흰쥐에 메틸렌블루를 전처치한 후 委中․足三里에 자침한 MTB처리군(MTB+ (BL40+ST36))의 뇌혈류를 관찰한 결과 시간이 경과함에 따라 증가하다가 감소하는 경향을 보였으며, 이 결과를 전처치하지 않은 정상 자침군과 비교하였을 때 유의한 차이가 보였다(Table 3, Fig. 3).
- 흰쥐에 인도메타신을 전처치한 후 委中․足三里에 자침한 IDN처리군(IDN+(BL40+ST36))의 국소 뇌혈류량은 시간이 경과함에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 이 결과를 전처치를 하지 않은 정상자침군(BL40+ST36)과 비교하였을 때 유의성 있게 감소하였음을 관찰하였다(Table 1, Fig. 1).
후속연구
- 본 연구의 자료는 사암침법이 생체에 미치는 영향을 규명하는데 일정부분 도움이 될 수 있으리라 사료되지만 인체를 대상으로 한 연구가 아니라 흰쥐를 대상으로 하였고 표본의 수도 다소 적었다는 점이 연구의 한계라고 생각한다. 하지만 본 연구의 결과를 토대로 향후 위중과 족삼리에 관련된 연구를 진행함에 있어 기초자료로 활용할 수 있으리라 판단된다.
- 본 연구의 자료는 사암침법이 생체에 미치는 영향을 규명하는데 일정부분 도움이 될 수 있으리라 사료되지만 인체를 대상으로 한 연구가 아니라 흰쥐를 대상으로 하였고 표본의 수도 다소 적었다는 점이 연구의 한계라고 생각한다. 하지만 본 연구의 결과를 토대로 향후 위중과 족삼리에 관련된 연구를 진행함에 있어 기초자료로 활용할 수 있으리라 판단된다.
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