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문제 정의
- pneumonia 감염과 급성, 만성 질환과의 연관성에 관한 연구가 보고되고 있으나 집단생활과 연관된 감염률 연구는 없는 실정이다. 본 연구에서는 기숙사 생활을 하는 일개 대학의 대학생을 연구 대상으로 선정하고 표준 혈청학적 검사법인 미세면역형광법을 이용하여 집단생활 거주 개월 수에 따른 C. pneumonia의 혈청학적 감염률을 조사하였다.
제안 방법
- 다음에 슬라이드의 각 well에는 PBS로 IgG 1:80, IgM 1:100으로 희석시킨 형광표지된 항인 토끼 면역글로불린(FITC-conjugated rabbit anti-human immunoglobulin: DAKO, Denmark)G와 M을 각각 30 μl 점적하여, 37℃ 암실에서 30분간 반응시키고 PBS로 10분간 3회, 멸균증류수로 10분간 3회씩 진탕하여 수세 후, 형광현미경으로 관찰하였다[14, 15].
- 미세면역형광법은 검사할 혈청을 phosphate buffered saline (PBS)으로 1:8 에서 1:1024까지 2배수 단계 희석하여 슬라이드의 각 well에 순서대로 30 μl씩 점적하였으며 나머지 1 well에는 음성대조로 PBS 30 μl을 점적한 다음 37℃ 암실에서 30분간 반응시키고, 그 다음에는 PBS로 10분간 3회, 멸균종류 수로 10분간 3회씩 진탕하여 수세하였다.
- 05%의 포르말린을 첨가하여 균체를 불활성화 시켜 항원으로 사용하였다. 음성대조를 위해서는 감염시키지 않는 단층 McCoy세포를 항원제조와 같은 방법으로 처리한 후 침사를 2% egg yolk sac 완충용액으로 재 부유하여 사용하였다.
- 판정기준은 IgG 항체 역가 1:32 미만은 음성, 1:32 이상은 과거감염 그리고 1:152 이상은 현재감염으로 각각 판정하였다. IgM 항체 역가는 1:16 미만은 음성, 1:16 이상은 현재감염으로 각각 판정하였다.
- 혈청중에 항-Chlamydophila pneumoniae IgG나 IgM 항체가 있으면 fluorescein isothiocyanate가 부착된 항-인 IgG, IgM과 결합하여 형광을 나타나게 되는데 가장 높은 희석배수를 역가로 판정하였다.
대상 데이터
- 2013년 3월에 김천대학교 임상병리학과 재학생 중 기숙사 집단생활 경험자 중에서 호흡기증상이 없는 20∼25세, 남학생 30명, 여학생 30명 전체 60명을 선정하였다.
- 2013년 3월에 김천대학교 임상병리학과 재학생 중 기숙사 집단생활 경험자 중에서 호흡기증상이 없는 20∼25세, 남학생 30명, 여학생 30명 전체 60명을 선정하였다. 기숙사 집단생활 경험이 1개월인 학생 12명, 7개월 14명, 13개월 15명, 35개월 19명을 대상으로 하였다.
- 항원제조에 사용한 Chlamydophila pneumonia 시험균주는 경북대학교병원 진단검사의학과에서 계대배양된 혈청형 TW183 [14, 16]와 McCoy세포를 숙주로 하여 봉입체를 관찰 할 수 있었고, 계대 배양은 적어도 96시간이 지나서 시행하는 것이 바람직하다고 하였다[16]. 이에 본 연구에서도 McCoy 세포 주를 사용하여 96시간 계대배양하여 사용하였다. 시험 균주를 shell vial 단층 McCoy세포에 배양하여 100% 감염이 되게 한 후, 직경 2~3 mm의 유리구슬을 넣어 진탕하고 1,000 rpm에서 10분간 원심분리시켜 세포찌꺼기를 침전시킨 후 제거하고 상층액을 17,000 rpm으로 원심분리 하여 기본체만 1회 더 원심 분리 시켰다.
데이터처리
- 자료분석은 SPSS / PC 10.0 for Windows를 이용하여, 유의 수준 p=0.05로 하였으며, 성별 혈청항체 감염율은 Chi-square 검정법으로 비교하였다.
성능/효과
- C. pneumoniae IgG 항체 역가를 이용한 집단생활 1개월, 7개월, 13개월, 35개월된 학생의 과거 감염률과 현재 감염률은 각각 50.0%, 71.4%, 66.7%, 89.5%와 50.0%, 28.6%, 33.3%, 10.5%로 나타났으며 집단생활의 개월 수가 증가할수록 과거 감염률의 비율은 증가하였고 현재 감염률의 비율은 감소한 것으로 나타났다. 이러한 결과는 본 연구의 C.
- C. pneumoniae IgG 항체에 의한 감염률은 집단생활이 1개월 군에서 과거 감염률 50.0%, 현재 감염률 50.0%, 7개월 군에서 과거 감염률 71.4%, 현재 감염률 28.6%, 13개월 군에서 과거 감염률 66.7%, 현재 감염률 33.3%, 35개월 군에서 과거 감염률 89.5%, 현재 감염률 10.5% 이었다. 과거 감염률의 경우 35개월 군에서 다른 군에 비하여 89.
- C. pneumoniae IgM 항체에 의한 현재 감염률은 집단생활이 1개월, 7개월, 13개월, 35개월 군에서 각각 41.7%, 28.6%, 26.7%, 5.3%로 나타났으며 35개월 군에서 5.3%로 다른 군에 비하여 낮게 나타났다(Table 5). 그리고 C.
- C. pneumoniae의 IgG 항체 역가가 1:32 이상 1:152 미만의 과거 감염률이 남자가 73.3%로 여자 70% 보다 높았고 1:152 이상의 현재 감염률에 있어서는 여자가 30%로 남자 26.4%보다 약간 높았다. 전체적으로는 과거 감염률 71.
- 본 연구에서 C. pneumoniae IgG 항체 역가에 의한 과거 감염률은 집단생활을 경험한 남자에서 73.3%, 여자에서 70%였으며 현재 감염률은 각각 26.4%, 30% 였다. 전체적으로는 과거 감염률 71.
- pneumonia 감염은 무증상인 경우가 많고 집단생활을 하는 군인들에서 높은 무증상 감염을 나타낸 것과 관련이 있는 것으로 판단된다[5, 9]. 본 연구에서 C. pneumoniae IgM 항체를 이용한 현재 감염의 진단에 있어서도 남녀간의 차이는 보이지 않았으며 IgG를 이용한 현재 감염률 28.3%와 유사한 23.3%를 나타냈다.
- 3%이었다. 이상의 결과로 볼 때 집단생활자의 경우 C. pneumoniae에 의한 무증상 감염이 대단히 높다고 생각되며, 과거감염은 집단생활 경험의 개월 수가 많을수록 증가하였으며, 현재 감염률은 집단생활 초기에 증가하였다가 개월 수가 증가할수록 감소하였다. 따라서 면역력이 약한 생활자가 많이 속해 있는 탁아소, 노인병원 등에서 전파방법과 예방법에 관하여 다양한 연구조사가 있어야 할 것으로 사료된다.
- 4%, 30% 였다. 전체적으로는 과거 감염률 71.7%, 현재 감염률 28.3% 였다. 이는 Lee 등[15]이 보고한 건강한 남자의 과거 감염률 58.
- 4%보다 약간 높았다. 전체적으로는 과거 감염률 71.7%, 현재 감염률 28.3%이었다. 그러나 남자와 여자의 과거 감염률과 현재 감염률은 모두 유의한 차이가 없었다(Table 2).
- 2% 보다 높게 나타났다[15]. 전파방법에 대해서는 아직 명확히 밝혀져 있지 않으나 본 연구에서는 C. pneumoniae IgG 항체를 이용한 검사에서 과거감염 71.7%, 현재감염 28.3%이었고 C. pneumoniae IgM 항체 검사에서 현재감염 23.3%이었다. 이상의 결과로 볼 때 집단생활자의 경우 C.
후속연구
- pneumoniae에 의한 무증상 감염이 대단히 높다고 생각되며, 과거감염은 집단생활 경험의 개월 수가 많을수록 증가하였으며, 현재 감염률은 집단생활 초기에 증가하였다가 개월 수가 증가할수록 감소하였다. 따라서 면역력이 약한 생활자가 많이 속해 있는 탁아소, 노인병원 등에서 전파방법과 예방법에 관하여 다양한 연구조사가 있어야 할 것으로 사료된다.
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