Propolis extracts는 다양한 성분으로 구성되어 있는 수지상의 혼합물로서 여러 약리작용을 보여주기 때문에 민간요법으로 널리 이용되어왔다. 특히 propolis extracts는 독성이 거의 없다는 장점 때문에 면역증강제재로서 활용가능성이 높게 평가되고 있다. 이에 본 실험에서는 대상으로 in vitro 및 in vivo상에서 propolis extracts가 양식넙치 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. In vitro상에서 propolis extracts가 PBL의 탐식능 및 NBT assay활성능에 미치는 영향을 조사 한 바 유효농도는 $50{\sim}150{\mu}g/ml$ 이었으며, 가장 활성이 높은 농도는 $100{\mu}g/ml$ 이었다. In vivo상에서 양식넙치에 propolis extracts를 단독 또는 S. iniae 불활화 균액과 혼합하여 어체에 투여 후에 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. Haematocrit치는 propolis extracts단독 및 vaccine과 혼합 처리 할때 유의적 차이를 보이지 않았다. 그렇지만, 혈청 lysozyme과 신장대식세포의 탐식능, 활성산소 환원능 및 항체가는 propolis extracts+vaccine 투여구에서 유의적으로 증가하였다. 이러한 결과들에 의하여 propolis extracts는 양식넙치에서 특이적 및 비특이적 면역증강작용이 우수하므로 향후 양식어류에 있어서 비특이적 면역증강 물질 및 adjuvant로 활용가능성이 기대되어진다.
Propolis extracts는 다양한 성분으로 구성되어 있는 수지상의 혼합물로서 여러 약리작용을 보여주기 때문에 민간요법으로 널리 이용되어왔다. 특히 propolis extracts는 독성이 거의 없다는 장점 때문에 면역증강제재로서 활용가능성이 높게 평가되고 있다. 이에 본 실험에서는 대상으로 in vitro 및 in vivo상에서 propolis extracts가 양식넙치 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. In vitro상에서 propolis extracts가 PBL의 탐식능 및 NBT assay활성능에 미치는 영향을 조사 한 바 유효농도는 $50{\sim}150{\mu}g/ml$ 이었으며, 가장 활성이 높은 농도는 $100{\mu}g/ml$ 이었다. In vivo상에서 양식넙치에 propolis extracts를 단독 또는 S. iniae 불활화 균액과 혼합하여 어체에 투여 후에 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. Haematocrit치는 propolis extracts단독 및 vaccine과 혼합 처리 할때 유의적 차이를 보이지 않았다. 그렇지만, 혈청 lysozyme과 신장대식세포의 탐식능, 활성산소 환원능 및 항체가는 propolis extracts+vaccine 투여구에서 유의적으로 증가하였다. 이러한 결과들에 의하여 propolis extracts는 양식넙치에서 특이적 및 비특이적 면역증강작용이 우수하므로 향후 양식어류에 있어서 비특이적 면역증강 물질 및 adjuvant로 활용가능성이 기대되어진다.
Propolis is a beehive product with a very complex chemical composition, widely used in folk medicine because of its several therapeutic activities. This study was conducted to measure the efficacy of propolis on non-specific defense reactions, specific immune response, and protection levels against ...
Propolis is a beehive product with a very complex chemical composition, widely used in folk medicine because of its several therapeutic activities. This study was conducted to measure the efficacy of propolis on non-specific defense reactions, specific immune response, and protection levels against pathogen challenge with Streptococcus iniae. in vitro and in vivo. In vitro, the phagocytic activity and NBT assay of peripheral blood leukocytes (PBL) were evaluated in a various propolis extractsconcentrations (0, 10, 50, 100, 150, 250 and $500{\mu}g/ml$). The optimal concentration showing activation of propolis extracts was determined to $100{\mu}g/ml$. In vivo, they were divided into four groups (PBS, propoli extractss, vaccine, propolis extracts + vaccine) in vivo. Fish were received i.p. injection of either PBS or propolis extracts, and in the presence or absence of formalin inactivated S. iniae ($1{\times}10^8$ CFU/fish), respectively. The level of haematocrit is not affected among experimental groups. The phagocytic activity and the NBT reduction activities of head kidney phagocyte were markedly (p<0.05)augmented in the propolis extracts groups than in the PBS-control group, respectively. The level of serum lysozyme activity was significantly (p<0.05) increased in the propolis extracts treated groups than in the PBS-control group. The agglutinin titer was significantly (p<0.05) enhanced in the vaccine+propolis extracts group than in the vaccine group, but there was no difference between PBS-control and propolis treated group. The results of the present study suggest that propolis extracts seems to be a promising compounds of non-specific immune stimulator, also being able to use a good adjuvant.
Propolis is a beehive product with a very complex chemical composition, widely used in folk medicine because of its several therapeutic activities. This study was conducted to measure the efficacy of propolis on non-specific defense reactions, specific immune response, and protection levels against pathogen challenge with Streptococcus iniae. in vitro and in vivo. In vitro, the phagocytic activity and NBT assay of peripheral blood leukocytes (PBL) were evaluated in a various propolis extractsconcentrations (0, 10, 50, 100, 150, 250 and $500{\mu}g/ml$). The optimal concentration showing activation of propolis extracts was determined to $100{\mu}g/ml$. In vivo, they were divided into four groups (PBS, propoli extractss, vaccine, propolis extracts + vaccine) in vivo. Fish were received i.p. injection of either PBS or propolis extracts, and in the presence or absence of formalin inactivated S. iniae ($1{\times}10^8$ CFU/fish), respectively. The level of haematocrit is not affected among experimental groups. The phagocytic activity and the NBT reduction activities of head kidney phagocyte were markedly (p<0.05)augmented in the propolis extracts groups than in the PBS-control group, respectively. The level of serum lysozyme activity was significantly (p<0.05) increased in the propolis extracts treated groups than in the PBS-control group. The agglutinin titer was significantly (p<0.05) enhanced in the vaccine+propolis extracts group than in the vaccine group, but there was no difference between PBS-control and propolis treated group. The results of the present study suggest that propolis extracts seems to be a promising compounds of non-specific immune stimulator, also being able to use a good adjuvant.
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문제 정의
특히 propolis extracts는 독성이 거의 없다는 장점 때문에 면역증강제재로서 활용가능성이 높게 평가되고 있다. 이에 본 실험에서는 대상으로 in vitro 및 in vivo상에서 propolis extracts가 양식넙치 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다.
이에 본 실험에서는 양식넙치를 대상으로 propolis extracts의 면역증강효과에 미치는 영향을 조사하였다.
제안 방법
96 well plate(Corning, USA)에서 넙치로부터 분리한 혈청 50 μl를 멸균생리 식염수를 이용하여 2배 계열희석 한 후, formalin 불활화 항원을 50 μl씩 반응시킨 후, 24시간 후에 응집반응 결과를 확인하였다.
In vitro에서 propolisextracts 의 농도차(0, 10, 50, 100, 150, 250 및 500 μg/ml)에 따른 식세포의 활성능을 조사하기 위해서 양식넙치의 pheripheral blood leukocytes(PBL)의 phagocytosis 및 NBT reduction 조사를 하였다.
In vitro상에서 propolis extracts가 PBL의 탐식능 및 NBT assay활성능에 미치는 영향을 조사한 바 유효농도는 50∼150 μg/ml이었으며, 가장 활성이 높은 농도는 100μg/ml 이었다. In vivo상에서 양식 넙치에 propolis extracts를 단독 또는 S. iniae 불활화 균액과 혼합하여 어체에 투여 후에 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. Haematocrit치는 prop- olis extracts단독 및 vaccine과 혼합 처리 할때 유의적 차이를 보이지 않았다.
NBT 측정은 멸균된 슬라이드 글라스위에 0.2% NBT(sigma)용액 0.2 ml을 적하시킨 후 상기와 같이 준비된 백혈구부착 커버글라스를 거꾸로 올려놓은 다음 습윤 배양기에서 2 hrs 반응시켰다. 광학 현미경(400 X)으로 formazan 형성한 백혈구를 검경하였다(n=200).
They were divided into four groups (PBS, Propolis extracts, Vaccine, and Vaccine + Proplois extracts) Each groups(5 fish/group) of fish were received i.p. injection of either PBS or 100 mg/kg of propolis extracts, and in the presence or absence of formalin in- activated S. iniae (1×108 CFU/fish), respectively.
teasing한 세포 현탁액을 35%와 51% 농도의 percoll 용액이 들어있는 15 ml 원심튜브(Corning, USA) 위에 조심스럽게 중층 시킨 다음 원심 분리(450 × g, 30분간)하여 백혈구층만을 조심스럽게 회수한 후 PBS(pH 7.2)로 3회 세정하였다.
iniae 균액을 멸균 PBS에 현탁하여 균 농도를 1 × 109 CFU/ml로 조정하였다. 각 실험구별로 균액을 어체 복강에 0.1 ml씩 주사한 후 10일 동안 생존율을 조사하였다.
2 ml을 적하시킨 후 상기와 같이 준비된 백혈구부착 커버글라스를 거꾸로 올려놓은 다음 습윤 배양기에서 2 hrs 반응시켰다. 광학 현미경(400 X)으로 formazan 형성한 백혈구를 검경하였다(n=200). 이때 3반복으로 측정하였다.
5% NaCl이 첨가된 BHI broth(Difco, USA)에 접종하여 water bath(30℃, 48 h)로 진탕 배양하였다. 균액의 불활화는 10% 중성포르말린(Sigma)을 증균 배양액의 3%가 되도록 첨가하여 18시간 처리하였으며, 배양 균액의 일부를 BHI agar(Difco, USA)에서 접종 배양시 비 발육상태를 확인하였다. 백신으로 사용할 균액은 불활화시킨 균액을 원심분리(10000×g, 10분)하여 상징액을 제거하고 멸균 phosphate buffered saline(PBS, pH 7.
어체를 MS-222로 마취시킨 후에 두부를 절단하여서 희생시켰다. 두신 대식세포의 식작용능을 측정하기 위하여 넙치의 복부를 절개하여 두신을 무균적으로 10 cm의 petri dish(Corning, USA)분리하였다. 분리된 두신을 무균가위로 세절하고 멸균 슬라이드로 teasing한 후, nylon mesh를 통과시켜 세포 현탁액을 준비하였다.
멸균 커버글라스(22 × 40 mm, marienfeld)위에 채혈한 혈액을 0.2 ml과 propolis extracts를 농도별(0, 10, 50, 100, 150, 250 및 500 μg/ml)로 0.2 ml을 첨가하여 22℃의 humidity chamber에서 1시간 배양 후에 적혈구 및 비 부착 세포들을 PBS로 세정하였으며, 여과지로 과다한 세정액을 제거하였다.
불활화 균액 및 propolis 처리는 Chu et al(2006) 및 Cuesta et al(2005)의 방법을 보완하여 사용하였다. 즉 실험구는 4개구(PBS구, propolisextracts 구, vaccine단독구, vaccine+propolis extracts혼합구)로 구분하였으며, 각 실험구당 5마리 넙치를 사용하였다.
전 실험기간 동안의 평균 사육수온은 22±2℃범위로 유지하였고, 환수는 1일 2회 수량의 1/3정도를 환수하면서 필요에 따라 수온유지를 위해 heater를 사용하였다. 사료는 넙치용 EP(주; 우성사료)사료를 어체 중량의 2%를 1일 2회 급이 하였다.
생존율의 측정은 4개 처리구(PBS구, propolis extracts구, vaccine구 및 Vaccine+propolis extracts 혼합구)로 구분하여 각 군마다 12마리의 넙치를 이용하였다. 즉 각 실험구별 처리액 0.
2)로 3회 원심(500 × g, 10 min)하여 균 농도를 1 × 109 CFU/ml로 조정 후 사용하였다. 식세포와 표적세포를 각각 동량(0.5 ml) 혼합하여 3시간 배양 후 각 well을 PBS로 3회 세정 후 100%- methanol로 고정한 후 Wright 염색 후 광학현미경으로 200개의 대식세포를 관찰해서 탐식율을 산출했다.
즉 실험구는 4개구(PBS구, propolisextracts 구, vaccine단독구, vaccine+propolis extracts혼합구)로 구분하였으며, 각 실험구당 5마리 넙치를 사용하였다. 어체를 MS-222(Sigma)로 충분히 마취시킨 후 어체의 내부 장기에 손상이 가지 않도록 1회용 주사기를 이용하여 단독 또는 혼합한 용액 0.2 ml을 어체 복강 내에 주사하였다. 이때 어체내 투여 농도는 균액(1 × 108 CFU/fish) 및 propolis extracts (100 mg/kg) 농도가 되도록 조정하였다.
Hematocrit치는 micro capillary 방법으로 측정하였다. 어체를 MS-222(Sigma)에 마취시킨 다음 hep- arin(5,000 IU, Sigma)처리한 멸균 플라스틱 주사기로 넙치의 미부 정맥에서 채혈하였다. 채혈한 혈액을 시판 capillary tube(Chase Inc.
광학 현미경(400 X)으로 formazan 형성한 백혈구를 검경하였다(n=200). 이때 3반복으로 측정하였다. 한편, 식균능의 측정은 백혈구 부착 커버글라스에 S.
이때 어체내 투여 농도는 균액(1 × 108 CFU/fish) 및 propolis extracts (100 mg/kg) 농도가 되도록 조정하였다.
전 실험기간 동안의 평균 사육수온은 22±2℃범위로 유지하였고, 환수는 1일 2회 수량의 1/3정도를 환수하면서 필요에 따라 수온유지를 위해 heater를 사용하였다.
PBL의 분리 및 활성능 측정은 Anderson et al(1992)의 방법에 준하였다. 즉 양식넙치를 MS-222로 마취 시킨 후에 헤파린 처리 주사기를 이용하여서 미정맥으로부터 채혈하였다. 멸균 커버글라스(22 × 40 mm, marienfeld)위에 채혈한 혈액을 0.
즉, 백신균액 접종 후 2주째에 어체를 MS-222로 마취시킨 후 1회용 주사기를 이용하여 미부정맥에서 채혈하여 냉장고에 2 h 정치 후 원심분리(400 × g, 15min)하여 혈청을 분리하였다.
한편, 식균능의 측정은 백혈구 부착 커버글라스에 S. iniae(1 × 107 CFU/ml)액을 0.2 ml을 적하시킨 후 습윤 배양기에서 3 hrs 반응시킨 다음 실온에서 건조시킨 다음 Wright 염색을 시행한 후 식균된 세포를 관찰해서 탐식율을 산출했다(n=200).
대상 데이터
탐식능의 표적세포는 Streptococcus. iniae (S. iniae) 균주를 이용하였다. 즉 배양기에 48시간 배양 후 PBS(pH 7.
백신제작은 국립수산진흥원으로부터 분양받은 Streptococcus iniae (S. iniae, JSL0208)를 이용하였다. 증균은 균주를 1.
본 실험에 사용된 넙치 Paralichthys olivaceus(약 50 g)는 전북 부안에 소재한 군산대학교 부속 해양 연구원에서 사육중인 넙치를 산소공급 조절 장치가 부착된 수조 운반차량을 이용하여서 1 ton 원형의 FRP 수조에 수용하였다. 전 실험기간 동안의 평균 사육수온은 22±2℃범위로 유지하였고, 환수는 1일 2회 수량의 1/3정도를 환수하면서 필요에 따라 수온유지를 위해 heater를 사용하였다.
p>국내의 양식넙치산업에서 문제시 되고 있는 연쇄구균증은 주로 어체의 성장이 빠른 고수온기인 하절기에 매년 발생하기 때문에 넙치양식어가에 심각한 경제적 부담을 초래하고 있다. 본 증의 원인체는 Streptococcus. iniae로서 그람양성세균의 β-용혈성을 보이며, 이환된 어체는 외관상 채색흑화, 안구백탁, 복부종대 및 탈장증상을 보이는 것이 특징이다(Kim et al.
분리된 두신을 무균가위로 세절하고 멸균 슬라이드로 teasing한 후, nylon mesh를 통과시켜 세포 현탁액을 준비하였다. 사용한 배지는 penicillin/streptomycin(Sigma) 100 units/ml 및 heparin(Sigma) 10 units/ml 등을 함유한 L-15배지(Sigma) 이었다. teasing한 세포 현탁액을 35%와 51% 농도의 percoll 용액이 들어있는 15 ml 원심튜브(Corning, USA) 위에 조심스럽게 중층 시킨 다음 원심 분리(450 × g, 30분간)하여 백혈구층만을 조심스럽게 회수한 후 PBS(pH 7.
In vitro에서 propolisextracts 의 농도차(0, 10, 50, 100, 150, 250 및 500 μg/ml)에 따른 식세포의 활성능을 조사하기 위해서 양식넙치의 pheripheral blood leukocytes(PBL)의 phagocytosis 및 NBT reduction 조사를 하였다. 이때 사용한 어체는 5마리였다.
불활화 균액 및 propolis 처리는 Chu et al(2006) 및 Cuesta et al(2005)의 방법을 보완하여 사용하였다. 즉 실험구는 4개구(PBS구, propolisextracts 구, vaccine단독구, vaccine+propolis extracts혼합구)로 구분하였으며, 각 실험구당 5마리 넙치를 사용하였다. 어체를 MS-222(Sigma)로 충분히 마취시킨 후 어체의 내부 장기에 손상이 가지 않도록 1회용 주사기를 이용하여 단독 또는 혼합한 용액 0.
데이터처리
대조구와 각 실험구 사이의 통계학적 유의성은 Student's t-test로 검정하였으며, P<0.05 일 때 유의성이 있는 것으로 판정하였다.
이론/모형
두신 대식세포의 활성산소 변화 측정은 Baulny et al.(1996)의 방법에 준하여 nitroblue tetrazolium(NBT) reduction 방법으로 측정하였다. 즉 96 well 에 대식세포(5 × 106 cells/ml) 및 옵소닌화된 zymo- san이 함유된 NBT용액을 동량(100 μl) 첨가하고 22℃에서 2 hrs 반응시켰다.
Hematocrit치는 micro capillary 방법으로 측정하였다. 어체를 MS-222(Sigma)에 마취시킨 다음 hep- arin(5,000 IU, Sigma)처리한 멸균 플라스틱 주사기로 넙치의 미부 정맥에서 채혈하였다.
PBL의 분리 및 활성능 측정은 Anderson et al(1992)의 방법에 준하였다. 즉 양식넙치를 MS-222로 마취 시킨 후에 헤파린 처리 주사기를 이용하여서 미정맥으로부터 채혈하였다.
proplis의 추출은 Sforcin(2005)의 방법에 준하여 시행하였다. 간기하면 구입한 프로폴리스(30 g)를 증류수를 첨가하여 총량이 100ml이 되게 균질화 희석시킨 추출물을 여과후에 eavporation을 시킨 후 -70℃ 냉동상태에 보존하였다.
두신세포의 분리는 Secombes(1990)의 방법에 따랐다. 어체를 MS-222로 마취시킨 후에 두부를 절단하여서 희생시켰다.
응집 항체가는 microtiter 법으로 측정하였다(Roberson 1990). 즉, 백신균액 접종 후 2주째에 어체를 MS-222로 마취시킨 후 1회용 주사기를 이용하여 미부정맥에서 채혈하여 냉장고에 2 h 정치 후 원심분리(400 × g, 15min)하여 혈청을 분리하였다.
혈청 lysozyme의 활성은 Swicki and Studnicka(1987)의 방법에 준하여 turbidimetric assay로 분석하였다. 즉 냉동 건조된 Micrococcus lysodeikticus(Sigma) 균체를 0.
성능/효과
hematocrit치의 변화를 조사한 결과, PBS를 처리한 대조구는 30±3.5%, propolis extracts 처리구는 29.5±1.6%, vaccine단독 처리구는 31±3.7% prop- olis+vaccine extracts 혼합 처리구는 29±3.4%로 대조구에 비해서 Ht치가 약간 감소되는 경향을 보였으나 유의적 차이를 보이지 않았다(Fig. 2).
6과 같다. 대조구의 경우 생존율이 22%에 비해 propolis extracts 구는 46%, vac- cine단독구의 경우 생존율이 72%이었으나, vac- cine+propolis extracts 혼합 처리구는 86%의 생존율을 보였다(Fig. 7).
두신 대식세포의 대한 반응기산소 활성치를 Nitroblue tetrazolium(NBT) 환원 후 OD 값을 측정한 결과, PBS 처리구의 경우 0.24±0.01치에 비하여 Propolis 처리 경우에는 0.31±0.02치로 유의성이 인정되었다.
본 실험(in vitro)에서 prop- olis extracts농도차에 따른 PBL의 탐식능 및 NBT 환원능을 조사하였던 바 propolis extracts의 50 ∼ 250 μg/ml 범위대에서 PBS처리구에 비해서 활성능이 유의적으로 증가를 보였으며, 그중 100 μg/ml에서 가장 높았다(Fig. 1).
본 실험에서 propolis extracts가 균체의 감염방어력에 미치는 영향을 평가하기 위해서 S. iniae를 이용하여 공격실험을 한 결과 vaccine단독구에 비해서 propolis extracts+vaccine혼합 처리구에서 생존율이 유의적으로 높게 나타났다(Fig. 6). 이러한 결과는 propolis extracts가 선천적 면역계의 활성 (lysozyme, 탐식능 및 NBT환원능)을 유도하고 아울러 특이항체 생성 및 항체의존성 식세포 살해작용(antibody dependent cell cytotoxcity, ADCC)등의 특이적 면역반응을 활성화 시킨 결과 어체에 감작된 S.
즉, 외부의 병원체가 숙주의 식세포 막을 자극하면 O2로부터 형성된 O2-와 H2O2 등과 같은 일련의 반응기산소(reactive oxygen intermediate, ROI)가 외부 병원체에 대하여 살균 작용을 하는 것으로 알려져 있다(Secombes, 1990; Shon, 1999). 본 실험에서 propolis extracts처리구는 대조구에 비해서 식작용능이 유의성 있게 증가되었으며, NBT 환원능 또한 유의성 있게 증가시켰다(Fig.3, Fig. 4). 이러한 결과는 propol is extracts가 대식세포를 자극하여서 탐식작용 및 superoxide anion(O2-)의 생성작용을 활성화시켰기 때문에 결과적으로 S.
, 1997). 본 실험에서 vaccine+propolis extracts혼합 처리구는 vaccine 단독 처리구에 비하여 균체응집소가는 유의적으로 높게 나타난 결과(Fig. 5)는 마우스에 proplis extracts 를 경구적으로 단기간 처리경우에도 항체 생성의 증강효과를 보인 결과(Sforcin et al., 2005)와 propolis extracts를 복강 내로 백신과 혼합 투여시 항체가 2주째부터 대조군에 비하여 매우 증가되었다는 보고(Fan et al., 2010)들과 일치되어진다. 한편, 이러한 결과는 propolis extracts가 항체생성세 포를 직접적으로 활성화를 유발하기 보다는 면역계 시발세포인 대식세포를 활성화에 따른 일련의 cytokine작용으로 항체생성을 증가시켰을 것으로 추정되나 본 실험만으로는 명확히 알 수가 없었다.
4). 이러한 결과는 propol is extracts가 대식세포를 자극하여서 탐식작용 및 superoxide anion(O2-)의 생성작용을 활성화시켰기 때문에 결과적으로 S. iniae 감염에 대한 propolis처리구의 생존율을 높이는 것으로 판단된다. 따라서 propolis extracts 가 ROI의 활성에 있어서 시발점이 되는 강력한 살균력을 보여주는 superoxide anion(O2-)의 활성을 현저하게 증가시킨다는 점에서 적어도 양식넙치의 비특이적인 면역증강제로 활용될 가능성이 높을 것으로 기대된다.
즉 propolis extracts농도 50∼150 μg/ml 범위대에서 PBL의 탐식능 및 NBT 환원능이 대조구에 비해서 유의성 있게 증가를 보였으며, 특히 100 μg/ml에서 가장 활성이 높았다.
즉 대조군의 경우 145±11치를 보인 반면에 propolis extracts 처리구에서는 178±13치로 유의성 있게 높았다.
, 1992; Paulsen et al, 2002). 한편, in vivo상에서 prop- olis 처리 유무(PBS, Propolis, Vaccine, Propolis + Vaccine)에 따른 lysozyme의 활성치를 조사하였던 바 propolis 처리구는 대조구에 비해서 lysozyme 활성능이 유의적으로 증가되어졌다(Fig. 2). 한편, lyzozyme의 활성이 그람양성세균보다는 그람양성 세균에 효과적이란 점으로 미루어 볼때 propolis extracts가 양식넙치의 새균성 고질병의 하나인 연쇄구균증의 예방을 위한 유용하게 활용되어질 것으로 평가되어진다.
, 2010)들과 일치되어진다. 한편, 이러한 결과는 propolis extracts가 항체생성세 포를 직접적으로 활성화를 유발하기 보다는 면역계 시발세포인 대식세포를 활성화에 따른 일련의 cytokine작용으로 항체생성을 증가시켰을 것으로 추정되나 본 실험만으로는 명확히 알 수가 없었다.
후속연구
이상의 결과를 요약해보면 propolis extracts가 양식넙치의 혈청 중의 lysozyme, 대식세포의 식작용 능 및 활성산소 환원능등을 활성화시킨 결과로 미루어 볼때 양식 어류의 면역증강제의 유용물질로서 활용가능성이 높을 것으로 사료된다. 그렇지만 어류의 양식특성상 다양한 스트레스 환경에 처해질 가능성이 매우 높기 때문에 따라서 양식현장에서 propolis extracts를 면역증강제로 활용하기 위해서는 면역계 주요 작동세포인 T 및 B림프구들의 미치는 영향 및 백신지속기간 등에 대한 추가 시험이 필요하리라 사료된다.
iniae 감염에 대한 propolis처리구의 생존율을 높이는 것으로 판단된다. 따라서 propolis extracts 가 ROI의 활성에 있어서 시발점이 되는 강력한 살균력을 보여주는 superoxide anion(O2-)의 활성을 현저하게 증가시킨다는 점에서 적어도 양식넙치의 비특이적인 면역증강제로 활용될 가능성이 높을 것으로 기대된다.
그렇지만, 혈청 lysozyme과 신장대식세포의 탐식능, 활성산소 환원능 및 항체가는 propolis extracts+vaccine 투여구에서 유의적으로 증가하였다. 이러한 결과들에 의하여 prop- olis extracts는 양식넙치에서 특이적 및 비특이적 면역증강작용이 우수하므로 향후 양식어류에 있어서 비특이적 면역증강 물질 및 adjuvant로 활용 가능성이 기대되어진다.
이상의 결과를 요약해보면 propolis extracts가 양식넙치의 혈청 중의 lysozyme, 대식세포의 식작용 능 및 활성산소 환원능등을 활성화시킨 결과로 미루어 볼때 양식 어류의 면역증강제의 유용물질로서 활용가능성이 높을 것으로 사료된다. 그렇지만 어류의 양식특성상 다양한 스트레스 환경에 처해질 가능성이 매우 높기 때문에 따라서 양식현장에서 propolis extracts를 면역증강제로 활용하기 위해서는 면역계 주요 작동세포인 T 및 B림프구들의 미치는 영향 및 백신지속기간 등에 대한 추가 시험이 필요하리라 사료된다.
2). 한편, lyzozyme의 활성이 그람양성세균보다는 그람양성 세균에 효과적이란 점으로 미루어 볼때 propolis extracts가 양식넙치의 새균성 고질병의 하나인 연쇄구균증의 예방을 위한 유용하게 활용되어질 것으로 평가되어진다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
연쇄구균증이 주로 발생하는 때와 그 이유는?
국내의 양식넙치산업에서 문제시 되고 있는 연쇄구균증은 주로 어체의 성장이 빠른 고수온기인 하절기에 매년 발생하기 때문에 넙치양식어가에 심각한 경제적 부담을 초래하고 있다. 본 증의 원 인체는 Streptococcus.
식용 및 약용의 천연산물들이 양식 어체의 면역증강제로 활용되기 위한 조건은?
, 1999). 통상적으로 식용 및 약용의 천연산물들이 양식 어체의 면역증강제로서 활용되기 위한 조건으로서는 어류 체내에 독성작용이 거의 없을 것, 환경 친화적일 뿐만 아니라, 증체율 향상과 더불어 탁월한 생리활성 작용을 필요로 한다(Burdock, 1998; Stahl, 1992; Kim et al., 1999; Jia & Wu 2004).
어체의 비특이적 면역 증강을 통한 질병예방효과가 매우 긍정적으로 평가 되는 이유는?
본 증의 예방 및 치료를 위해서 주로 항균요법에 의존되어지고 있다. 그렇지만 과도한 약제의 빈번한 사용은 약제 내성균의 확산으로 치료에 어려움을 증가시킬 뿐만 아니라, 어체내에 약제의 잔류로 인해서 공중보건학적으로도 매우 심각한 문제로 지적되고 있다(Barton and Iwama, 1991; Iwama et al., 1997; Kim et al.
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