[논문]피부각질형성세포에서 다양한 베리류의 피부노화개선 효과 비교

이수정; 최혜란; 이진철; 박희전; 이희권; 정종태; 이태범

doi:10.9721/kjfst.2014.46.2.198

[국내논문] 피부각질형성세포에서 다양한 베리류의 피부노화개선 효과 비교
The Anti-aging Effects of Various Berries in the Human Skin Keratinocyte (HaCaT) Cells 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.46 no.2, 2014년, pp.198 - 204

이수정 ((재)고창복분자연구소) , 최혜란 ((재)고창복분자연구소) , 이진철 ((재)고창복분자연구소) , 박희전 ((재)고창복분자연구소) , 이희권 ((재)고창복분자연구소) , 정종태 ((재)고창복분자연구소) , 이태범 ((재)고창복분자연구소)

초록
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다양한 베리류인 복분자, 블루베리(재배종), 블루베리(야생종), 블랙초크베리 및 오디의 inflammatory cytokines 발현 억제효과, MMP-1 발현 억제활성 그리고 ROS 생성 저해효과를 비교해보았다. Inflammatory cytokines 발현 억제효과 비교에서 복분자와 블루베리(재배종)의 TNF-${\alpha}$ 억제활성이 가장 뛰어났고, IL-6의 경우 블랙초크베리, 블루베리, 복분자 순으로 inflammatory cytokines의 발현 억제 효과를 보여주었다. 또한 블랙초크베리, 블루베리(야생종), 복분자가 IL-8의 발현을 눈에 띄게 억제 하였다. 더불어 복분자와 오디의 inflammatory cytokines 발현 억제에 대해 시너지 효과가 있는지 여부를 확인하기 위해 복분자와 오디를 각각 $250{\mu}g/mL$씩 함께 처리한 결과 복분자 $250{\mu}g/mL$과 오디 $250{\mu}g/mL$의 농도로 동시에 처리할 경우, 복분자와 오디를 각각 500 ${\mu}g/mL$로 처리한 그룹에 비해 시너지 효과를 보이지 않았지만 오디만을 처리했을 때보다는 염증성 사이토카인의 발현이 감소됨을 확인하였다. 또한 베리류 착즙액을 처리한 모든 그룹에서 MMP-1 mRNA의 발현이 현저하게 감소되었고, 그중에서도 특히 블루베리(야생종)의 효과가 가장 탁월하였다. 복분자($250{\mu}g/mL$)와 오디($250{\mu}g/mL$)를 동시에 처리한 그룹과 복분자 또는 오디를 각각 500 ${\mu}g/mL$로 처리한 그룹을 비교해본 결과, 복분자와 오디를 동시에 처리한 그룹이 복분자와 오디만을 각각 처리한 그룹보다 MMP-1 mRNA의 발현이 좀 더 감소하는 효과를 보여주었다. ROS 생성저해 효과를 비교한 결과, 블랙초크베리가 가장 뛰어났고 그 다음으로 복분자, 블루베리(재배종)의 순으로 두 착즙액의 ROS 생성 저해 효과가 비슷한 것으로 나타났다. 그러나 복분자 $250{\mu}g/mL$과 오디 $250{\mu}g/mL$의 농도로 동시에 처리그룹의 경우 ROS 생성에 대한 시너지 억제효과를 보이지 않았다. 이상의 결과들로부터 다섯 가지 베리류 즉, 복분자, 블루베리(재배종), 블루베리(야생종), 블랙초크베리 및 오디의 inflammatory cytokines 과 MMP-1 mRNA 발현 및 ROS 생성에 대한 저해 효과는 각각의 베리류에서 차이를 보였으나, 다섯가지 베리류 모두 항염증, 항산화 작용을 통해 피부노화 개선에 기여할 것으로 사료된다.

Abstract ▼ AI-Helper

Ultraviolet B (UV-B) irradiation is a negative factor that induces skin damage, inflammation, and aging. UVB irradiation induces the inflammatory response through interleukin (IL)-6 and IL-8 expression in keratinocytes. In addition, it induces the production of reactive oxygen species (ROS) and the activation of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1), which plays an important role in collagen 1 degradation in the extracellular matrix. We investigated the antiaging effects of five kinds of berry in human skin keratinocyte (HaCaT) cells using juice of black raspberry (Rubus occidentalis), blueberry wild (Vacciniun angustifolium) and cultivar (Vacciniun corymbosum), black chokeberry (Aronia melanocarpa (Michx.) Elliott), and mulberry (Morus abla). HaCaT cells irradiated with UV-B exhibited increased ROS generation, as well as IL-6, IL-8, and MMP-1 gene expression, when compared to the control cells that were not irradiated with UV-B. However, pre-treatment of berry juice before UV-B irradiation significantly down-regulated the UV-B-induced ROS generation and inflammatory cytokine and MMP-1 expression. The results suggest that all berries have anti-aging effects including lowering inflammatory cytokine levels, ROS generation, and MMP-1 expression in HaCaT cells during UV-B irradiation.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

UV-B가 염증을 유도하는지 확인 해보고자 UV-B의 선량이 증가할 때 inflammatory cytokines의 발현을 확인해 보았다. 먼저 HaCaT 세포에 다양한 선량별로 UV-B를 조사하여 HaCaT 세포가 죽지 않는 최대 선량을 확인한 결과 100 mJ/cm²임을 알 수 있 었다(data not shown).
2). 마지막으로 UV-B 선량은 HaCaT 세포가 죽지 않는 최대 선량인 100 mJ/cm²로 하여 다양한 베리류 착즙액이 UV-B로 유도된 inflammatory cytokines의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 확인해 보았다. 그 결과 UV-B 100 mJ/cm²그룹에서 inflammatory cytokines의 발현이 현저히 증가됨을 확인하였고, UV-B 100 mJ/ cm²를 조사한 후 베리류 착즙액을 처리한 그룹들에서 증가되었던 inflammatory cytokines의 발현이 현저히 감소되었다(Fig.
특히 복분자(Rubus occidentalis)는 anthocyanins (cyanidin 3-sambubioside, cyanidin 3-glucoside, cyanidin 3- xylosylrutinoside, cyanidin 3-rutinoside and pelargonidin 3-rutinoside), flavonoids (flavonols and flavanols), tannins (proanthocyanidins, ellagitannins and gallotannins), stilbenoids (resveratrol) 및 phenolic acids와 그리고 lignans가 풍부한 것으로 보고되었다(18). 본 실험에서는 인간각질형성세포주인 HaCaT 세포에서 UV-B로 유도된 inflammatory cytokines 발현, ROS 생성 및 MMP-1 mRNA의 유도와 같은 세포내 반응을 베리류 중에서 복분자, 블루베리(Vaccinium corymbosum, 재배종 및 야생종), 블랙초크베리 (Aronia melanocapa) 및 오디(Morus alba)의 억제활성을 비교해 보고자하였다.

제안 방법

1시간 뒤 배지를 없애고, serum free 배지를 20 µL씩 분주하고 나서, UV-B를 100 mJ/cm2의 선량으로 세포에 조사한 뒤 serum free 배지를 180 µL씩 추가로 분주하였다.
1시간 뒤 배지를 없애고, serum free 배지를 500 µL씩 분주하고 나서, 100 mJ/cm2 세기로 UV-B를 세포에 조사하였다.
First strand cDNA을 50 mM Tris-HCl (pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), 1 U/µL RNasin (Invitrogen), 1 mM each dNTP, oligo (dT)20 100 ng과 MMLV reverse transcriptase (Invitrogen) 200U가 함유된 20 µL의 용액에서 총 RNA 2 µg으로부터 합성하였다.
자외선 조사를 위해 serum free 배지를 세포배양 dish 또는 well에 채운 후 UV-B lamp (Crosslinker Model CL-1000, UVP, LCC, Upland, CA, USA)를 사용하여 세포에 UV-B를 조사하였다. HaCaT 세포가 자외선을 받은 뒤 죽지 않고 염증과 산화적 스트 레스를 일으킬 수 있는 적당한 선량을 결정하기 위해 0, 25, 50, 100 mJ/cm²의 선량별로 조사하였다.
MTT assay에는 cell viability assay kit (EZ-Cytox, Dogen, Seoul, Korea)를 이용하였고, 모든 well에 MTT 용액 10 µL를 가해주고 다시 37℃, 5% CO2에서 4시간 배양한 뒤 흡광도 측정을 위해 1분 정도 부드럽게 shaking을 한 뒤 microplate reader (Synergy HT, Bio-Tek, Winooski, VT, USA)를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다.
UV-B의 조사를 통해 세포손상과 노화의 원인이 되는 ROS를 유도한 뒤, 다양한 베리류의 항산화활성을 비교해보았다. UV-B 선량이 0, 25, 50, 100 mJ/cm² 로 증가함에 따라 ROS의 생성량도 눈에 띄게 증가되었고, 특히 100 mJ/cm²의 선량을 조사한 그룹은 대조군에 비해 ROS의 생성량이 약 1.
다양한 베리류, 즉 복분자를 비롯한 블루베리(재배종), 블루베리(야생종), 블랙초크베리 및 오디 추출물의 세포독성여부를 확인한 결과 최고농도인 500 µg/mL에서 독성을 보이지 않았고(Fig. 1), 이러한 결과를 바탕으로 베리류 착즙액이 HaCaT 세포에 독성이 없는 것으로 사료되어 500 µg/mL의 농도에서 실험을 진행하였다.
다양한 베리류가 HaCaT 세포에 독성을 미치는지 확인하기 위해 96 well plate에 well당 4×104 cell/mL로 분주한 후 24시간 동안 배양하고, 복분자, 블루베리(재배종), 블루베리(야생종), 블랙초크베리 및 오디 착즙액을 처리한 뒤 24시간 뒤에 methyl thiazolyl diphenyl tetrazolium (MTT) assay를 실행하였다.
다양한 베리류인 복분자, 블루베리(재배종), 블루베리(야생종), 블랙초크베리 및 오디의 inflammatory cytokines 발현 억제효과, MMP-1 발현 억제활성 그리고 ROS 생성 저해효과를 비교해보았다. Inflammatory cytokines 발현 억제효과 비교에서 복분자와 블루베리(재배종)의 TNF-α 억제활성이 가장 뛰어났고, IL-6의 경우 블랙초크베리, 블루베리, 복분자 순으로 inflammatory cytokines의 발현 억제 효과를 보여주었다.
착즙포에 공기가 들어가지 않도록 준비한 다음 유압식 착즙기(KR-70, Koryeo, Incheon, Korea)를 이용하여 하강버튼을 천천히 누르면서 압력이 2000 psi가 될 때까지 착즙하였다. 복분자, 블루베리(재배종), 블루베리(야생종), 블랙초크베리 및 오디 착즙액의 처리는 다음과 같이 실시하였다. Serum free 배지로 dish 또는 well을 한번 washing한 뒤 serum free 배지를 채워 넣고 베리류 착즙액을 처리하였다.
복분자와 오디 복합처리 시의 inflammatory cytokines 발현 억제에 대해 시너지 효과가 있는지 여부를 확인하기 위해 복분자와 오디를 각각 250 µg/mL씩 함께 처리하였다.
본 실험에서 DCFH-DA의 농도는 2.5 µM로 처리 하였고, DCFH-DA 처리 후 1시간 뒤에 형광분석 ELISA reader기 (Bio-Tek)를 통해 excitation wavelength 485 nm, emission wavelength 530 nm를 이용해 분석하였다.
3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl₂, 10 mM DTT (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), 1 U/µL RNasin (Invitrogen), 1 mM each dNTP, oligo (dT)20 100 ng과 MMLV reverse transcriptase (Invitrogen) 200U가 함유된 20 µL의 용액에서 총 RNA 2 µg으로부터 합성하였다. 실시간 PCR은 Fast Start DNA Master SYBR Green I kit (Roche, Mannheim, Germany)을 이용하여 Light Cycler 2.0에서 증폭하였다. 사용한 primer와 PCR 조건은 Table 1, 2와 같으며 유전자의 정량 분석은 Light Cycler Software 4.
영하 40℃에 보관한 복분자(BRB)를 비롯한 블루베리(재배종, BB (cv.)), 블루베리(야생종, BB (WT)), 블랙초크베리(BCB) 및 오디(MB)를 각각 10kg을 24시간 해동 후 착즙포에 담고 손으로 으깨었다. 착즙포에 공기가 들어가지 않도록 준비한 다음 유압식 착즙기(KR-70, Koryeo, Incheon, Korea)를 이용하여 하강버튼을 천천히 누르면서 압력이 2000 psi가 될 때까지 착즙하였다.
이후 UV-B를 HaCaT 세포에 0, 25, 50, 100 mJ/cm2의 선량별로 조사하여 TNF-α, IL-6 및 IL-8 mRNA의 발현을 확인해 보았다.
자외선 조사를 위해 serum free 배지를 세포배양 dish 또는 well에 채운 후 UV-B lamp (Crosslinker Model CL-1000, UVP, LCC, Upland, CA, USA)를 사용하여 세포에 UV-B를 조사하였다. HaCaT 세포가 자외선을 받은 뒤 죽지 않고 염증과 산화적 스트 레스를 일으킬 수 있는 적당한 선량을 결정하기 위해 0, 25, 50, 100 mJ/cm²의 선량별로 조사하였다.

대상 데이터

5 mL씩 추가로 분주한 뒤 24시간 배양하였다. 베리류를 처리한 세포에서 RNA를 추출하기 위해 total RNA extraction reagent인 tri reagent (RNAiso PLUS, Takara, Otsu, Japan)를 이용하였다. Tri reagent 1 mL을 세포에 넣은 후 15초 동안 vortex하였다.
5 µM로 처리 하였고, DCFH-DA 처리 후 1시간 뒤에 형광분석 ELISA reader기 (Bio-Tek)를 통해 excitation wavelength 485 nm, emission wavelength 530 nm를 이용해 분석하였다. 실험에 사용된 양성대조군은 N-acetyl-L-cysteine (NAC, Sigma aldrich, St. Louis, MO, USA)을 사용하였다.
인간각질형성세포주인 HaCaT 세포를 56℃에서 30분간 열처리 된 fetal bovine serum (PAA, Etobicoke, ON, Canada) 10%와 항생제(penicillin/streptomycin, Lonza, Walkersville, MD, USA)를 함유한 Dulbecco’s modified Eagle’s media (DMEM, Welgene, Daegu, Korea)를 사용하여 5% CO2, 37℃ 세포 배양기에서 배양하였다.
피부각질형성 세포인 HaCaT에서 ROS를 유도하기 위해 96 well black plate에 1×105 cell/mL로 분주하고 24시간 배양하였다.

데이터처리

통계분석 모든 분석 자료는 평균±표준오차(mean±SE)로 나타내었으며 실험결과는 SPSS 12.0K (SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 이용하여 p<0.05 수준에서 통계처리 하였고 t-test와 Duncan’s multiple range test로 검증하였다.

이론/모형

0에서 증폭하였다. 사용한 primer와 PCR 조건은 Table 1, 2와 같으며 유전자의 정량 분석은 Light Cycler Software 4.0 (Roche)을 이용하였다.
이때 배지에 베리류 착즙액의 처리 농도가 500 µg/mL이 되도록 하여 24시간 동안 배양하였다. 이후 ROS 생성량을 측정하기 위 해 dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) 염색 방법을 사용하 였다(19). 본 실험에서 DCFH-DA의 농도는 2.

성능/효과

특히 복분자와 블루베리(재배종)의 TNF-α 억제활성이 가장 뛰어났다. IL-6의 경우 블랙초크베리, 블루베리, 복분자 순으로 inflammatory cytokines의 발현 억제 효과를 보여주었고 블루베리 재배종과 야생종의 IL-6 억제 활성은 비슷한 것으로 나타났다. 또한 블랙초 크베리, 블루베리(야생종), 복분자가 IL-8의 발현을 눈에 띄게 억제 하였다.
Inflammatory cytokines 발현 억제효과 비교에서 복분자와 블루베리(재배종)의 TNF-α 억제활성이 가장 뛰어났고, IL-6의 경우 블랙초크베리, 블루베리, 복분자 순으로 inflammatory cytokines의 발현 억제 효과를 보여주었다.
MMP-1의 발현에 베리류 착즙액이 어떠한 영향을 미치는지 확인한 결과, UV-B를 100 mJ/cm2 로 조사한 그룹에서 MMP-1의 발현이 현저히 증가되었고, UV-B를 조사한 후 다양한 베리류 착즙액을 500 µg/mL의 농도로 처리 하였을 경우, 베리류 착즙액을 처리한 모든 그룹에서 MMP-1 mRNA의 발현이 현저하게 감소되었다(Fig. 4).
복분자(250 µg/mL)와 오디 (250 µg/mL)를 동시에 처리한 그룹과 복분자 또는 오디를 각각 500 µg/mL로 처리한 그룹을 비교해본 결과, 복분자와 오디를 동시에 처리한 그룹이 복분자와 오디만을 각각 처리한 그룹보다 MMP-1 mRNA의 발현이 좀 더 감소하는 효과를 보여주었다. ROS 생성저해 효과를 비교한 결과, 블랙초크베리가 가장 뛰어났고 그 다음으로 복분자, 블루베리(재배종)의 순으로 두 착즙액의 ROS 생성 저해 효과가 비슷한 것으로 나타났다. 그러나 복분자 250 µg/mL과 오디 250 µg/mL의 농도로 동시에 처리그룹의 경우 ROS 생성에 대한 시너지 억제효과를 보이지 않았다.
UV-B의 조사를 통해 세포손상과 노화의 원인이 되는 ROS를 유도한 뒤, 다양한 베리류의 항산화활성을 비교해보았다. UV-B 선량이 0, 25, 50, 100 mJ/cm² 로 증가함에 따라 ROS의 생성량도 눈에 띄게 증가되었고, 특히 100 mJ/cm²의 선량을 조사한 그룹은 대조군에 비해 ROS의 생성량이 약 1.8배 증가 되었다(Fig. 5). UV-B 조사 후 베리류 착즙액을 처리한 결과 모든 베리류 처리 그룹에서 ROS의 생성이 눈에 띄게 감소되었고, 그중에서도 특히 블랙초크베리의 활성이 가장 뛰어난 것을 확인하였다(Fig.
5). UV-B 조사 후 베리류 착즙액을 처리한 결과 모든 베리류 처리 그룹에서 ROS의 생성이 눈에 띄게 감소되었고, 그중에서도 특히 블랙초크베리의 활성이 가장 뛰어난 것을 확인하였다(Fig. 5). NAC은 광범위하게 연구가 진행된 ROS 제거제이다(24).
마지막으로 UV-B 선량은 HaCaT 세포가 죽지 않는 최대 선량인 100 mJ/cm²로 하여 다양한 베리류 착즙액이 UV-B로 유도된 inflammatory cytokines의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 확인해 보았다. 그 결과 UV-B 100 mJ/cm²그룹에서 inflammatory cytokines의 발현이 현저히 증가됨을 확인하였고, UV-B 100 mJ/ cm²를 조사한 후 베리류 착즙액을 처리한 그룹들에서 증가되었던 inflammatory cytokines의 발현이 현저히 감소되었다(Fig. 3). 특히 복분자와 블루베리(재배종)의 TNF-α 억제활성이 가장 뛰어났다.
그 결과 UV-B의 선량이 증가함에 따라 TNF-α, IL-6 및 IL-8 mRNA의 발현이 증가함을 확인하였다(Fig. 2).
그 결과 복분자 250 µg/mL과 오디 250 µg/mL의 농도로 동시에 처리할 경우, 복분자와 오디를 각각 500 µg/mL 로 처리한 그룹에 비해 시너지 효과를 보이지 않았지만 오디만을 처리했을 때보다는 염증성 사이토카인의 발현이 감소됨을 확인하였다(Fig. 3).
이런 안토시아닌이 블랙초크베리의 강력한 항산화능력을 나타내는 것 으로 생각되며, 이미 블랙초크베리의 항산화와 항염증에 관한 연구가 보고된바 있다(30-32). 그 다음으로 높은 ROS 생성 저해 효과를 보인 그룹은 복분자, 블루베리(재배종)의 순으로 두 착즙액의 ROS 생성 저해 효과가 비슷한 것으로 나타났다. 복분자의 항산화활성에 대해 많은 연구결과가 존재하며(33), 복분자의 항산화 활성은 복분자에 포함된 페놀성 화합물 및 flavonoids류가 관여할 것으로 추정한다(34-36).
더불어 복분자와 오디의 inflammatory cytokines 발현 억제에 대해 시너지 효과가 있는지 여부를 확인하기 위해 복분자와 오디를 각각 250 µg/mL씩 함께 처리한 결과 복분자 250 µg/mL과 오디 250 µg/mL의 농도로 동시에 처리할 경우, 복분자와 오디를 각각 500 µg/mL로 처리한 그룹에 비해 시너지 효과를 보이지 않았지만 오디만을 처리했을 때보다는 염증성 사이토카인의 발현이 감소됨을 확인하였다.
더불어 복분자와 오디의 inflammatory cytokines 발현 억제에 대해 시너지 효과가 있는지 여부를 확인하기 위해 복분자와 오디를 각각 250 µg/mL씩 함께 처리한 결과 복분자 250 µg/mL과 오디 250 µg/mL의 농도로 동시에 처리할 경우, 복분자와 오디를 각각 500 µg/mL로 처리한 그룹에 비해 시너지 효과를 보이지 않았지만 오디만을 처리했을 때보다는 염증성 사이토카인의 발현이 감소됨을 확인하였다. 또한 베리류 착즙액을 처리한 모든 그룹에서 MMP-1 mRNA의 발현이 현저하게 감소되었고, 그중에서도 특히 블루베리(야생종)의 효과가 가장 탁월하였다. 복분자(250 µg/mL)와 오디 (250 µg/mL)를 동시에 처리한 그룹과 복분자 또는 오디를 각각 500 µg/mL로 처리한 그룹을 비교해본 결과, 복분자와 오디를 동시에 처리한 그룹이 복분자와 오디만을 각각 처리한 그룹보다 MMP-1 mRNA의 발현이 좀 더 감소하는 효과를 보여주었다.
IL-6의 경우 블랙초크베리, 블루베리, 복분자 순으로 inflammatory cytokines의 발현 억제 효과를 보여주었고 블루베리 재배종과 야생종의 IL-6 억제 활성은 비슷한 것으로 나타났다. 또한 블랙초 크베리, 블루베리(야생종), 복분자가 IL-8의 발현을 눈에 띄게 억제 하였다. Torri 등(20)은 블루베리의 염증억제에 대한 효과를 보 고한 바 있고, 복분자 또한 TNF-α와 IL-6의 억제효과에 대한 연구에서는 복분자가 염증반응의 매개물질인 nitric oxide (NO), prostaglandin E₂ (PGE₂) 그리고 inflammatory cytokine 등의 생성을 억제함으로 염증반응을 완화시켜주는 것으로 판단하였다(21).
IL-6의 경우 블랙초크베리, 블루베리, 복분자 순으로 inflammatory cytokines의 발현 억제 효과를 보여주었고 블루베리 재배종과 야생종의 IL-6 억제 활성은 비슷한 것으로 나타났다. 또한 블랙초 크베리, 블루베리(야생종), 복분자가 IL-8의 발현을 눈에 띄게 억제 하였다. Torri 등(20)은 블루베리의 염증억제에 대한 효과를 보 고한 바 있고, 복분자 또한 TNF-α와 IL-6의 억제효과에 대한 연구에서는 복분자가 염증반응의 매개물질인 nitric oxide (NO), prostaglandin E₂ (PGE₂) 그리고 inflammatory cytokine 등의 생성을 억제함으로 염증반응을 완화시켜주는 것으로 판단하였다(21).
UV-B가 염증을 유도하는지 확인 해보고자 UV-B의 선량이 증가할 때 inflammatory cytokines의 발현을 확인해 보았다. 먼저 HaCaT 세포에 다양한 선량별로 UV-B를 조사하여 HaCaT 세포가 죽지 않는 최대 선량을 확인한 결과 100 mJ/cm²임을 알 수 있 었다(data not shown). 이후 UV-B를 HaCaT 세포에 0, 25, 50, 100 mJ/cm²의 선량별로 조사하여 TNF-α, IL-6 및 IL-8 mRNA의 발현을 확인해 보았다.
모든 베리류 처리 그룹에서 MMP-1 mRNA의 발현 억제효과를 보여주었지만, 그중에서도 특히 블루베리(야생종)의 효과가 가장 탁월 하였다.
복분자(250 µg/mL)와 오디 (250 µg/mL)를 동시에 처리한 그룹과 복분자 또는 오디를 각각 500 µg/mL로 처리한 그룹을 비교해본 결과, 복분자와 오디를 동시에 처리한 그룹이 복분자와 오디만을 각각 처리한 그룹보다 MMP-1 mRNA의 발현이 좀 더 감소하는 효과를 보여주었다.
복분자(250 µg/mL)와 오디(250 µg/mL)를 동시에 처 리한 그룹과 복분자 또는 오디를 각각 500 µg/mL로 처리한 그룹을 비교해본 결과, 복분자와 오디를 동시에 처리한 그룹이 복분자와 오디만을 각각 처리한 그룹보다 MMP-1 mRNA의 발현이 좀 더 감소하는 효과를 보여주었다.
NAC은 glutathione의 전구체로 작용하며 직접적으로 H₂O₂ 또는 hydroxyl radical (OH)과 같은 ROS 제거제로 작용하여 ROS를 감소시키거 나 ROS에 의한 산화스트레스 및 염증성 반응을 감소시킨다(25- 27). 양성대조군인 NAC 10 nM보다 블랙초크베리의 효과가 더 높은 것으로 나타났다. 블랙초크베리에 함유된 안토시아닌 중 cyanidin 3-galactoside, cyanidin 3-arabinoside, cyanidin 3-glucoside, cyanidin-3-O-xyloside 4종이 주요 성분으로 이루어져 있다(28,29).
그러나 복분자 250 µg/mL과 오디 250 µg/mL의 농도로 동시에 처리그룹의 경우 ROS 생성에 대한 시너지 억제효과를 보이지 않았다. 이상의 결과들로부터 다섯 가지 베리류 즉, 복분자, 블루베리(재배종), 블루베리(야생종), 블랙초크베리 및 오디의 inflammatory cytokines 과 MMP-1 mRNA 발현 및 ROS 생성에 대한 저해 효과는 각각의 베리류에서 차이를 보였으나, 다섯가지 베리류 모두 항염증, 항산화 작용을 통해 피부노화 개선에 기여할 것으로 사료된다.
특히 복분자와 블루베리(재배종)의 TNF-α 억제활성이 가장 뛰어났다.

후속연구

오디는 한국에서 재배되는 베리류 중 산업화 및 상품화를 하는데 있어서 가장 우수한 가격경쟁력을 가지고 있다. 따라서 피부노화 연구결과를 바탕으로 기능성 음료로서 복분자 제품을 개발시 오디와의 혼합을 통해 복분자 단독음료와 동일한 피부노화 억제 효과를 증명할 수 있다면 제품의 가격경쟁력에서 우위를 가질 수 있을 것으로 사료된다. 복분자와 오디 복합처리 시의 inflammatory cytokines 발현 억제에 대해 시너지 효과가 있는지 여부를 확인하기 위해 복분자와 오디를 각각 250 µg/mL씩 함께 처리하였다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	피부가 자외선에 노출되면 어떻게 되는가?	피부노화는 나이가 들어감에 따라 피부의 생리적 기능감소와 구조적인 변화로 인해 나 타나는 생리적 노화(intrinsic aging)와, 자외선(ultrviolet, UV)과 같은 외부자극에 의한 화학적 스트레스가 원인이 되는 광노화 (photoaging)로 구분할 수 있다. 피부가 자외선에 노출되면 홍반, 부종, 화상반응, 색소침작, 거칠어짐, 탄력손실 및 주름과 같은 일 련의 피부손상 혹은 노화과정이 촉진된다(1). 자외선은 태양광 스펙트럼에서 가시광선보다 짧은 파장대인 200-400 nm 영역의 한 부분이다.
	피부노화는 어떻게 구분되는가?	피부는 다양한 환경적인 요인에 대해 신체를 보호하는 물리적 장벽으로써의 기능을 갖는 가장 첫 번째 기관이며, 다양한 환경적인 자극은 면역계의 활성화를 일으킨다. 피부노화는 나이가 들어감에 따라 피부의 생리적 기능감소와 구조적인 변화로 인해 나 타나는 생리적 노화(intrinsic aging)와, 자외선(ultrviolet, UV)과 같은 외부자극에 의한 화학적 스트레스가 원인이 되는 광노화 (photoaging)로 구분할 수 있다. 피부가 자외선에 노출되면 홍반, 부종, 화상반응, 색소침작, 거칠어짐, 탄력손실 및 주름과 같은 일 련의 피부손상 혹은 노화과정이 촉진된다(1).
	다양한 베리류에 대한 실험을 통해서 알 수 있는 사실은 무엇인가?	그러나 복분자 250 µg/mL과 오디 250 µg/mL의 농도로 동시에 처리그룹의 경우 ROS 생성에 대한 시너지 억제효과를 보이지 않았다. 이상의 결과들로부터 다섯 가지 베리류 즉, 복분자, 블루베리(재배종), 블루베리(야생종), 블랙초크베리 및 오디의 inflammatory cytokines 과 MMP-1 mRNA 발현 및 ROS 생성에 대한 저해 효과는 각각의 베리류에서 차이를 보였으나, 다섯가지 베리류 모두 항염증, 항산화 작용을 통해 피부노화 개선에 기여할 것으로 사료된다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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