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문제 정의
- 본 연구는 자생지 지역 민간에서 식용과 약용으로 이용되고 있으며, 인공 증식의 성공으로 활발한 연구가 가능해진 미선나무(Abeliophyllum distichum Nakai)를 대상으로 영양성분 및 생리활성 물질 등 화학성분을 분석하여 식품 개발을 위한 기초 연구의 자료를 마련하고자 실시되었다. 일반성분 및 영양성분 분석 결과 조회분, 조단백, 조지방 함량, fructose, glucose 등 당의 함량 및 ascorbic acid함량은 미선나무 줄기보다는 잎에서 더 높았다.
- 미선나무의 잎과 줄기 부위 등을 소재로 한 체계적인 성분 규명은 새로운 고부가가치의 식용식물의 개발과 더불어 세계 유일의 종인 미선나무가 우리나라 고유의 천연자원임을 알리는 기회가 될 것으로 사료된다. 본 연구에서는 미선나무 잎과 줄기의 영양성분 및 기능성 성분을 분석하여 미선나무에 관한 연구의 기초를 마련하고자 하며, 다양한 생리활성을 가진 미선나무를 활용한 식품 개발의 토대를 마련하고자 한다. 더불어 미선나무 재료에 대한 안전성을 검토할 목적으로 시료의 유전 독성을 예측할 수 있는 염색체 이상 시험과 실험동물을 이용하여 단회 경구 투여 독성실험을 실시함으로써 미선나무 재료의 안전성에 관한 기초실험을 수행하였다.
제안 방법
- 5 um)을 사용하였고, 이동상은 두 가지 용매를 사용하였다. A 용매는 1.25 mM PIC B7 (1-heptanesulfonic acid sodium salt) 를 첨가한 증류수에 1% acetic acid를 첨가했으며, B 용매는 methanol과 증류수의 비율이 60 : 40인 용액에 1.25 mM PIC B7 와1 % acetic acid를 첨가하였다. A 용액은 0분-43분까지 100%를 흘려 주었고, 44분부터는 A 용액을 0%로 3분 정도 흘려 준 뒤에 다시 처음상태로 복귀하였다.
- Jasco사(Tokyo, Japan)의 HPLC system를 이용하였으며 column은 Prevail Carbohydrate ES (5 µm, 4.6×250 mm, Grace)을 사용하였고 Evaporative Light Scattering Detector (ELSD)를 이용하여 drift tube temperature 60℃, spray chamber temperature 30℃에서 측정하였다.
- 결과의 판정은 PCE/(PCE+NCE) 비율(mean±SD, %)이 0.1 이상인 경우 시험이 타당한 것으로 하고 소핵 유발빈도(MNPCE/2000PCES, mean±SD, %)가 통계학적으로 유의하며, 용량 의존적으로 증가하거나, 하나 이상의 용량에서 재현성 있는 양성반응을 나타낼 겨우 양성으로 판정하였다.
- 약 8 주령의 수컷 마우스에 미선나무 시험물질을 2000 mg/kg, 1000 mg/kg, 500 mg/kg의 용량으로 경구투여하고, 투여 후 24시간에 골수세포를 채취하여 소핵유발빈도와 세포독성을 평가하였다. 군 당 2000개의 다염성 적혈구(pormochromatic erythrocyte; PCE)를 관찰하고, 이중 소핵 다염성 적혈구(PCE with one or more micronuclei; MNPCE)의 출현빈도를 측정하였다. 결과의 판정은 PCE/(PCE+NCE) 비율(mean±SD, %)이 0.
- , Lethal Dose 50)을 조사하기 위하여 Sprague-Dawley (SD) 계통 암·수 랫드를 이용하여 시험물질을 단회 경구투여 하였다. 대조군과 3개의 시험군(500, 1,000 및 2,000 mg/kg)으로 시험을 수행하였으며, 시험동물은 각 군에 암수 각 5마리를 사용하여, 밤새 절식시킨 후 실험하였다. 투여 후 14일간 매일 1회 일반증상 관찰을 실시하였으며, 투여 전, 투여 후 1, 4, 7 및 14일에 체중을 측정하였다.
- 본 연구에서는 미선나무 잎과 줄기의 영양성분 및 기능성 성분을 분석하여 미선나무에 관한 연구의 기초를 마련하고자 하며, 다양한 생리활성을 가진 미선나무를 활용한 식품 개발의 토대를 마련하고자 한다. 더불어 미선나무 재료에 대한 안전성을 검토할 목적으로 시료의 유전 독성을 예측할 수 있는 염색체 이상 시험과 실험동물을 이용하여 단회 경구 투여 독성실험을 실시함으로써 미선나무 재료의 안전성에 관한 기초실험을 수행하였다.
- 동결 건조된 미선나무 잎과 줄기분말 50 mg에 water 1 mL를 가하여 voltex mixer로 2분간 추출한 후 상층액을 0.45 µm polyvinylidene fluoride filter (Whatman, Maidstone, Kent, England)로 거른 후 HPLC에 주입하여 분석하였다.
- 미선나무 재료에 대한 발암성 유발 유·무 판단의 기초 자료를 얻기 위하여 유전독성시험 중 ICR 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험을 실시하였다.
- 미선나무 재료의 독성증상과 반수치사량(LD50, Lethal Dose 50)을 조사하기 위하여 Sprague-Dawley (SD) 계통 암·수 랫드를 이용하여 시험물질을 단회 경구투여 하였다.
- 45 µm syringe filter 로 여과하여 실험에 사용하였다. 본 실험에서는 동결건조된 미선나무 잎과 줄기분말에 함유된 vitamin을 HPLC를 통하여 분석하고 정량하였다. Column은 Capcell Pak C18 column (4.
- 미선나무 재료에 대한 발암성 유발 유·무 판단의 기초 자료를 얻기 위하여 유전독성시험 중 ICR 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험을 실시하였다. 약 8 주령의 수컷 마우스에 미선나무 시험물질을 2000 mg/kg, 1000 mg/kg, 500 mg/kg의 용량으로 경구투여하고, 투여 후 24시간에 골수세포를 채취하여 소핵유발빈도와 세포독성을 평가하였다. 군 당 2000개의 다염성 적혈구(pormochromatic erythrocyte; PCE)를 관찰하고, 이중 소핵 다염성 적혈구(PCE with one or more micronuclei; MNPCE)의 출현빈도를 측정하였다.
- 유기산 분석은 미선나무 잎, 줄기 분말 1g을 3차 증류수로 25배 희석한 후 10분간 sonication하여 0.2 µm filter (Whatman, CA, USA)로 여과시켜 HPLC를 사용하여 분석하였다.
- = 5 : 1(v/v)) 30 mL을 가한 다음 가열 판(100)에서 3시간 동안 용해시키고 1 mL로 농축시킨 후, 증류수를 가하여 100 mL로 정용하였다. 유도결합 플라스마 방출 분광기(ICP-AES : Inductively Coupled Plasma Atomic Emission Spectrometer)을 이용하여 시료의 무기질 함량을 측정하였다.
- 5 N MeOH-NaOH 4 mL을 넣고 냉각관을 설치하여 30분간 반응시킨 후 trifluoride methanol (BF3) 5 mL 첨가하여 2분 후 냉각관을 통해 hexane 3 mL을 넣고 1분 후에 saturated salt solution을 첨가해 hexane 층을 플라스크에 옮겼다. 이에 과량의 무수 sodium sulfate를 넣고 hexane 층에 잔류하는 수분을 제거한 다음 여과하여 GC (7890A, Agilent, Santa Clara, CA USA) 분석시료로 사용하였다. GC 분석 조건은 다음과 같다(Table 1).
- 정량을 위한 검량선은 caffeic acid 1 mg을 70% methanol 1 mL에 용해시켜 20, 30, 40, 50 µg/mL에되도록 조제한 후 시료용액과 같은 방법으로 처리하여 725 nm에서 흡광도를 측정하여 작성하였다.
- 정량을 위한 검량선은 rutin 1 mg을 70% methanol 1 mL에 용해시켜 100, 200, 300, 400 µg/mL에 되도록 조제한 후 시료용액과 같은 방법으로 처리하여 420 nm에서 흡광도를 측정하여 작성하였다.
- 총 플라보노이드 함량은 Nieva 등15)의 방법을 변형하여 사용하였다. 위와 같은 방법으로 추출한 crude 시료용액 0.
- 투여 후 14일간 매일 1회 일반증상 관찰을 실시하였으며, 투여 전, 투여 후 1, 4, 7 및 14일에 체중을 측정하였다. 투여 후 14일 째에 부검을 실시하고, 대사와 관련된 장기를 적출하여 병리조직학적 검사를 실시하였다. 본 실험과정은 한국건성생활환경시험연구원 동물실험윤리위원회의 승인 하에 수행되었다(승인번호 GT13-00436).
- 대조군과 3개의 시험군(500, 1,000 및 2,000 mg/kg)으로 시험을 수행하였으며, 시험동물은 각 군에 암수 각 5마리를 사용하여, 밤새 절식시킨 후 실험하였다. 투여 후 14일간 매일 1회 일반증상 관찰을 실시하였으며, 투여 전, 투여 후 1, 4, 7 및 14일에 체중을 측정하였다. 투여 후 14일 째에 부검을 실시하고, 대사와 관련된 장기를 적출하여 병리조직학적 검사를 실시하였다.
대상 데이터
- Column은 Capcell Pak C18 column (4.6 mm × 250 mm I.D. 5 um)을 사용하였고, 이동상은 두 가지 용매를 사용하였다.
- 본 연구에 사용된 미선나무 잎과 줄기는 2013년 10월 경 충북 괴산군 청천면 농가에서 재배되고 있는 개체로부터 채취하여 동결 건조한 후 영양성분 및 기능성성분 분석을 위한 시료로 사용하였다.
- 0 mL/min 이었고, 시료주입량은 20 µL, column의 온도는 40℃로 사용하였으며 280 nm에서 분석하였다. 표준물질로 ascobic acid, nicotinic acid, nicotinamide, pyridoxine, thiamin hydrochloride, riboflavine, folic acid (Sigma, St. Louis, USA)를 사용하여 정량하였다.
- 45 µm polyvinylidene fluoride filter (Whatman, Maidstone, Kent, England)로 거른 후 HPLC에 주입하여 분석하였다. 표준물질은 fructose, glucose와 sucrose를 사용하였다. Jasco사(Tokyo, Japan)의 HPLC system를 이용하였으며 column은 Prevail Carbohydrate ES (5 µm, 4.
데이터처리
- 안전성 평가 시험의 경우 대조군에 대한 실험군 간의 통계적 유의성은 student’s two-tailed t-test로 분석하였다.
이론/모형
- 미선나무 잎, 줄기의 일반성분은 AOAC방법12)에 의하여 분석하였다. 수분은 105℃에서 상압 건조하여 측정하였고, 조단백은 micro-Kjeldahl 로 측정하였으며, 질소계수 6.
- 25를 사용하여 환산하였다. 조지방은 시료를 Soxhlet 장치를 사용하여 65℃에서 8시간 petroleum ether로 추출하였으며, 회분은 550℃ 직접 회화법을 사용하여 측정하였다.
- 총 페놀 화합물 함량은 Folin-Denis 방법14)에 따라 분석하였다. 동결 건조된 미선나무 잎과 줄기분말1 g에 70% methanol 9 mL를 가한 후, 25℃에서 15시간 동안 추출한 후 10분 동안 12,000 rpm에서 원심분리기(Beckman, Pasadena, CA, USA)를 이용하여 고형분을 제거하고 상등액만을 crude 시료로 사용하였다.
성능/효과
- 19) 산초와 초피 잎의 유기산은 malic acid 및 citric acid 두 종류만이 동정되었으며,16) 헛개나무 잎에는 malic acid, malonic acid, citric acid가 주요 유기산으로 보고되었다.17) 위의 결과들은 미선나무에 함유된 유기산 조성과 유사한 경향을 보였으며, 국내에서 자생하는 약용식물의 잎에 함유된 유기산 중에서 malic acid가 주요 유기산임을 알 수 있었으나 그 조성과 함량은 식물의 종류에 따라 다소 차이가 있는 것으로 나타났다.
- 1) 자생식물은 자연에 저절로 나서 자라는 식물을 의미하는데, 특정 지역의 환경에 대한 높은 적응성과 생물학적 다양성을 지니고 있다.2) 1917년 정태현박사가 충북 진천군 초평면 용정리에서 미선나무를 처음 발견하였고, 1924년 일본인 학자 이시토야 쓰토무[石戶谷勉]가 학계에 처음 보고하여 Abeliophyllum distichum Nakai 이라는 학명을 얻었다.3) 미선나무는 세계적으로 1속 1종의 희귀식물로 괴산, 영동 및 부안 소재의 미선나무 자생지는 천연기념물로 지정되어 있다.
- 2) 1917년 정태현박사가 충북 진천군 초평면 용정리에서 미선나무를 처음 발견하였고, 1924년 일본인 학자 이시토야 쓰토무[石戶谷勉]가 학계에 처음 보고하여 Abeliophyllum distichum Nakai 이라는 학명을 얻었다.3) 미선나무는 세계적으로 1속 1종의 희귀식물로 괴산, 영동 및 부안 소재의 미선나무 자생지는 천연기념물로 지정되어 있다. 미선나무 자생지 주변의 민간에서는 오래 전부터 미선나무를 이용하여 고기의 누린내 제거, 해충구제, 각종 염증질환, 배탈 등의 예방 및 치료에 사용하였다.
- 32) 미선나무의 총 페놀 함량 분석 결과 잎의 함량(50.64 mg/g)이 줄기의 함량(13.53 mg/g)보다 약 3.7배 이상 높았다. 가죽나무의 부위별 총 페놀 함량은 잎, 뿌리, 줄기 순으로 잎의 총 페놀 함량 은 82.
- 소핵시험의 결과를 종합하여 볼 때 시험물질은 식품의약청안정청 고시 제 2005-60의 의약품 등의 독성시험기준에 명시된 마우스 최대 투여용량인 2,000 mg/kg/day의 범위에서 마우스 골수세포에 소핵을 유발하는 유전독성 효과는 없는 결과를 보였다.37) 단회 투여 후 14일까지의 체중 변화를 관찰한 결과, 모든 시험군에서 시험물질에 의한 체중 변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 보아 본 시험조건에서 시험물질의 반수치사량(LD50, Lethal Dose 50)은 2,000 mg/kg 이상으로 판단되었다.
- mitomycin C를 처리한 양성대조군은 소핵 유발빈도에서 용매대조군에 비해 통계적으로 유의하며 현저한 증가를 보였다(P<0.05).
- 소핵시험은 식품의약청안정청 고시 제 2005-60의 의약품 등의 독성시험기준에 명시된 마우스 최대 투여용량인 2,000 mg/kg/day의 범위에서 마우스 골수세포에 소핵을 유발하는 유전독성 효과는 없는 결과를 보였다. 단회투여 독성시험은 모든 시험군에서 시험 물질에 의한 체중 변화는 관찰되지 않은 결과로 보아 본 시험조건에서 시험물질의 반수치사량(LD50, Lethal Dose 50)은 2,000 mg/kg 이상으로 판단되었다. 이상의 결과로 보아 미선나무 잎에는 줄기보다 영양성분과 생리활성 성분을 다량 함유하고 있으며, 다양한 기능성 식품 및 의약품 등의 소재로써 활용 가능성 매우 높은 것으로 사료된다.
- 미선나무의 지방산 함량을 살펴보면, 잎에서는 palmitic acid, stearic acid, behenic acid, linoleic acid 순으로, 줄기에서는 linolenic acid, palmitic acid, linoleic acid의 순으로 함유되었다. 무기질 함량을 분석한 결과, Ca의 함량이 잎 및 줄기에 모두 높았으나 잎보다 줄기에 더 많이 함유되었으며, Mg도 줄기에 더 많이 함유되었다. 유기산은 malic acid, succinic acid, citric acid의 함량 순으로 높았고, 줄기보다 잎의 함량이 더 높았다.
- 53 mg/g이 함유되어 잎의 총 페놀 함량이 줄기의 함량보다 약 3배 이상 높았다. 미선나무 부위별 플라보노이드 함량을 측정한 결과 잎에서는 96.47 mg/g, 줄기에서는 18.53 mg/g을 나타내었다.
- 싸리나무 줄기의 무기질을 분석한 Lee 등21)은 Ca, K, Zn, Mg, Mn, Na 등의 순으로 높은 함량을 보고하였고, 헛개나무의 연구17)에서는 잎, 줄기 모두에서 K, Ca, Mg, Na의 순으로 높은 함량을 보였다. 미선나무 잎과 줄기에는 Ca 함량이 제일 높았고, 줄기의 함량이 3배 정도 더 높았는데 이는 싸리나무 줄기의 결과와 유사하였으나 헛개나무의 결과와는 다른 경향을 보였다.
- 미선나무 잎과 줄기의 당 함량을 분석한 결과 fructose는 잎에 32.13 mg/g이 함유되어 줄기(11.38 mg/g)보다 3배 정도 높았으며, glucose의 함량은 잎과 줄기 각각 56.17 mg/g, 10.59 mg/g으로 줄기보다 잎의 함량이 많았다. Lee 등22)에 의하면 올리브 잎의 주요 당은 sucrose (1.
- 미선나무의 단회 투여 독성 및 개략적인 치사량의 분석 결과, 실험기간 동안 시험물질에 의한 사망동물 및 특이한 일반증상은 관찰되지 않았다. 체중측정결과, 모든 동물에서 정상적인 체중증가가 관찰되었으며, 시험군간 통계학적으로 유의한 체중변화는 관찰되지 않았다(Table 10).
- 미선나무의 무기질 조성을 보면 잎과 줄기 모두에서 Ca, Mg, Fe, Na 순으로 높았으며, 미선나무 줄기의 Ca과 Mg은 592.34 mg/100 g, 131.83이었고, 잎에서는 각각 166.17, 37.72 mg/100 g 함량을 나타내었다. 싸리나무 줄기의 무기질을 분석한 Lee 등21)은 Ca, K, Zn, Mg, Mn, Na 등의 순으로 높은 함량을 보고하였고, 헛개나무의 연구17)에서는 잎, 줄기 모두에서 K, Ca, Mg, Na의 순으로 높은 함량을 보였다.
- 미선나무의 소핵시험 결과, 용매대조군과 비교하여 500, 1,000, 2,000 mg/kg의 투여군에서 특이한 일반증상은 관찰되지 않았으며, 개체 당 약 2000개의 다염성 적혈구에서 관찰한 소핵 유발빈도는 모든 시험물질투여군 용매대조군과 비교하여 통계적으로 유의한 결과를 보이지 않았다(Table 9). mitomycin C를 처리한 양성대조군은 소핵 유발빈도에서 용매대조군에 비해 통계적으로 유의하며 현저한 증가를 보였다(P<0.
- 미선나무의 수용성 비타민 함량을 분석한 결과 잎과 줄기 모두에서 ascorbic acid가 제일 많았고, 줄기에 비해 잎의 ascorbic acid 함량이 4.4배 더 높았다. 유기체 내의 대표적인 항산화물질인 ascorbic acid (비타민 C)는 비타민 E와 함께 유리된 라디컬을 효과적으로 소거하는 물질이다.
- 미선나무의 플라보노이드 함량을 측정한 결과 잎에는 96.47 mg/g으로 줄기(18.53 mg/g)보다 5배 정도 높았다. 봄부터 가을까지 시기별로 개나리 잎에 함유하는 플라보노이드의 양을 분석한 결과34)에 따르면, 개나리 잎은 27.
- 유기산은 malic acid, succinic acid, citric acid의 함량 순으로 높았고, 줄기보다 잎의 함량이 더 높았다. 생리활성을 나타내는 물질로 알려져 있는 총 페놀 화합물과 플라보노이드의 함량도 각각 미선나무 잎이 줄기보다 약 3.7~5배 정도 높았다. 소핵시험은 식품의약청안정청 고시 제 2005-60의 의약품 등의 독성시험기준에 명시된 마우스 최대 투여용량인 2,000 mg/kg/day의 범위에서 마우스 골수세포에 소핵을 유발하는 유전독성 효과는 없는 결과를 보였다.
- 05). 세포독성의 지표인 PCE/(PCE+NCE) 비율도 실험에 적용한 모든 미선나무 투여군에서 멸균증류수를 사용한 음성대조군에 비하여 유의한 감소가 나타나지 않았다. mitomycin C를 처리한 양성대조군은 용매대조군과 비교하여 뚜렷한 골수세포의 증식억제는 나타나지 않았다.
- 7~5배 정도 높았다. 소핵시험은 식품의약청안정청 고시 제 2005-60의 의약품 등의 독성시험기준에 명시된 마우스 최대 투여용량인 2,000 mg/kg/day의 범위에서 마우스 골수세포에 소핵을 유발하는 유전독성 효과는 없는 결과를 보였다. 단회투여 독성시험은 모든 시험군에서 시험 물질에 의한 체중 변화는 관찰되지 않은 결과로 보아 본 시험조건에서 시험물질의 반수치사량(LD50, Lethal Dose 50)은 2,000 mg/kg 이상으로 판단되었다.
- 36) 따라서 소핵이 많이 관찰될수록 돌연변이 물질의 영향을 많이 받았음을 알 수 있다. 소핵시험의 결과를 종합하여 볼 때 시험물질은 식품의약청안정청 고시 제 2005-60의 의약품 등의 독성시험기준에 명시된 마우스 최대 투여용량인 2,000 mg/kg/day의 범위에서 마우스 골수세포에 소핵을 유발하는 유전독성 효과는 없는 결과를 보였다.37) 단회 투여 후 14일까지의 체중 변화를 관찰한 결과, 모든 시험군에서 시험물질에 의한 체중 변화는 관찰되지 않았다.
- 체중측정결과, 모든 동물에서 정상적인 체중증가가 관찰되었으며, 시험군간 통계학적으로 유의한 체중변화는 관찰되지 않았다(Table 10). 실험종료 시 모든 생존 동물의 부검결과, 특이한 육안소견은 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 보아 본 시험조건에서 시험물질 미선나무주정 추출물의 반수치사량(LD50, Lethal Dose 50)은 2,000 mg/kg 이상인 것으로 사료된다.
- 5%로 보고되었다. 위의 연구와 본 실험을 비교했을 때, 미선나무 잎에 함유된 조단백은 다른 약용식물에 비해 높은 반면, 조회분 및 조지방은 비슷하거나 대체적으로 낮은 경향을 보였다. Lee 등21)은 싸리나무 줄기에서 조회분 0.
- 무기질 함량을 분석한 결과, Ca의 함량이 잎 및 줄기에 모두 높았으나 잎보다 줄기에 더 많이 함유되었으며, Mg도 줄기에 더 많이 함유되었다. 유기산은 malic acid, succinic acid, citric acid의 함량 순으로 높았고, 줄기보다 잎의 함량이 더 높았다. 생리활성을 나타내는 물질로 알려져 있는 총 페놀 화합물과 플라보노이드의 함량도 각각 미선나무 잎이 줄기보다 약 3.
- Hur 등23)은 환삼덩굴 잎과 줄기 당류 분석에서 glucose는 검출되지 않았지만 fructose 함량이 가장 높고, sucrose 및 maltose 등의 순으로 함유되었다고 보고하였다. 이들 결과와 미선나무 결과는 다른 경향을 보였으며, 당의 종류 및 함량은 식물의 종에 따라 차이가 많이 나는 것으로 사료된다.
- 단회투여 독성시험은 모든 시험군에서 시험 물질에 의한 체중 변화는 관찰되지 않은 결과로 보아 본 시험조건에서 시험물질의 반수치사량(LD50, Lethal Dose 50)은 2,000 mg/kg 이상으로 판단되었다. 이상의 결과로 보아 미선나무 잎에는 줄기보다 영양성분과 생리활성 성분을 다량 함유하고 있으며, 다양한 기능성 식품 및 의약품 등의 소재로써 활용 가능성 매우 높은 것으로 사료된다.
- 27 mg/g)의 순이었다. 이상의 결과로 보아 미선나무 잎의 총 플라보노이드 함량(96.47 mg/g)은 계절에 따른 개나리의 최고 플라보노이드 함량보다는 낮았지만 다른 연구결과에 비하여 높은 것을 알 수 있었다.
- 실험종료 시 모든 생존 동물의 부검결과, 특이한 육안소견은 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 보아 본 시험조건에서 시험물질 미선나무주정 추출물의 반수치사량(LD50, Lethal Dose 50)은 2,000 mg/kg 이상인 것으로 사료된다.
- 37) 단회 투여 후 14일까지의 체중 변화를 관찰한 결과, 모든 시험군에서 시험물질에 의한 체중 변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 보아 본 시험조건에서 시험물질의 반수치사량(LD50, Lethal Dose 50)은 2,000 mg/kg 이상으로 판단되었다.
- 본 연구는 자생지 지역 민간에서 식용과 약용으로 이용되고 있으며, 인공 증식의 성공으로 활발한 연구가 가능해진 미선나무(Abeliophyllum distichum Nakai)를 대상으로 영양성분 및 생리활성 물질 등 화학성분을 분석하여 식품 개발을 위한 기초 연구의 자료를 마련하고자 실시되었다. 일반성분 및 영양성분 분석 결과 조회분, 조단백, 조지방 함량, fructose, glucose 등 당의 함량 및 ascorbic acid함량은 미선나무 줄기보다는 잎에서 더 높았다. 미선나무의 지방산 함량을 살펴보면, 잎에서는 palmitic acid, stearic acid, behenic acid, linoleic acid 순으로, 줄기에서는 linolenic acid, palmitic acid, linoleic acid의 순으로 함유되었다.
- 미선나무 잎과 줄기에 함유된 총 페놀과 플라보노이드 함량은 Table 8과 같다. 잎에는 50.64 mg/g, 줄기에는 13.53 mg/g이 함유되어 잎의 총 페놀 함량이 줄기의 함량보다 약 3배 이상 높았다. 미선나무 부위별 플라보노이드 함량을 측정한 결과 잎에서는 96.
- 미선나무 잎과 줄기에 함유된 수분, 조회분, 조단백 및 조지방 등의 일반성분에 대한 분석 결과는 다음과 같다(Table 2). 잎에서는 수분 65.07%, 조회분 1.32%, 조단백 11.97%, 조지방 2.52%를 함유하였으며, 줄기에는 수분 40.97%, 조회분 0.91%, 조단백 3.77%, 그리고 0.36%의 조지방이 함유된 것으로 분석되었다.
- 미선나무 잎과 줄기의 당 함량은 Table 3과 같다. 잎의 당 함량은 fructose 32.13%, glucose 56.17%이며, 줄기의 당 함량은 fructose 11.38%, glucose 10.59%를 나타내었다.
- 미선나무 잎과 줄기의 지방산 함량을 분석한 결과는 Table 4와 같다. 잎의 지방산 함량은 myristic acid 1.75%, palmitic acid 31.79%, stearic acid 14.79%, oleic acid 7.70%, linoleic acid 12.21%, linolenic acid 5.40%, arachidic acid 5.01%, behenic acid 12.24%, lignoceric acid 9.11%로 palmitic acid의 함량이 제일 높았다. 줄기의 지방산 함량을 살펴보면 palmitic acid 26.
- 54 mg/g를 나타내었다. 줄기에 함유된 유기산 함량은 succinic acid 0.28 mg/g, malic acid 0.80 mg/g 이었으며, citric acid는 검출되지 않았다.
- 11%로 palmitic acid의 함량이 제일 높았다. 줄기의 지방산 함량을 살펴보면 palmitic acid 26.75%, stearic acid 14.79%, oleic acid 9.10%, linoleic acid 15.25%, linolenic acid 32.78%, arachidic acid 4.16%, behenic acid 3.70%를 나타내었으며, myristic acid와 lignoceric acid 는 검출되지 않았다.
- 미선나무의 단회 투여 독성 및 개략적인 치사량의 분석 결과, 실험기간 동안 시험물질에 의한 사망동물 및 특이한 일반증상은 관찰되지 않았다. 체중측정결과, 모든 동물에서 정상적인 체중증가가 관찰되었으며, 시험군간 통계학적으로 유의한 체중변화는 관찰되지 않았다(Table 10). 실험종료 시 모든 생존 동물의 부검결과, 특이한 육안소견은 관찰되지 않았다.
후속연구
- 32 mg/g) 함량이 더 높다는 결과를 보였다. 따라서 항산화 영양소인 비타민 C를 다량 함유한 미선나무 잎은 향후 건강차 개발에 유용한 소재가 될 수 있을 것으로 기대된다.
- 미선나무의 효능이 민간요법 및 특허에서 제시한 기능성 성분으로서 뿐만 아니라 식품소재로서 활용하기 위해서는 과학적 근거에 의한 미선나무 재료의 안전성 평가 등 체계적인 연구가 선행되어야 한다. 미선나무의 잎과 줄기 부위 등을 소재로 한 체계적인 성분 규명은 새로운 고부가가치의 식용식물의 개발과 더불어 세계 유일의 종인 미선나무가 우리나라 고유의 천연자원임을 알리는 기회가 될 것으로 사료된다. 본 연구에서는 미선나무 잎과 줄기의 영양성분 및 기능성 성분을 분석하여 미선나무에 관한 연구의 기초를 마련하고자 하며, 다양한 생리활성을 가진 미선나무를 활용한 식품 개발의 토대를 마련하고자 한다.
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