[논문]Paenibacillus polymyxa CK-1이 생산한 길항물질이 Trichoderma sp. 생육에 미치는 영향

이상원; 최진상; 김철호

doi:10.14480/jm.2014.12.3.201

Paenibacillus polymyxa CK-1이 생산한 길항물질이 Trichoderma sp. 생육에 미치는 영향
The effect of antagonists produced by Paenibacillus polymyxa CK-1 on the growth of Trichoderma sp. 원문보기

Journal of mushrooms = 한국버섯학회지, v.12 no.3, 2014년, pp.201 - 208

이상원 (경남과학기술대학교 제약공학과) , 최진상 (경남과학기술대학교 식품과학부) , 김철호 (경남과학기술대학교 제약공학과)

초록
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버섯배지의 발효를 효율적으로 행하면서 버섯의 재배 시 빈번하게 발생하는 푸른곰팡이 병의 원인 균주인 Trichoderma sp. 곰팡이 성장을 억제하는 세균의 분리를 행하였다. 균원시료로부터 1차 분리한 약 200여 균주 중에서 성장속도가 빠르고, SM, AM 및 CM의 평판배지 상에서 clear zone이 뚜렷한 6균주를 2차 분리하였다. 분리한 6균주 중 cellulase, amylase 및 protease의 효소활성이 높고 T. virens와 T. harzianum에 대하여 강한 항균활성을 나타낸 C-1균주를 최종 분리균주로 선정하였다. 분리한 C-1균주는 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology에 의한 동정과 16S rDNA 염기서열 분석을 행한 결과 Paenibacillus polymyxa 밝혀져 P. polymyxa CK-1으로 명명하였다. P. polymyxa CK-1균주의 생육조건을 검토한 결과 최적배양온도는 $45^{\circ}C$, 생육을 위한 배지의 최적 pH는 6.0~7.0 범위로 나타났다. T. virens와 T. harzianum 곰팡이의 생육억제를 위한 P. polymyxa CK-1의 배양시간은 22~36시간이 적당하였다. 그리고 P. polymyxa CK-1균주의 24시간째 배양용액을 처리한 petri dish에 두 곰팡이를 각각 접종한 후 10일 동안 방치하여도 곰팡이의 생육은 관찰되지 않았다. P. polymyxa CK-1 균주가 생산한 길항물질의 열안정성을 검토한 결과 $60^{\circ}C$ 및 $100^{\circ}C$로 20분 동안 처리한 시험구에서는 두 곰팡이의 균사성장이 전혀 관찰되지 않았지만 $121^{\circ}C$에서 20분 동안 처리한 시험구에서는 약간의 균사성장이 관찰되었다. P. polymyxa CK-1배양액이 버섯균사 생육에 미치는 영향을 검토한 결과 팽이버섯, 표고버섯 등의 다양한 버섯균사 생육에 전혀 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.

Abstract ▼ AI-Helper

The separation of the bacteria inhibiting Trichoderma sp. mold, the strain causing blue mold disease that occurs frequently when cultivating mushroom while carrying out the efficient fermentation of mushroom medium, from the growth was done. In about 200 strains isolated primarily from fungus garden samples, 6 strains were secondly isolated, which had fast growth rates and a clear zone on the plate medium of SM, AM, and CM. Among the 6 strains isolated, the C-1 strain showed high enzymatic activity of cellulase, amylase, and protease, and strong antibacterial activity for the T. virens and T. harzianum, selected finally. The selected C-1 strain was identified as Paenibacillus polymyxaby the result of the identification by Bergey's Manual of Systematic Bacteriology and the analysis of the nucleotide sequence of 16S rRNA, and named as P. polymyxa CK-1. In reviewing the growth conditions of the P. polymyxa CK-1 strain, the optimum cultivation temperature was $45^{\circ}C$, and the optimum pH for growth was in the range of 6.0~7.0. Appropriate incubation time of P. polymyxa CK-1 for the growth inhibition of the fungus T. virens and T. harzianum was 22 to 36 hours. And the fungal growth was not observed, even when leaving two molds inoculated on each petri dishes, which were treated with 24 hour culture solution of P. polymyxa CK-1 strain for 10 days. As a result of studying the thermal stability of the antagonists produced by the P. polymyxa CK-1 strain, no mycelial growth of the two fungi was observed in the test group treated for 20 minutes at $60^{\circ}C$ and $100^{\circ}C$, but mycelial growth was slightly observed in the test group treated for 20 minutes at $121^{\circ}C$. As aresult of reviewing the impact of the P. polymyxa CK-1 culture medium on mushroom mycelial growth, it showed no effect on a variety of mushroom mycelial growth including enoki mushroom and shiitake mushroom.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 푸른곰팡이 병의 주요 원인균주인 Trichoderma sp.에 대해 길항력이 있는 세균을 순수분리한 다음 분리세균이 분비하는 세포외 길항 물질이 T. virens와 T. harzianum에 대한 길항 특성을 확인함으로써 버섯의 푸른곰팡이 병을 조절하기 위한 생물학적 방제법 개발의 기초 자료를 제공하고자 한다.

가설 설정

1)Growth rate: + slow, ++ medium, +++ fast. ²⁾Size of clear zone on SM³⁾ containing skim milk for protease, AM⁴⁾ containing soluble starch for amylase and CM⁵⁾ media containing carboxy methyl cellulose for cellulase activity.

제안 방법

P. polymyxa CK-1배양액 중의 길항물질이 버섯균사 생육에 미치는 영향의 검토는 45℃, 120 rpm으로 24시간 동안 배양한 P. polymyxa CK-1 배양액을 원심분리하여 얻은 상등액과 멸균수를 1:3 및 1:1로 각각 혼합한 다음 80 mesh로 분쇄한 미송톱밥 5%를 첨가하여 PDA평판배지를 제조하여 행하였다. 제조한 평판배지 중앙에 팽이버섯과 표고버섯의 균사를 블록형태로 접종하여 25℃에서 배양하면서 각 버섯의 균사성장 정도를 검토하였다.
배양한 후 그 배양액을 원심분리하여 얻은 상등액을 60℃, 100℃ 및 121℃에서 각각 20분 동안 열처리한 용액을 사용하였다. 각 온도에서 열처리한 배양액을 시료로 사용하여 배양시간에 따른 길항물질의 생산성 검토 방법과 동일하게 PDA평판배지를 제조한 다음 T. virens와 T. harzianum을 각각 블록형태로 배지의 중앙에 접종하여 25℃에서 배양하면서 곰팡이 균사의 성장정도를 검토하였다.
버섯배지의 발효를 효율적으로 행하면서 버섯의 재배 시 빈번하게 발생하는 푸른곰팡이 병의 원인 균주인 Trichoderma sp. 곰팡이 성장을 억제하는 세균의 분리를 행하였다. 균원시료로부터 1차 분리한 약 200여 균주 중에서 성장속도가 빠르고, SM, AM 및 CM의 평판배지 상에서 clear zone이 뚜렷한 6균주를 2차 분리하였다.
6에 나타내었다. 대조구는 P. polymyxa CK-1 균주가 생산하는 길항물질 대신 멸균수만으로 평판배지를 제조하여 사용하였다(Fig. 6-A and B의 control). P.
7에 나타내었다. 대조구는 PDA평판배지를 사용하였고, 시험구는 P. polymyxa CK-1 균주를 24 hr. 배양한 다음 원심분리하여 얻은 상등액을 멸균수에 25% 및 50%씩 각각 혼합하여 PDA평판배지를 제조하여 사용하였다.
제조한 평판배지 중앙에 팽이버섯과 표고버섯의 균사를 블록형태로 접종하여 25℃에서 배양하면서 각 버섯의 균사성장 정도를 검토하였다. 대조구는 PDA평판배지를 사용하였다.
배양시간에 따른 길항물질의 생산성 검토는 1 L 삼각플라스크에 Nutrient broth배지 500 mL를 첨가하여 멸균한 다음 분리 동정한 Paenibacillus polymyxa CK-1 전배양액 5 mL를 접종하여 45℃, 120 rpm으로 배양하면서 2시간 간격으로 배양액을 10 mL씩 채취하였다. 채취한 배양액은 8,000×g에서 10분 동안 원심분리를 행하여 얻어진 상등액과 증류수를 1 : 1로 잘 혼합한 후 PDA배지성분을 첨가하여 평판배지를 제조하였다.
polymyxa CK-1 균주를 24 hr. 배양한 다음 원심분리하여 얻은 상등액을 멸균수에 25% 및 50%씩 각각 혼합하여 PDA평판배지를 제조하여 사용하였다. 제조한 평판배지 중앙에 팽이버섯(Fig.
polymyxa CK-1분리균주를 45℃, 24 hr. 배양한 후 그 배양액을 원심분리하여 얻은 상등액을 60℃, 100℃ 및 121℃에서 각각 20분 동안 열처리한 용액을 사용하였다. 각 온도에서 열처리한 배양액을 시료로 사용하여 배양시간에 따른 길항물질의 생산성 검토 방법과 동일하게 PDA평판배지를 제조한 다음 T.
분리균주의 생육을 위한 최적 배양온도는 500 mL 삼각플라스크에 Nutrient broth배지 200 mL를 넣고 121℃, 15분 멸균한 다음 분리균주의 전배양 용액을 2 mL씩을 접종한 후 30~50℃의 온도범위에서 120 rpm으로 배양하면서 2시간 간격으로 시료를 채취하여 660 nm에서 흡광도를 측정하여 검토하였다. 배지의 초기 pH는 Nutrient broth배지를 0.1 N HCl과 0.1 N NaOH용액으로 pH 5~9의 범위로 각각 조절한 다음 45℃의 배양온도에서 상기의 최적 배양온도의 영향 검토와 동일하게 행하였다.
버섯 재배사에서 발효시켜 멸균을 행한 배지 및 부엽토 등에서 채취한 각 균원시료 1g씩을 멸균된 생리식염수 9 ml에 잘 희석한 후 SM, AM 및 CM평판배지에 각각 도말하여 생육속도가 빠르고 clear zone이 뚜렷한 균주를 1차 분리한 후 amylase, cellulase 및 protease 효소활성을 검토한 다음 T. virence와 T. harzianum에 대한 길항활성이 높은 균주를 최종적으로 선정하였다. 최종 분리균주는 Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology 및 Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology과 16S rDNA 유전자 분석을 행하여 동정하였다(Sneath et al, 1986; Gerhardt et al, 1981).
분리 균주가 Trichoderma sp. 병원균주에 나타내는 길항력 검토는 PDA평판배지를, 분리균주의 동정, 최적온도 및 배지의 초기pH 검토를 위한 배지는 Nutrient broth배지를 사용하였다.
분리균주의 생육을 위한 최적 배양온도는 500 mL 삼각플라스크에 Nutrient broth배지 200 mL를 넣고 121℃, 15분 멸균한 다음 분리균주의 전배양 용액을 2 mL씩을 접종한 후 30~50℃의 온도범위에서 120 rpm으로 배양하면서 2시간 간격으로 시료를 채취하여 660 nm에서 흡광도를 측정하여 검토하였다. 배지의 초기 pH는 Nutrient broth배지를 0.
이상의 결과로 3종류의 평판배지 상에서 clear zone이 뚜렷하면서 효소활성이 높고 또한 Trichoderma sp.에 대한 길항력이 우수하게 나타난 C-1분리균주를 최종 분리균주로 선정하여 이하의 실험을 행하였다.
polymyxa CK-1 배양액을 원심분리하여 얻은 상등액과 멸균수를 1:3 및 1:1로 각각 혼합한 다음 80 mesh로 분쇄한 미송톱밥 5%를 첨가하여 PDA평판배지를 제조하여 행하였다. 제조한 평판배지 중앙에 팽이버섯과 표고버섯의 균사를 블록형태로 접종하여 25℃에서 배양하면서 각 버섯의 균사성장 정도를 검토하였다. 대조구는 PDA평판배지를 사용하였다.
채취한 배양액은 8,000×g에서 10분 동안 원심분리를 행하여 얻어진 상등액과 증류수를 1 : 1로 잘 혼합한 후 PDA배지성분을 첨가하여 평판배지를 제조하였다. 제조한 평판배지의 중앙에 코르코볼 No.3(직경 5 mm)로 T. virens와 T. harzianum곰팡이를 각각 접종하여 25℃의 항온배양기에서 배양하면서 곰팡이의 균사성장 정도를 검토하였다. 대조구는 P.
채취한 배양액은 8,000×g에서 10분 동안 원심분리를 행하여 얻어진 상등액과 증류수를 1 : 1로 잘 혼합한 후 PDA배지성분을 첨가하여 평판배지를 제조하였다.
최종 분리균주는 Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology 및 Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology과 16S rDNA 유전자 분석을 행하여 동정하였다(Sneath et al, 1986; Gerhardt et al, 1981).

대상 데이터

본 연구 수행을 위해 사용한 버섯은 경북 청도군 소재의 (주)그린피스 버섯농장 실험실에서 Flammulina velutipes Fv1-5와 Lentinus edodes를 분양받아 PDA(potato dextrose agar) 평판배지에 배양하여 4℃ 냉장 보관하여 두면서 사용하였다. 그리고 버섯에서 푸른곰팡이 병을 일으키는 병원성 곰팡이는 농촌진흥원 농업유전자원정보센터에서 분양 받아 본 연구실에서 보관 중인 Trichoderma virens와 T. harzianum을 사용하였으며, 곰팡이에 대한 길항 미생물은 발효가 완료된 버섯배지 및 부엽토 등의 300여점의 시료로부터 직접 순수분리하여 사용하였다.
길항미생물의 분리용 배지는 sodium chloride 1%, yeast extract 0.5%, peptone 1%, skim milk 2%로 구성된 SM배지와 SM배지에서 skim milk 대신 2% soluble starch가 함유된 AM배지 및 1% carboxy methyl cellulose(CMC)가 함유된 CM배지를 사용하였다(Park et al, 2007). 분리 균주가 Trichoderma sp.
harzianum곰팡이를 각각 접종하여 25℃의 항온배양기에서 배양하면서 곰팡이의 균사성장 정도를 검토하였다. 대조구는 P. polymyxa CK-1배양액을 첨가하지 않고 증류수만으로 제조한 PDA평판배지를 사용하였다.
본 연구 수행을 위해 사용한 버섯은 경북 청도군 소재의 (주)그린피스 버섯농장 실험실에서 Flammulina velutipes Fv1-5와 Lentinus edodes를 분양받아 PDA(potato dextrose agar) 평판배지에 배양하여 4℃ 냉장 보관하여 두면서 사용하였다. 그리고 버섯에서 푸른곰팡이 병을 일으키는 병원성 곰팡이는 농촌진흥원 농업유전자원정보센터에서 분양 받아 본 연구실에서 보관 중인 Trichoderma virens와 T.
균원시료로부터 1차 분리한 약 200여 균주 중에서 성장속도가 빠르고, SM, AM 및 CM의 평판배지 상에서 clear zone이 뚜렷한 6균주를 2차 분리하였다. 분리한 6균주 중 cellulase, amylase 및 protease의 효소활성이 높고 T. virens와 T. harzianum에 대하여 강한 항균활성을 나타낸 C-1균주를 최종 분리균주로 선정하였다. 분리한 C-1균주는 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology에 의한 동정과 16S rDNA 염기서열 분석을 행한 결과 Paenibacillus polymyxa 밝혀져 P.

성능/효과

대체적으로 3종류의 평판배지 상에서 C-1, #14-26 및 #21-3균주의 clear zone이 비교적 크게 나타났다. 3종류의 효소활성을 검토한 결과 Amylase는 #14-26과 C-1, Cellulase는 C-1과 B-2, Protease는 C-1과 C-2균주에서 높게 나타났다. 그리고 이들 분리균주가 T.
polymyxa CK-1균주의 24시간째 배양용액을 처리한 petri dish에 두 곰팡이를 각각 접종한 후 10일 동안 방치하여도 곰팡이의 생육은 관찰되지 않았다. P. polymyxa CK-1 균주가 생산한 길항물질의 열안정성을 검토한 결과 60℃ 및 100℃로 20분 동안 처리한 시험구에서는 두 곰팡이의 균사성장이 전혀 관찰되지 않았지만 121℃에서 20분 동안 처리한 시험구에서는 약간의 균사성장이 관찰되었다. P.
6-A and B의 control). P. polymyxa CK-1 균주의 24시간째 배양용액을 60℃, 100℃ 및 120℃에서 20분 동안 각각 열처리한 후 증류수와 1 : 1로 혼합한 다음 PDA 평판배지를 제조여 T. virens (Fig. 6-A) 및 T. harzianum(Fig. 6-B)를 각각 접종한 결과 60℃ 및 100℃로 처리한 시험구에서는 두 곰팡이의 균사성장이 전혀 관찰되지 않았지만(Fig. 6. A,B의 a,b) 121℃에서 20분 동안 처리한 시험구에서는 약간의 균사성장이 관찰되었다(Fig. 6. A,B의 c). 그러나 이 시험구를 10일 동안 그대로 방치하여도 곰팡이의 균사성장은 더 이상 일어나 않고 균사가 뭉쳐지는 것이 관찰되어 P.
polymyxa CK-1으로 명명하였다. P. polymyxa CK-1균주의 생육조건을 검토한 결과 최적배양온도는 45℃, 생육을 위한 배지의 최적 pH는 6.0~7.0 범위로 나타났다. T.
polymyxa CK-1 균주가 생산한 길항물질의 열안정성을 검토한 결과 60℃ 및 100℃로 20분 동안 처리한 시험구에서는 두 곰팡이의 균사성장이 전혀 관찰되지 않았지만 121℃에서 20분 동안 처리한 시험구에서는 약간의 균사성장이 관찰되었다. P. polymyxa CK-1배양액이 버섯균사 생육에 미치는 영향을 검토한 결과 팽이버섯, 표고버섯 등의 다양한 버섯균사 생육에 전혀 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.
5에 나타내었다. P. polymyxa CK-1의 배양액을 2시간 간격으로 취하여 증류수와 1:1로 혼합하여 제조한 PDA평판배지 상에서 T. virens와 T. harzianum의 균사생장을 검토한 결과 배양액을 첨가하지 않은 대조구에서는 두 곰팡이의 균사성장이 매우 왕성하게 이루어졌다. 그리고 P.
0 범위로 나타났다. T. virens와 T. harzianum 곰팡이의 생육억제를 위한 P. polymyxa CK-1의 배양시간은 22~36시간이 적당하였다. 그리고 P.
곰팡이 성장을 억제하는 세균의 분리를 행하였다. 균원시료로부터 1차 분리한 약 200여 균주 중에서 성장속도가 빠르고, SM, AM 및 CM의 평판배지 상에서 clear zone이 뚜렷한 6균주를 2차 분리하였다. 분리한 6균주 중 cellulase, amylase 및 protease의 효소활성이 높고 T.
A,B의 c). 그러나 이 시험구를 10일 동안 그대로 방치하여도 곰팡이의 균사성장은 더 이상 일어나 않고 균사가 뭉쳐지는 것이 관찰되어 P. polymyxa CK-1분리균주는 온도에 매우 안정한 길항성물질을 세포외로 분비하는 것으로 밝혀졌다. 이와 같은 결과는 Pediococcus pentosaceus FB61이 생산한 pediocin A의 물질은 100℃에서 10분간 열처리하면 단지 5% 정도의 항균활성만이 유지되었다는 결과와 비교할 때 상당히 열안정성이 높은 것으로 판단된다(Piva and Hedadon, 1994).
harzianum의 균사생장을 검토한 결과 배양액을 첨가하지 않은 대조구에서는 두 곰팡이의 균사성장이 매우 왕성하게 이루어졌다. 그리고 P. polymyxa CK-1의 0~10시간 동안 배양한 용액을 첨가한 시험구에서도 T. virens와 T. harzianum 모두 대조구와 거의 대등하게 성장하였지만 12시간째 이후의 배양용액을 첨가한 시험구에서는 두 곰팡이 모두 생육이 감소하기 시작하여 T. virens의 경우는 18시간, T. harzianum의 경유는 20시간 이후의 배양용액을 첨가한 petri dish에서는 곰팡이의 성장을 전혀 관찰할 수 없었다. 이러한 결과는 P.
3종류의 효소활성을 검토한 결과 Amylase는 #14-26과 C-1, Cellulase는 C-1과 B-2, Protease는 C-1과 C-2균주에서 높게 나타났다. 그리고 이들 분리균주가 T. virens와 T. harzianum에 대한 길항력을 검토한 결과 분리한 6균주 모두 T. virens와 T. harzianum에 대한 길항력은 상당히 높은 것으로 나타났다(Fig. 1). 이와 같은 길항성은 pathogen과 길항세균 사이에 영양분의 경합이 이루어져 사멸하거나 또는 길항세균이 생성한 효소에 의해서 병원성균주의 독성물질이 분해되어 나타나는 것으로 보고되고 있다(Nari and Fahy, 1972).
7-B)의 균사를 블록형태로 접종하여 배양한 결과 분리균주 배양액 첨가농도에 관계없이 버섯 균사생육은 대조구와 전혀 차이를 나타내지 않고 매우 왕성하게 이루어졌다. 단지 P. polymyxa CK-1 배양액을 50% 첨가한 시험구는 25%첨가한 시험구보다 버섯균사가 약간 뭉쳐서 성장하는 것으로 관찰되었다. 결과에는 나타내지 않았지만 큰느타리버섯 및 영지버섯의 균사생육에서도 동일한 결과를 나타내었다.
polymyxa CK-1균주와는 다른 최적온도를 나타내었다(Berridge et al, 1979). 배지의 초기pH를 검토한 결과 pH 6.0~7.0 범위에서는 거의 대등하게 매우 왕성하게 생육하였으나 pH 5 이하와 pH 9 이상에서는 생육이 느려지는 것을 관찰하였다. 특히 산성조건보다는 pH 9 이상의 알칼리조건에서 이러한 현상은 더욱더 뚜렷하게 나타났다(Fig.
이들 균주 중 성장속도가 빠르면서 SM, AM 및 CM의 평판배지 상에서 clear zone이 뚜렷한 6균주를 2차 분리하여 cellulase, amylase 및 protease의 효소활성 측정 결과를 Table 1에 나타내었다. 분리균주의 성장속도는 대체적으로 왕성하였으나, 각 분리균주가 평판배지 상에서 나타내는 clear zone 크기는 배지의 종류에 따라 약간 차이를 나타내었다. 대체적으로 3종류의 평판배지 상에서 C-1, #14-26 및 #21-3균주의 clear zone이 비교적 크게 나타났다.
분리균주인 C-1 균주는 생장특성과 이화학적 특성(Table 2)을 근거로 하여 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology에 의한 동정과 계통학적 유연관계를 조사하기 위해서 16S rDNA 염기서열 분석을 행한 결과(Fig. 2) Paenibacillus polymyxa로 분류되어 본 연구에서는 Paenibacillus polymyxa CK-1으로 명명하였다(Sneath et al, 1986; Gerhardt et al, 1981).
분리한 C-1균주는 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology에 의한 동정과 16S rDNA 염기서열 분석을 행한 결과 Paenibacillus polymyxa 밝혀져 P. polymyxa CK-1으로 명명하였다.
4에 나타내었다. 생육온도는 30℃에서 45℃로 높아짐에 따라 P. polymyxa CK-1세균의 생육은 왕성하게 이루어져 45℃ 배양 시 정상기의 OD값이 2.2정도 이었으나 50℃에서는 생육이 급격하게 떨어져 배양 16 hr째 OD값이 약 1.0정도를 나타내었다(Fig. 3). Streptococcus lactis의 경우 배양온도에 따라 생성되는 물질의 패턴이 변화되는 것을 발견하였으며, nisin생성의 최적온도는 28-30℃로 보고된바 있어 본 연구에서 분리한 P.
harzianum의 경유는 20시간 이후의 배양용액을 첨가한 petri dish에서는 곰팡이의 성장을 전혀 관찰할 수 없었다. 이러한 결과는 P. polymyxa CK-1균주의 36시간째 배양용액에서도 동일하게 얻을 수 있었지만 그 이후의 배양용액에서는 약간씩 효과가 감소하였다. 그리고 P.
4). 이상의 결과로 P. polymyxa CK-1 분리균주의 최적생육 온도는 45℃, 배지의 초기pH는 pH7의 중성부근인 것으로 밝혀졌다.
polymyxa CK-1균주의 24시간 배양용액을 처리한 petri dish를 10일 동안 방치하여도 곰팡이의 생육은 관찰할 수 없었다. 이상의 결과로 P. polymyxa CK-1의 길항물질 생산을 위한 배양시간은 22~36시간이 적당한 것으로 판단되었다. 전통발효식품의 위생적 문제를 해결할 목적으로 순수분리한 Bacillus subtilis CH-14 항균미생물은 배양 24 hr째에 최대의 항균물질을 생산하였고 배양 60 hr째에는 항균활성이 95% 이상 소실하였다고 보고한 내용과 유사한 경향을 나타내었다(Park et al, 2007).
diacetylactis UL720균주가 생산한 diacetin B는 121℃에서 20분간 열처리 후에도 안정하다고 보고한 내용과는 유사하였다(Ali and Lacroix, 1995). 이상의 결과로 미생물이 생산하는 길항물질은 그 미생물의 특성에 따라서 열 안정성에 상당한 차이를 나타내는 것으로 판단된다.
배양한 다음 원심분리하여 얻은 상등액을 멸균수에 25% 및 50%씩 각각 혼합하여 PDA평판배지를 제조하여 사용하였다. 제조한 평판배지 중앙에 팽이버섯(Fig. 7-A)과 표고버섯(Fig. 7-B)의 균사를 블록형태로 접종하여 배양한 결과 분리균주 배양액 첨가농도에 관계없이 버섯 균사생육은 대조구와 전혀 차이를 나타내지 않고 매우 왕성하게 이루어졌다. 단지 P.

후속연구

결과에는 나타내지 않았지만 큰느타리버섯 및 영지버섯의 균사생육에서도 동일한 결과를 나타내었다. 이상의 결과로 P. polymyxa CK-1분리균주는 amylase, protease 및 cellulase효소활성의 분비력이 높을 뿐만 아니라 분리균이 생산하는 길항물질은 T. virens 및 T. harzianum 곰팡이의 생육은 억제하지만 버섯의 생육에는 아무런 영향을 미치지 않는 것으로 나타났기 때문에 버섯배지의 발효에 효과적이고 또한 버섯의 푸른곰팡이 질병예방 및 퇴치에 도움이 될 것으로 추측되어 향후 깊이 있는 연구가 필요한 것으로 생각된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	인공재배되고 있는 식용버섯으로는 어떤 것들이 있는가?	식용버섯은 오랜 전부터 중요한 식품 재료로 이용되어 왔고, 지방과 에너지 함량이 낮은 반면, 식이섬유와 기능성 물질의 함량이 높고, 특히 항암력과 면역촉진 등 각종 기능성이 밝혀지면서 건강식품 및 보건식품으로 그 수요가 날로 증가하고 있다(Breene, 1990; Kalberer and Kunsch, 1974; Manzi et al, 2007; Yoshioka and Tabeta, 1985). 식용버섯이 세계적으로 중요한 식품재료로 널리 이용됨에 따라, 주로 아가리쿠스(Agaricus), 목이버섯(Auricularia), 팽이버섯(Flammulina), 표고버섯(Lentinus), 그리고 느타리버섯(Pleurotus) 등이 인공재배되고 있다(Chang et al, 1993).
	식용버섯은 어떤 특징을 가지고 있는가?	버섯은 분류학상 진균류에 위치하며, 대부분 담자균류에 속하지만 일부 종은 자낭균, 그리고 드물게는 점균류 중에서도 볼 수 있다. 식용버섯은 오랜 전부터 중요한 식품 재료로 이용되어 왔고, 지방과 에너지 함량이 낮은 반면, 식이섬유와 기능성 물질의 함량이 높고, 특히 항암력과 면역촉진 등 각종 기능성이 밝혀지면서 건강식품 및 보건식품으로 그 수요가 날로 증가하고 있다(Breene, 1990; Kalberer and Kunsch, 1974; Manzi et al, 2007; Yoshioka and Tabeta, 1985). 식용버섯이 세계적으로 중요한 식품재료로 널리 이용됨에 따라, 주로 아가리쿠스(Agaricus), 목이버섯(Auricularia), 팽이버섯(Flammulina), 표고버섯(Lentinus), 그리고 느타리버섯(Pleurotus) 등이 인공재배되고 있다(Chang et al, 1993).
	식용버섯의 인공재배 과정에서 생기는 푸른곰팡이병은 무엇에 의해 발생하는가?	버섯의 인공재배 과정 중에 빈번하게 발생하는 푸른곰팡이 병은 Trichoderma sp., Aspergillus sp., Penicillium sp., Gliocladium sp. 등에 의해 발생하는 것으로 보고되고 있는데, 그 중에서도 Trichoderma sp.에 의한 피해가 가장 큰 것으로 보고되고 있다(Szczech et al, 2008; Seo, 2001).

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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