[논문]가미방기황기탕(加味防己黃芪湯) 주정 추출물이 류마티스 관절염 동물병태모델에 미치는 영향

심부용; 최학주; 박지원; 김동희

doi:10.6116/kjh.2014.29.6.95.

[국내논문] 가미방기황기탕(加味防己黃芪湯) 주정 추출물이 류마티스 관절염 동물병태모델에 미치는 영향
Effects of GamiBangkeehwangkee-tang (fángjǐhuángqí-tāng) ethanol extract on Collagen-induced Rheumatoid Arthritis model of DBA/1 mice 원문보기

大韓本草學會誌 = The Korea journal of herbology, v.29 no.6, 2014년, pp.95 - 102

심부용 (대전대학교 한의과대학 병리학과) , 최학주 (대전대학교 난치성면역질환 동서생명의학연구소) , 박지원 (대전대학교 한의과대학 병리학과) , 김동희 (대전대학교 한의과대학 병리학과)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : The purpose of this study is to prove the effect of GamiBangkeehwangkee-tang (f$\acute{a}$ngj$\check{i}$hu$\acute{a}$ngq$\acute{i}$-t$\bar{a}$ng, BHT) ethanol extract on the immunity and rheumatoid arthritis related inflammatory cytokines. Methods : We checked viability in RAW 264.7 cell after treat by BHT. Then we measured inflammatory and immunity factors of DBA/1 mice with rheumatoid arthritis induced by collagen after BHT oral administration. Also, we checked micro-CT image, bone volume and bone inflammation ratio in micro-CT and structural parameter test. Results : BHT showed cell viability of 95% or higher in all concentration in RAW 264.7 cells. BHT treated group decreased level in serum of IgM and IgG test by 36% and 25% respectively. And BHT treated group showed significant decrease in WBC, neutrophil, lymphocyte and monocytes immune cell ratio in blood by 47%, 22%, 56% and 85% respectively. Also, BHT treated group decreased level in serum of $IL-1{\beta}$, IL-6, IL-17, $TNF-{\alpha}$ and hs-CRP tests by 29%, 33%, 32%, 24% and 56% respectively. Finally, BHT treated group showed increase ratio of bone volume that decrease ratio of bone inflammation. Conclusions : In this study, the results were observed rheumatoid arthritis factors cytokine decrease in serum. And BHT showed immunoglobulin and immune cells ratio decrease in serum and blood. Also, BHT depending on effects of inflammatory and immunity in hs-CRP test, micro-CT, structural parameter test. Thus, these results can used as a effective drug of BHT for inflammation and immunity.

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AI 본문요약
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문제 정의

관절염에 대한 연구로 김¹⁴⁾ 등은 방기황기탕이 Monosodium Indoacetate로 유발된 흰쥐의 골관절염에 미치는 영향을 연구를 보고함으로써 항관절염 효능을 규명한 바가 있다. 이에 저자는 김¹⁴⁾의 실험결과에 준하여 보다 유의적인 항관절염 처방 개발을 위하여 임상에서 鎭痛, 消炎, 利關節 작용이 있는 牛膝, 威靈仙, 川烏頭를 가미한 加味防己黃芪湯을 주정으로 추출 한 후 항RA 효능을 규명하고자 함과 동시에 안전하고 효과적인 RA 치료제의 개발을 하고자 하였다. 실험은 CIA를 통해 RA를 유발시킨 동물 병태 모델을 이용하여 항염증 및 면역학적 효능을 확인하고자 하였다.

제안 방법

이에 저자는 김¹⁴⁾의 실험결과에 준하여 보다 유의적인 항관절염 처방 개발을 위하여 임상에서 鎭痛, 消炎, 利關節 작용이 있는 牛膝, 威靈仙, 川烏頭를 가미한 加味防己黃芪湯을 주정으로 추출 한 후 항RA 효능을 규명하고자 함과 동시에 안전하고 효과적인 RA 치료제의 개발을 하고자 하였다. 실험은 CIA를 통해 RA를 유발시킨 동물 병태 모델을 이용하여 항염증 및 면역학적 효능을 확인하고자 하였다.
5∼3 cm 아래쪽의 피내를 통해 천천히 주입하여 1차 유발을 하였다. 1차 유발 후 2주 후에 1차 시기와 동일하게 CFA 대신 incomplete Freund's adjuvant (IFA)과 혼합하여 한쪽 발바닥에 주사하여 관절의 파괴, 변형 및 부종 등을 유발하였다. 실험은 4개의 군으로 나누었으며 매일 1회, 오후 2시에 정상군, 대조군에는 증류수를, 양성대조군인 indomethacin (이하, Indo) 투여군과 BHT 투여군은 각각 200 ㎕ (200 ㎎/㎏) 씩 투여하였다.
본 연구에서는 류마티스 관절염을 유발한 마우스에서 현재 임상에서 사용되고 있는 加味防己黃芪湯(BHT)의 류마티스 관절염에 대한 안전성, 효능 및 기전을 객관적으로 검증하기 위하여, 중금속 검사 및 RA 동물병태모델에서 간 기능과 신 기능 검사, 면역글로불린 검사, 면역세포 검사, cytokine 검사, hs-CRP 검사, micro CT 및 Structural Parameter 검사를 연구한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다.

대상 데이터

실험동물인 수컷 5주령의 DBA/1 mouse (20∼23 g)는 ㈜중앙실험동물 (Korea)에서 공급 받아 실험 당일까지 고형사료 (㈜퓨리나)와 물을 충분히 공급하고 온도 22 ± 2℃, 습도 55 ± 15%, 12시간-12시간 (light-dark cycle)의 환경에서 2주간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 본 실험은 대전대학교 동물실험 윤리 위원회의 승인 (동물사용 윤리위원회 승인 번호–DJUARB 2014-014)을 받아 동물윤리 준칙에 의거하여 실험하였다.

데이터처리

실험 결과는 실험 결과는 SPSS 11.0의 unpaired student's T-test 및 ANOVA를 사용하여 통계처리 하였으며 p<0.05, p<0.01 및 p<0.001 수준에서 유의성을 검정하였다.

성능/효과

즉, 면역 반응은 백혈구가 침입한 병원체를 포식하고 면역 세포들을 분비하여 염증반응과 작동세포들의 소환 및 활성화를 유도하게 되는 것이다. 본 연구에서 BHT는 면역글로불린 IgM과 IgG를 유의성 있게 감소시켰으며, 면역 세포인 백혈구, 호중구, 림프구, 단핵구의 생성량을 감소시키는 결과를 확인 할 수 있었다.
이상의 결과를 종합해 볼 때, BHT는 안전성 평가를 통해 안전한 것으로 확인되었으며, 염증성 자가 면역질환인 RA에 대해 염증과 면역반응 유관인자 조절을 통해 RA의 병리적 진행을 억제함을 객관적으로 증명해주었다. 따라서 현재 임상에서 활용되고 있는 BHT가 보다 체계적인 임상적인 연구 결과가 진행된다면 EBM (Evidence-based medicine) 구축에 일조할 것으로 사료된다.
이상의 결과들로 보아 加味防己黃芪湯은 염증 및 면역반응의 유관인자 조절을 통해 류마티스 관절염의 주요 인자들을 감소 효능이 실험적으로 규명되었다. 보다 구체적인 치료 기전은 향 후 보다 심도있는 연구를 통하여 보완되어야 할 것으로 보이나 이와 같은 결과는 加味防己黃芪湯이 류마티스 관절염의 치료제로서 효과뿐만 아니라 다른 염증성 자가면역질환에도 사용될 수 있을 것이라 생각되어지나, 추후 다양한 질환의 임상 전 연구를 통해 밝혀내야 할 것이라 사료된다.

후속연구

이상의 결과를 종합해 볼 때, BHT는 안전성 평가를 통해 안전한 것으로 확인되었으며, 염증성 자가 면역질환인 RA에 대해 염증과 면역반응 유관인자 조절을 통해 RA의 병리적 진행을 억제함을 객관적으로 증명해주었다. 따라서 현재 임상에서 활용되고 있는 BHT가 보다 체계적인 임상적인 연구 결과가 진행된다면 EBM (Evidence-based medicine) 구축에 일조할 것으로 사료된다.
이상의 결과들로 보아 加味防己黃芪湯은 염증 및 면역반응의 유관인자 조절을 통해 류마티스 관절염의 주요 인자들을 감소 효능이 실험적으로 규명되었다. 보다 구체적인 치료 기전은 향 후 보다 심도있는 연구를 통하여 보완되어야 할 것으로 보이나 이와 같은 결과는 加味防己黃芪湯이 류마티스 관절염의 치료제로서 효과뿐만 아니라 다른 염증성 자가면역질환에도 사용될 수 있을 것이라 생각되어지나, 추후 다양한 질환의 임상 전 연구를 통해 밝혀내야 할 것이라 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	염증과 면역반응이란?	인체에서 염증과 면역반응은 다양한 염증세포와 면역세포를 이용하여 외부의 세균과 바이러스 같은 해로운 물질로부터 우리 몸을 보호하는 매우 중요한 생체현상으로, 염증반응과 면역반응이 과다하게 일어나는 경우에는 염증성 자가면역 질환이 발생하여 결국 사망에 이르게 되며1-3), 천식, 아토피피부염, 크론병 및 류마티스 관절염(Rheumatoid Arthritis, RA) 등이 대표적인 염증성 자가 면역질환으로 알려져 있다.
	류마티스 관절염(RA)이 염증과 면역 기전의 치료가 병행되어야 하는 질병 중 하나인 이유는?	RA는 손가락, 손목, 발목을 포함한 다양한 관절에서 발생하는데 관절을 둘러싸고 있는 활액막에서 일어나는 염증성 면역 반응으로 인해 전신성 만성 염증 반응으로 진행되며 부종과 통증을 일으키고 결국 관절 조직과 골조직의 침식 및 파괴를 일으킨다4,5). 이러한 RA의 원인은 유전적인 요소를 포함하여 자가면역관용(self tolerance)의 불균형 및 미생물이나 바이러스에 의한 감염 등과 같은 염증 원인과 관련된 여러 환경적 요소들이 복합적으로 관련되어 나타난다6). 따라서 RA는 염증과 면역 기전의 치료가 병행되어야 하는 질병 중 하나이다.
	대표적인 염증성 자가 면역질환은?	인체에서 염증과 면역반응은 다양한 염증세포와 면역세포를 이용하여 외부의 세균과 바이러스 같은 해로운 물질로부터 우리 몸을 보호하는 매우 중요한 생체현상으로, 염증반응과 면역반응이 과다하게 일어나는 경우에는 염증성 자가면역 질환이 발생하여 결국 사망에 이르게 되며1-3), 천식, 아토피피부염, 크론병 및 류마티스 관절염(Rheumatoid Arthritis, RA) 등이 대표적인 염증성 자가 면역질환으로 알려져 있다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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