[논문]길경(桔梗)발효 추출물의 알레르기성 소양행동 억제효과연구

하미애; 김진우; 이신우; 전현식; 조영손; 신용욱

doi:10.6116/kjh.2014.29.6.165.

길경(桔梗)발효 추출물의 알레르기성 소양행동 억제효과연구
Anti-pruritic Effect of Ethanol Extracts from Platycodon grandiflorum and its fermented production in Scratching Behavior Mouse Models 원문보기

大韓本草學會誌 = The Korea journal of herbology, v.29 no.6, 2014년, pp.165 - 173

하미애 (경남과학기술대학교 농학.한약자원학부) , 김진우 (경남과학기술대학교 농학.한약자원학부) , 이신우 (경남과학기술대학교 농학.한약자원학부) , 전현식 (경남과학기술대학교 농학.한약자원학부) , 조영손 (경남과학기술대학교 농학.한약자원학부) , 신용욱 (경남과학기술대학교 농학.한약자원학부)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : Platycodon Root is frequently used in traditional medicine to treat inflammatory diseases of the throat. The purpose of this study was to characterize the effect of the EtOH extract of fermented Platycodon grandiflorum on the ameliorative effects on the Antipruritic Effect of atopic dermatitis mouse model induced by compound 48/80 and ovalbumin (OVA)-induced allergic responses in mice. Methods : In the present study, we examined the anti allergic effect of Platycodon grandiflorum (PR) and its fermented production (FPR) in several mouse model. We measured acute ear edema in a mouse model caused by TPA and consecutively histological change of Ear tissue was observed by hematoxylin and eosin (H&E) staining. and also Scratching behaviors by compound 48/80 was investigated. The levels of allergic mediators such as immunoglobulin (Ig) E, and anti-oxidant markers such as SOD and MDA in the sera of OVA induced allergic mice were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Results : FPR inhibited compoud 48/80-induced scratching behavior in mice, as well as acetic acid-induced writhing in mice. The anti-scratching behavioral effect of FPR was more potent than PR. FPR extract significantly decreased the serum levels of IgE and MDA compared with those of OVA control group. Conclusions : These results indicate that Anti allergic effect of Platycodon grandiflorum is enhanced by fermentation with Saccharomyces cerevisae and FPR may be useful for protection from the itching reactions, which are IgE-mediated representative skin allergic diseases.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

그 중에서도 가려움증은 아토피 피부염의 주요한 임상 양상³⁹⁾으로서 아토피피부염 환자에서 병변 피부의 표피에서의 경피 신경 섬유는 고밀도로 확장되어 있으며 이는 피부의 표면에까지 이르는 것으로 알려져 있다^40,41). 따라서 생쥐의 소양행동억제효과가 단순히 통증을 저해함에 기인 한 것인지를 확인하기 위해서 초산으로 유도한 진통효과를 확인하였다. 진통실험 결과를 통하여 길경의 고농도 추출물에서 통증이 생쥐의 소양행동에 영향을 미치는 것으로 나타나 그 결과는 제시하지 않았다.
즉, 한의학에서 알레르기 반응은 鼻鼽, 鼻塞, 喘息, 咳嗽, 急喉痺, 癮疹, 搔癢, 癍疹 등으로 모두 鼻, 肺, 皮膚와 관련되므로 肺系統의 질환으로 보고 있다^45,46) 폐와 관련된 알레르기 유발물질로 대표적인 난알부민(ovalbumin, OVA)은 B세포의 활성화에 의한 혈청 내 IgE 농도의 증가와 더불어 T세포 매개에 의한 염증성 사이토카인 들은 물론, 화학주성의 원인인 케모카인(chemokine)의 생산을 증가⁴⁷⁾시키며 OVA로 염증사이토카인이 증가하고 염증세포의 침투가 증가하여 염증부위에서는 활성산소가 생성되어 천식과 같은 다양한 질환이 유발된다⁴⁸⁾고 알려져 있다. 본 실험에서는 염증부위로 인한 혈류내의 SOD 변화 유무를 확인하였다. Superoxide dismutase(SOD) 는 체내의 항산화 체제의 중추적인 역할을 하는 효소로서 산화적 스트레스가 발생할 때 생기는 Superoxide 를 제거하는데 중요한 역할을 담당한다.
본 연구는 알레르기로 인한 소양행동이 증가된 마우스와 난알부민 감작으로 알레르기 면역반응이 유도된 마우스에서 발효길경 80% 에탄올추출물의 알레르기 조절효과를 확인하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
이에 길경을 식용미생물인 효모균으로 발효시켜서 항산화작용을 증강시킨 발효 길경의 80% 에탄올 추출물을 이용하여 다수의 아토피성 피부염 동물모델에 적용하여 알레르기 증상의 조절 효과를 확인하고자 실험을 수행하였으며, 유의한 결과를 얻었기에 이에 보고하는 바이다.

제안 방법

4) on days 1 and 14. Each mouse was challenged through the airway with OVA (5%, w/v, in PBS) for 20 min, using an ultrasonic nebulizer, on days 21, 22, and 23 after initial sensitization. Mice were given 500 mg/kg/day of PR, FPR orally, on each of days 21 to 23.
H&E 염색된 귀조직 슬라이드에서 귀 조직의 비후도와 염증세포 침윤 등을 광학현미경(Leica Co.,German)으로 관찰하였다.
OVA 처치한 생쥐에서 분리한 혈청에서 IgE를 측정하기 위하여 ELISA kit(Mouse IgE ELISA Set BD)을 사용하여 생산량을 측정하였다. 즉, Capture 항체를 coating 완충용액에 희석하여 microwell에 coating한 후 4℃에서 overnight 하였다.
Spectrophotometer plate reader를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정하였다. Standard 와 Sample을 주어진 공식에 대입하여 혈중 SOD농도를 계산하였다.
각 군으로부터 수집한 귀 조직을 4% formaldehyde 용액으로 7일간 고정한 후 파라핀으로 포매하여 블록을 제작하고 microtome을 이용하여 귀 조직을 5 µm 두께의 절편을 제작하였다. xylene으로 탈파라핀 시키고 100%, 95%, 80%, 75% 알코올 순서대로 함수시켰다. 이를 hematoxylin과 eosin으로 염색한 후 Permount 로 봉입하였다.
각 군으로부터 수집한 귀 조직을 4% formaldehyde 용액으로 7일간 고정한 후 파라핀으로 포매하여 블록을 제작하고 microtome을 이용하여 귀 조직을 5 µm 두께의 절편을 제작하였다.
실험군으로, 생리식염수만을 투여한 정상군(Normal), 난알부민(OVA) 감작을 시킨 대조군(Control), 면역반응이 유발된 대조군에 길경 80% 에탄올 추출물(PR)을 500 ㎎/㎏과 발효길경 80% 에탄올 추출물(FPR) 500 ㎎/㎏ 용량으로 투여한 실험군(PR 500, FPR 500) 및 대조약물로써 항히스타민제인 케토티펜(Ketotifen)을 10 ㎎/㎏ 복강 투여한 양성대조군(Ketotifen 10)으로 나누었으며, 각 군당 6마리의 마우스를 사용하였다. 길경 및 길경발효추출물과 케토티펜은 OVA 분무전에 투여 하였다. 실험 23일째 약물투여 및 OVA 분무 후에 동물을 마취시킨 뒤 심장 채혈로 혈액을 수집하였으며, 수집된 혈액은 3,000 rpm에서 15분간 원심 분리함으로써 혈청을 분리한 뒤 -80℃로 보관한 뒤 혈청 분석에 이용하였다.
난알부민으로 알레르기 면역반응이 유도된 마우스에서 길경 및 발효 길경 에탄올추출물의 체내 항산화계에 미치는 영향을 비교하기 위해 혈청 내 MDA 를 측정하였다. Fig.
난알부민으로 알레르기 면역반응이 유도된 마우스에서 길경 및 발효 길경 에탄올추출물의 체내 항산화계에 미치는 영향을 비교하기 위해 혈청 내 SOD 를 측정하였다. Fig.
난알부민으로 알레르기 면역반응이 유도된 마우스에서 길경 및 발효길경 에탄올추출물의 IgE 항체 생성에 대한 억제 효과를 비교하기 위해 혈청 내 IgE의 농도를 효소면역반응법으로 측정하였다. 그 결과, Fig.
진통실험 결과를 통하여 길경의 고농도 추출물에서 통증이 생쥐의 소양행동에 영향을 미치는 것으로 나타나 그 결과는 제시하지 않았다. 다음으로 길경 및 발효길경이 아토피 증상으로 각질이 두꺼워지는 것을 저해하는지 유무를 확인하기 위해서 TPA를 생쥐 피부에 도포하여 염증을 유도하여 보았다. TPA 는 급성 접촉성 피부염을 유발하여 피부를 자극시키며 국소염증의 임상양상으로 표피의 각질세포가 증식되어 피부의 두께가 두꺼워 지는 것이 두드러진 특징이다.
마지막 복강 주사 7일 후 즉, 실험시작 21일째 마우스를 15×18×20 ㎝ 크기의 아크릴 상자 안에 넣고 5% 농도의 OVA 용액을 nebulizer (0.25ml/min)를 이용하여 매일 1일 1회, 1회 30분간 3일 동안 분무함으로써 호흡을 경유한 알레르기성 면역반응을 유도하였다.
고 보고 있다. 먼저 길경 및 발효길경의 비만세포 탈과립 억제효과를 살펴보기 위해서 비만세포의 활성화시키는 화합물중 하나인 Compound 48/80을 이용하여 아토피의 대표적인 임상양상인 소양행동을 유발시켰다. Compound 48/80은 혼합 다당체 성분으로 비만세포막 수용체에 작용하여 세포외의 칼슘을 세포내로 유입시킴으로써 세포내 자유칼슘의 양을 증가시켜 비만세포의 탈과립 및 히스타민 유리를 강력하게 일으키며 세포내 cAMP- phosphodiesterase의 파괴를 억제하여 세포내 cAMP양을 감소시킨다고 알려져 있다^37,38).
과 같이 제작하였다. 먼저 난알부민 (ovalbumin, chicken egg albumin; OVA) 1 ㎎을 PBS와 수산화알루미늄 겔(Al(OH)3gel)을 1:1 로 혼합한 용액 100ul 를 실험 시작일과 14일째 마우스의 복강내 주사하였다. 마지막 복강 주사 7일 후 즉, 실험시작 21일째 마우스를 15×18×20 ㎝ 크기의 아크릴 상자 안에 넣고 5% 농도의 OVA 용액을 nebulizer (0.
발효의 확인은 48시간 배양한 시료에서 총균수를 측정하여 발효를 확인한 후 분석에 사용하였다. 발효길경을 얻은 후, 길경과 발효길경을 각각 80%에탄올을 가하여 2시간씩 2회 가열 추출하였다. 추출이 완료된 다음 Whatman (No.
즉, 건조 후 발효균주로서 효모(Saccharomyces cerevisae C-2)를 중량 대비 5%로 접종하여 온도 37℃, 습도 75%를 유지하며 48시간 배양하였다. 발효의 확인은 48시간 배양한 시료에서 총균수를 측정하여 발효를 확인한 후 분석에 사용하였다. 발효길경을 얻은 후, 길경과 발효길경을 각각 80%에탄올을 가하여 2시간씩 2회 가열 추출하였다.
비만세포 탈과립을 유도하여 생쥐로 하여금 가려움증을 유발하게 하는 compound 48/80 으로 유도한 소양행동에 대한 길경과 발효길경 추출물의 억제효과를 Fig.2에 제시하였다. 대조군은 시간당 230.
길경 및 길경발효추출물과 케토티펜은 OVA 분무전에 투여 하였다. 실험 23일째 약물투여 및 OVA 분무 후에 동물을 마취시킨 뒤 심장 채혈로 혈액을 수집하였으며, 수집된 혈액은 3,000 rpm에서 15분간 원심 분리함으로써 혈청을 분리한 뒤 -80℃로 보관한 뒤 혈청 분석에 이용하였다.
25ml/min)를 이용하여 매일 1일 1회, 1회 30분간 3일 동안 분무함으로써 호흡을 경유한 알레르기성 면역반응을 유도하였다. 실험군으로, 생리식염수만을 투여한 정상군(Normal), 난알부민(OVA) 감작을 시킨 대조군(Control), 면역반응이 유발된 대조군에 길경 80% 에탄올 추출물(PR)을 500 ㎎/㎏과 발효길경 80% 에탄올 추출물(FPR) 500 ㎎/㎏ 용량으로 투여한 실험군(PR 500, FPR 500) 및 대조약물로써 항히스타민제인 케토티펜(Ketotifen)을 10 ㎎/㎏ 복강 투여한 양성대조군(Ketotifen 10)으로 나누었으며, 각 군당 6마리의 마우스를 사용하였다. 길경 및 길경발효추출물과 케토티펜은 OVA 분무전에 투여 하였다.
실험동물은 온도 23 ± 3℃, 습도 50 ± 10% 내외, 명암주기 12시간 주기로 일정하게 유지된 사육실에서 다섯 마리씩 polycarbonate mice cage에 수용하여 사육하였으며 적응 기간 동안 사료와 물을 제한 없이 공급하였다.
아토피 환자의 대표 증상으로서 혈청 IgE 가 높은데, 이는 아토피 환자의 Th-1/Th-2 불균형으로 인해 IgE의 과다분비에 의한 것임⁴³⁾이 보고되고 있으며 항원 자극에 의해 생산된 IgE는 비만세포 또는 호염기구 표면에 있는 Fc receptor와 결합하게 되며, 다시 항원이 들어오게 되면 특이 항체 IgE와 결합함으로써 이들 세포에 탈과립을 일으켜 histamine, leukotriene 등을 방출되어 혈관투과성이 증가되고, 국소 부종 등의 알레르기 반응⁴⁴⁾이 나타는 것이다. 이에 동물모델에서 발효길경의 IgE 저해효과 를 확인하기 위해서 OVA로 천식을 유도하였다. 즉, 한의학에서 알레르기 반응은 鼻鼽, 鼻塞, 喘息, 咳嗽, 急喉痺, 癮疹, 搔癢, 癍疹 등으로 모두 鼻, 肺, 皮膚와 관련되므로 肺系統의 질환으로 보고 있다^45,46) 폐와 관련된 알레르기 유발물질로 대표적인 난알부민(ovalbumin, OVA)은 B세포의 활성화에 의한 혈청 내 IgE 농도의 증가와 더불어 T세포 매개에 의한 염증성 사이토카인 들은 물론, 화학주성의 원인인 케모카인(chemokine)의 생산을 증가⁴⁷⁾시키며 OVA로 염증사이토카인이 증가하고 염증세포의 침투가 증가하여 염증부위에서는 활성산소가 생성되어 천식과 같은 다양한 질환이 유발된다⁴⁸⁾고 알려져 있다.
의 방법에 따라 제조하였다. 즉, 건조 후 발효균주로서 효모(Saccharomyces cerevisae C-2)를 중량 대비 5%로 접종하여 온도 37℃, 습도 75%를 유지하며 48시간 배양하였다. 발효의 확인은 48시간 배양한 시료에서 총균수를 측정하여 발효를 확인한 후 분석에 사용하였다.
즉, 시료를 경구 투여한 1시간 후에 체중 20g 전후의 BALB/c 마우스를 각각 아크릴 관찰 상자(22×22×24cm) 에 10분간 두어 환경에 순화시킨 뒤 목뒤의 등 털을 제거하고 1mg/mL의 농도로 식염수에 용해한 compound 48/80 50 µL를 29 gauge needle 로 피하주사한 뒤 즉시 관찰상자에 넣고 1시간 동안 무인조건에서 소양행동을 비디오카메라로 녹화하여 관찰한다.
에 준하여서 초산으로 유도한 마우스의 신전반응을 관찰하였다. 즉, 시료를 마우스의 경구로 투여한 1시간 후에 0.7% 초산을 0.1mL / 10g body 의 용량으로 복강에 주사 하고 10분에서 20분 사이에 마우스의 신전행동(writhing syndrome) 의 횟수를 측정하였으며 대조약물로 Aminopyrine을 사용하였다.
5% 20㎕를 각각 도포한다. 처음 TPA 도포한 4시간 후 경추탈골 시킨 뒤 Digimatic Micrometer (Mitsutoyo Co., Tokyo, Japan) 를 이용하여 귀의 두께를 측정하고, 조직을 적출하여 조직염색을 수행하였다.⁴
발효길경을 얻은 후, 길경과 발효길경을 각각 80%에탄올을 가하여 2시간씩 2회 가열 추출하였다. 추출이 완료된 다음 Whatman (No. 1) filter paper로 감압여과하고, 이를 Rotary evaporator로 감압 농축하여 얻은 점조상의 추출물을 동결 건조기에서 건조하여 시료를 제조하였다. 이때 수득율은 길경, 발효길경이 각각 18.
혈중 Malondialdehyde(MDA)는 Enzyme-linked Immunosorbent assay kit(E90597Ge, UscnLife)를 이용하여 분석 하였다. 96-wellplate 에 Sample과 Standard 희석액 50㎕에 Detection Reagent A 용액 50㎕를 넣고 37℃에서 1시간 반응 시켰다.
혈중 SOD농도는 Superoxide Dismutase assay kit(706002, Cayman)를 이용하여 분석하였다. 96-wellplate에 Radical Detector 200㎕ 씩 넣고 standard 와 Sample 희석액을 10㎕ 넣은 후, Xanthine oxidase를 20㎕를 넣고 잘 혼합한 후, 실온의 shaker위에 20분간 둔다.

대상 데이터

실험에 사용되어진 시약으로 compound 48/80, Evans Blue, ovalbumin (OVA)과 ketotifen, H&E 염색 시약은 Sigma-Aldrich사(St Louice, CA, USA)로부터 구입하였으며, Al(OH)3 gel(InvivoGen, San Diego,USA), Superoxide Dismutase(SOD) assay kit(Cayman, michigan, USA), Mouse IgE ELISA kit(BD, San Diego, USA), Malondialdehyde(MDA) 는 ELISA kit(UscnLife, Germany)를 사용하였다. 또한 실험기기로는 Rotary Evaporator (Eyela, Japan), 동결건조기(FD 5508, llshin Lab, Korea), Digimatic Micrometer(Mitsutoyo Co., Tokyo, Japan), nebulizer(Clenny 2 Aerosol, Medel, Italy), microplatereader(Anthos2020, Asys Hitech Gmbh,Austria), Microtome RM2145, Microscope (LEICA, Germany) 등을 사용하였다.
본 실험에 사용된 길경은 경상남도 사천에서 3년간 재배된 것을 2012년 2월에 채취하여 선별 후 깨끗이 세정하여 물기를 제거한 건조하여 사용하였으며 발효길경은 Kim 등²⁵⁾의 방법에 따라 제조하였다. 즉, 건조 후 발효균주로서 효모(Saccharomyces cerevisae C-2)를 중량 대비 5%로 접종하여 온도 37℃, 습도 75%를 유지하며 48시간 배양하였다.
실험동물은 수컷의 ICR mouse 5주령과 암컷 BALB/c mouse 6주령을 주식회사 코아텍 (경기도, 한국)에서 공급받아 사용하였다. 실험동물은 동물실에서 7일간 적응시킨 후 사용하였다.
실험에 사용되어진 시약으로 compound 48/80, Evans Blue, ovalbumin (OVA)과 ketotifen, H&E 염색 시약은 Sigma-Aldrich사(St Louice, CA, USA)로부터 구입하였으며, Al(OH)3 gel(InvivoGen, San Diego,USA), Superoxide Dismutase(SOD) assay kit(Cayman, michigan, USA), Mouse IgE ELISA kit(BD, San Diego, USA), Malondialdehyde(MDA) 는 ELISA kit(UscnLife, Germany)를 사용하였다.
실험동물은 온도 23 ± 3℃, 습도 50 ± 10% 내외, 명암주기 12시간 주기로 일정하게 유지된 사육실에서 다섯 마리씩 polycarbonate mice cage에 수용하여 사육하였으며 적응 기간 동안 사료와 물을 제한 없이 공급하였다. 행동 관찰 실험은 실험동물 개체수를 5마리로 나머지 실험은 개체수를 6마리로 실험하였다.

데이터처리

실험결과는 mean±SD로 표시하였다. Control 값과 시료 처치군과의 유의성은 Student-Newman-Keuls test 와 ANOVA를 적용하여 p 값이 0.05 미만일때 통계적으로 유의성이 있다고 판정하였다.

이론/모형

Gong²⁹⁾ 등의 방법에 준하여서 난알부민(OVA)으로 알레르기 면역반응이 유도된 동물모델을 Fig.1. 과 같이 제작하였다.
마지막으로 50㎕의 Stop solution으로 반응을 중지하고, Spectrophotometer plate reader를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정한다. Sample의 혈중 MDA농도는 Standard curve에 준하여 계산하였다.
TPA 로 유도된 피부염 억제작용을 측정하기 위해 Park²⁸⁾ 등의 방법에 준하여 5주령 웅성 ICR 마우스 귀에 아세톤에 녹인 TPA(0.15㎍/㎕)를 20㎕ 도포하였다. 30분 후 용매에 녹인 길경과 발효길경 추출물 0.
소양행동 실험은 Sugimoto 등의 실험방법을 따랐다²⁶⁾. 즉, 시료를 경구 투여한 1시간 후에 체중 20g 전후의 BALB/c 마우스를 각각 아크릴 관찰 상자(22×22×24cm) 에 10분간 두어 환경에 순화시킨 뒤 목뒤의 등 털을 제거하고 1mg/mL의 농도로 식염수에 용해한 compound 48/80 50 µL를 29 gauge needle 로 피하주사한 뒤 즉시 관찰상자에 넣고 1시간 동안 무인조건에서 소양행동을 비디오카메라로 녹화하여 관찰한다.
진통효과를 측정하기 위해 Siegmund 등의 방법²⁷⁾에 준하여서 초산으로 유도한 마우스의 신전반응을 관찰하였다. 즉, 시료를 마우스의 경구로 투여한 1시간 후에 0.

성능/효과

1. 길경발효 추출물은 비만세포 탈과립으로 인한 생쥐의 소양행동을 억제시켰으며 이는 진통효과도 일부 작용한 것으로 여겨진다.
2. 길경과 길경발효 추출물은 TPA 로 귀부종이 유도된 아토피 피부염 동물모델에서 귀 조직의 상피층 손상을 막고, 염증세포 침윤을 억제시킴으로써 부종과 같은 피부염 증상을 완화했지만 유의성은 발견되지 않았다.
3. 길경발효 추출물은 난알부민 유도 알레르기 면역반응이 유도된 마우스에서 감소된 혈청 내 SOD를 유의적으로 증가시켰다
4. 길경과 길경발효 추출물은 난알부민 유도 알레르기 면역반응이 유도된 마우스에서 증가된 혈청내의 MDA 를 감소시켰으며 특히, 길경발효추출물 투여군에서는 유의성이 발견되었다.
Fig.5 에서는 실험 종료 후 각 군의 평균치의 귀 두께를 나타내는 개체의 귀 피부를 박리한 후 H&E 염색법을 이용하여 피부 조직을 분석한 결과, TPA 로 피부염이 유발된 Control 군(B)은 사진에서 보는 바와 같이 귀 두께가 증가하여 발진이 진행된 것을 확인할 수 있었고 백혈구의 침윤도 관찰되는 등 현저한 피부손상이 나타난 것으로 확인되었다.
난알부민으로 알레르기 면역반응이 유도된 마우스에서 길경 및 발효길경 에탄올추출물의 IgE 항체 생성에 대한 억제 효과를 비교하기 위해 혈청 내 IgE의 농도를 효소면역반응법으로 측정하였다. 그 결과, Fig. 6 에서와 같이 혈청 내 IgE의 농도는 정상군(Normal)에 비해 난알부민 감작으로 알레르기 면역반응이 유발된 대조군 (Control)에서 현저히 증가되었다. 대조약물인 ketotifen을 10 ㎎/㎏ 투여한 군(Ketotifen 10)에서는 대조군에 비해 IgE의 농도가 32.
05% 를 도포한 군에서는 대조군의 귀부종을 69% 억제한 것으로 나타났다. 길경 에탄올 80% 추출물 0.2% 투여군 (PR 0.2) 에서는 27.86% 를 억제하였고 발효 길경 에탄올 80% 추출물 0.2% 투여군 (FPR 0.2) 에서는 35.47% 억제한 것으로 관찰되었다. Fig.
7% 현저히 감소된 것을 확인할 수 있었다. 길경 에탄올 80% 추출물 500mg/kg 투여군 (PR 500)과 발효 길경 에탄올 80% 추출물 500mg/kg 투여군 (FPR 500) 에서는 각각 18.7% 와 27.3%를 억제하는 것으로 나타났다.
3 에 제시하였다. 대조군에서는 10분당 32회의 신전반응을 나타낸 것에 비해 양성대조군인 Aminopyrine 10mg/kg (i.p) 투여군에서는 대조군의 신전반응을 72.1% 를 저해 하였으며 길경과 발효 길경 투여 전체 군에서 모두 진통효과를 나타내었다. 길경의 경우 투여용량이 증가할수록 오히려 통증반응이 증가된 것에 비해 발효 길경의 경우 투여용량에 비례하게 통증이 감소됨을 나타낸다.
2에 제시하였다. 대조군은 시간당 230.3 회의 소양행동이 관찰된 데에 비해 길경 에탄올 80% 추출물 200mg/kg 투여군(PR 200) 에서는 185.5 회가 관찰되어 19.5%의 저해효과를 나타낸 것에 비해서 양성대조군인 Azelastine 10mg/kg (i.p) 투여군에서는 대조군의 소양행동을 82.6% 를 저해 하였으며 발효길경 에탄올 80% 추출물 200mg/kg 투여군(FPR 200)에서는 135.7회가 관찰되어 41.1%의 소양행동 저해효과를 나타내었다.
5 에 제시하였다. 대조군의 귀부종 증가 억제율을 비교하면 양성대조군인 Betamethasone 0.05% 를 도포한 군에서는 대조군의 귀부종을 69% 억제한 것으로 나타났다. 길경 에탄올 80% 추출물 0.
6 에서와 같이 혈청 내 IgE의 농도는 정상군(Normal)에 비해 난알부민 감작으로 알레르기 면역반응이 유발된 대조군 (Control)에서 현저히 증가되었다. 대조약물인 ketotifen을 10 ㎎/㎏ 투여한 군(Ketotifen 10)에서는 대조군에 비해 IgE의 농도가 32.7% 현저히 감소된 것을 확인할 수 있었다. 길경 에탄올 80% 추출물 500mg/kg 투여군 (PR 500)과 발효 길경 에탄올 80% 추출물 500mg/kg 투여군 (FPR 500) 에서는 각각 18.
8 에 제시한 바와 같이 혈청 내 MDA의 농도는 정상군(Normal)보다 난알부민 감작으로 알레르기 면역반응이 유도된 대조군(Control)에서 현저히 증가하였다. 반면, 길경추출물을 500 ㎎/㎏ 투여한 군(PR 500)과 발효길경 500 ㎎/㎏ 투여한 군(FPR 500) 모두에서 대조군에 비해 감소하였으나 PR 500mg/㎏ 투여한 군보다 FPR 500 ㎎/㎏ 투여한 군에서 MDA 농도가 더 유의적으로 감소하여서 양성대조군인 Ketotifen 10mg/kg 투여군이 대조군에 비해 86.1%를 저해한 효과와 유사한 74.0% 저해효과를 나타내고 있다.
7 에 제시한 바와 같이 혈청 내 SOD의 농도는 정상군(Normal)보다 난알부민 감작으로 알레르기 면역반응이 유도된 대조군(Control)에서 현저히 감소하였다. 반면, 길경추출물을 500 ㎎/㎏ 투여한 군(PR 500)과 발효길경 500 ㎎/㎏ 투여한 군(FPR 500) 모두에서 대조군에 비해 증가하였으나 PR 500mg/㎏ 투여한 군보다 FPR 500 ㎎/㎏ 투여한 군에서 SOD 농도가 더 유의적으로 증가 하였다.
또한 혈관투과성이 증가시켜 진피에 부종이 유발되고 염증세포의 침윤이 증가⁴²⁾된다고 알려져 있다. 본 실험에서도 짧은 시간내에 생쥐의 귀 두께의 현저한 증가를 가져온 것으로 관찰되었다. 아토피 환자의 대표 증상으로서 혈청 IgE 가 높은데, 이는 아토피 환자의 Th-1/Th-2 불균형으로 인해 IgE의 과다분비에 의한 것임⁴³⁾이 보고되고 있으며 항원 자극에 의해 생산된 IgE는 비만세포 또는 호염기구 표면에 있는 Fc receptor와 결합하게 되며, 다시 항원이 들어오게 되면 특이 항체 IgE와 결합함으로써 이들 세포에 탈과립을 일으켜 histamine, leukotriene 등을 방출되어 혈관투과성이 증가되고, 국소 부종 등의 알레르기 반응⁴⁴⁾이 나타는 것이다.
본 연구결과로부터 발효 길경의 80% 에탄올추출물은 알레르기 면역반응 유도 매개물질들의 분비를 감소시키고, 체내의 항산화계를 회복시킴으로써 알레르기로 인한 피부질환 치료에 효과적일 것으로 사료된다.
이에 비해 양성대조군은 귀부종이 현저히 감소된 것을 확인할 수 있었다. 한편, TPA 으로 피부염을 유발한 후 FPR 0.2 의 저용량을 처리한 군(F)은 Control 군(B)에 비해 epidermis의 두께도 현저히 줄었고, 부종이 많이 사라진 것을 관찰할 수 있었다.

후속연구

따라서 특유의 고미를 개선하고 길경 내의 배당체를 미생물을 이용하여 전환을 통하여 약리작용과 안전성을 증진시킬 방법을 찾는 것은 필요한 일이다. 그동안에 길경의 발효에 대한 연구가 다수 진행되어 발효를 통해 관능치를 가진 특이적으로 변형된 형태의 platycodin을 산출한다고 보고^53,54)된 바 있으므로 본 실험에서는 길경 포제의 개념으로 비교적 상용화에 용이한 효모균주를 이용한 생물전환을 통하여 길경의 항산화를 증진시키고 알레르기로 인한 증상을 완화시킬 수 있다고 여겨지므로 앞으로 알레르기를 완화하는 기전이 추가로 연구되어질 필요가 있다고 생각된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	알레르기로 인한 소양행동이 증가된 마우스와 난알부민 감작으로 알레르기 면역반응이 유도된 마우스에서, 발효길경 80% 에탄올추출물의 알레르기 조절효과는 무엇인가?	본 연구결과로부터 발효 길경의 80% 에탄올추출물은 알레르기 면역반응 유도 매개물질들의 분비를 감소시키고, 체내의 항산화계를 회복시킴으로써 알레르기로 인한 피부질환 치료에 효과적일 것으로 사료된다.
	길경은 무엇인가?	길경(桔梗, Platycodi Radix)은 초롱꽃과(桔梗科: Campanulaceae)에 속하는 도라지(Platycodon grandiflorum a. (Jacq) DC.)의 뿌리1)로 특히 중국 및 일본과 함께 우리나라에서만 유일하게 자생하는 식물로 예로부터 식용 및 약용으로 사용2)되어져 왔으며 특히 1∼2년근과는 달리 3년근 이상은 약용으로 중요시되어 왔다3). 에도 "治肺氣喘促下一切氣療咽喉痛及胸脇諸痛下蠱毒"에서 언급4)한바와 같이 길경은 宣肺利咽, 祛痰排膿 등의 효능으로 咳嗽痰多, 胸悶不暢, 咽痛音啞, 肺癰吐膿, 瘡瘍膿成不潰 등의 치료에 이용되어지고 있다5).
	아토피는 면역학적인 측면에서 어떠한가?	아토피는 면역학적인 측면에서 살펴보면, 급성병변의 경우 Th2세포 반응에 의한 IL-4, 5, 10의 증가, Th-1세포에서 분비되는 interferon(IFN-γ)의감소, 비만세포의 증가 등이 병의 발생과 상관있으며, 이후 IL-12에 의해 Th-1세포 반응이 활성화되어 병변의 만성화가 진행 된다17). 아토피피부염에서 IFN-γ와 IL-2를 투여하였을 때 피부염이 호전되었다는 보고는 Th-1/Th-2 불균형이 아토피피부염의 병인에 중요함을 제시해준다18,19).

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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