[논문]한국산과 중국산 산사의 항산화 활성 및 암세포 증식 억제효과

박용현; 이현주; 이재준

doi:10.7856/kjcls.2015.26.1.103

한국산과 중국산 산사의 항산화 활성 및 암세포 증식 억제효과
Effects of Korean and Chinese Crataegi Fructrus on the Antioxidant Activity and Antiproliferation of Cancer Cells 원문보기

한국지역사회생활과학회지 = The Korean Journal of Community Living Science, v.26 no.1, 2015년, pp.103 - 113

박용현 (조선대학교 식품영양학과) , 이현주 (한경대학교 영양조리과학과) , 이재준 (조선대학교 식품영양학과)

Abstract ▼ AI-Helper

This study examines the effects of Korean Crataegi fructrus(KCF) and Chinese Crataegi fructrus(CCF) on the antioxidative activity and antiproliferation of human cancer cells(HCT-116 human colon, Hep G2 human liver, and A549 human lung cancer cells). The total polyphenol and flavonoid contents, and antioxidative index of the Crataegi fructrus ethanol extracts were significantly higher in KCF than in CCF. The DPPH radical-scavenging activity of the KCF ethanol extract was 82.26%(1000 ppm), and that of the CCF ethanol extract was 77.64%. Antiproliferation effects of 80% ethanol extracts of KCF and CCF on human cancer cells(HCT-116, Hep G2 and A549) increased in a dose-dependent manner. Inhibitory effects of KFC on HCT-116 and A549 cells were greater than those of CCF. The results suggest that ethanol extracts of Crataegi fructrus have antioxidative and hyperplasia inhibition effects on human cancer cells.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 연구에서는 한국산과 중국산 산사의 항산화 효과와 암세포 증식 억제효과를 비교분석하여 산사가 다양한 기능성 식품소재로 활용할 수 있는 자료를 제공하고, 소비자들에게 올바른 기능성 식품을 선택할 수 있는 기초자료를 제공하고자 실시하였다.
본 연구는 산지에 따른 산사의 항산화 및 암세포 증식 억제효과를 비교 분석하였다. 80% 에탄올로 추출한 한국산과 중국산 산사 추출물의 총 polyphenol와 총 flavonoid 함량은 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 유의적으로 높은 나타났다.
한국산과 중국산 산사 80% 에탄올 추출물의 간암세포 증식 억제효과를 알아보기 위해 간암(Hep G2) 세포주를 대상으로 MTT assay를 이용한 간암 세포 증식 억제효과를 알아보았다. 간암 세포주에 한국산과 중국산 산사 추출물의 농도별(16.

가설 설정

1)The concentration of all test samples was 1000 ppm (1 mg/mL).

제안 방법

Louis, MO, USA)에 첨가하고, 초음파(SONICS^®, UCX-750, CT, USA)를 이용하여 시료 추출물과 유지가 잘 혼합되도록 하였다. Rancimat의 측정 조건은 산사 에탄올 추출물 각각 3.0 g을 반응 용기에 취하고 증류수 70 mL를 측정 용기에 넣은 후, 110℃에서 air flow rate 20 L/h로 하여 산화안정성을 비교하였다. 합성 항산화제인 BHA와 BHT와 천연 항산화제인 비타민 C는 양성대조군으로 아무 것도 첨가하지 않은 것을 음성대조군으로 비교 실험하였다.
본 실험에 사용한 암세포주는 인체 간암세포인 Hep G2, 인체 대장암세포인 HCT-116, 인체 폐암 세포인 A549로 한국세포주은행(KCLB, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. 각 세포주는 100 Units/mL의 penicillin-streptomycin(GIBCO, Rockville, MD, USA)과 10%의 fetal bovine serum(FBS)이 함유된 RPMI 1640(Rosewell Park Memorial Institute, Hyclone, Logan, UT, USA), DMEM(Dulbeco Minimum Essential Medium, GIBCO, Rockville, MD, USA), MEM(Minimum Essential Medium, GIBCO, Rockville, MD, USA) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO₂ incubator (Model 311, Forma, Waltham, MA, USA)에서 배양하였다. 배양된 각각의 암세포는 일주일에 2~3회 refeeding하고, 6~7일 만에 phosphate buffered saline(PBS)로 세척한 후 0.
간암 세포주에 한국산과 중국산 산사 추출물의 농도별(16.125, 31.25, 62.50, 125, 250, 500, 1000 μg/mL)로 시료 처리를 한 후 각 세포 생존율을 측정한 결과는 Fig. 1과 같다.
대장암(HCT-116) 세포주에 한국산과 중국산 산사 추출물의 농도별(16.125, 31.25, 62.50, 125, 250, 500, 1000 μg/mL)로 시료 처리를 한 후 각 세포 생존율을 측정한 결과는 Fig. 2와 같다.
배양 완료 후 2 mg/mL 농도의 MTT 시약을 well 당 10 μL씩 분주한 다음 37℃, 5% CO2 배양기에서 4시간 후 MTT 시약이 포함된 배지를 제거하고 dimethyl sulfoxide(DMSO) 100 μL를 가한 후 상온에서 발색시키고, ELISA Microplate Reader(ELx808, Bio Tek Inc., Winooski, VT, USA)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
각 세포주는 100 Units/mL의 penicillin-streptomycin(GIBCO, Rockville, MD, USA)과 10%의 fetal bovine serum(FBS)이 함유된 RPMI 1640(Rosewell Park Memorial Institute, Hyclone, Logan, UT, USA), DMEM(Dulbeco Minimum Essential Medium, GIBCO, Rockville, MD, USA), MEM(Minimum Essential Medium, GIBCO, Rockville, MD, USA) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO₂ incubator (Model 311, Forma, Waltham, MA, USA)에서 배양하였다. 배양된 각각의 암세포는 일주일에 2~3회 refeeding하고, 6~7일 만에 phosphate buffered saline(PBS)로 세척한 후 0.05% trypsin-0.02% EDTA로 부착된 세포를 분리해 원심분리 하였다. 그 후 집적된 암세포에 배지를 넣고 피펫으로 암세포가 골고루 분산되도록 잘 혼합하여 75 mL cell culture flask에서 계대 배양하면서 실험하였다.
본 실험에서는 산사 에탄올 추출물의 총 polyphenol 함량은 tannic acid를 기준 물질로 측정하였으며, 그 결과는 Table 1과 같다. 한국산 산사와 중국산 산사 에탄올 추출물의 총 polyphenol 함량은 각각 127.
를 기본 골격으로 하는 담황색 또는 노란색을 띠는 페놀성 화합물의 총칭으로, 항산화, 항염증, 항알레르기, 항균, 항바이러스, 지질저하 작용 및 면역증강 작용 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다(Cha & Cho 2001). 본 연구에서 산사 에탄올 추출물의 총 flavonoid 함량은 rutin을 기준 물질로 측정하였으며, 그 결과는 Table 1과 같다. 한국산 산사와 중국산 산사 에탄올 추출물의 총 flavonoid 함량은 각각 54.
산사 분말 100 g 당 80% ethanol 1500 mL을 첨가한 후 환류냉각관을 부착한 65℃의 heating mantle(Mtops ms-265, Seoul, Korea)에서 3시간씩 3회 추출한 다음 Whatman filter paper(No.2, GE Heathcare, Buckinghamshire, UK)로 여과하였다. 여액을 40℃ 수욕 상에서 rotary vacuum evaporator(EYELA VACUUM NVC-1100, Tokyo, Japan)로 용매를 제거하고 감압․농축한 다음 동결 건조시켜, 시료의 산화를 방지하기 위해 -70℃에 냉동 보관하면서 사용하였다.
산사 에탄올 추출물에 포함된 용매를 완전히 제거한 함량이 600 ppm이 되도록 soybean oil(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA)에 첨가하고, 초음파(SONICS®, UCX-750, CT, USA)를 이용하여 시료 추출물과 유지가 잘 혼합되도록 하였다.
산사 에탄올 추출물의 2,2-diphenyl–1-picrylhydrazyl(DPPH) radical 소거능은 Blois(1958)의 방법을 이용하여 측정하였다. 산사 에탄올 추출물을 각각 1 mL과 0.2 mM DPPH 1 mL을 test tube에 취한 후 혼합하여 37℃에서 30분간 반응시켜 UV- spectro-photometer(Shimadzu UV-1601PC, Kyoto, Japan)를 사용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 활성의 비교를 위하여 양성대조군으로 비타민 C와 합성 항산화제인 BHA와 BHT를 이용하여 동일한 방법으로 측정하였다.
2 mM DPPH 1 mL을 test tube에 취한 후 혼합하여 37℃에서 30분간 반응시켜 UV- spectro-photometer(Shimadzu UV-1601PC, Kyoto, Japan)를 사용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 활성의 비교를 위하여 양성대조군으로 비타민 C와 합성 항산화제인 BHA와 BHT를 이용하여 동일한 방법으로 측정하였다. 산사 에탄올 추출물의 DPPH radical 소거능은 (1-시료첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도) × 100에 의하여 계산하여 나타냈다.
총 flavonoid 함량은 Davis법을 변형한 방법(Chae et al. 2002)에 따라 측정하였다. 산사 에탄올 추출물 각각 1 mL에 diethylene glycol 2 mL를 첨가한 다음 1N NaOH 20 μL을 넣고 37℃ water bath에서 1시간 동안 반응시킨 후 UV- spectrophotometer(Shimadzu UV-1601PC, Kyoto, Japan)로 420 nm에서 흡광도를 측정하였다.
폐암 세포 주에 한국산 및 중국산 산사 에탄올 추출물의 농도별(16.125, 31.25, 62.50, 125, 250, 500, 1000 μ g/mL)로 시료 처리를 한 후 각 세포 생존율을 측정한 결과는 Fig. 3과 같다.
산사 에탄올 추출물 각각 1 mL에 diethylene glycol 2 mL를 첨가한 다음 1N NaOH 20 μL을 넣고 37℃ water bath에서 1시간 동안 반응시킨 후 UV- spectrophotometer(Shimadzu UV-1601PC, Kyoto, Japan)로 420 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준곡선은 rutin을 이용하여 최종 농도가 0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 및 1.0 mg/mL가 되도록 조제하였으며, 이 검량곡선으로부터 시료중의 flavonoid 함량을 구했다.
Test tube에 산사 에탄올 추출물을 각각 1 mL과 Folin reagent 2 mL을 넣은 후 실온에서 3분 간 정치한 다음 10% Na₂CO₃ 2 mL을 첨가하였고, 이를 혼합한 후 30℃에서 40분간 정치하였으며, UV-spectrophotometer(Shimadzu UV-1601PC, Kyoto, Japan)를 사용하여 760 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준곡선은 tannic acid를 이용하여 최종 농도가 0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 mg/mL가 되도록 조제하였으며, 이 검량곡선으로부터 시료 중의 총 polyphenol 함량을 구했다.
0 g을 반응 용기에 취하고 증류수 70 mL를 측정 용기에 넣은 후, 110℃에서 air flow rate 20 L/h로 하여 산화안정성을 비교하였다. 합성 항산화제인 BHA와 BHT와 천연 항산화제인 비타민 C는 양성대조군으로 아무 것도 첨가하지 않은 것을 음성대조군으로 비교 실험하였다. 모든 측정치는 3회 반복 실험하여 얻은 값의 평균치로 표시하였다.

대상 데이터

본 실험에 사용된 산사는 2012년 4월 서울경동 시장에서 구입하여 수세한 후 동결건조기(ED 8512, Ilshin, Yangju, Korea)를 이용하여 -70℃에서 72시간 건조하였다. 동결 건조된 산사는 분쇄기로 20 mesh로 마쇄 후 -70℃에서 냉동보관하면서 시료로 사용하였다.
본 실험에 사용한 암세포주는 인체 간암세포인 Hep G2, 인체 대장암세포인 HCT-116, 인체 폐암 세포인 A549로 한국세포주은행(KCLB, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. 각 세포주는 100 Units/mL의 penicillin-streptomycin(GIBCO, Rockville, MD, USA)과 10%의 fetal bovine serum(FBS)이 함유된 RPMI 1640(Rosewell Park Memorial Institute, Hyclone, Logan, UT, USA), DMEM(Dulbeco Minimum Essential Medium, GIBCO, Rockville, MD, USA), MEM(Minimum Essential Medium, GIBCO, Rockville, MD, USA) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO₂ incubator (Model 311, Forma, Waltham, MA, USA)에서 배양하였다.

데이터처리

모든 실험은 독립적으로 3회 반복 실시하여 얻은 결과로, 본 실험에서 얻어진 결과는 SPSS 18.0 P/C package(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 이용하여 통계 분석하였다. 실험군당 평균±표준오차로 표시하였고, 세 집단 이상의 평균치 분석은 일원 배치 분산분석(one-way analysis of variance)을 한 후 통계적 유의성 검정은 p<0.
합성 항산화제인 BHA와 BHT와 천연 항산화제인 비타민 C는 양성대조군으로 아무 것도 첨가하지 않은 것을 음성대조군으로 비교 실험하였다. 모든 측정치는 3회 반복 실험하여 얻은 값의 평균치로 표시하였다.
실험군당 평균±표준오차로 표시하였고, 세 집단 이상의 평균치 분석은 일원 배치 분산분석(one-way analysis of variance)을 한 후 통계적 유의성 검정은 p<0.05 수준에서 Tukey’s test를 이용하여 상호 검정(Post-Hoc test)하였으며, 두 진단 간 통계적 유의성 검정은 Student’s t-test를 실시하여 유의성을 검정하였다.

이론/모형

암세포 증식 억제효과를 측정하기 위해 Ishiyama et al.(1996)의 방법에 따라 3- (4,5- dimethylthiazol2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT) assay로 실험하였다. 즉, 1×10⁵ cell/well 농도로 96 well plate에 100 μL씩 분주한 후, 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 24시간 배양한 다음 전 배양에 사용된 배지를 제거하고 배지에 일정 농도로 희석된 추출물을 100 μL를 첨가하여 다시 24시간 배양하였다.
산사 에탄올 추출물의 2,2-diphenyl–1-picrylhydrazyl(DPPH) radical 소거능은 Blois(1958)의 방법을 이용하여 측정하였다.
산사 에탄올 추출물의 총 polyphenol 함량은 Folin-Denis법(Folin & Denis 1912)에 따라 측정하였다.
항산화지수(antioxidant index, AI)는 Joo & Kim(2002)의 방법에 의하여 Rancimat(Metrohm Model 679, Herisan, Switzerland)을 이용하여 측정하였다.

성능/효과

한국산과 중국산 산사 에탄올 추출물의 DPPH radical 소거능을 측정한 결과는 Table 2와 같다. 1000 ppm에서 한국산 산사와 중국산 산사 에탄올 추출물의 DPPH radical 소거능은 각각 82.26%와 77.64%로 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 유의적으로 높게 나타났고, 합성항산화제인 BHT와 BHA에 비하여 천연항산화제인 비타민 C의 DPPH radical 소거능이 더 유의적으로 높은 것으로 나타났다. 한국산 산사 에탄올 추출물의 DPPH radical 소거능은 비타민 C에 비해서는 적었으나, BHT 및 BHA와는 비슷한 수준으로 나타났고, 중국산 산사 에탄올 추출물은 BHT 및 BHA 보다 유의적으로 낮게 나타났다.
80% 에탄올로 추출한 한국산과 중국산 산사 추출물의 총 polyphenol와 총 flavonoid 함량은 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 유의적으로 높은 나타났다. 1000 ppm에서 한국산과 중국산 산사 추출물의 DPPH radical 소거능은 각각 82.26%와 77.64%로 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 유의적으로 높은 DPPH radical 소거능을 보였으며, Rancimat으 로 측정한 한국산과 중국산 산사의 항산화지수는 각각 1.32와 1.24로 BHT, BHA 및 비타민 C에 비해서는 낮았으나, 시료를 미첨가한 음성대조군보다는 높은 항산화력을 보였다. 간암(Hep G2), 대장 암(HCT116) 및 폐암(A549)세포에 대한 산사 에탄올 추출물의 암세포 증식 억제효과를 알아본 결과, 한국산 및 중국산 산사 에탄올 추출물의 농도가 증가할수록 모두 암세포의 증식 억제 활성이 농도 의존적으로 증가하는 경향이었다.
본 연구는 산지에 따른 산사의 항산화 및 암세포 증식 억제효과를 비교 분석하였다. 80% 에탄올로 추출한 한국산과 중국산 산사 추출물의 총 polyphenol와 총 flavonoid 함량은 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 유의적으로 높은 나타났다. 1000 ppm에서 한국산과 중국산 산사 추출물의 DPPH radical 소거능은 각각 82.
24로 BHT, BHA 및 비타민 C에 비해서는 낮았으나, 시료를 미첨가한 음성대조군보다는 높은 항산화력을 보였다. 간암(Hep G2), 대장 암(HCT116) 및 폐암(A549)세포에 대한 산사 에탄올 추출물의 암세포 증식 억제효과를 알아본 결과, 한국산 및 중국산 산사 에탄올 추출물의 농도가 증가할수록 모두 암세포의 증식 억제 활성이 농도 의존적으로 증가하는 경향이었다. 산지에 따른 항암활성은 대장암 및 폐암세포에서는 한국산 산사 에탄올 추출물이, 간암세포에 대한 항암활성은 중국산 산사 에탄올 추출물이 더 높은 경향이었다.
같은 장미과인 복분자 열매 추출물이 폐암 세포주인 A549에 대하여 생육 억제 활성을 연구한 결과, 농도 0.5 mg/mL 이상에 서 80% 이상의 생육 억제 활성을 나타내어(Lee et al. 2003), 본 연구에서 산사 추출물 500 μg/mL에서 한국산 55.22%, 중국산 54.28%를 나타내어 복분자 추출물보다는 낮은 항암활성을 갖는 것으로 판단된다.
대부분 한국산 산사 추출물이 중국산 산사 추출물에 비하여 더 낮은 세포 생존율을 보여 한국산 산사의 대장암 세포 증식 억제효과가 더 큰 것으로 나타났으며, 250 μg/mL 농도에서만 유의적인 차이를 보였다.
(2008) 도 비파 부위별 에탄올 추출물의 DPPH radical 소거능은 총 polyphenol 함량이 높게 나타난 잎, 종자, 과육 순으로 높은 전자공여능을 보였다고 보고하였다. 따라서 본 연구결과 산사 추출물의 DPPH radical 소거능 효과가 우수하게 나타난 것은 산사에 다량 함유된 총 polyphenol과 flavonoid 때문인 것으로 생각되며, 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 DPPH radical 소거 활성이 높게 나타난 것은 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 총 polyphenol과 flavonoid 함량 모두 높았기 때문이라 사료된다.
또한 가장 높은 농도인 1000 μg/mL에서 70% 이상의 대장암 및 폐암 세포의 증식 억제활성을 보였고, 간암세포에서는 40% 이상의 증식 억제활성을 보였다.
또한 산사 에탄올 추출물 농도 1000 μg/mL 에서 70% 이상의 대장암 및 폐암세포의 증식 억제 활성을 보였고, 간암세포에서는 40% 이상의 증식 억제활성을 보였다.
따라서 산사의 경우 보통 과피와 함께 말려 이용되기 때문에 더 많은 항산화 성분의 함유로 인하여 높은 항산화효과를 기대해 볼 수 있을 것이라 사료된다. 또한 총 polyphenol 함량이 높을수록 다양한 생리활성을 가져 기능성물질로 유용하게 활용할 수 있다는 점에서, 총 polyphenol 함량이 더 높게 나타난 한국산 산사가 중국산 산사보다 유용할 것으로 판단된다.
Lee(2002)는 매실 에탄올 추출물도 Rancimat으로 측정한 항산화지수가 대조구보다 높게 나타났다고 보고하였다. 본 연구에서 한국산과 중국산 산사의 항산화지수는 비슷한 수준으로 나타났으며, 산사에 다량 함유된 총 polyphenol, flavonoid 등의 항산화 활성을 갖는 성분들에 의하여 유도기간을 연장함으로써 유지의 산패 억제효과를 나타낸 것이라 사료된다.
본 연구에서와 같은 농도인 1000 μg/mL에서 간암세포 억제효과를 비교해 보면 한국산 및 중국산 산사 추출물의 간암 세포 증식 억제율은 각각 41.6%와 62.6%로, 살구 과육 에탄올 추출물 11.4%에 비하여 산사 추출물의 항암활성이 높은 것으로 판단된다.
본 연구에서와 같은 농도인 1000 μg/mL에서 대장암 세포 억제효과를 비교해 보면 한국산 및 중국산 산사 추출물의 대장암세포 증식 억제율은 각각 75.1%와 79.2%로, 오미자 추출물 10%에 비하여 산사 추출물의 항암 활성이 높은 것으로 판단된다.
산 지에 따른 폐암세포 증식 억제효과를 비교해 보면, 31.25 μg/mL 농도 이상에서는 중국산 산사 추출물에 비하여 한국산 산사 추출물에서 더 낮은 세포 생존율을 보였으며 125 μg/mL과 1000 μg/mL 에서만 유의적인 차이를 보였다.
산지에 따른 간암세포 증식 억제효과를 비교해 보면, 대게 중 국산 산사 추출물이 한국산 산사 추출물에 비해 유의적 차이는 없었으나 증식 억제효과가 더 큰 것으로 나타났으며, 1000 μg/mL 농도에서만 유의적인 차이를 보였다.
이상의 결과 산지에 따른 항암활성은 대장암 및 폐암세포에서는 한국산 산사 에탄올 추출물이, 간암세포에 대한 항암활성은 중국산 산사 에탄올 추출물이 더 높은 경향이었다. 또한 가장 높은 농도인 1000 μg/mL에서 70% 이상의 대장암 및 폐암 세포의 증식 억제활성을 보였고, 간암세포에서는 40% 이상의 증식 억제활성을 보였다.
한국산과 중국산 산사 에탄올 추출물의 유지 산화 억제효과를 알아보기 위하여 Rancimat으로 측정한 항산화지수는 Table 3과 같다. 양성대조군으로 사용한 천연항산 화제인 비타민 C의 항산화지수가 가장 높았고, 합성항산화제인 BHT와 BHA는 비타민 C에 비하여 낮게 나타났다. 한국산과 중국산 산사의 항산화지수는 BHT, BHA 및 비타민 C에 비해서는 낮았으나 시료를 미첨가한 음성대조군보다는 유의적으로 높게 나타나 한국산과 중국산 산사의 soybean oil에 대한 산화 억제효과가 있는 것으로 확인되었다.
이상의 결과 산지에 따른 항암활성은 대장암 및 폐암세포에서는 한국산 산사 에탄올 추출물이, 간암세포에 대한 항암활성은 중국산 산사 에탄올 추출물이 더 높은 경향이었다. 또한 가장 높은 농도인 1000 μg/mL에서 70% 이상의 대장암 및 폐암 세포의 증식 억제활성을 보였고, 간암세포에서는 40% 이상의 증식 억제활성을 보였다.
64%로 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 유의적으로 높게 나타났고, 합성항산화제인 BHT와 BHA에 비하여 천연항산화제인 비타민 C의 DPPH radical 소거능이 더 유의적으로 높은 것으로 나타났다. 한국산 산사 에탄올 추출물의 DPPH radical 소거능은 비타민 C에 비해서는 적었으나, BHT 및 BHA와는 비슷한 수준으로 나타났고, 중국산 산사 에탄올 추출물은 BHT 및 BHA 보다 유의적으로 낮게 나타났다. Park et al.
한국산 산사 추출물은 62.50 μg/mL 이상에서, 중국산 산사 추출물은 250 μg/mL 이상의 농도에서 폐암세포의 생존율이 유의적으로 감소하는 경향을 보였으며 가장 높은 농도인 1000 μg/mL에서 생존율이 각각 26.41%와 33.57%로 폐암세포 증식 억제효과가 나타났다.
한국산 산사 추출물은 농도 31.25 μg/mL 이상에서, 중국산 산사 추출물은 500 μg/mL 이상의 농도에서 대장암세포의 생존율이 유의적으로 감소하는 경향을 보였으며 가장 높은 농도인 1000 μg/mL에서 생존율이 각각 24.96%와 20.82%로 대장암세포 증식 억제 효과가 나타났다.
본 연구에서 산사 에탄올 추출물의 총 flavonoid 함량은 rutin을 기준 물질로 측정하였으며, 그 결과는 Table 1과 같다. 한국산 산사와 중국산 산사 에탄올 추출물의 총 flavonoid 함량은 각각 54.05 mg/g과 42.85 mg/g으로, 총 polyphenol 함량이 더 높았던 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 유의적으로 높은 함량을 보였다. Lee et al.
본 실험에서는 산사 에탄올 추출물의 총 polyphenol 함량은 tannic acid를 기준 물질로 측정하였으며, 그 결과는 Table 1과 같다. 한국산 산사와 중국산 산사 에탄올 추출물의 총 polyphenol 함량은 각각 127.00 mg/g과 103.30 mg/g으로, 한국산 산사가 중국산에 비하여 유의적으로 높은 함량을 보였다. 산사와 같은 장미과에 속하는 비파의 경우 과육의 총 polyphenol 함량은 20.
한국산과 중국산 산사 모두 62.50 μg/mL 이하에서는 대조군에 비하여 유의적인 생존율의 변화는 없었고, 125 μg/mL 이상에서는 추출물의 농도가 증가됨에 따라 간암세포의 생존율이 감소하는 경향이었으며, 가장 높은 농도인 1000 μg/mL에서 각각 58.40%와 37.38%의 생존율로 높은 세포 증식 억제율을 보였다.
양성대조군으로 사용한 천연항산 화제인 비타민 C의 항산화지수가 가장 높았고, 합성항산화제인 BHT와 BHA는 비타민 C에 비하여 낮게 나타났다. 한국산과 중국산 산사의 항산화지수는 BHT, BHA 및 비타민 C에 비해서는 낮았으나 시료를 미첨가한 음성대조군보다는 유의적으로 높게 나타나 한국산과 중국산 산사의 soybean oil에 대한 산화 억제효과가 있는 것으로 확인되었다. 산지에 따른 차이를 살펴보면, 한국산 산사가 중국산 산사에 비하여 항산화지수가 다소 높았으나, DPPH radical 소거능의 결과와는 다르게 산지에 따른 유의적 차이가 없었다.

후속연구

2 mg%로, quercitrin이 앵두의 주요 flavonoid라 보고된 바 있다. 본 연구에서 산사에는 높은 함량의 총 polyphenol 및 flavonoid를 함유하고 있는 것으로 나타났으며, 이로 인하여 산사는 천연 항산화제 이외에도 다양한 기능성 식물 소재로 활용 가능할 것으로 생각된다.
또한 가장 높은 농도인 1000 μg/mL에서 70% 이상의 대장암 및 폐암 세포의 증식 억제활성을 보였고, 간암세포에서는 40% 이상의 증식 억제활성을 보였다. 이러한 산사 추출물의 암세포 증식 억제효과는 산사 중의 polyphenol류는 항돌연변이원성이 있으며, polyphenol 물질의 OH기가 발암성을 갖는 불안정한 group과 결합하여 유리기를 소멸시켜 발암성 물질을 불활성화시키는 작용으로 나타난 결과로 판단되며, 향후 더 자세한 연구가 필요하리라 생각된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	산사란 무엇인가?	산사(Crataegi fructus)는 특유의 향긋한 냄새와 단맛과 신맛을 가지고 있는 장미과(Rosaceae)에 속한 산사나무(Crataegus pinnatifida Bunge)의 성숙한 과실로, 우리나라 및 중국, 일본 전역에 자생하고 있다(Jeong et al. 1999).
	산사의 효능은?	1999). 예로부터 산사는 음식의 소화를 돕고, 혈의 소통을 원활하게 하며 어혈을 없애는 효능이 있어 한방에서 자주 사용되고 있는 약재이다. 하지만 최근에는 산사에 다양한 생리활성 물질을 함유하고 있는 건강식품으로 인식되면서 효소나 약용주 등으로 이용되고 있으며, 이에 따라 산사에 관한 생리활성 연구뿐만 아니라 식품에 활용한 연구(Wang et al, 2000; Shin & Yoon 2011)들도 보고되고 있다.
	한국산 산사와 중국산 산사 에탄올 추출물의, 총 polyphenol 함량 시험 비교를 통해 알수 있는 것은?	따라서 산사의 경우 보통 과피와 함께 말려 이용되기 때문에 더 많은 항산화 성분의 함유로 인하여 높은 항산화효과를 기대해 볼 수 있을 것 이라 사료된다. 또한 총 polyphenol 함량이 높을수록 다양한 생리활성을 가져 기능성물질로 유용하게 활용할 수 있다는 점에서, 총 polyphenol 함량이 더 높게 나타난 한국산 산사가 중국산 산사보다 유용할 것으로 판단된다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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