[논문]계지가부자탕(桂枝加附子湯)이 MIA로 유도된 골관절염 Rat 모델에 미치는 영향

원제훈; 우창훈

doi:10.18325/jkmr.2015.25.2.051

계지가부자탕(桂枝加附子湯)이 MIA로 유도된 골관절염 Rat 모델에 미치는 영향
Effects of Gyejigabuja-tang on MIA-induced Osteoarthritis in Rats 원문보기

Journal of Korean Medicine Rehabilitation : JKMR = 한방재활의학과학회지, v.25 no.2, 2015년, pp.51 - 64

원제훈 (대구한의대학교 한의과대학 한방재활의학과교실) , 우창훈 (대구한의대학교 한의과대학 한방재활의학과교실)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives This study was carried out to investigate the effects of Gyejigabuja-tang extracts on the Monosodium iodoacetate (MIA) induced osteoarthritis in rats. Methods Osteoarthritis was induced by injection of MIA into knee joint cavity of rats. Rats are divided into 4 groups (normal, control, positive comparison group, GBT group, each n=5). Normal group was injected by normal saline into knee joint cavity only. Control group was induced for osteoarthritis by MIA and oral medicated with distilled water. Positive comparison group was injected with MIA and taken Joins tablet 25 mg/kg. GBT group was injected with MIA and taken Gyejigabuja-tang extracts 300 mg/kg. Positive comparison group and GBT group were oral medicated for each substance once a day for 4 weeks. ALT, AST and creatinine were evaluated for hepatotoxicity and nephrotoxicity. Hind paw weight bearing ability was examined and inflammatory cytokines (IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$), $PGE_2$, $LTB_4$, osteocalcin and deoxypyridinoline (DPD) within serum were analysed. Knee joint structures were observed by Hematoxylin & Eosin (H&E), Safranin-O staining method. Results 1. Function of liver and kidney was not affected. 2. Hind paw weight bearing ability was significantly improved. 3. IL-$1{\beta}$, IL-6 and TNF-${\alpha}$ in experimental group were significantly decreased compared with control group. 4. $PGE_2$, $LTB_4$, Osteocalcin and DPD in experimental group were decreased compared with control group. 5. In histopathologic observation, injury on synovial membrane and cartilage of experimental group was lesser than control group (H&E, Safranin-O staining). Conclusions Based on these results, it can be suggested that Gyejigabuja-tang has anti-inflammation effects on the MIA-induced osteoarthritis in rats.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

문제 정의

본 연구에서는 桂枝加附子湯이 골관절염 치료에 어떤 유의한 효과를 나타내는지 알아보기 위해 MIA로 골관절염을 유발시킨 Rat에 桂枝加附子湯을 투여하고 뒷다리 체중 부하 검사, 혈액학적 분석, 혈청 내 염증 cytokine 및 매개인자 측정, 병리조직학적 검사를 시행하여 유의한 결과를 얻었기에 이를 보고하는 바이다.

제안 방법

桂枝加附子湯의 골관절염의 치료제로서 유효성을 확인 하고자 뒷다리 체중 부하 검사를 통해 통증 억제 효과를 확인하였고, 골관절염의 병리기전에 관여하는 혈청 내 염증 cytokine (IL-1β, IL-6, TNF-α)과 매개인자인 PGE 2, LTB 4, Osteocalcin, DPD를 측정하였으며, H&E 및 Safranin-O 염색을 통해 관절의 병리조직학적 검사를 시행하여 관절 막과 연골의 손상 정도를 확인하였다.
정상군은 골관절염을 유발하지 않고 아무런 처치 없이 자유식이 하였다. 양성 대조군은 조인스정(J200, SK케미칼, 한국) 25 mg/kg을, 실험군은 桂枝加附子湯 300 mg/kg을 2 ml의 0.5% CMC(Sigma, USA) 용액에 녹여서 투여하였고, 대조군은 0.5% CMC 용액을 동량 투여하였다. 약물 투여는 1일 1회 매일 오전 11시에 금속제 존대를 이용하여 위 내로 강제 경구 투여하였다.

대상 데이터

본 실험에서는 Diethyl pyrocarbonate, Chloroform, Trichloroacetic acid, Isopropanol, Tris-HCl, KCl, MgCl2, D-PBS, 2-Isopropanol, MIA는 Sigma Co. (USA) 제품을 사용하였으며, FBS는 Life Technologies Co. (USA) 제품을 사용하였다. IL-1β, IL-6, TNF-α의 ELISA kit는 R&D system (USA) 제품을 사용하였고 PGE 2 ELISA kit는 Cayman (514010, USA) 제품을, LTB 4 ELISA kit는 Cayman (520111, USA) 제품을 사용하였다.
수컷 7주령의 SD Rat (175~200 g)는 샘타코바이오코리아 Co.(오산, 한국)에서 공급받았고, 동물은 실험 당일까지 고형사료(삼양사료 Co., 한국)와 물을 충분히 공급하고 온도 22±2^oC, 습도 55±15%, 12시간 light-dark cycle의 환경에서 1주간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 본 연구는 ○○대학교 동물실험윤리위원회의 승인을 받아 실시하였다(승인번호: DJUARB2014-010).
에 의거하여 처방하였다. 약재는 옴니허브(대구, 한국)에서 구입하여 정선 후 사용하였고, 그 구성과 분량(1첩)은 다음과 같다(Table I).

데이터처리

0 for Windows를 사용하여 통계처리 하였다. 통계적 유의성은 unpaired student’s t-test를 이용하여 검정하였고 p＜0.05인 것을 유의성이 있다고 판정하였다. 모든 값은 평균±표준편차로 표기하였다.

이론/모형

본 실험에 사용한 桂枝加附子湯은 ｢新古方撰次｣⁹⁾ 에 의거하여 처방하였다. 약재는 옴니허브(대구, 한국)에서 구입하여 정선 후 사용하였고, 그 구성과 분량(1첩)은 다음과 같다(Table I).
약물 투여를 시작한지 1주 지난 시점에 식품의약품안전처의 생약(한약)제제의 효력시험 가이드라인¹³⁾에 근거하여 MIA를 주입, 골관절염을 유발하였다.

성능/효과

, Osteocalcin, DPD 등 매개인자의 생성을 억제하여 항염증 작용을 하는 것을 확인할 수 있었다. 또한 병리조직학적 관찰을 통해 관절막의 손상과 연골의 파괴를 억제하는데 효과가 있음을 확인하였다. 이를 통해 桂枝加附子湯이 골관절염 치료에 효과가 있을 것으로 사료되며 향후 임상에의 활용을 기대할 수 있을 것이다.
이상의 결과를 종합하면 桂枝加附子湯이 MIA로 유도된 골관절염 Rat에서 통증을 감소시키고 혈청 내 염증 cytokine 및 PGE₂, LTB₄, Osteocalcin, DPD 등 매개인자의 생성을 억제하여 항염증 작용을 하는 것을 확인할 수 있었다. 또한 병리조직학적 관찰을 통해 관절막의 손상과 연골의 파괴를 억제하는데 효과가 있음을 확인하였다.

후속연구

위 결과들을 종합해볼 때 골관절염을 억제하는 효능에 있어서 桂枝加附子湯은 조인스정과 그 정도가 비슷하다고 볼 수 있다. 桂枝加附子湯은 300 mg/kg, 조인스정은 25 mg/kg으로 투여용량이 동일하지 않아 정확한 비교는 아니라는 점에서 결과가 제한적이지만 추후 추가적인 연구를 기대해 볼 수 있다.
또한 병리조직학적 관찰을 통해 관절막의 손상과 연골의 파괴를 억제하는데 효과가 있음을 확인하였다. 이를 통해 桂枝加附子湯이 골관절염 치료에 효과가 있을 것으로 사료되며 향후 임상에의 활용을 기대할 수 있을 것이다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	골관절염의 특징은?	골관절염은 성인에게 발생하는 가장 흔한 관절 질환 중 하나로 주로 체중이 부하되는 관절을 침범하는데, 관절 연골의 국소적인 퇴행성 변화, 연골하골의 비대, 주변 골연골부의 과잉 골형성, 관절의 변형 등을 특징으로 하며 반복적인 동통, 관절 강직감 및 점진적인 운동장애 등을 초래한다1).
	桂枝加附子湯이 골관절염에 미치는 효과를 확인하기 위해 MIA로 유도된 골관절염 Rat를 이용하여 뒷다리 체중 부하 검사, 혈청 내 염증 cytokine 및 매개인자 측정, 무릎 관절의 병리조직학적 변화를 관찰하여 얻은 결론은?	1. 간독성 및 신독성은 나타나지 않았다. 2. 뒷다리 체중 부하 검사에서 뚜렷한 통증 감소가 나타났다. 3. 혈청 내 염증 cytokine 중 IL-1β, IL-6는 유의성 있게 감소하였으며, TNF-α는 감소하였으나 유의성은 없었다. 4. 혈청 내 염증 매개인자 PGE2, LTB4, Osteocalcin, DPD가 유의성 있게 감소하였다. 5. 병리조직학적 소견에서 무릎 관절의 관절막의 미란, 염증조직 등이 감소하였고 연골의 손상이 감소하였다.
	桂枝加附子湯이란?	桂枝加附子湯은 ｢傷寒論｣의 처방으로, 太陽病에 發汗過多로 陽虛液脫하여 소변이 곤란하고 四肢痛이 있어 屈伸이 되지 않는 환자에게 사용한다고 기록되어 있다9). 桂枝加附子湯의 연구로는 김 등10) 의 양측난소절제술 후 발생한 갱년기증후군 환자 치험례와 방11) 의 문헌적 고찰 연구 등이 보고되었고, 실험동물에서 桂枝加附子湯 전탕액의 鎭痛, 鎭痙 효과에 대한 연구12) 는 있었지만 桂枝加附子湯이 골관절염에 미치는 영향에 대한 연구는 접하지 못했다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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