[국내논문]나초(糯草) 에탄올추출물이 Human 유래 Jurkat 세포와 THP-1 세포의 알러지 및 염증 사이토카인에 미치는 영향 Effect of 'DaoCao' on the inflammatory cytokines in Human Jurkat cell and THP-1 cell원문보기
Objectives : The aim of this study is to investigate anti-inflammatory activity using various extracts of rice straw (DaoCao) extract (RS).Methods : To investigate the anti-inflammatory effect of RS, we examined the effect of RS on cytokines production on THP-1 cell. Cells were cultured in incubator...
Objectives : The aim of this study is to investigate anti-inflammatory activity using various extracts of rice straw (DaoCao) extract (RS).Methods : To investigate the anti-inflammatory effect of RS, we examined the effect of RS on cytokines production on THP-1 cell. Cells were cultured in incubator (37℃, CO25%, 0.5% FBS-RPMI, 1X106cells/ml). One hour after,Dermatophagoides pteronissinus(Dp., 10 ug/ml) was treated into cell and at 6 hour after, each different concentrations(0.1, 1 and 10 ug/ml) of RS were treated. The cells were incubated for 16 hours and harvest the supernatant. The levels of IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, MCP-1 and TNF-αwere determined using a commercially available ELISA kit.Results : We investigated whether RS has the inhibition of inflammatory response in Jurkat cells and THP-1 cells. RS suppressed secretion of IL-4, IL-5, and TNF-αinduced by house dust mites in Jurkat cells. It showed significant effects for all concentrations. RS suppressed the increased expression of IL-6, IL-8 and MCP-1 after treatment with mite in THP-1 cells. These results suggest that RS may be used as a valuable agent for treating allergic diseases such as atopy due to its anti-inflammatory property.Conclusions : RS showed significant biological activities with anti-inflammatory in the human T cells. These results suggest that RS may be used as a valuable agent for treating allergic diseases such as atopy due to its anti-inflammatory property. In terms of Korean traditional medicine, we expect the results to contribute to building of EBM (Evidence-Based Medicine).
Objectives : The aim of this study is to investigate anti-inflammatory activity using various extracts of rice straw (DaoCao) extract (RS).Methods : To investigate the anti-inflammatory effect of RS, we examined the effect of RS on cytokines production on THP-1 cell. Cells were cultured in incubator (37℃, CO25%, 0.5% FBS-RPMI, 1X106cells/ml). One hour after,Dermatophagoides pteronissinus(Dp., 10 ug/ml) was treated into cell and at 6 hour after, each different concentrations(0.1, 1 and 10 ug/ml) of RS were treated. The cells were incubated for 16 hours and harvest the supernatant. The levels of IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, MCP-1 and TNF-αwere determined using a commercially available ELISA kit.Results : We investigated whether RS has the inhibition of inflammatory response in Jurkat cells and THP-1 cells. RS suppressed secretion of IL-4, IL-5, and TNF-αinduced by house dust mites in Jurkat cells. It showed significant effects for all concentrations. RS suppressed the increased expression of IL-6, IL-8 and MCP-1 after treatment with mite in THP-1 cells. These results suggest that RS may be used as a valuable agent for treating allergic diseases such as atopy due to its anti-inflammatory property.Conclusions : RS showed significant biological activities with anti-inflammatory in the human T cells. These results suggest that RS may be used as a valuable agent for treating allergic diseases such as atopy due to its anti-inflammatory property. In terms of Korean traditional medicine, we expect the results to contribute to building of EBM (Evidence-Based Medicine).
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
문제 정의
THP-1 세포주에서는 단구세포 주화성 인자인 MCP-1의 생성을 농도 의존적으로 유의성 있게 감소 시켰고, IL-6와 IL-8의 생성을 감소시키는 것으로 나타났다. 본 연구는 통해 糯草 추출물이 집먼지 진드기에 의한 알레르기 및 염증 사이토카인의생성을 억제함으로써 아토피 피부염 등의 치료 가능성을 나타내는 것으로 糯草를 이용한 다양한 염증성 질환 등에의 응용 가능성을 시사하고 있다.
본 연구에서는 Dp.에 의해 자극한 human T 세포주 생성의 알레르기 및 염증 사이토카인에 대해 糯草추출물의 항염증 및 알레르기에 대한 연구를 진행한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다.
제안 방법
Jurkat 세포와 THP-1세포는 96well plates에 1×104 cells/well로 분주하여 24시간 동안 배양 한(37℃, CO25%) 후, RS를 각각 1, 5, 10, 20 ㎍/㎖의 농도로 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배양 후, 10ul의 WST solution을 첨가한 후 30분 반응 시킨 후, 450nm에서 흡광도의 변화를 측정하여 대조군에 대한 세포 생존율을 백분율로 표시 하였다.
동안 배양하였다. 배양 후, 10ul의 WST solution을 첨가한 후 30분 반응 시킨 후, 450nm에서 흡광도의 변화를 측정하여 대조군에 대한 세포 생존율을 백분율로 표시 하였다.
세포를 24 well plate에 한 well 당 1×106 (0.5% FBS-RPMI배지) 개의 세포를 넣고 37℃조건에서 1시간 동안 안정시킨 후 한 시간이 지나서 집먼지 진드기 (Dermatophagoides pteronissinus) 분말을 10ug/ml 넣고 배양하다, 6시간 후에 糯草 추출물을 0.1, 1, 10 ㎍/㎖ 넣고 16시간 배양하였다. 배양이 끝난 후 상등액을 취하여 ELISA kit을 이용하여 염증 및 알러지 사이토카인인 TNF-α, IL-4, IL-5, IL-6, Ⅱ.
대상 데이터
본 연구에 사용한 糯草(Rice straw 이하, RS로 표기)는 전남 여수시 율촌면 농가에서 수집한 벼의 줄기와 잎을 건조 후 사용하였다.
from three independent experiments. Statistically significant value was calculated by compared with control group by student's t-test (***:P<0.001).
from three independent experiments. Statistically significant value was calculated by compared with control group by student's t-test (***:P<0.001).
from three independent experiments. Statistically significant value was calculated by compared with control group by student's t-test (**:P<0.01, ***: P<0.001).
이론/모형
Cells treated with 1, 5, 10, or 20 ㎛/㎖ of RS for 24hr. Cell viability was determined using WST assay. The results were presented by the mean ± S.
성능/효과
본 연구에서는 알레르기성 사이토카인 분비를 촉진시키는것으로 보고되어진11-13) 집먼지 진드기 분말로 자극한 인간 T 세포주인 Jukat 세포에서 IL-4, IL-5, TNF-α 와 인간 단구 계 세포주인 THP-1 세포에서 IL-6, IL-8, MCP-1를 측정한 결과 糯草가 이들 알레르기 및 염증 인자의 생성을 억제하는 효과가 있는 것으로 나타났다.
RS에 대한 세포주의 생존율을 확인한 결과 Jurkat 세포주는 대조군을 100±1.0%로 나타냈을 때 1, 5, 10, 20 (㎍/ ㎖) 농도에서 109±3.0%, 105±4.0%, 95±6.0%, 76± 9.0%의 세포 생존율을 나타내었으며, THP-1 세포주는 대조군을 100±3.0로 나타냈을 때 1, 5, 10, 20 (㎍/㎖) 농도에서 107±8.0%, 103±4.0%, 100±3.0%, 93±3.0%의 세포 생존율을 나타내었다(Table 1).
를 처리한 Jurkat 세포에서 IL-4 생성량을 측정한 결과, Dp. 처리된 대조군의 IL-4 생성량이 341.4±15.1 pg/ ㎖로 나타났으며, RS0.1에서 91.3±20.6pg/㎖, RS1에서 70.3±6.8 pg/㎖, RS10에서 21.0±7.9pg/㎖로 모든 농도에서 유의성 있는 (***:P<0.001)감소를 나타내었다 (Fig. 1).
를 처리한 Jurkat 세포에서 IL-5 생성량을 측정한 결과, Dp. 처리된 대조군의 IL-5 생성량이 32.9±0.9 pg/㎖ 로 나타났으며, RS0.1에서 10.0±2.8pg/㎖, RS1에서 9.0 ±1.0pg/㎖, RS10에서 5.3±3.2pg/㎖로 모든 농도에서 유의성 있는 (***:P<0.001)감소를 나타내었다 (Fig. 2).
를 처리한 Jurkat 세포에서 TNF-α 생성량을 측정한 결과, Dp. 처리된 대조군의 TNF-α 생성량이 21.3±1.1 pg/㎖로 나타났으며, RS0.1에서 9.0±1.0pg/㎖, RS1에서 9.0±1.7pg/㎖, RS10에서 6.0±1.0pg/㎖로 모든 농도에서 유의성 있는 (***:P<0.001) 감소를 나타내었다 (Fig. 3).
를 처리한 THP-1 세포에서 MCP-1 생성량을 측정한 결과, Dp. 처리된 대조군의 MCP-1 생성량이 135.0±3.1pg/ ㎖로 나타났으며, RS0.1에서 132.0±2.2pg/㎖, RS1에서 95.0±10.6 pg/㎖, RS10에서 48.0±1.2pg/㎖로 RS1과 RS10에서 각각 유의성 있는 (**:P<0.01, ***:P<0.001) 감소를 나타내었다 (Fig. 4).
를 처리한 THP-1 세포에서 IL-6 생성량을 측정한 결과, Dp. 처리된 대조군의 IL-6 생성량이 166.0±4.6pg/㎖ 로 나타났으며, RS0.1에서 118.7±7.5pg/㎖, RS1에서 113.3±12.2pg/㎖, RS10에서 78.7±17.6pg/㎖로 모든 농도에서 유의성 있는 (**:P<0.01, *** : P<0.001)감소를나타내었다 (Fig. 5).
를 처리한 THP-1 세포에서 IL-8 생성량을 측정한 결과, Dp. 처리된 대조군의 IL-8 생성량이 486.1±6.0 pg/ ㎖로 나타났으며, RS0.1에서 481.1±30.5pg/㎖, RS1에서 455.6±33.0 pg/㎖, RS10에서 371.7±10.7pg/㎖로 RS10 에서 유의성 있는 (**:P<0.01) 감소를 나타내었다 (Fig. 6).
-4, IL-5, TNF-α의 생성을 유의성 있게 감소시켰다. THP-1 세포주에서는 단구세포 주화성 인자인 MCP-1의 생성을 농도 의존적으로 유의성 있게 감소 시켰고, IL-6와 IL-8의 생성을 감소시키는 것으로 나타났다. 본 연구는 통해 糯草 추출물이 집먼지 진드기에 의한 알레르기 및 염증 사이토카인의생성을 억제함으로써 아토피 피부염 등의 치료 가능성을 나타내는 것으로 糯草를 이용한 다양한 염증성 질환 등에의 응용 가능성을 시사하고 있다.
2. Jurkat 세포주에서 대조군에 비해 RS 추출물은 Ⅱ.-5 의 생성을 농도 의존적으로 감소시켰다.
이상의 결과들로 보아 糯草추출물의 염증 및 알레르기에 대한 유의적인 결과는 신규 치료제 및 관련 제품 개발에 기초적 자료를 제공할 수 있을 것으로 보이며, 한의학적 관점에서는 객관적 규명을 통한 EBM 구축에 일조할 수 있을 것으로 사료된다.
참고문헌 (21)
HC. Park, Kim YH, Kim JE, Ko JY, Namgoung SJ, Lee CM, Kim YS, Ro YS. Effect of air purifier on indoor air quality and atopic dermatitis. Allergy Asthma Respir Dis. 2013 ; 1(3) : 248-56.
Lombardero M, Heymann PW, Platts-Mills TA, Fox JW, Chapman MD. Conformational stability of B cell epitopes on group I and group II Dermatophagoides spp. allergens. Effect of thermal and chemical denaturation on the binding of murine IgG and human IgE antibodies. J Immunol. 1990 ; 144(4) : 1353-60.
Leung DY, Schneeberger EE, Siraganian RP, Geha RS, Bhan AK. The presence of IgE on macrophages and dendritic cells infiltrating into the skin lesion of atopic dermatitis. Clin Immunol Immunopathol. 1987 ; 42(3) : 328-37.
Furue M, Saeki H, Furukawa F, Hide M, Ohtsuki M, Katayama I, Sasaki R, Suto H, Takehara K. Guidelines for management of atopic dermatitis. J Dermatol. 2009 ; 36(10) : 563-77.
Tupker RA, De Monchy JG, Coenraads PJ, Homan A, van der Meer JB. Induction of atopic dermatitis by inhalation of house dust mite. J Allergy Clin Immunol. 1996 ; 97(5) : 1064-70.
Ahn JY, Lim IR, Kim JH, Shin MG, Kwon SW, Kim DG, Song BS, Song BJ, Jeong HJ, Hong SH, Kwon DR, Kim YK, Kim DK, Lee YM. Inhibitory Effect of Gamigunggui-tang on Allergic Contact Dermatitis. Korean J Orient Physiol Pathol. 2010 ; 24(2) : 290-5.
Lee JS, Kim IS, Ryu JS, Yun CY. House dust mite, Dermatophagoides pteronissinus increases expression of MCP-1, IL-6, and IL-8 in human monocytic THP-1 cells. Cytokine. 2008 ; 42(3) : 365-71.
Kim IS, Kim EH, Kim DH, Kim JS, Lee JS. Effect of House Dust Mite and CCL2 on S100A8 and S100A9 Expression in Human Monocytes. Biomed Sci Lett. 2013 ; 19(4) : 344-7.
Jung JY, Jung HA. Effect of Phellinus igniarius Quel Extract on the Anti-inflammatory, Anti allergy, Anti-oxidant, Anti-wrinkle reaction. J Korean Orient Med Ophthalmol Otolaryngol Dermatol. 2010 ; 23(3) : 42-65.
Tepper RI, Levinson DA, Stanger BZ, Campos-Torres J, Abbas AK, Leder P. IL-4 induces allergic-like inflammatory disease and alters T cell development in transgenic mice. Cell. 1990 ; 62(3) : 457–67.
Yazdanbakhsh M, van den Biggelaar A, Maizels RM. Th2 responses without atopy: immuno- regulation in chronic helminth infections and reduced allergic disease. Trends Immunol. 2001 ; 22(7) : 372–7.
Nuttall TJ, Hill PB, Bensignor E, Willemse T House dust and forage mite allergens and their role in human and canine atopic dermatitis. Vet Dermatol. 2006 ; 17(4) : 223-35.
AI-Helper
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.