TNBS로 유발된 마우스 대장염모델에서 설파살라진, 육계와 시호 복합 추출물의 항염증 및 세포 자멸 개선효과 Anti-inflammatory and apoptosis improving effects of sulfasalazine and Cinnamomi cortex and Bupleuri radix mixture in TNBS-induced colitis mouse model원문보기
염증성 장 질환에 일반적으로 사용되는 설파살라진은 고용량 및 장기 섭취 후 다양한 부작용이 있다. 본 연구에서는 TNBS로 유발된 마우스 대장염 모델에서 설파살라진, 육계와 시호 복합 추출물의 항염증 및 세포 자멸 개선효과를 확인하고자 하였다. 실험은 정상군, TNBS 대조군, Sulfasalazine (30 mg/kg)군, Sulfasalazine (60 mg/kg)군, Sulfasalazine (30 mg/kg)+육계 및 시호 혼합 (30 mg/kg)군, 총 5개의 군으로 나누었으며, 7일간 경구투여 하였다. 염증 및 세포 자멸 단백질은 western blot을 통해 발현량을 확인하였다. SCB 투여는 염증 단백질 및 세포 자멸과 관련된 단백질의 억제에 유의한 효과를 나타냈다. 이러한 결과로 보아 설파살라진, 육계와 시호 복합 추출물은 염증과 세포 자멸의 억제를 통해 염증성 장 질환을 개선시킬 수 있으며, 염증성 장 질환의 치료 대안 가능 물질로 사료되는 바이다.
염증성 장 질환에 일반적으로 사용되는 설파살라진은 고용량 및 장기 섭취 후 다양한 부작용이 있다. 본 연구에서는 TNBS로 유발된 마우스 대장염 모델에서 설파살라진, 육계와 시호 복합 추출물의 항염증 및 세포 자멸 개선효과를 확인하고자 하였다. 실험은 정상군, TNBS 대조군, Sulfasalazine (30 mg/kg)군, Sulfasalazine (60 mg/kg)군, Sulfasalazine (30 mg/kg)+육계 및 시호 혼합 (30 mg/kg)군, 총 5개의 군으로 나누었으며, 7일간 경구투여 하였다. 염증 및 세포 자멸 단백질은 western blot을 통해 발현량을 확인하였다. SCB 투여는 염증 단백질 및 세포 자멸과 관련된 단백질의 억제에 유의한 효과를 나타냈다. 이러한 결과로 보아 설파살라진, 육계와 시호 복합 추출물은 염증과 세포 자멸의 억제를 통해 염증성 장 질환을 개선시킬 수 있으며, 염증성 장 질환의 치료 대안 가능 물질로 사료되는 바이다.
Inflammatory bowel disease (IBD) is including Crohn's disease and ulcerative colitis. Sulfasalazine commonly used in IBD, possibly has various side effects after high dosage and long term intake. The present study aimed to investigate the sulfasalazine and combination with herbal medicine on 2,4,6-t...
Inflammatory bowel disease (IBD) is including Crohn's disease and ulcerative colitis. Sulfasalazine commonly used in IBD, possibly has various side effects after high dosage and long term intake. The present study aimed to investigate the sulfasalazine and combination with herbal medicine on 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced in mice model. TNBS-induced mice were injected through a flexible catheter 4 cm in length 1.6 mg TNBS. Animals were divided into five groups (n=12): Normal group, TNBS control group, Sulfasalazine (30 mg/kg) group, Sulfasalazine (60 mg/kg) group, Sulfasalazine (30 mg/kg)+Cinnamomi cortex and Bupleuri radix mixture (30 mg/kg) (SCB) group. Administration groups were fed extract during 7 days. The inflammatory, and apoptotic protein levels were determined using western blotting. SCB treatment showed an outstanding effectiveness in counteracting the IBD, as assessed by reduction of body weight loss, down-regulation of pro-inflammatory proteins and cytokines, and by inhibition of proteins related to apoptosis. This is the first report that sulfasalazine and Cinnamomi cortex plus Bupleuri radix mixture improve the severity of experimental IBD through the inhibition of both inflammation and apoptosis. We confirm that the SCB treatment instead of sulfasalazine alone may be promising as an alternative therapeutic plan against IBD, without any evidence of adverse effects.
Inflammatory bowel disease (IBD) is including Crohn's disease and ulcerative colitis. Sulfasalazine commonly used in IBD, possibly has various side effects after high dosage and long term intake. The present study aimed to investigate the sulfasalazine and combination with herbal medicine on 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced in mice model. TNBS-induced mice were injected through a flexible catheter 4 cm in length 1.6 mg TNBS. Animals were divided into five groups (n=12): Normal group, TNBS control group, Sulfasalazine (30 mg/kg) group, Sulfasalazine (60 mg/kg) group, Sulfasalazine (30 mg/kg)+Cinnamomi cortex and Bupleuri radix mixture (30 mg/kg) (SCB) group. Administration groups were fed extract during 7 days. The inflammatory, and apoptotic protein levels were determined using western blotting. SCB treatment showed an outstanding effectiveness in counteracting the IBD, as assessed by reduction of body weight loss, down-regulation of pro-inflammatory proteins and cytokines, and by inhibition of proteins related to apoptosis. This is the first report that sulfasalazine and Cinnamomi cortex plus Bupleuri radix mixture improve the severity of experimental IBD through the inhibition of both inflammation and apoptosis. We confirm that the SCB treatment instead of sulfasalazine alone may be promising as an alternative therapeutic plan against IBD, without any evidence of adverse effects.
본 연구에서는 Sulfasalazine의 독성 및 부작용을 최소화 하면서 효과를 높일 수 있는 치료제로 Sulfasalazine 육계 시호 복합 추출물(SCB)의 가능성을 검토하고자 TNBS로 유발한 마우스 대장염 모델에서 한양방 복합물의 유의한 치료효과를 얻었기에 이를 보고하고자 하는 바이다.
제안 방법
TNBS 유발 후 SCB 투여 8일째 되는 날 희생하여 마우스의 대장조직을 채취한 뒤 염증성 사이토카인인 TNF-α, IL-6, IL-1β의 발현량을 확인하고, chemokine인 MCP-1의 발현량 또한 확인하였다. 염증성 사이토카인은 대장염에서 염증반응의 초기에 수반되는데 TNF-α의 생성증가는 상피세포의 사멸을 유도하여 점막층을 파괴하고 염증반응이 지속적으로 일어날 수 있도록 한다(Choi 등, 2009).
과도한 ROS의 생성은 DNA 및 미토콘드리아의 손상을 야기하여 apoptosis 유발 촉진 신호로 작용한다고 알려져 있다(Han 등, 2011). 본 연구자는 SCB30 복합물 처리에 의한 TNBS 대장염 모델의 apoptosis 유발이 ROS 생성과 연관성이 있는지의 여부를 조사하였다. 산화적 스트레스 바이오마커 중 하나인 ROS를혈청에서 측정한 결과, 정상군(371.
대상 데이터
생후 8주령의 체중 25 g 내외의 수컷 Balb/C mice (오리엔트, 경기도, 대한민국)를 구입하였으며, 동물 사육실의 조건은 conventional system으로 온도 22±2 o C, 습도 50±5%, 명암주기(light-dark cycle)는 12시간 주기로 조절하였다. 사료는 고형사료(조단백질 22.
실험에 사용된 육계(Cinnamomi Cortex)는 전라북도 전주시 약재시장에서 구입하여 시료제조에 사용하였고, 시호(Bupleuri radix)는 본초원(영천시, 경상남도, 대한민국)에서 공급받아 사용하였다.
데이터처리
모든 수치는 평균 ± 표준오차(Mean ± SEM)로 표시하였으며, SPSS (22.0 for Windows program)를 사용하여 one-way analysis of variance (ANOVA)로 유의수준 p-value <0.05에서 검정하였다.
성능/효과
05)은 대조군에 비해 유의성 있게 증가하였다. SCB30 투여군(8.23±0.22, p <0.05)은 대조군에 비해 유의성 있게 대장 길이가 증가하는 것으로 나타나 SCB 복합물이 대장 길이 회복 효과를 유의하게 했음을 확인할 수 있었다(Fig. 1B).
TNBS로 유발된 마우스 대장염 모델에서 SCB를 실험 시작일부터 종료일까지 매일 투여하여 체중의 변화를 측정한 결과, TNBS로 염증을 유발한 대조군은 정상군에 비하여 체중의 변화가 유의성 있게 감소하였는데, 이는 TNBS로 유발된 염증에 의한 것으로 사료되는 바이다. 하지만, SCB를 투여한 군에서는 유의적인 체중의 변화는 보이지 않았다(Table 1).
2). 이러한 유의한 결과는 (Jung 등, 2014) 의 연구와 일치하여 간경화, 간염, 췌장질환, 전신 감염증, 등 여러가지 혈액 질환 등이 원인으로 비장비대가 나타나는데, 대장염으로 인한 비장비대에 SCB가 유의적인 효과를 보이는 것으로 사료된다.
후속연구
60Sulfa 투여군과 SCB30 투여군은 대조군에 비하여 유의성 있는 적은 발현을 보여 SCB 복합물은 60Sulfa 투여군과 비교해 동등 또는 그 이상인 것으로 확인되었다. 본 연구결과를 바탕으로 향후 SCB의 항염효과 증대에 미치는 영향 및 기전에 관한 규명을 통해서 sulfasalazine의 독성 및 부작용을 최소화 하면서 효과를 높일 수 있는 치료제의 개발이 필요할 것으로 사료된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
염증성 장질환의 감염성 기원이라고 추측되는 것들은 무엇인가?
염증성 장질환(Inflammatory bowel disease; IBD)은 과거 서양에서만 주로 발생하는 질환으로 우리나라에서는 매우 드문 질병으로 알려져 왔으나, 최근 우리나라의 식생활이 서구화되면서, 그 환자 수가 급증하고 있다(Kim 등, 2008a; Kim 등, 2013).감염성 기원이라고 추정되는 설사 및 위장염, 크론병, 궤양성 대장염, 기타 장관 감염성 질환으로 병원치료를 받은 횟수가 2004년 3,129,707회에서 2012년 5,218,879회로 급증하고 있다(Kim 등, 2015). IBD는 임상에서는 복통, 설사, 농혈, 점액변이 주요한 증상이며, 병변은 점막 및 점막하층에서 주로 나타나고 병리학적으로 볼 때 궤양이 형성되고 각종의 염증 세포가 생성되는 등의 비특이성 증상이 있다(Cho와 Kim 2009).
염증성 장질환이란 무엇인가?
염증성 장질환(Inflammatory bowel disease; IBD)은 과거 서양에서만 주로 발생하는 질환으로 우리나라에서는 매우 드문 질병으로 알려져 왔으나, 최근 우리나라의 식생활이 서구화되면서, 그 환자 수가 급증하고 있다(Kim 등, 2008a; Kim 등, 2013).감염성 기원이라고 추정되는 설사 및 위장염, 크론병, 궤양성 대장염, 기타 장관 감염성 질환으로 병원치료를 받은 횟수가 2004년 3,129,707회에서 2012년 5,218,879회로 급증하고 있다(Kim 등, 2015).
IBD의 증상 및 병변은 무엇인가?
감염성 기원이라고 추정되는 설사 및 위장염, 크론병, 궤양성 대장염, 기타 장관 감염성 질환으로 병원치료를 받은 횟수가 2004년 3,129,707회에서 2012년 5,218,879회로 급증하고 있다(Kim 등, 2015). IBD는 임상에서는 복통, 설사, 농혈, 점액변이 주요한 증상이며, 병변은 점막 및 점막하층에서 주로 나타나고 병리학적으로 볼 때 궤양이 형성되고 각종의 염증 세포가 생성되는 등의 비특이성 증상이 있다(Cho와 Kim 2009). IBD는 임상적 양상, 형태학적 양상에 따라 궤양성 대장염(Ulcerative colitis)과 크론씨 병(Crohn's disease)으로 구분하고 있다.
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