본 연구를 통해 보관 조건에 따른 사물탕 전탕액의 유효활성 물질 및 안정성과 관련된 특성들의 경시적 변화를 관찰하였다. 사물탕 전탕액의 보관온도(냉동 조건, 냉장 조건, 상온 암 조건, 상온 빛 조건, 고온 조건)를 달리하여, 각각을 0, 15, 30, 90, 180일간 보관하였다. 사물탕 전탕액의 경시적 변화로는 육안적 관찰, 산도, 흡광도, high performance liquid chromatography (HPLC) 분석, 생리활성(tyrosinase 저해 활성), 세균학적 검사 등을 관찰하였다. 그 결과, 사물탕 전탕액의 다양한 보관 기간과 온도에서, 육안적 검사, 산도, 흡광도, HPLC분석, 생리활성에서 경시적으로 큰 변화가 없었으며, 세균학적 검사를 통해서는 세균이 검출되지 않았다. 그러나 그 변화의 차이는 크지 않았지만, 사물탕 전탕액의 보관조건이 악화될수록, 보관기간이 증가할수록 미세한 변화가 관찰되었다. 따라서 6개월 이상 장기간 보관 할 경우, 사물탕 전탕액을 상온 암 조건, 상온 빛 조건, 고온 조건에서 보다 냉동 혹은 냉장 조건이나 가능하면 어두운 곳에서 보관하는 것이 유효성분 및 활성의 변화나 전탕액의 변질을 방지하기 위한 보관법으로 판단되었다.
본 연구를 통해 보관 조건에 따른 사물탕 전탕액의 유효활성 물질 및 안정성과 관련된 특성들의 경시적 변화를 관찰하였다. 사물탕 전탕액의 보관온도(냉동 조건, 냉장 조건, 상온 암 조건, 상온 빛 조건, 고온 조건)를 달리하여, 각각을 0, 15, 30, 90, 180일간 보관하였다. 사물탕 전탕액의 경시적 변화로는 육안적 관찰, 산도, 흡광도, high performance liquid chromatography (HPLC) 분석, 생리활성(tyrosinase 저해 활성), 세균학적 검사 등을 관찰하였다. 그 결과, 사물탕 전탕액의 다양한 보관 기간과 온도에서, 육안적 검사, 산도, 흡광도, HPLC분석, 생리활성에서 경시적으로 큰 변화가 없었으며, 세균학적 검사를 통해서는 세균이 검출되지 않았다. 그러나 그 변화의 차이는 크지 않았지만, 사물탕 전탕액의 보관조건이 악화될수록, 보관기간이 증가할수록 미세한 변화가 관찰되었다. 따라서 6개월 이상 장기간 보관 할 경우, 사물탕 전탕액을 상온 암 조건, 상온 빛 조건, 고온 조건에서 보다 냉동 혹은 냉장 조건이나 가능하면 어두운 곳에서 보관하는 것이 유효성분 및 활성의 변화나 전탕액의 변질을 방지하기 위한 보관법으로 판단되었다.
Consumer interest in the stability of medicinal herb extracts during storage has increased. Although the advent of new technologies has improved preservation conditions, increasing the storage time, there are few studies on the preservation of herb extracts. The purpose of this study was to perform ...
Consumer interest in the stability of medicinal herb extracts during storage has increased. Although the advent of new technologies has improved preservation conditions, increasing the storage time, there are few studies on the preservation of herb extracts. The purpose of this study was to perform microscopic observations of Samul-tang decoctions under various preservation conditions. The storage temperature (a high temperature, room temperature, with or without light, refrigeration, or cryopreservation) and storage time (0, 15, 30, 90, and 180 days) were given to each condition Macroscopic morphology, pH, UV absorption, HPLC, and bacteriological studies were performed to determine microscopic changes in Samul-tang decoctions. The biological activity (tyrosinase inhibition) of the Samul-tang decoctions was also examined. There were no major changes in the indicated observation items when the extracts were stored in each condition. However, at higher storage temperatures and longer storage times, microscopic changes increased, although no bacteria were detected. Furthermore, the higher the storage temperature was and the longer the storage time was, the bigger the change was, despite of minor microscopic changes. Therefore, to maintain the stability of herbal extracts during storage, it is recommended to keep the Samul-tang decoction in the preservation condition of refrigeration and cryopreservation or without light rather than high temperature and room temperature as possible.
Consumer interest in the stability of medicinal herb extracts during storage has increased. Although the advent of new technologies has improved preservation conditions, increasing the storage time, there are few studies on the preservation of herb extracts. The purpose of this study was to perform microscopic observations of Samul-tang decoctions under various preservation conditions. The storage temperature (a high temperature, room temperature, with or without light, refrigeration, or cryopreservation) and storage time (0, 15, 30, 90, and 180 days) were given to each condition Macroscopic morphology, pH, UV absorption, HPLC, and bacteriological studies were performed to determine microscopic changes in Samul-tang decoctions. The biological activity (tyrosinase inhibition) of the Samul-tang decoctions was also examined. There were no major changes in the indicated observation items when the extracts were stored in each condition. However, at higher storage temperatures and longer storage times, microscopic changes increased, although no bacteria were detected. Furthermore, the higher the storage temperature was and the longer the storage time was, the bigger the change was, despite of minor microscopic changes. Therefore, to maintain the stability of herbal extracts during storage, it is recommended to keep the Samul-tang decoction in the preservation condition of refrigeration and cryopreservation or without light rather than high temperature and room temperature as possible.
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문제 정의
적절한 복약 지도를 위해서는 제조된 한약 전탕액이 얼마나 안정적으로 유지되는지에 대한 연구가 필요하다. 이에 본 연구는 한방 의 료기관 다빈도 처방 중 하나인 사물탕 전탕액의 보관기간 및 온도에 따른 안정성을 평가하고자 하였다. 사물탕은 당귀, 천궁, 작약, 숙지황으로 구성되어 있고, 기존에 발표된 국내·외 연구 논문에 따르면 심혈관 기능 및 혈액 순환 기능 개선효과, 빈혈 개선 효과, 뇌조직 및 신경 보호 효과, 면역 조절 효과, 항암 효과, 항 스트레스 효과, 방사선 방호 효과, 운동 피로회 복 효과, 염증 및 알러지 억제 효과, 항산화 효과 등이 있는 것으로 보고되었다[1].
제안 방법
사물탕 전탕액은 파우치에 포장한 상태로 냉동 조건(freezing preservation, -18℃, FP), 냉장 조건(cold preservation, 4℃, CP), 상온 암 조건(room temperature preservation under dark, RTPD), 상온 빛 조건(room temperature preservation under light, RTPL), 가혹조건인 고온 조건(high temperature preservation, 40℃, HTP)에 각각 보관하였다(Table 2). 각 조건에서 0, 15, 30, 90, 180 일이 지난 후, 보관한 전탕액 중 무작위로 파우치 3개를 선택하여 개봉하고, 감압 건조하였다. 건조된 분말은 methanol로 용해하고, 이를 10 mg/ml 농도로 정량 하여 해당 실험에 사용하였다.
호기성 세균 수의 측정을 위해 tryptic soy agar (TSA), 진균 수의 측정을 위해 Sabouraud dextrose agar (SDA), Escherichia coli의 분리를 위해 MacConkey agar (MC agar), Salmonella 선택배지인 triple sugar iron agar (TSI agar), Staphylococcus aureus 선택배지인 mannitol salt agar를 사용하였고, 그 외 Pseudomonas cetrimide agar (PCA), Luria Bertani (LB) 배지를 사용하였다. 각 평판배지에 각 보관 조건의 전탕 액을 100 μl씩 도말 한 후 37℃ 배양기에서 24-30시간 동안 배양하여 세균의 성장여부를 관찰하여 오염도를 판정하였다.
냉동 조건, 냉장 조건, 상온 암 조건, 상온 빛 조건 그리고 고온 조건에서 보관 중인 사물탕 전탕액 파우치를 일정시간 간격(0, 15, 30, 90, 180 일)으로 꺼내어 세균학적 검사를 하였다. tryptic soy agar (TSA), Sabouraud dextrose agar (SDA), MacConkey agar (MC agar), triple sugar iron agar (TSI agar), mannitol salt agar, Pseudomonas cetrimide agar (PCA), Luria Bertani (LB) 배지 등 총 7가지의 배지에서 배양한 결과, 세균은 전혀 검출되지 않았다.
사물탕 전탕액의 투명 파우치를 개봉하지 않은 상태에서 부유물, 침전물의 양상을 관찰하였고 부유물, 침전물의 양상은 임의로 6가지 단계로 분류하였다. 냉동 조건에 있었던 사물탕 전탕액은 상온에서 해동시킨 후 동일한 방법으로 관찰하였다. 부유물, 침전물이 관찰 되지 않음(nothing, -), 침전물이 작은 가루형태로 관찰됨(light, +), 침전물이 미세한(지름 0.
변질은 식품이 미생물, 햇빛, 산소, 화학물질 등의 작용에 의해서 기존성분이 분해되고 맛, 냄새, 색깔 및 외관 등이 변화 되어 식품으로서의 가치를 잃게 되는 현상으로, 주로 세균학 적 검사 및 화학적 검사를 통하여 변질 여부의 판정이 이루어 진다[4]. 따라서 사물탕 전탕액의 보관 기간 및 온도에 따른 화학적 검사 중의 하나로 전탕액의 산도 변화를 관찰하였다. 각 보관조건의 사물탕 전탕액 파우치를 일정기간 간격으로 꺼내어 전탕액의 산도를 측정한 결과, Fig.
4A) 사물 탕 전탕액의 유효한 생리활성을 확인하였다. 따라서 사물탕 전탕액의 보관조건에 따라 무작위로 한 개의 시료를 선택하여, tyrosinase 저해 활성이 50-60%를 나타내는 500 μg/ml 농도로 희석하여 tyrosinase 저해활성의 변화를 관찰하였다(Fig. 4B). 그 결과, 사물탕 전탕액의 보관 0일째 tyrosinase 저해 활 성이 58%이고, 보관기간과 온도에 따라 저해 활성이 34-48% 까지 감소하였으나 유효활성인 tyrosinase 저해활성의 변화는 크지 않았다.
일반 가정환경은 실험실 환경의 보관조건 보다 다양하게 한약 전탕액을 보관하고 있다. 따라서 한약 전탕액 의 장기 보관 시, 안정성에 대한 변화를 조사하기 위해 보관방법을 냉동 조건, 냉장 조건, 상온 암 조건, 상온 빛 조건, 고온 조건으로 총 5가지로 선정하여, 부유물, 침전물 확인, pH, 세균학적 검사를 시행하였고, 또한 한약전탕액의 유효 활성의 변화와 High performance liquid chromatography (HPLC)를 통한 유효 성분의 변화를 조사하였다.
사물탕 전탕액을 현탁하여 채취하고, 13, 000 rpm에서 1분 간 원심 분리하여 얻은 상층액을 UV/VIS 분광광도계(JP/U- 2800, Hitachi, Tokyo, Japan)를 사용하여 254 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 또한 전탕액 상층액을 pH meter (672 pH/Ion meter, Metrohm, Herisau, Switzerland)를 이용하여 산도를 측정하였다.
사물탕 구성약재의 지표물질을 분석하기 위해 photodiode array가 장착된 HPLC/DAD (LC-10A, Shimadzu, Kyoto, Japan)을 사용하였다. Columne ZORBAX Eclipse XDB-C18 (4.
12 g이다. 사물탕 전탕액 파우치 제조를 위하여 사물탕 2.5 제(50 첩) 분량(936 g)의 약재와 약재 무게의 약 10 배 부피에 해당하는 9.5 l의 증류수를 가한 후 초음파 병합 약탕기(Sonimedi, Wonju, Korea)를 사용하여 전탕하였다. 장비 조작은 한방의료기관에서 통상적으로 사용하는 방식과 유사하게 초음파 병합 약탕기 온도를 95℃로 설정하였다[9].
사물탕 전탕액은 파우치에 포장한 상태로 냉동 조건(freezing preservation, -18℃, FP), 냉장 조건(cold preservation, 4℃, CP), 상온 암 조건(room temperature preservation under dark, RTPD), 상온 빛 조건(room temperature preservation under light, RTPL), 가혹조건인 고온 조건(high temperature preservation, 40℃, HTP)에 각각 보관하였다(Table 2). 각 조건에서 0, 15, 30, 90, 180 일이 지난 후, 보관한 전탕액 중 무작위로 파우치 3개를 선택하여 개봉하고, 감압 건조하였다.
사물탕 전탕액의 변질 여부를 판단하기 위하여 육안으로 물리적인 변화를 관찰하였다. 사물탕 전탕액을 개봉하지 않고투명 파우치 상태에서 관찰한 결과, 사물탕 전탕액의 보관기 간과 온도에 따른 변화는 Table 3과 같았다.
이를 근거로 사물탕 전탕액의 부적절한 보관 시 변질을 우려 하여, 사물탕 전탕액의 보관기간 및 온도에 따른 안정성을 평가하기 위하여 육안적 관찰, 산도, 흡광도, high performance liquid chromatography (HPLC) 분석, Mushroom tyrosinase 저해 활성, 세균학적 검사 등을 조사하였다. 사물탕 전탕액의 변질여부, 전탕액 속 전분 노화정도를 파악하기 위해 육안적 관찰, 산도, 흡광도를 관찰하였고, HPLC분석, Mushroom ty- rosinase 저해 활성변화를 통해 유효성분의 변화와 생리활성의 변화를 알아보고자 하였으며, 세균학적 검사를 통해 세균 오염에 대한 안정성을 검사하고자 하였다. 그 결과, 보관조건이 가혹 조건에 가까워질수록 변화가 나타나지만, 그 정도는 미약하다.
사물탕 전탕액의 투명 파우치를 개봉하지 않은 상태에서 부유물, 침전물의 양상을 관찰하였고 부유물, 침전물의 양상은 임의로 6가지 단계로 분류하였다. 냉동 조건에 있었던 사물탕 전탕액은 상온에서 해동시킨 후 동일한 방법으로 관찰하였다.
6×150 mm, 5 μm, Agilent, Santa Clara, USA)을 사용하였고, 시료 주입량은 10 μl로 설정하였다. 이동상은 water (1.0% acetic acid 포함, solvent A), acetonitrile (ACN) (1.0% acetic acid 포함, solvent B)로 구성하였고, 이동상의 조건은 0-40 min 구간에서 5-40% solvent B, 40-70 min 구간에서 40% sol- vent B로 농도 구배를 주어 유속을 0.8 ml/min로 하여 분석하였다. 검출파장은 각 지표물질의 최대 흡수 파장을 적용하여 254 nm로 설정하였다.
제조된 한약 내의 세균의 생장은 보관 기간 및 온도에 큰 영향을 받을 것이라 판단하며, 제조된 한약 내에 세균번식으로 인해 전탕액의 변질의 심각한 문제를 유발할 수도 있다. 이를 근거로 사물탕 전탕액의 부적절한 보관 시 변질을 우려 하여, 사물탕 전탕액의 보관기간 및 온도에 따른 안정성을 평가하기 위하여 육안적 관찰, 산도, 흡광도, high performance liquid chromatography (HPLC) 분석, Mushroom tyrosinase 저해 활성, 세균학적 검사 등을 조사하였다. 사물탕 전탕액의 변질여부, 전탕액 속 전분 노화정도를 파악하기 위해 육안적 관찰, 산도, 흡광도를 관찰하였고, HPLC분석, Mushroom ty- rosinase 저해 활성변화를 통해 유효성분의 변화와 생리활성의 변화를 알아보고자 하였으며, 세균학적 검사를 통해 세균 오염에 대한 안정성을 검사하고자 하였다.
한약재의 중요한 생리활성 성분들은 대부분 254 nm의 자외 선에서 최대흡수 파장을 나타내므로 전탕액의 보관기간과 온도에 따른 유효성분의 경시적 변화를 관찰하기 위해 254 nm에서 흡광도를 측정하였다(Fig. 2B). 각 보관온도에서 0, 15, 30, 90, 180일간 보관한 시료를 3배 희석하여 흡광도를 측정한 결과, 육안적 관찰 결과와 유사하게 보관기간이 길어질수록 흡광도가 서서히 증가하는 양상은 보였으나, 0과 180일에서의 흡광도를 비교해 볼 때 유의적인 변화는 없었다.
대상 데이터
사물탕 구성약재의 지표물질을 분석하기 위해 photodiode array가 장착된 HPLC/DAD (LC-10A, Shimadzu, Kyoto, Japan)을 사용하였다. Columne ZORBAX Eclipse XDB-C18 (4.6×150 mm, 5 μm, Agilent, Santa Clara, USA)을 사용하였고, 시료 주입량은 10 μl로 설정하였다. 이동상은 water (1.
각 표준물질의 순도는 98% 이상이었다. HPLC용 용매는 water, acetonitrile (ACN)은 JT Baker Inc. (Phillipsburg, NJ, USA)를 통해 구입하였고, mush- room tyrosinase, kojic acid 등은 Sigma에서 구입하였다.
8 ml/min로 하여 분석하였다. 검출파장은 각 지표물질의 최대 흡수 파장을 적용하여 254 nm로 설정하였다.
본 실험에 사용된 사물탕 전탕액의 구성 원료 한약재인 당 귀(Angelicae gigas Nakai, Radix), 천궁(Cnidium officinale Makino, Rhizoma), 백작약(Paeonia lactiflora Pall, Radix), 숙지황(Rehmannia glutinosa Liboschitz var. purpurea Makino, Radix)은 화림 제약(Busan, Korea)에서 구입하여 사용하였다. 표준물질인 nodakenine Nagara Science Co.
저자는 국내외 10대 한약재 중 최근에도 여전히 주문량이 많은 한약재인 당귀, 천궁을 기본으로 하는 한약 전탕액인 사물탕을 선정하였다. 사물탕은 보혈을 위한 처방으로서 어지러움, 창백함 등이 대표 증상인 혈허증을 치료하는데 주로 사용 된다[1, 15].
장비 조작은 한방의료기관에서 통상적으로 사용하는 방식과 유사하게 초음파 병합 약탕기 온도를 95℃로 설정하였다[9]. 전탕액은 자유조절 롤포장기(MH 205 Tower, Kyungseo Machine Co., Incheon, Korea)를 사용하여 파우치 팩으로 포장하였다.
호기성 세균 수의 측정을 위해 tryptic soy agar (TSA), 진균 수의 측정을 위해 Sabouraud dextrose agar (SDA), Escherichia coli의 분리를 위해 MacConkey agar (MC agar), Salmonella 선택배지인 triple sugar iron agar (TSI agar), Staphylococcus aureus 선택배지인 mannitol salt agar를 사용하였고, 그 외 Pseudomonas cetrimide agar (PCA), Luria Bertani (LB) 배지를 사용하였다. 각 평판배지에 각 보관 조건의 전탕 액을 100 μl씩 도말 한 후 37℃ 배양기에서 24-30시간 동안 배양하여 세균의 성장여부를 관찰하여 오염도를 판정하였다.
데이터처리
모든 실험의 결과는 3번 반복 수행하여 얻어진 것으로, 통계 분석은 ANOVA에 의해 분석하여 mean±S.D로 표시하였고, 통계적 유의성은 p≤0.05 이하 일 때 유의한 차이가 있는 것으로 판정하였다.
이론/모형
Tyrosinase 활성은 Lee의 방법[5]에 따라 L-tyrosine이 ty- rosinase에 의해 L-3, 4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) quinone으로 전환되는 것을 측정하였다[16]. 1 mM L-tyrosine 과 50 mM sodium phosphate buffer (pH 6.
성능/효과
냉동 조건, 냉장 조건, 상온 암 조건, 상온 빛 조건 그리고 고온 조건에서 보관 중인 사물탕 전탕액 파우치를 일정시간 간격(0, 15, 30, 90, 180 일)으로 꺼내어 세균학적 검사를 하였다. tryptic soy agar (TSA), Sabouraud dextrose agar (SDA), MacConkey agar (MC agar), triple sugar iron agar (TSI agar), mannitol salt agar, Pseudomonas cetrimide agar (PCA), Luria Bertani (LB) 배지 등 총 7가지의 배지에서 배양한 결과, 세균은 전혀 검출되지 않았다. 따라서, 사물탕 전탕액을 파우치 상태 여러 조건에서 장시간 보관한 경우, 세균의 오염에 관한 문제는 발생하지 않았다.
2B). 각 보관온도에서 0, 15, 30, 90, 180일간 보관한 시료를 3배 희석하여 흡광도를 측정한 결과, 육안적 관찰 결과와 유사하게 보관기간이 길어질수록 흡광도가 서서히 증가하는 양상은 보였으나, 0과 180일에서의 흡광도를 비교해 볼 때 유의적인 변화는 없었다.
그 결과, 보관조건이 가혹 조건에 가까워질수록 변화가 나타나지만, 그 정도는 미약하다. 결론적으로 사물탕 전탕액을 복용하기 전에는 냉동 조건, 냉장 조건, 상온 암 조건에서 보관하는 것이 가장 바람직한 것으로 판단되었다. 또한 가혹 조건인 고온 조건을 제외한 다른 모든 조건에서 보관한 사물탕은 30일 까지는 변화가 없었으므로, 장기간 보관 시는 냉동, 냉장 보관을 권장하고, 30일 이내는 가혹조건에서의 보관만 피한다면 사물탕의 약리활성 이나 유효 성분에는 크게 영향을 미치지 않을 것으로 판단되었다.
4B). 그 결과, 사물탕 전탕액의 보관 0일째 tyrosinase 저해 활 성이 58%이고, 보관기간과 온도에 따라 저해 활성이 34-48% 까지 감소하였으나 유효활성인 tyrosinase 저해활성의 변화는 크지 않았다. 냉동 조건에서 보관된 사물탕 전탕액의 경우, 보관 기간이 길어져도 90일까지는 유효 생리활성인 tyrosinase 의 저해 활성이 일정하게 유지되었고, 냉장에서 보관하는 경우, 30일까지 저해 활성이 일정하게 유지되었다.
3B)를 비교한 결과, ferulic acid 함량의 변화가 관찰되었으나 전체적으로 지표물질이나 기타 성분의 변화는 없었다. 그러나 지표물질 nodake- nin과 ferulic acid의 함량 비율을 비교한 결과, 냉동, 냉장 조건 에서 보관하는 경우를 제외하고 보관기간이 길어질수록 no- dakenin과 ferulic acid의 비율이 감소하였다(Fig. 3C). 따라서 유효성분의 변화를 최소한으로 방지하기 위해서는 장기간 보 관 시, 저온인 냉동, 냉장 조건에서 보관하는 것이 좋을 것이라 사료된다.
49%로 높았다[2, 3, 6, 14]. 기존의 결과를 근거로, 사물탕 전탕액도 mushroom tyrosinase 저해 활성이 있을 것으로 판단되어 보관 0일의 사물탕 전탕액 중 무작위로 3개를 추출하여 tyrosinase 저해 활성을 측정한 결과, 3개의 시료 모두 유사한 저해 활성을 보여(Fig. 4A) 사물 탕 전탕액의 유효한 생리활성을 확인하였다. 따라서 사물탕 전탕액의 보관조건에 따라 무작위로 한 개의 시료를 선택하여, tyrosinase 저해 활성이 50-60%를 나타내는 500 μg/ml 농도로 희석하여 tyrosinase 저해활성의 변화를 관찰하였다(Fig.
그 결과, 사물탕 전탕액의 보관 0일째 tyrosinase 저해 활 성이 58%이고, 보관기간과 온도에 따라 저해 활성이 34-48% 까지 감소하였으나 유효활성인 tyrosinase 저해활성의 변화는 크지 않았다. 냉동 조건에서 보관된 사물탕 전탕액의 경우, 보관 기간이 길어져도 90일까지는 유효 생리활성인 tyrosinase 의 저해 활성이 일정하게 유지되었고, 냉장에서 보관하는 경우, 30일까지 저해 활성이 일정하게 유지되었다. 반면에 사물탕 전탕액을 고온 조건, 상온 빛 조건, 상온 암 조건에서 보관한 경우, tyrosinase 저해 활성의 변화가 관찰되었다.
반면에 사물탕 전탕액을 고온 조건, 상온 빛 조건, 상온 암 조건에서 보관한 경우, tyrosinase 저해 활성의 변화가 관찰되었다. 따라서 사물탕 전탕액의 보관기간 및 온도에 따른 유의적 변화는 크게 나타나지 않았지만, 사물탕의 장기간 보관 시, 예상되는 유효 생리활성, 침전물 등의 변화를 고려할 때 고온 조건, 상온 빛 조건, 상온 암 조건에서보다 냉동 혹은 냉장 조건에서 보관 하는 것이 바람직할 것으로 판단된다.
결론적으로 사물탕 전탕액을 복용하기 전에는 냉동 조건, 냉장 조건, 상온 암 조건에서 보관하는 것이 가장 바람직한 것으로 판단되었다. 또한 가혹 조건인 고온 조건을 제외한 다른 모든 조건에서 보관한 사물탕은 30일 까지는 변화가 없었으므로, 장기간 보관 시는 냉동, 냉장 보관을 권장하고, 30일 이내는 가혹조건에서의 보관만 피한다면 사물탕의 약리활성 이나 유효 성분에는 크게 영향을 미치지 않을 것으로 판단되었다. 또한 사물탕의 파우치 형태는 180일까지 세균이 검출 되지 않아 안정한 복용형태라 사료되었다.
또한 가혹 조건인 고온 조건을 제외한 다른 모든 조건에서 보관한 사물탕은 30일 까지는 변화가 없었으므로, 장기간 보관 시는 냉동, 냉장 보관을 권장하고, 30일 이내는 가혹조건에서의 보관만 피한다면 사물탕의 약리활성 이나 유효 성분에는 크게 영향을 미치지 않을 것으로 판단되었다. 또한 사물탕의 파우치 형태는 180일까지 세균이 검출 되지 않아 안정한 복용형태라 사료되었다. 향후 사물탕 이외의 여러 한약처방 탕액 파우치에 대해 보관 기간 및 온도 조건을 달리한 실험을 통하여 전탕액 파우치에 대한 적절한 보관 기간 및 온도를 정하여야 할 것이다.
사물탕 전탕액을 개봉하지 않고투명 파우치 상태에서 관찰한 결과, 사물탕 전탕액의 보관기 간과 온도에 따른 변화는 Table 3과 같았다. 보관 기간이 길어 질수록 부유물, 침전물의 양이 증가하였고, 보관기간이 동일한 경우 고온, 상온 빛 조건에서 보관한 사물탕의 부유물, 침전 물이 더 많았다. 하지만, 전탕액을 180일 동안 냉동 보관했을 경우, 부유물, 침전물이 적게 관찰되었다.
냉동 조건에 있었던 사물탕 전탕액은 상온에서 해동시킨 후 동일한 방법으로 관찰하였다. 부유물, 침전물이 관찰 되지 않음(nothing, -), 침전물이 작은 가루형태로 관찰됨(light, +), 침전물이 미세한(지름 0.1~ 1 cm 정도) 형태로 관찰됨(semi light, ++), ++와 입자크기는 유사하지만, 그 수가 배로 증가된 것이 관찰됨(medium, +++),바닥에 가라앉은 침전물의 너비 2 cm 정도(heavy, ++++), 바닥에 가라앉은 침전물의 너비 3 cm 정도(strong heavy, +++++) 로 정의하였다.
곽향정기 산은 3개월간 상온 보관하여, 항염증 및 항산화 활성의 변화를 평가했을 때, 2개월 이내 복용해야 약효의 소실이 없음이 증명 되었다[10]. 사군자탕과 사물탕 전탕액을 5℃와 20℃에서 10, 20, 30일간 보관한 후, 세균 수 측정 및 한약전탕액의 변질상태를 확인한 결과[4], 30일간 보관한 사물탕 전탕액에서 세균학적 검사상 문제가 없었으며, 휘발성 염기질소, 트리메칠아민, 과산화물가 및 thiobarbituric acid value 등의 변화도 없었다.
4 분에 ferulic acid (천궁)이 검출되었다[1]. 사물탕 전탕액의 지표물질로 사용된 4가지를 중심으로 성분의 변화를 관찰한 결과, 전탕액의 제조과정에서의 유효 성분 변화는 크게 나타나지 않았다. 전탕액 보관 0 일의 경우(Fig.
180일 고온 조건 보관 시에는 보관기간이 지남에 따라 산도가 다소 감소하는 경향을 보였으나 큰 변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 보관 방법 및 기간이 사물탕 전탕액의 pH에는 큰 영향을 미치지 않을 것으로 사료 된다. 하지만, 180일 이상 장기간 보관 시에는 사물탕 전탕액 내의 유효성분의 변화 또는 변질을 방지하기 위해서는 냉동 조건, 냉장 조건이나 상온 암 조건에서 보관하는 것이 바람직 할 것으로 생각된다.
2와 같았다. 최초 전탕액의 산도는 pH 5.28이었으나 보관 기간에 따라 산도가 점차 감소하여 180일 후, 모든 보관 조건에서의 산도는 pH 4.85-5.21로 나타났다. 180일 고온 조건 보관 시에는 보관기간이 지남에 따라 산도가 다소 감소하는 경향을 보였으나 큰 변화는 관찰되지 않았다.
한약은 변증, 치법, 약물, 방제의 과정을 거쳐 처방되는데 [15] 처방 중에서도 많이 사용되는 약물들을 중심으로 전탕액의 탕전 및 보관에 대한 연구가 진행되었다. 평위산의 보관 기간 및 온도에 따른 항염증 효과를 비교한 결과, 냉동 및 냉장 조건에서 6개월까지 항염증 효능이 유지되었으나, 상온 보관 에서는 그렇지 않은 것으로 확인되었으며[7], 진피의 지표성분 인 hesperidin을 8개월 보관 후 변화 분석을 통해 상온보관 보다는 냉장 보관이 안정한 방법임이 입증되었다[6]. 곽향정기 산은 3개월간 상온 보관하여, 항염증 및 항산화 활성의 변화를 평가했을 때, 2개월 이내 복용해야 약효의 소실이 없음이 증명 되었다[10].
후속연구
보관조건이 악화될 수록 부유물, 침전물의 양이 증가한 이유는 추출 초기와는 달리 보관하면서 사물탕에 포함된 구성 성분의 용해도가 감소하기 때문으로 생각된다. 육안적 검사는 적은 비용, 시간, 노력으로 물리적 변화를 알 수 있지만 객관성이 결여될 수 있으므로 화학적 변화, 세균학적 검사 등의 추가 실험결과를 포함하여 변질 여부를 판단해야 할 것으로 사료된다.
또한 사물탕의 파우치 형태는 180일까지 세균이 검출 되지 않아 안정한 복용형태라 사료되었다. 향후 사물탕 이외의 여러 한약처방 탕액 파우치에 대해 보관 기간 및 온도 조건을 달리한 실험을 통하여 전탕액 파우치에 대한 적절한 보관 기간 및 온도를 정하여야 할 것이다.
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