[논문]제주 자생 다정큼나무 및 참가시나무의 항산화 효과

김혜란; 박규남; 정보경; 윤원종; 정용환; 장경수

doi:10.12925/jkocs.2016.33.1.41

제주 자생 다정큼나무 및 참가시나무의 항산화 효과
Antioxidative Effects of Rhaphiolepis indica and Quercus salicina from Jeju 원문보기

한국유화학회지 = Journal of oil & applied science, v.33 no.1, 2016년, pp.41 - 50

김혜란 (부산가톨릭대학교 임상병리학과) , 박규남 (부산가톨릭대학교 임상병리학과) , 정보경 (부산가톨릭대학교 임상병리학과) , 윤원종 (제주테크노파크 생물종다양성연구소) , 정용환 (제주테크노파크 생물종다양성연구소) , 장경수 (부산가톨릭대학교 임상병리학과)

초록
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본 연구에서는 제주 천연 물질인 다정큼나무와 참가시나무 잎 추출물에서 항산화 효과를 확인하였다. 두 추출물에 대한 항산화 효과 및 세포독성 효과를 농도별, 시간별로 비교 분석한 바, 다정큼나무와 참가시나무 추출물에서 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었다. 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 5 mg/mL 농도에서 89.93%, 92.41%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내어 다정큼나무보다 참가시나무 추출물에서 더 높은 항산화 효과를 확인하였다. 총 페놀 함량은 다정큼나무 추출물에서는 65.20 mg GAE/g, 참가시나무 추출물에서는 85.20 mg GAE/g 으로 참가시나무에서 더 높은 총 페놀 함량을 나타내며 DPPH 라디칼 소거능과 상관성 있는 결과를 확인하였다. 산화적 스트레스에 의한 간세포(HepG2) 및 폐세포(A549) 보호효과는 두 가지 추출물 모두 약 10%의 세포 보호능을 나타내며 다소 낮은 효과를 나타내었다. 추출물의 폐세포에 대한 독성율은 $100{\mu}g/mL$ 이하의 농도에서 독성을 나타내지 않았다. 본 연구 결과는 다정큼나무 및 참가시나무 추출물을 이용한 항산화 물질 개발을 위한 기초자료로 활용될 것이다.

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, the extracts from the leaves of Rhaphiolepis indica(R. indica) and Quercus salicina(Q. salicina) confirmed antioxidative effects. The antioxidative and cytotoxic effects of the two extracts were analyzed according to varied concentrations and time. The extracts of R. indica and Q. salicina showed dose-dependent DPPH radical scavenging activities. The extracts of R. indica and Q. salicina at concentrations of 5 mg/mL showed DPPH radical scavenging activities at 89.93 and 92.41%. Therefore, Q. salicina were confirmed to have higher antioxidative effects than R. indica. Total phenolic contents were 65.20 mg GAE/g for R. indica and 85.20 mg GAE/g for Q. salicina. The result that Q. salicina have higher total phenolic contents than R. indica suggested a correlation between total phenolic contents and DPPH radical scavenging activity. The cell protective effects of HepG2 and A549 cells under oxidative stress, both the extracts showed relatively low cell protective effects at around 10%. The Cytotoxic effects of A549 Cells did not show cytotoxicity at concentrations of $100{\mu}g/mL$ or below. The results of this study are likely to be used as basic data to develop antioxidants using the extract of R. indica and Q. salicina.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에 앞서 제주도에 자생하는 600여 종의 식물자원의 추출물을 이용하여 항산화 효과를 스크린한 결과, 다정큼나무(Rhaphiolepis indica)와 참가시나무(Quercus salicina) 잎 추출물에서 항산화 효과를 확인하였다. 그리하여 항산화 효과가 있는 다정큼나무와 참가시나무 추출물을 이용하여 항산화 효과를 비교하고 세포 독성에 대하여 연구하였다. 다정큼나무는 장미과(Rosaceae)에 속하는 상록 관목으로, 장미과는 경제적으로 중요한 과일나무인 딸기, 사과, 살구, 체리, 복숭아, 배, 자두 등과 같은 과일 작물을 포함한 3000개 이상의 종을 가진다[14].
참가시나무에 대한 연구로는 참가시나무의 활성물질을 이용한 항산화 효과[18]에 대한 연구가 일부 보고 되었다. 본 연구에서는 연구가 미비한 제주 상록관목인 다정큼나무와 참가시나무를 이용하여 DPPH 라디칼 소거능 및 총 페놀 함량으로 물질 자체의 항산화 효과를 밝히고 항산화 관련 효소를 생산하는 간세포 및 폐세포에 추출물을 처리한 후, H₂O₂에 의한 산화적 스트레스로부터 세포 보호효과를 농도별로 측정하였으며, 간세포와 폐 세포를 이용하여 세포 독성을 나타내는지에 농도별, 시간별로 측정하여 천연 물질을 이용한 천연 항산화제 개발을 위한 기초자료로 활용하고자 본 실험을 수행하였다.
본 연구에서는 제주 자생식물인 다정큼나무와 참가시나무 잎 추출물을 이용하여 항산화 효과 및 세포 독성효과를 확인하였다. 다정큼나무와 참가시나무 추출물에서 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거능이 증가 하는 것을 확인하였고, 총 페놀 함량과 연관성 있는 결과를 나타내었다.

제안 방법

DPPH 라디칼 소거능이 총 페놀 함량과 연관성이 있는지 알아보기 위해 추출물의 총 페놀 함량을 측정하였다. 다정큼나무, 참가시나무 추출물의 총 페놀 함량은 gallic acid를 기준물질로 측정하였으며, 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 총 페놀 함량은 각각 65.
MTT assay를 통해 HepG2와 A549에 대한 다정큼나무 및 참가시나무 추출물의 세포 독성효과를 확인하였다. 세포를 1 X 10⁵개/mL 농도로 조정하여 96 well에 100 µL 분주 후 37℃, 5% CO₂에서 24시간 배양한다.
간세포에서 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 농도별 세포 독성효과를 측정하기 위해 HepG2를 이용하여 두 추출물을 농도별로 처리하여 48시간 및 72시간 동안 세포 독성을 측정하였다. 간세포에서 다정큼나무 추출물은 1, 10, 100 ㎍/mL 농도에서 48시간 동안 세포 독성을 확인 할 수 없었고 200 ㎍/mL 에서 89.
간세포에서 두 추출물의 산화적 스트레스에 대한 항산화효과를 측정하기 위해, HepG2에 H₂O₂를 처리하여 산화적 스트레스를 유발한 후 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 세포 보호효과를 측정하였다. 다정큼나무 추출물의 0.
65 mL), 100 μL Folin-Denis reagent를 혼합하여 5분 뒤 1 N Na₂CO₃ 200μ L를 추가하여 2시간 동안 실온에서 반응시킨다. 그리고 750 nm에서 Spectronic Genesys 5(Milton Roy Company, USA)를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 gallic acid를 사용하였으며 시료와 동일한 방법으로 분석 후 얻은 표준곡선으로부터 추출물의 총 페놀 함량 값을 gallic acid equivalents per gram Extracts sample(mg GAE/g)로 나타내었다.
배지를 제거하고 DMSO를 200 µL 분주한 뒤 560 nm에서 Biotrak Ⅱ Plate reader(Amersham Life Science, UK)를 이용하여 흡광도를 측정하였다.
배지를 제거하고 dimethyl sulfoxide(DMSO)를 200 µL 분주한 뒤 560 nm에서 Biotrak Ⅱ Plate reader(Amersham Life Science, UK)를 이용하여 흡광도를 측정하였다.
추출물의 전자 공여능은 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)의 환원력을 이용하여 측정 하였다[19]. 각각의 용매에 0.
폐세포에서 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 농도별 세포 독성효과를 측정하기 위해 A549를 이용하여 두 추출물을 농도별로 처리하여 48시간 및 72시간 동안 세포 독성을 측정하였다. 폐세포에서 다정큼나무 추출물은 1, 10, 100 ㎍/mL 농도에서 48시간 동안 세포 독성을 확인 할 수 없었고 200 ㎍/mL 에서 93.
폐세포에서 두 추출물의 산화적 스트레스에 대한 항산화효과를 측정하기 위해, A549에 H₂O₂를 처리하여 산화적 스트레스를 유발한 후 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 세포 보호효과를 측정하였다. 다정큼나무 추출물의 0.
그리고 750 nm에서 Spectronic Genesys 5(Milton Roy Company, USA)를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 gallic acid를 사용하였으며 시료와 동일한 방법으로 분석 후 얻은 표준곡선으로부터 추출물의 총 페놀 함량 값을 gallic acid equivalents per gram Extracts sample(mg GAE/g)로 나타내었다. 모든 측정값은 3번 반복 실험하여 측정한 평균값과 표준편차 (mean ± SD)로 나타내었다.

대상 데이터

채집한 시료는 증류수로 2~3회 수세한 뒤 물기를 제거한 후 2주 동안 음건하였으며, 마쇄기로 분쇄하여 추출용 시료로 사용하였다. Ethanol(EtOH)을 이용하여 10 mg/mL 농도로 용해하여 추출물을 실험에 사용하였고, 양성 대조군으로 Quercetin(SigmaAldrich, USA)을 사용하였다.
본 실험에 사용한 세포주는 human liver carcinoma cell line인 HepG2와 human lung carcinoma cell line인 A549로 한국세포주은행 (KCLB, Korea)에서 분양 받아 사용하였다. 세포배양용 배지로는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(Hyclone, USA)를 사용하였으며, 0.
본 연구는 2015년도 Brain Busan 21 사업의 지원으로 수행되었다.
세포배양용 배지로는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(Hyclone, USA)를 사용하였으며, 0.1mM non-essential amino acids(GIBCO, USA), 10% fetal bovine serum(Hyclone, USA) 과 항생제인 penicillin-streptomycin(GIBCO, USA)을 첨가하여 사용하여 37℃, 5% CO2에서 배양하였다.
2.1 추출물 제조

제주도에 자생하고 있는 다정큼나무 (Rhaphiolepis indica) 잎을 2006년 3월경에 채집하였고, 참가시나무(Quercus salicina) 잎은 2006년 2월경에 채집하였다. 채집한 시료는 증류수로 2~3회 수세한 뒤 물기를 제거한 후 2주 동안 음건하였으며, 마쇄기로 분쇄하여 추출용 시료로 사용하였다.

데이터처리

모든 측정값은 3번 반복 실험하여 측정한 평균값과 표준편차 (mean ± SD)로 나타내었다.
모든 측정값은 3번 반복 실험하여 측정한 평균값과 표준편차(mean ± SD)로 나타내었다.

이론/모형

추출물의 총 페놀 함량 측정은 Folin-Denis method를 사용하였다[20]. 1 mg/mL 추출물(50μL), DW(1.

성능/효과

산화적 스트레스에 따른 간세포에서의 세포 보호효과를 확인한 결과, 다정큼나무와 참가시나무 추출물 모두 약 10%의 세포 보호능을 보이며, 큰 차이는 없었다. quercetin 양성 대조군에서는 0.1 ㎍/mL 농도에서 세포 보호능을 확인 할 수 없었지만, 1, 10, 100, 200, ㎍/mL 농도에서 20.87, 23.04, 55.47, 91.06%의 농도의존성으로 높은 생존율을 나타내었으며 H₂O₂만 처리한 세포 생존율과 비교하였을 때, 100, 200 ㎍/mL 농도에서 약 38, 74%의 세포 보호능을 확인하였다.
산화적 스트레스에 따른 폐세포에서의 세포 보호효과를 확인한 결과, 다정큼나무와 참가시나무 추출물 모두 미비한 효과를 나타내며, 큰 차이는 없었다. quercetin 양성 대조군에서는 0.1, 1, 10 ㎍/mL 농도에서 세포 보호능을 확인 할 수 없었지만, 100, 200 ㎍/mL 농도에서 54.20, 81.48%의 농도의존성으로 높은 생존율을 나타내었으며 H₂O₂를 처리한 세포 생존율과 비교하였을 때, 100, 200 ㎍/mL 농도에서 약 37, 64%의 세포 보호능을 확인하였다.
간세포에서 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 농도별 세포 독성효과를 측정하기 위해 HepG2를 이용하여 두 추출물을 농도별로 처리하여 48시간 및 72시간 동안 세포 독성을 측정하였다. 간세포에서 다정큼나무 추출물은 1, 10, 100 ㎍/mL 농도에서 48시간 동안 세포 독성을 확인 할 수 없었고 200 ㎍/mL 에서 89.70%의 세포 생존율로 약 10%의 세포 독성을 나타내었으며, 72시간 동안 처리 시 다정큼나무 추출물은 1, 10 ㎍/mL 에서는 세포 독성을 확인 할 수 없었고 100㎍/mL 과 200 ㎍/mL 에서는 47.59, 38.57%의 세포 생존율로 간세포에서 세포 독성효과는 약 52, 61% 이었다. 참가시나무 추출물은 간세포에서 48시간 처리 시 1, 10 ㎍/mL 농도에서 세포독성을 확인 할 수 없었고 100, 200 ㎍/mL에서 약 90% 이상의 생존율로 약 10% 미만의 세포독성을 나타내었으며, 72시간 처리 시 1, 10 ㎍/mL 에서는 세포 독성을 확인 할 수 없었고 100, 200 ㎍/mL 에서 약 71.
1). 다정큼나무 추출물 0.05, 0.1, 0.5, 1, 5 mg/mL 농도에서 3.10, 6.06, 16.10, 25.40, 89.93%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었으며, 참가시나무 추출물은 농도별로 6.63, 10.09, 23.15, 45.59, 92.41%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었다. 참가시나무 추출물은 다정큼나무 추출물보다 모든 농도에서 높은 항산화 효과를 나타내었다.
를 처리하여 산화적 스트레스를 유발한 후 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 세포 보호효과를 측정하였다. 다정큼나무 추출물의 0.1, 1, 10 ㎍/mL 에서는 세포 보호효과를 확인 할 수 없었고, 100 ㎍/mL 에서는 26.20%, 200 ㎍/mL 에서는 30.26%의 세포 생존율을 나타내었으며, H₂O₂만 처리한 세포 생존율과 비교하였을 때, 약 10%의 세포 보호효과를 확인하였다. 참가시나무 추출물은 0.
를 처리하여 산화적 스트레스를 유발한 후 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 세포 보호효과를 측정하였다. 다정큼나무 추출물의 0.1, 1, 10 ㎍/mL 에서는 세포 보호효과를 확인 할 수 없었고, 100㎍/mL 에서는 24.75%, 200 ㎍/mL 에서는 28.36%의 세포 생존율을 나타내었으며, H₂O₂만 처리한 세포 생존율과 비교하였을 때, 약 10%의 세포 보호효과를 확인하였다. 참가시나무 추출물은 0.
DPPH 라디칼 소거능이 총 페놀 함량과 연관성이 있는지 알아보기 위해 추출물의 총 페놀 함량을 측정하였다. 다정큼나무, 참가시나무 추출물의 총 페놀 함량은 gallic acid를 기준물질로 측정하였으며, 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 총 페놀 함량은 각각 65.20 mg GAE/g과 85.20 mg GAE/g으로 참가시나무 추출물이 다정큼나무 추출물보다 높은 총 페놀 함량을 나타내었다 (Table 1). 이에 DPPH 라디칼 소거능이 총 페놀 함량과 연관성 있음이 확인되었다.
다정큼나무와 참가시나무 잎 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 농도별로 측정한 결과, 두 추출물 모두 농도 의존적으로 항산화 효과를 나타내었다(Fig. 1). 다정큼나무 추출물 0.
본 연구에서는 제주 자생식물인 다정큼나무와 참가시나무 잎 추출물을 이용하여 항산화 효과 및 세포 독성효과를 확인하였다. 다정큼나무와 참가시나무 추출물에서 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거능이 증가 하는 것을 확인하였고, 총 페놀 함량과 연관성 있는 결과를 나타내었다. 그러나 간세포와 폐세포에 H₂O₂를 처리하여 산화적 스트레스를 유발하였을 때에 대한 세포 보호 효과는 미비하였다.
참가시나무 추출물은 다정큼나무 추출물보다 모든 농도에서 높은 항산화 효과를 나타내었다. 대조군으로 사용한 quercetin은 농도별로 15.51, 35.51, 83.14, 85.33, 86.72%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내어, 최대농도인 5 mg/mL 에서는 quercetin보다 참가시나무 및 다정큼나무 추출물에서 다소 높은 DPPH 라디칼 소거능 나타내었다. 천연 추출물에 포함된 항산화물질은 자유 라디칼로 유도 된 산화적 스트레스에 보호할 뿐만 아니라 합성 항산화제의 부작용을 극복 할 수 있다[22].
이는 사용한 다정큼나무와 참가시나무 추출물이 추출물 자체를 이용한 것으로 추출물의 분획을 이용한 실험 시 더 높은 항산화 효과가 관찰 될 것으로 예상된다. 또한 간세포 및 폐세포를 이용한 세포 독성시험에서는 다정큼나무와 참가시나무 모두 폐세포에 대한 독성보다 간세포에 대한 세포 독성이 높게 확인되었다. 본 연구 결과는 다정큼나무 및 참가시나무의 항산화 물질 개발을 위한 기초자료로 활용될 것으로 사료된다.
본 연구에 앞서 제주도에 자생하는 600여 종의 식물자원의 추출물을 이용하여 항산화 효과를 스크린한 결과, 다정큼나무(Rhaphiolepis indica)와 참가시나무(Quercus salicina) 잎 추출물에서 항산화 효과를 확인하였다. 그리하여 항산화 효과가 있는 다정큼나무와 참가시나무 추출물을 이용하여 항산화 효과를 비교하고 세포 독성에 대하여 연구하였다.
2). 산화적 스트레스에 따른 간세포에서의 세포 보호효과를 확인한 결과, 다정큼나무와 참가시나무 추출물 모두 약 10%의 세포 보호능을 보이며, 큰 차이는 없었다. quercetin 양성 대조군에서는 0.
3). 산화적 스트레스에 따른 폐세포에서의 세포 보호효과를 확인한 결과, 다정큼나무와 참가시나무 추출물 모두 미비한 효과를 나타내며, 큰 차이는 없었다. quercetin 양성 대조군에서는 0.
5). 세포에 따른 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 세포 독성 차이는 확인 할 수 없었지만, 간세포보다 폐세포에서 두 가지 추출물 모두 세포 생존율이 높은 것으로 보아 간세포가 다정큼나무와 참가시나무 추출물에서는 세포 독성이 더 높음이 확인되었다. 쇠비름 (Portulaca oleracea) 추출물을 이용한 간세포와 폐세포에서의 세포 독성효과는 간세포에서는 250㎍/mL 농도에서 73%, 폐세포에서 250 ㎍/mL 농도에서는 82%의 세포 생존율로 다정큼나무와 참가시나무 보다 낮은 세포 독성을 나타내었으며, Al-Sheddi 등의 연구에서 폐세포에 100 ㎍/mL 이하의 농도에서 세포 독성을 관찰하지 못한 점은 본 연구 결과와 유사하였다[26].
20 mg GAE/g으로 참가시나무 추출물이 다정큼나무 추출물보다 높은 총 페놀 함량을 나타내었다 (Table 1). 이에 DPPH 라디칼 소거능이 총 페놀 함량과 연관성 있음이 확인되었다. 천연 식물이 항산화제로써 필수적인 역할을 하는 페놀 함량이 다양한 식물에서 밝혀졌으며 guava(Psidium Guayaba L.
26%의 세포 생존율을 나타내었으며, H₂O₂만 처리한 세포 생존율과 비교하였을 때, 약 10%의 세포 보호효과를 확인하였다. 참가시나무 추출물은 0.1, 1, 10 ㎍/mL 농도에서는 세포 보호효과를 확인 할 수 없었고 100 ㎍/mL 에서는 27.01%, 200 ㎍/mL 에서는 31.98%의 세포 생존율을 나타내었으며, H₂O₂만 처리한 세포의 생존율과 비교하였을 때, 약 10%의 세포 보호효과를 확인하였다(Fig. 2). 산화적 스트레스에 따른 간세포에서의 세포 보호효과를 확인한 결과, 다정큼나무와 참가시나무 추출물 모두 약 10%의 세포 보호능을 보이며, 큰 차이는 없었다.
36%의 세포 생존율을 나타내었으며, H₂O₂만 처리한 세포 생존율과 비교하였을 때, 약 10%의 세포 보호효과를 확인하였다. 참가시나무 추출물은 0.1, 1, 10 ㎍/mL농도에서는 세포 보호효과를 확인 할 수 없었고 100 ㎍/mL 에서는 21.59%, 200 ㎍/mL 에서는 23.58%의 세포 생존율을 나타내었으며, H₂O₂만 처리한 세포 생존율과 비교하였을 때, 약 10% 미만의 세포 보호효과를 확인하였다(Fig. 3). 산화적 스트레스에 따른 폐세포에서의 세포 보호효과를 확인한 결과, 다정큼나무와 참가시나무 추출물 모두 미비한 효과를 나타내며, 큰 차이는 없었다.
57%의 세포 생존율로 간세포에서 세포 독성효과는 약 52, 61% 이었다. 참가시나무 추출물은 간세포에서 48시간 처리 시 1, 10 ㎍/mL 농도에서 세포독성을 확인 할 수 없었고 100, 200 ㎍/mL에서 약 90% 이상의 생존율로 약 10% 미만의 세포독성을 나타내었으며, 72시간 처리 시 1, 10 ㎍/mL 에서는 세포 독성을 확인 할 수 없었고 100, 200 ㎍/mL 에서 약 71.91, 37.67%의 세포 생존율을 나타나 세포 독성효과는 약 28, 62%이었다(Fig. 4).
41%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었다. 참가시나무 추출물은 다정큼나무 추출물보다 모든 농도에서 높은 항산화 효과를 나타내었다. 대조군으로 사용한 quercetin은 농도별로 15.
44%의 세포 생존율로 폐세포에서 세포 독성효과는 약 68% 이었다. 참가시나무 추출물은 폐세포에서 48시간 처리 시 1, 10, 100 ㎍/mL 농도에서 세포 독성을 확인 할 수 없었고 200 ㎍/mL 농도에서 약 93.7%의 생존율로 약 7%의 세포독성을 나타내었으며, 72시간 처리 시 1, 10, 100 ㎍/mL 농도에서 세포 독성을 확인 할 수 없었고 200 ㎍/mL 에서 23.31%의 세포 생존율을 나타나 세포 독성율은 약 77%이었다(Fig.5). 세포에 따른 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 세포 독성 차이는 확인 할 수 없었지만, 간세포보다 폐세포에서 두 가지 추출물 모두 세포 생존율이 높은 것으로 보아 간세포가 다정큼나무와 참가시나무 추출물에서는 세포 독성이 더 높음이 확인되었다.
이에 DPPH 라디칼 소거능이 총 페놀 함량과 연관성 있음이 확인되었다. 천연 식물이 항산화제로써 필수적인 역할을 하는 페놀 함량이 다양한 식물에서 밝혀졌으며 guava(Psidium Guayaba L.), mango(Mangifera indica L.), barbados cherry(Malpighia glabra L.)의 총 페놀 함량은 24.15, 44.18, 49.21 mg GAE/g 으로[25], 다정큼나무와 참가시나무 추출물에서 더 높은 총 페놀 함량을 확인하였다.
폐세포에서 다정큼나무와 참가시나무 추출물의 농도별 세포 독성효과를 측정하기 위해 A549를 이용하여 두 추출물을 농도별로 처리하여 48시간 및 72시간 동안 세포 독성을 측정하였다. 폐세포에서 다정큼나무 추출물은 1, 10, 100 ㎍/mL 농도에서 48시간 동안 세포 독성을 확인 할 수 없었고 200 ㎍/mL 에서 93.50%의 세포 생존율로 약 7%의 세포 독성을 나타내었으며, 72시간 동안 처리 시 다정큼나무 추출물은 1, 10, 100 ㎍/mL 농도에서 세포 독성을 확인 할 수 없었고 200 ㎍/mL 에서는 31.44%의 세포 생존율로 폐세포에서 세포 독성효과는 약 68% 이었다. 참가시나무 추출물은 폐세포에서 48시간 처리 시 1, 10, 100 ㎍/mL 농도에서 세포 독성을 확인 할 수 없었고 200 ㎍/mL 농도에서 약 93.

후속연구

또한 간세포 및 폐세포를 이용한 세포 독성시험에서는 다정큼나무와 참가시나무 모두 폐세포에 대한 독성보다 간세포에 대한 세포 독성이 높게 확인되었다. 본 연구 결과는 다정큼나무 및 참가시나무의 항산화 물질 개발을 위한 기초자료로 활용될 것으로 사료된다.
그러나 간세포와 폐세포에 H₂O₂를 처리하여 산화적 스트레스를 유발하였을 때에 대한 세포 보호 효과는 미비하였다. 이는 사용한 다정큼나무와 참가시나무 추출물이 추출물 자체를 이용한 것으로 추출물의 분획을 이용한 실험 시 더 높은 항산화 효과가 관찰 될 것으로 예상된다. 또한 간세포 및 폐세포를 이용한 세포 독성시험에서는 다정큼나무와 참가시나무 모두 폐세포에 대한 독성보다 간세포에 대한 세포 독성이 높게 확인되었다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	항산화 효소 방어시스템이 방지하고자 하는 산화적 손상은 어떤 문제를 일으키는가?	활성산소종과 같은 자유 라디칼은 하나 또는 하나 이상의 홀 전자를 가지는 것을 말하며, 그들은 정상적인 세포에서 신진대사의 생산물로서 지속적으로 생성된다[1]. 최근 특정 오염 물질, 유기용매, 농약, 담배 연기 등과 같은 외부요인 또는 인체의 내부요인으로 인해 superoxide anion, hydroxyl radical, hydrogen peroxide (H2O2)를 포함하는 활성산소종이 과잉 생성 되며[2], 이들은 지질과산화를 유발하여 세포막 손상및 세포의 항산화 레벨을 감소시켜 세포에서의 항산화 작용의 방어와 산화적 생산 사이의 불균형을 초래하여 인간의 건강에 많은 문제를 일으킨다[3,4].
	자유 라디칼은 무엇인가?	활성산소종과 같은 자유 라디칼은 하나 또는 하나 이상의 홀 전자를 가지는 것을 말하며, 그들은 정상적인 세포에서 신진대사의 생산물로서 지속적으로 생성된다[1]. 최근 특정 오염 물질, 유기용매, 농약, 담배 연기 등과 같은 외부요인 또는 인체의 내부요인으로 인해 superoxide anion, hydroxyl radical, hydrogen peroxide (H2O2)를 포함하는 활성산소종이 과잉 생성 되며[2], 이들은 지질과산화를 유발하여 세포막 손상및 세포의 항산화 레벨을 감소시켜 세포에서의 항산화 작용의 방어와 산화적 생산 사이의 불균형을 초래하여 인간의 건강에 많은 문제를 일으킨다[3,4].
	현재 다정큼나무에 관한 연구 상황은 어떠한가?	다정큼나무는 장미과(Rosaceae)에 속하는 상록 관목으로, 장미과는 경제적으로 중요한 과일나무인 딸기, 사과, 살구, 체리, 복숭아, 배, 자두 등과 같은 과일 작물을 포함한 3000개 이상의 종을 가진다[14]. 다정큼나무에 대한 연구로는 다정큼나무의 뿌리로부터 얻은 Triterpenoids, Biphenyls, Dibenzofurans의 항염증 효과[15,16]에 대한 연구 외에는 생리학적 효과에 대한 연구가 이루어져 있지 않아 생리 활성에 대한 연구가 필요하다. 참가지나무는 참나무과(Fagaceae)에 속하는 제주 관목 식물로서 설사, 이질, 피부염 및 출혈의 치료를 위해 사용되었다[17].

참고문헌 (26)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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