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문제 정의
- 따라서 본 연구는 生乾 黃精과 蒸熟 黃精의 약리적 차이점을 알아보고자 in vitro 및 세포실험을 활용하여 항산화 효능의 변화를 살펴보고, 동물모델을 이용한 黃精의 항피로 실험을 통해 補益 작용의 변화를 연구하였으며 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
제안 방법
- 黃精의 生乾과 蒸熟에 따른 다양한 효능의 변화를 알아보기 위해 항산화 실험, 항피로 동물실험을 진행한 결과 다음과 같은 결론을 얻을 수 있었다.
- 黃精은 補中益氣, 滋陰潤肺, 生津止渴 등의 효능이 있어서 脾胃虛弱, 病後虛損, 筋骨衰弱 등의 병증을 치료하는데 사용된다33). 黃精의 補益 작용에서 착안하여, 蒸熟 횟수에 따른 黃精의 補益 작용 변화와 혈관내 여러 가지 인자들과 골격근에 미치는 영향을 알아보고자 혈청 분석과 동물모델을 이용하여 항피로 실험을 진행하였다. 실험에 사용된 인자들로는 혈중 TG, creatine, TC 등이 있었다.
- 黃精의 유효 성분에 관한 연구는 많이 진행 되었지만 문헌에서 고찰한 것처럼 九蒸九曝을 통해 만들어지는 蒸製 黃精에 대한 연구나 蒸製에 따른 성분 변화, 효능 변화에 대한 연구는 미비한 실정이다. 그래서 補陰藥, 補益藥으로서의 黃精을 사용 시 蒸熟 여부에 따른 그 차이에 대한 구분이 필요하다고 생각이 되어, 항산화 활성성분 및 항산화 효능, 항피로 실험을 통해 生乾과 蒸熟의 정도에 따른 차이를 비교 분석하였다.
- 동물모델을 활용하여 黃精의 항피로실험을 진행하였다
대상 데이터
- Sprague-Dawley 웅성쥐 5주령을 효창사이언스에서 66마리 구입을 하였다. 사육실 온도는 23±2℃, 상대습도는 50±10%, 사료와 물은 자유급여를 하였다.
- 마우스 대식 세포주인 RAW 264.7 세포는 american type culture collection (ATCC, Rockville, U.S.A)로부터 구입하여 사용하였다. Raw 264.
- 실험에 사용된 黃精 (Polygonati Rhizoma : PR)은 충북 음성군에서 재배된 5년생 층층갈고리둥굴레의 뿌리를 구입하여 시료 제조에 사용하였다. 이 시료를 대전대학교 본초학교실에서 가공하여 실험에 사용하였다.
- 黃精의 補益 작용에서 착안하여, 蒸熟 횟수에 따른 黃精의 補益 작용 변화와 혈관내 여러 가지 인자들과 골격근에 미치는 영향을 알아보고자 혈청 분석과 동물모델을 이용하여 항피로 실험을 진행하였다. 실험에 사용된 인자들로는 혈중 TG, creatine, TC 등이 있었다.
- 실험에 사용된 黃精 (Polygonati Rhizoma : PR)은 충북 음성군에서 재배된 5년생 층층갈고리둥굴레의 뿌리를 구입하여 시료 제조에 사용하였다. 이 시료를 대전대학교 본초학교실에서 가공하여 실험에 사용하였다.
이론/모형
- ABTS radical을 이용한 항산화력 측정은 Re 등의 방법17)을 이용하여 측정하였다
- CCK-8 측정은 ELISA (multiscan spectrum, thermo scientific)를 이용하여 분석하였다.
- 黃精 물 추출물에 대한 세포독성 여부를 확인하기 위해 CCK-8 assay를 이용한 세포독성을 실험하였다. RAW 264.
- 총 Polyphenol 함량은 Folin-Denis법14)을 이용하였다
- 총 flavonoid의 함량 측정은 Davis법15)을 변형한 방법에 따라 측정하였다
- 추출한 시료의 free radical 소거능 활성의 측정을 위해 DPPH법16)을 이용하였다
성능/효과
- 黃精의 蒸熟 횟수에 따른 DPPH 소거율 측정을 확인한 결과 대조군에 비해 1, 3, 6, 9蒸 모두에서 각각 1.1%, 6.1%, 14.2%, 23.3%로 DPPH 소거능 활성이 증가하는 모습으로 polyphenol과 flavonoid의 함량 증가와 유사한 패턴을 보였다. 또 다른 방법인 ABTS radical 소거능을 측정한 방법에서는 黃精 生乾에 비해 蒸熟을 했을 때 ABTS radical 소거능이 1 蒸은 黃精 生乾과 별 차이를 보이지 않았지만, 3蒸은 0.
- 黃精의 蒸熟 횟수에 따른 polyphenol, flavonoid 함량 변화를 관찰한 결과, 黃精 生乾과 黃精 1증의 경우에는 polyphenol 함량이 없었지만 3蒸부터 6蒸, 9蒸은 蒸熟 횟수가 증가함에 따라 polyphenol 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. Flavonoid 함량을 측정한 결과 역시 生乾 黃精에 비해 1蒸 -0.
- 따라서 生乾 黃精과 蒸熟 黃精의 생리활성을 in vivo, in vitro 연구 결과, 黃精은 生乾보다 蒸熟 횟수에 비례하여 항산화 효과는 증가하였으나, 동물 모델을 통한 항피로 실험에서는 生乾 黃精이 더 우수하다는 결과를 얻을 수 있었다. 즉, 黃精은 生乾이나 蒸熟에 따라 항산화, 항피로 효과를 달리 사용할 수 있으며, 補氣劑이자 血流 改善劑로도 응용이 가능할 것이라 사료된다.
- 그러나 3蒸, 6蒸 및 9蒸 AMPK 단백질 발현량은 오히려 감소되었다. 따라서 生乾 黃精의 항피로 능력이 蒸熟 黃精보다 우수하다고 판단되며, 黃精을 補氣劑로 사용 시에는 生乾 黃精을 응용하는 것이 마땅하다고 판단된다.
- 이상의 연구 결과로서 生乾, 蒸熟 黃精은 항산화 효과가 있으며 蒸熟 횟수가 증가할수록 그 효능도 증가되었다. 항피로 효과는 生乾 黃精에서만 나타나는 것으로 보아 향후 生乾 黃精의 補氣 작용에 대한 연구가 더 진행되어야 한다고 사료된다.
후속연구
- 따라서 生乾 黃精과 蒸熟 黃精의 생리활성을 in vivo, in vitro 연구 결과, 黃精은 生乾보다 蒸熟 횟수에 비례하여 항산화 효과는 증가하였으나, 동물 모델을 통한 항피로 실험에서는 生乾 黃精이 더 우수하다는 결과를 얻을 수 있었다. 즉, 黃精은 生乾이나 蒸熟에 따라 항산화, 항피로 효과를 달리 사용할 수 있으며, 補氣劑이자 血流 改善劑로도 응용이 가능할 것이라 사료된다. 하지만 항피로 실험에서 蒸熟 黃精보다 오히려 生乾 黃精에서 더 좋은 결과가 나오는 것을 보았을 때, 추후에 이런 부분에서의 추가 연구가 더 이루어져야 할 것이다.
- 즉, 黃精은 生乾이나 蒸熟에 따라 항산화, 항피로 효과를 달리 사용할 수 있으며, 補氣劑이자 血流 改善劑로도 응용이 가능할 것이라 사료된다. 하지만 항피로 실험에서 蒸熟 黃精보다 오히려 生乾 黃精에서 더 좋은 결과가 나오는 것을 보았을 때, 추후에 이런 부분에서의 추가 연구가 더 이루어져야 할 것이다.
- 이상의 연구 결과로서 生乾, 蒸熟 黃精은 항산화 효과가 있으며 蒸熟 횟수가 증가할수록 그 효능도 증가되었다. 항피로 효과는 生乾 黃精에서만 나타나는 것으로 보아 향후 生乾 黃精의 補氣 작용에 대한 연구가 더 진행되어야 한다고 사료된다.
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