[논문]국내 시장에서 유통되는 초오의 DNA 감별과 화학적 분석

장혜리; 조경화; 송광호; 이경진; 박샛별; 이채민; 하인진; 이경진; 서영배; 김영식

국내 시장에서 유통되는 초오의 DNA 감별과 화학적 분석
Molecular Identification and Chemical Analysis of Aconiti Kusnezoffii Tuber on the Domestic Markets 원문보기

생약학회지, v.49 no.2, 2018년, pp.145 - 154

장혜리 (서울대학교 약학대학 천연물과학연구소) , 조경화 (서울대학교 약학대학 천연물과학연구소) , 송광호 (서울대학교 약학대학 천연물과학연구소) , 이경진 (서울대학교 약학대학 천연물과학연구소) , 박샛별 (서울대학교 약학대학 천연물과학연구소) , 이채민 (서울대학교 약학대학 천연물과학연구소) , 하인진 (경희대학교 경희의료원) , 이경진 (경희대학교 한의과대학 본초학교실) , 서영배 (서울대학교 약학대학 천연물과학연구소) , 김영식 (서울대학교 약학대학 천연물과학연구소)

Abstract ▼ AI-Helper

Aconiti Kusnezoffii Tuber has been traditionally used to treat the symptoms of rheumatoid arthritis and joint pain. The main constituents are diterpenoid alkaloids such as benzoylmesaconine, benzoylaconine, mesaconitine, aconitine, and hypaconitine. In Korea, Aconiti Kusnezoffii Tuber is officially defined as the tubers of Aconitum kusnezoffii Reichb., A. ciliare Decasisne, and A. triphyllum Nakai. On the other hand, only the tuber of A. kusnezoffii is to be used in China. In order to identify the botanical origin of Aconiti Kusnezoffii Tuber circulated in Korea, we analyzed 24 samples of Aconiti Kusnezoffii Tuber obtained from local markets for comparative DNA analysis. The sequence analysis of nrRNA ITS 1 was useful to distinguish Aconitum species and revealed that the roots of A. karakolicum were circulated in Korean markets without discretion. HPLC quantitative analysis showed that aconitine was detected at the highest amount in A. karakolicum. Authentic diterpenoid alkaloids were coinjected for quantification of aconitine-type ingredients. All data were statistically grouped by Principal Component Analysis (PCA). This study suggests that both molecular and chemical analyses should be utilized for the standardization and the quality control for Aconiti Kusnezoffii Tuber.

주제어

표/그림 (8)

표 Table I. The additional plant materials obtained from the herbarium of Korea National Arboretum (KH) and DNA sequence data from GenBank for the comparative analysis of DNA sequences
그림 Fig. 1. Aligned sequences of nrITS region from 21 samples of Aconiti Kusnezoffii Tuber and additional sequences for comparative purpose. Shaded are the ITS 1 sequences indentified from the plant materials of Aconitum kusnezoffii (KHB1345644), A. jaluense (KHB1176845) and A. ciliare (KHB1109515), and the sequence of A. karakolicum obtained from GenBank (AY571358).
그림 Fig. 2. Chemical structures of compounds 1-5.
표 Table II. Analytical data of regression equation, limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) for marker compounds in A. karakolicum
표 Table III. Contents of compounds (1-5)
표 Table IV. Crude drugs used for DNA and HPLC analysis to identify Aconiti Kusnezoffii Tuber collected on the market
그림 Fig. 3. Representative HPLC chromatograms of mixed standards and extract of Aconiti Kusnezoffii Tuber samples (A) mixed standards, (B) AKT1703; extract of Aconitum kusnezoffii (C) AKT1710; extract of raw A. karakolicum, (D) AKT1709; extract of partially processed A. karakolicum (E) AKT1701; extract of processed A. karakolicum.
그림 Fig. 4. PCA projection of 21 samples of Aconiti Kusnezoffii Tuber (A) 2015 samples, (B) 2017 samples.

AI 본문요약
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문제 정의

karakolicum은 aconitine, hypaconitine, mesaconitine 등의 diterpene alkaloid계 성분을 함유하고 있는 것으로 알려져 있으며¹¹⁾ aconitine류의 alkaloid계 성분은 혈압하강, 사지궐냉, 삼실세동 등의 부작용을 일으킬 수 있다고 보고되어 있으므로,¹²⁾ 초오의 유통 과정은 엄밀한 감시가 필요하다. 이에 본 연구는 국내 시장에서 유통되고 있는 초오의 실정을 파악하고자 rDNA의 ITS 염기서열을 분석 비교하여 국내 시장에서 유통되고 있는 초오의 기원식물을 판별하였으며, diterpenoid alkaloid 주성분에 대한 HPLC 분석법을 개발하고 정량하였다.

제안 방법

8S, 그리고 ITS 2를 포함하는 전체 ITS 구간을 증폭한 후에, ITS 1구간만을 증폭하고자 primer ITS 1(5'-TCC GTA GGT GAA CCT GCG G-'3)과 ITS 2(5'-GCT GCG TTC TTC ATC GAT GC-'3)을 사용하여 PCR을 재차 수행하였다.¹³⁾일차 PCR은 94℃에서 5분간 전처리, 그리고 94℃ 30초, 55o C 30초, 72℃ 1분의 과정을 40회 반복한 후, 72℃에서7분간 최종 처리하였으며, 이차 PCR은 95℃에서 5분간 전처리, 그리고 94℃ 30초, 52℃ 30초, 72℃ 1분의 과정을 35회 반복, 그리고 72℃에서 7분간 최종 처리로 이어지는 과정으로 진행하였다. PCR 산물은 반응 완료 후, 0.
DNA 추출 − 초오 시료를 가로 세로 2-5 mm 정도 크기로 절편하여 막자사발에서 석영모래와 함께 분말 상태로 마쇄한 후 DNeasy Plant Mini Kit(Qiagen, Germany)를 이용하여 DNA를 추출하였다.
, Dubuque, IA, USA)을 이용하여 사용하였다. HPLC 분석을 위한 기기로는 Hitachi L-6200 HPLC pump(Hitachi Chemical, Tokyo, Japan), Sedex 75 증기화광산란 Evaporative Light Scatttering Detector(ELSD, Sedere, Virty-sur-Seine, France), SIL-9A auto injector(Shimadzu, Japan)을 이용하였다. 분석용 컬럼은 Sinco C18 column(4.
HPLC 분석조건의 확립 − 초오의 지표성분으로 알려진 benzoylmesaconine(1), benzoylaconine(2), mesaconitine(3), aconitine(4), hypaconitine(5)의 최적 분석법을 확립하였다 (Fig. 2, 3-A).
PCA 분석 − 초오 시료의 DNA 분석과 HPLC 함량 분석에 군집형성 차이를 확인하였다.
PCA분석 − 초오 시료의 DNA 분석과 HPLC 함량 분석에 대한 차이를 확인하기 위해 HPLC 함량분석 지표물질을 변수로 하여 Principal Component Analysis(PCA)를 적용하여 패턴분석을 실시하였다.
PCR 기법을 이용한 ITS 유전자 증폭 − 관속식물을 종수준에서 판별하는데 유용한 것으로 확인된 핵 rDNA의 ITS 구간의 염기서열의 비교분석을 위하여 PCR 기법을 이용하여 5.8S를 포함하는 ITS 1 및 ITS 2의 전체 구간을 증폭하고, 특히 이 중에서 초오속 식물 종 사이에서 뚜렷이 차이를 나타내는 ITS 1 구간의 염기서열을 비교 분석하였다.
¹³⁾일차 PCR은 94℃에서 5분간 전처리, 그리고 94℃ 30초, 55o C 30초, 72℃ 1분의 과정을 40회 반복한 후, 72℃에서7분간 최종 처리하였으며, 이차 PCR은 95℃에서 5분간 전처리, 그리고 94℃ 30초, 52℃ 30초, 72℃ 1분의 과정을 35회 반복, 그리고 72℃에서 7분간 최종 처리로 이어지는 과정으로 진행하였다. PCR 산물은 반응 완료 후, 0.7% agarose gel에서 50 V로 25분간 전기영동하여 증폭을 확인한 후, High Pure PCR Product Purification Kit(R℃he, Germany)를 사용하여 정제하였다. 이후 염기서열 분석 실험 시까지-20℃에서 냉동 보관하였다.
PCR은 일차적으로 ITS 5(5'-GGA AGT AAA AGT CGT AAC AAG G-'3)와 ITS 4(5'-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC-'3)를 primer로 사용하여 ITS 1과 5.8S, 그리고 ITS 2를 포함하는 전체 ITS 구간을 증폭한 후에, ITS 1구간만을 증폭하고자 primer ITS 1(5'-TCC GTA GGT GAA CCT GCG G-'3)과 ITS 2(5'-GCT GCG TTC TTC ATC GAT GC-'3)을 사용하여 PCR을 재차 수행하였다.
PCR증폭은 Takara Ex Taq(Takara Bio Inc., Japan)를 사용하여 수행하였는데, 50 μl 반응액은 10 x Ex Taq 완충용액 5 μl, dNTP 4 μl, MgCl2 3 μl, Takara Ex Taq 0.2 μl, DDW 31.8 μl, 각 primer 2 μl와 추출 DNA 2 μl를 포함하도록 하였다.
검출한계와 정량한계 − ICH 가이드라인에 따라 신호 대잡음비가 각각 3:1과 10:1일 때의 농도로 계산하였다.
나머지 혼합용액 400 μl를 동일한 DNeasy Mini spin column에 다시 안착시키고, 2분간 원심분리하여 추출된 DNA가 DNeasy Mini spin column membrane에 결집되도록 하였다.
마쇄한 미세분말을 약 20 mg 취해 1.5 ml의 micr℃entrifuge tube에 각각 담고 400 μl의 AP1 완충용액과 100 mg/ml 농도의 RNase A 용액 4 μl를 첨가한 뒤 65℃ heat bl℃k에서 3시간 방치하였으며, 15분에 한번씩 흔들어 시료 분말과 완충용액을 섞어주는 과정을 반복하였다.
분석법의 검증 − 분석법에 대한 검증으로 국제 의약품규제조화위원회 International Council for Harmonization of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (ICH) 가이드라인에 따라 직선성, 검출한계와 정량한계를 측정하여 분석법의 타당성을 검증하였다.
분석조건 − 초오 24개의 함량분석을 위해 다음의 조건으로 분석하였다.
실험재료 − 국내에서 유통되고 있는 초오 24종을 2015년 및 2017년 두 차례에 걸쳐 생약재 시장에서 수집하여 DNA 분석을 실시하였다.
염기서열 결정 및 비교 분석 − 정제된 PCR 산물의 염기서열은 ABI PRISM BigDye Terminator Cycle Sequencing Kit(Applied Biosystems, CA)를 사용하여 PTC-225 Peltier Thermal Cycler(MJ Research Inc., MA)로 thermal cycle sequencing 반응을 수행한 후에, ABI PRISM 3730XL Analyzer(Applied Biosystems, CA)로 염기서열을 분석하였다.
, MI)를 이용하여 재확인하였다. 염기서열의 차이를 상호 비교하기 위한 분석은 Clustal X 1.64b(Thompson et al., 1997)을 이용하여 염기서열을 정렬한 후, 재차 육안으로 확인하고 보정하여 염기서열의 차이를 비교 분석하였다. 확인된 염기서열은 GenBank 데이터베이스의 BLAST 검색 옵션을 사용하여 염기서열의 동일성을 비교 검색하였다.
정량분석 하기 위해 HPLC C18 (4.6 mm × 250mm, 5 μm) 컬럼을 이용하여 이동상 용매 0.05% trimety lamine이 함유된 물과 acetonitrile 기울기 용매조건으로, 유속은 1 ml/min로 고정하였다.
주요성분의 함량분석 − HPLC를 이용하여 24종의 초오 중주요 성분의 함량분석을 위해 지표성분으로 선정한 5종의 표준액을 분석하였다.
직선성 − benzoylmesaconine(1), benzoylaconine(2), mesaconitine(3), aconitine(4), hypaconitine(5)을 MeOH에 1 mg/ ml 농도로 녹인 후 31.25, 62.5, 125, 250, 500 μg/ml로 총 5개의 구간을 설정하여 3회 반복 측정 후 작성된 검량선의 상관계수(R2)로 직선성을 평가하였다.
직선성 − 지표성분 화합물 1, 2, 3, 4, 5의 표준용액을 31.25, 62.5, 125, 250, 500 μg/ml의 5가지 농도로 검량선을 작성하였다.
실험재료 − 국내에서 유통되고 있는 초오 24종을 2015년 및 2017년 두 차례에 걸쳐 생약재 시장에서 수집하여 DNA 분석을 실시하였다. 초오의 기원식물로 공정서에 기재되어있는 A. kusnezoffii 이삭바꽃, A. jaluense (= A. triphyllum) 투구꽃, A. ciliare 놋젓가락나물의 DNA 분석은 국내에서 직접 채집되어 동정이 확정된 후, 국립수목원 식물표본관 (KH)에 소장되어 있는 식물표본에서 채취한 소량의 잎으로 이루어졌으며, 중국 신장 지방의 고산(고도 1800-2000 m)에 서식하는 것으로 알려진 A. karakolicum의 ITS 염기서열은 GenBank 데이터베이스를 검색하여 확인하였다(Table I). DNA 분석에 사용된 초오 시료의 증거표본은 서울대학교 약학대학 자원식물표본관(NPRI)에 소장되어 있다(Table I).
추출된 DNA는 농도 0.75 μg λ DNA-Hind III digest(Takara Bio Inc., Japan)와 함께 0.5 μg/ml ethidium bromide를 포함하는 0.7% agarose gel에서 100 V로 45분간 전기영동 한 후, UV 조명 하에서 밝기를 상호 비교하여 확인하였다.
DNA 분석이 불가능하였던 세 개의 시료는 포제 및 약재의 처리 과정 중에 DNA가 손상되었기 때문인 것으로 추정된다. 한편으로 초오의 기원식물로 정의된 A. kusnezoffii 이삭바꽃, A. jaluense(= A. triphyllum) 투구꽃, A. ciliare 놋젓가락나물의 ITS 1은 국립수목원 표본관에 수집되어있는 식물 건조표본 시료를 분석하여 확인하였다(Table I). 또한 중국 신장 고산지역에 서식하는 것으로 알려진 A.

대상 데이터

HPLC 분석 − 분석에 사용된 HPLC용 acetonitrile은 J.T. Baker(Philipsburg, NJ, USA)에서 구입하였고 3차 증류수는 NANO pure Diamond(Barnstead Int., Dubuque, IA, USA)을 이용하여 사용하였다.
분석조건 − 초오 24개의 함량분석을 위해 다음의 조건으로 분석하였다. HPLC 이동상으로 A(0.05% triethylamine이 첨가된 distilled water)와 B(0.05% triethylamine이 첨가된 acetonitrile)의 혼합액을 이용하였다. 초오의 HPLC 구배 조건은 0-3분(20-30% B), 3-10분(30% B), 10-20분(30-50% B), 20-30분(50-55% B), 30-40분(55-75% B), 40-45분(75-100% B)이다.
HPLC 표준액 및 검체의 조제 − benzoylmesaconine(1), benzoylaconine(2), mesaconitine(3), aconitine(4), hypaconitine(5) 5종의 분석용 표준품(순도 99.0%)을 Avention Chemical(Incheon, Korea)에서 구입하여 각각 MeOH에 1 mg/ml 농도로 녹인 후 냉장 보관한 후 분석 전에 희석하여 사용하였다.
건조된 DNeasy Mini spin column에 65℃의 AE 완충용액 100 μl를 가하고 5분간 실온에서 DNA를 membrane으로부터 용출시킨 후, 2분간 원심분리하여 통과액을 수집하였다.
ciliare 놋젓가락나물의 ITS 1은 국립수목원 표본관에 수집되어있는 식물 건조표본 시료를 분석하여 확인하였다(Table I). 또한 중국 신장 고산지역에 서식하는 것으로 알려진 A. karakolicum의 ITS 1 염기서열은 GenBank 데이터베이스에서 획득하였다(Table I).
분석용 컬럼은 Sinco C18 column(4.6×250 mm, 5 μm, Sinco Co, Seoul, Korea)을 사용하였다.
이차로 50 μl의 AE 완충용액을 DNeasy Mini spin column에 추가하여 2분간 실온에서 DNA를 membrane으로부터 재차 용출시킨 후, 2분간 원심분리로 통과액을 수집하였다.

데이터처리

, 1997)을 이용하여 염기서열을 정렬한 후, 재차 육안으로 확인하고 보정하여 염기서열의 차이를 비교 분석하였다. 확인된 염기서열은 GenBank 데이터베이스의 BLAST 검색 옵션을 사용하여 염기서열의 동일성을 비교 검색하였다.

이론/모형

검출한계 Limit of Detection (LOD)=3 × (δ/S), 정량한계 Limit of Quantitation (LOQ)=10 × (δ/S) 계산식을 이용하여 계산하였다.
함량분석 − benzoylmesaconine(1), benzoylaconine(2), mesaconitine(3), aconitine(4), hypaconitine(5)의 함량은 선형회기 방정식을 이용하여 계산하였다.

성능/효과

karakolicum이 사용되고 있는 것을 확인한 바 있다.¹⁰⁾ 이는 이미 중국에서도 A. karakolicum이 초오로 오용되고 있으며, 중국으로부터 상당량의 초오를 수입하는 우리나라의 시장에도 A. karakolicum이 무분별하게 수입되어 유통되고 있는 것으로 판단된다. 따라서, 국내 시장에서 초오의 유통과정의 혼란을 방지하기 위하여, 기원 식물 종을 정확히 동정함으로 공정서 기준에 부합되는 품질 기준의 엄격한 적용이 필요하다.
ICH 가이드라인을 준수하여 초오의 지표성분 benzoylmesaconine, benzoylaconine, mesaconitine, aconitine, hypaconitine에 대한 HPLC 동시분석법은 DNA 감별법과 더불어 국내 시장에 유통되고 있는 초오의 성분들을 정량함으로써 초오의 품질관리 및 표준화에 필요한 중요한 결과를 제시하고 있다. 21개 시료의 HPLC 함량분석으로 추측한 초오의 기원과 DNA 분석 결과는 일치하였다. DNA 분석 결과로 확인된 A.
3). AKT1504, AKT1511, AKT1514를 제외하고 시료 21개의 HPLC 함량분석으로 추측되는 초오의 기원 결과와 DNA분석 결과가 일치하였다(Table I). AKT1703은 A.
AKT1504, AKT1511, AKT1514를 제외하고 시료 21개의 HPLC 함량분석으로 추측되는 초오의 기원 결과와 DNA분석 결과가 일치하였다(Table I). AKT1703은 A. kusnezoffii으로 HPLC 함량분석에서 mesaconitine(3)의 함량이 높은 것으로 확인하였다. 또한 HPLC 함량분석으로 포제의 정도에 따른 A.
karakolicum으로 여겨진다. AKT1705, AKT1708, AKT1709에서 알 수 있듯이 포제가 많이 될수록 aconitine(4)의 함량은 줄고, benzoylaconine(2)이 늘었음이 확인되었다. AKT1701, AKT1702는 더 많이 포제가 되어 benzoylmesaconine(1)의 함량이 확연히 증가하였다(Fig.
kusnezoffii은 HPLC 함량분석에서 mesaconitine(3)의 함량이 높은 것으로 확인하였다. DNA 분석 결과로 확인된 A. karakolicum는 HPLC 함량분석 결과, 포제의 정도에 따라 mesaconitine(3)이 benzoylmesaconine(1)으로의 함량 변화가 컸을 것으로 생각된다.
21개 시료의 HPLC 함량분석으로 추측한 초오의 기원과 DNA 분석 결과는 일치하였다. DNA 분석 결과로 확인된 A. kusnezoffii은 HPLC 함량분석에서 mesaconitine(3)의 함량이 높은 것으로 확인하였다. DNA 분석 결과로 확인된 A.
DNA 비교 분석 − 2015년, 2017년 두 차례에 걸쳐 국내시장에서 24개의 초오를 수집하여 분석한 결과, 시료 AKT1504, AKT1511, AKT1514를 제외한 21개의 시료에서 ITS 1의 염기서열을 결정할 수 있었다(Table IV).
ITS 1 구간의 DNA분석 결과, 국내산으로 표기된 6개의 시료 중 AKT1502, AKT1505, AKT1703 세 개의 시료가 A. kusnezoffii 이삭바꽃 혹은 A. jaluense 투구꽃으로 확인되었으며(Fig. 1), 국내 공정서에서 정의되는 초오의 기준에 적합한 것으로 나타났다. 그러나 이를 제외한 나머지 국내산 표기 시료 AKT1701와 AKT1702는 중국 식물 종인 A.
검출한계와 정량한계 − 검량선의 직선 방정식의 y절편 값의 표준편차와 직선 방정식의 기울기를 이용하여 ICH 가이드라인에 따라 계산한 결과, benzoylmesaconine(1)의 검출한계는 0.13 μg/ml, 정량한계는 0.44 μg/ml을 나타내었으며 benzoylaconine(2)의 검출한계는 0.13 μg/ml, 정량한계는 0.45 μg/ml, mesaconitine(3)의 검출한계는 0.17 μg/ml, 정량한계는 0.25 μg/ml, aconitine(4)의 검출한계는 0.11 μg/ml, 정량한계는 0.37 μg/ml, hypaconitine(5)의 검출한계는 0.14μg/ml, 정량한계는 0.33 μg/ml로 측정되어 미량의 성분도 정량분석이 가능함을 확인하였다(Table III).
국내 시장에서 유통되고 있는 초오를 nrDNA의 ITS 1 염기서열의 비교분석을 통하여 확인 한 결과 A. kusnezoffii 이삭바꽃 혹은 A. jaluense(=A. triphyllum) 투구꽃인 것을 확인할 수 있었으며, 중국에서 수입된 초오는 모두 A. karakolicum인 것으로 판명되었다. 비록 국내산으로 표시되어 있는 제품에서도 A.
5, 125, 250, 500 μg/ml의 5가지 농도로 검량선을 작성하였다. 그 결과, 상관계수(R²⁾가 benzoylmesaconine(1)은 0.9889, benzoylaconine(2)는 0.9993, mesaconitine(3)은 0.9880, aconitine(4)는 0.9771, hypaconitine(5)는 0.9912를 나타내어 높은 직선성을 확인하였다. 이에 대한 직선 방정식은 benzoylmesaconine(1)은 y=7.
1), 국내 공정서에서 정의되는 초오의 기준에 적합한 것으로 나타났다. 그러나 이를 제외한 나머지 국내산 표기 시료 AKT1701와 AKT1702는 중국 식물 종인 A. karakolicum으로 확인되었다(Fig. 1). 특히, 국내산 표기 시료 중의 하나인 AKT1704의 시료를 반복적으로 ITS 1 염기서열을 분석한 결과, A.
jaluense 투구꽃의 일종으로 간주되고 있다. 따라서 본 논문에서는 비록 A. triphyllum 세잎돌쩌귀가 우리나라의 공정서에서는 초오의 기원식물의 하나로 정의되고 있으나, 최근 제시되고 있는 분류학적 처리에 따라 A. jaluense 투구꽃의 일종으로 판단하였다.
kusnezoffii으로 HPLC 함량분석에서 mesaconitine(3)의 함량이 높은 것으로 확인하였다. 또한 HPLC 함량분석으로 포제의 정도에 따른 A. karakolicum의 성분변화가 관찰되었다. AKT1706, AKT1707, AKT1710과 같이 aconitine(4)이 많이 검출된 초오는 포제를 하지 않은 A.
또한 중국 원산지 표시 된 총 18개 시료 중 AKT1504, AKT1511, AKT1514는 DNA 염기서열 확인이 불가능하였고, 나머지 15개 시료는 A. karakolicum으로 확인되었다(Fig. 1, Table IV). Luo (2016) 등도 중국에서 유통되고 있는 초오를 대상으로 ITS 염기서열을 분석한 결과 A.
염기서열의 비교 분석 결과, A. kusnezoffii 이삭바꽃과 A. jaluense 투구꽃은 동일한 ITS 1의 염기서열을 가지는 것으로 나타났고, A. ciliare 놋젓가락나물은 이 두 종과 252 bp 크기의 ITS 1에서 3개 염기의 차이가 있었으며, 1개 염기의 소실이 있는 것으로 나타났다(Fig. 1). 한편으로 A.
1). 특히, 국내산 표기 시료 중의 하나인 AKT1704의 시료를 반복적으로 ITS 1 염기서열을 분석한 결과, A. jaluense의 염기서열 (AKT1704-1, AKT1704-2)과 A. karakolicum의 염기서열(AKT1704-3, AKT1704-4) 두 종류가 나타났다(Fig. 1). 이는 AKT1704의 포장에 국내산으로 표기되어 있었으나, A.
1). 한편으로 A. karakolicum은 이들 세 종과 ITS 1에서 현저한 차이를 나타내어, 공정서에 제시되어있는 초오의 기원식물들과 뚜렷이 구별되었다(Fig. 1).

후속연구

중국약전에서는 초오를 적정 용량 포제하여 사용할 것을 권장하고 있으며, 포제가 제대로 이루어지지 않을 경우 중독 증상이 발생할 수 있다고 경고하고 있다.²⁾ 본 연구결과로 기원식물의 확인이 제대로 이루어지지 않은 상황을 고려해볼 때, 안정성을 위한 포제 처리와 기준함량 준수 확인을 필요로 한다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	초오의 약효는?	전통적으로 초오는 신경통, 관절통, 심장병, 고혈압 및 열성질환 등에 약효가 있는 것으로 알려져 있으며1) 주성분은 diterpenoid alkaloid 계열로 benzoylmesaconine, benzoylaconine, mesaconitine, aconitine, hypaconitine 등이 알려져 있다.2) 초오는 우리나라에서 미나리아재비과에 속하는 Aconitum kusnezoffii Rchb.
	A. triphyllum 세잎돌쩌귀가 최근 제시되고 있는 분류학적 처리에 따라 A. jaluense 투구꽃의 일종으로 판단되는 근거는?	jaluense Kom. 투구꽃과 형태학적 변이가 중첩되어 나타남으로써 종을 구분 짓는 한계가 애매하여, 분류학적 처리에 다양한 견해가 제시되어 왔으며5-7) 이는 종간 교배로 인한 잡종화에 기인한 것으로 추정되었고,8) flavonoid 분석에 의하여 확인된 바 있다.9) 이로 인하여 최근에는 A. triphullum 세잎돌쩌귀는 더 이상 독립된 종으로 인식되지 못하고 A. jaluense 투구꽃의 일종으로 간주되고 있다. 따라서 본 논문에서는 비록 A.
	초오의 주성분은?	전통적으로 초오는 신경통, 관절통, 심장병, 고혈압 및 열성질환 등에 약효가 있는 것으로 알려져 있으며1) 주성분은 diterpenoid alkaloid 계열로 benzoylmesaconine, benzoylaconine, mesaconitine, aconitine, hypaconitine 등이 알려져 있다.2) 초오는 우리나라에서 미나리아재비과에 속하는 Aconitum kusnezoffii Rchb.

참고문헌 (23)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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