[논문]결명자로부터 분리된 Aurantio-obtusin의 항염증 활성

이기호; 장지훈; 우경완; 노종현; 정호경; 조현우; 용주현; 안병관

결명자로부터 분리된 Aurantio-obtusin의 항염증 활성
Anti-inflammatory Effects of Aurantio-obtusin isolated from Cassia tora L. in RAW264.7 Cells 원문보기

생약학회지, v.50 no.1, 2019년, pp.11 - 17

이기호 (한약진흥재단 한약자원본부) , 장지훈 (한약진흥재단 한약자원본부) , 우경완 (한약진흥재단 한약자원본부) , 노종현 (한약진흥재단 한약자원본부) , 정호경 (한약진흥재단 한약자원본부) , 조현우 (한약진흥재단 한약자원본부) , 용주현 (해남자연농업영농조합법인) , 안병관 (한약진흥재단 한약자원본부)

Abstract ▼ AI-Helper

Cassia tora L. have been used as a folk medicine in Korea. This study investigated anti-inflammatory effect of aurantio-obtusin isolated from C. tora. We isolated aurantio-obtusin from 50% ethanol extracts of C. tora L. We investigated the anti-inflammatory effects of aurantio-obtusin on the lipopolysaccharide (LPS)-stimulated inflammatory response in murine macrophage cell line (Raw 264.7). To investigate the cytotoxicity of aurantio-obtusin on RAW 264.7 cells, MTS assay was performed. RAW 264.7 cells were treated with aurantio-obtusin at different concentrations (12.5, 25, 50, $100{\mu}M$) for 30 h. The result showed that aurantio-obtusin had no cytotoxic effect in a concentration range of $12.5-100{\mu}M$. To determine the effect of aurantio-obtusin on LPS-induced NO production, the NO concentration measurement was performed. RAW 264.7 cells were treated with aurantio-obtusin at 12.5, 25, 50 and $100{\mu}M$ for 24 h, and the results showed that the NO production of aurantio-obtusin-treated cells compared to LPS alone treated group was significantly decreased in a dose-dependent manner. Pretreatment of aurantio-obtusin inhibited LPS-induced NO production in a dose-dependent manner. To find out inhibitory mechanisms of aurantio-obtusin on inflammatory mediators, we examined the $PGE_2$ pathways. As a result, $PGE_2$ were decreased in a dose-dependent manner by aurantio-obtusin. The release of interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) and IL-6 were also reduced. Moreover, aurantio-obtusin suppressed LPL-induced $I{\kappa}B-{\alpha}$ degradation. These results suggest that the down regulation of NO, $PGE_2$, IL-$1{\beta}$ and IL-6 expression by aurantio-obtusin are achieved by the downregulation of NF-${\kappa}B$ activity.

주제어

표/그림 (7)

그림 Fig. 1. LC-MS chromatogram (A and B) and mass spectrum (C and D) of aurantio-obtusin from C. tora L. (A: LC chromatogram by UV at 286 nm, B: Total ion chromatogram by TOF-MS, C: Positive mode, D: Negative mode).
그림 Fig. 2. The chemical structure of aurantio-obtusin
그림 Fig. 3. Effect of aurantio-obtusin on cell viability in RAW 264.7 cells.
그림 Fig. 4. Effect of aurantio-obtusin on LPS-induced NO production in RAW 264.7 cells.
그림 Fig. 5. Effect of aurantio-obtusin on LPS-induced PGE₂ production in RAW 264.7 cells.
그림 Fig. 6. Effect of aurantio-obtusin on LPS-induced IL-6 (A), IL-1β (B) production in RAW 264.7 cells.
그림 Fig. 7. Effect of aurantio-obtusin on IκB-α degradation in LPS-induced RAW 264.7 cells.

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

따라서 본 연구에서는 aurantio-obtusin을 이용해 대식세포 주인 RAW264.7 세포에서 LPS로 유도시킨 염증반응을 관찰하여 결명자의 염증치료가능성을 보고자 한다.
이 연구는 결명자로부터 분리한 anthraquinone계열 화합물인 aurantio-obtusin을 colum chromatography법을 이용해 분리하였고, ¹H, ¹³C NMR과 TOF-ESI MS를 이용해 구조 동정하였으며, 분리한 성분의 항염증 효과의 가능성을 서술한 것이다. 염증반응은 유해한 자극원인 감염, 손상된 세포 등으로 일어나는 초기 생체반응 중 하나로 감염되거나 손상된 세포를 제거함과 동시에 원인이 되는 항원을 제거하는 후천적인 면역반응을 촉발시키는 것으로 알려져 있다.

제안 방법

분리한 성분은 Sigma aldrich Inc.(UK)의 DMSO-d₆ 를 사용해 용해시켰으며, Varian 600 spectrometer를 이용해 NMR(Nuclear magnetic resonance) spectrum을 측정하였다. Dulbecco's modified eagle’s medium(DMEM)과 fetal bovine serum (FBS), Penicillin-Streptomycin는 Gibco/BRL(EggensteinLeopoldshafen, Germany)에서 구입하였고, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfo–phenyl)-2H-tetrazolium(MTS), inner salt; phenazine ethosulfate(PES)가 포함된 The CellTiter 96^® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay와 Griess reagent system은 Promega (Madison, WI, USA)에서 구입하였다.
1% BSA에 든 anti-IκB-α(1:100) 처리하고 4oC에서 밤새 반응하였다.
Aurantio-obtusin의 염증관련 Cytokines의 생성 억제 효과 − Aurantio-obtusin이 RAW 264.7 cell에서 LPS로 유도 되는 각종 전염증성 및 염증성 cytokine들의 생성에 대한 영향을 조사하기 위하여 IL-6와 IL-1β의 생성을 조사하였다.
Aurantio-obtusin의 염증관련 Cytokines의 생성 억제 효과 − 본 실험에서는 IκB-α을 염색하여 염증반응에 의한 IκB-α degradation을 확인하여 NF-κB 핵내 유입을 간접적으로 관찰하였다.
Cytokines(IL-1β, IL-6) 측정 − Aurantio-obtusin의 염증성사이토카인 생성억제 효과를 측정하기 위해서 RAW 264.7 cell을 6 cm 배양 용기에 5×105 cells/ml로 분주하여 24시간 배양하여 세포를 안정화 시킨 뒤에 시료를 12.5~100 μM 전처리 한 뒤 2시간 후에 LPS를 500 ng/ml이 되도록 처리하 였다.
Dulbecco's modified eagle's medium(DMEM) 배지에 10% fetal bovine serum(FBS), 100 μg/ml streptomycin, 100 units/ml penicillin 첨가하여 CO2 배양기(MCO-17A1, Sanyo, Osaka, Japan)에서 온도 37oC, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
2 Kg YMC, Koyto, Japan)을 구입해 사용하였다. HPLC(Shimadzu, Kyoto, Japan)를 이용해 성분 스크리닝을 진행하였으며, LC-IT-TOF MS(Shimadzu, Kyoto, Japan)를 통해 성분의 추적 및 분리 성분의 구조 동정을 위한 분자량과 분자식 측정이 이루어졌다. LC와 LC-MS 분석에는 Water, Acetonitrile(Phillipsburg, NJ, USA), Formic acid(DAEJUNG, Korea)를 구입해 사용하였다.
Nitric Oxide(NO) 농도 측정 − Aurantio-obtusin의 NO 생성 억제를 측정하기 위해 시료를 12.5~100 μM 농도로 전처리하고, 2시간 후에 시료자체의 NO 생성에 영향이 있는지도 확인하기 위해 LPS를 처리(500 ng/ml) 혹은 무처리한 다음 RAW 264.7 cell를 24시간 배양하였다.
Prostaglandin E2(PGE2) 분석 − LPS 자극에 의하여 RAW 264.7 cell로부터 생성되는 prostaglandin E2(PGE2)양이 aurantio-obtusin에 의해 얼마나 감소하는가를 측정하기 위해 Nitric oxide(NO) 측정방법과 동일한 조건에서 배양된 세포 배양액을 PGE2 ELISA kit를 이용하여 분석하였다.
RAW 264.7 세포주에서 Aurantio-obtusin의 NO 생성 억제 효과 − RAW 264.7 세포주에서 aurantio-obtusin이 NO 생성을 저해하는지 확인하기 위해 aurantio-obtusin을 12.5~ 100 μM 농도로 전처리하고 2시간 후에 LPS(500 ng/ml)를 처리 혹은 무처리하여 24시간 배양하였다.
RAW 264.7 세포주에서 Aurantio-obtusin의 세포 독성 확인 − 항염증효과를 알아보기 전에 aurantio-obtusin이 RAW 264.7 세포에서 MTS assay를 통해 독성이 없는 농도를 확인하였다.
고정상인 ODS gel을 Glass Column(16 cm×60 cm)에 충진하여 water와 acetonitrile을 이동상으로 전개하였으며, 19개의 소분획물을 얻었다(MJ90-1~19). 각각의 분획물은 LC ITTOF MS(shimadzu, japan)를 이용해 스크리닝 하였으며, 분자량 측정을 통해 소분획물의 타겟성분을 추적하였다. 측정된 성분이 포함된 소분획물은 LC/MS 및 TLC를 이용해 분리 조건 설정 및 정제를 진행하였다.
세포 배양액 내 존재하는 PGE₂의 농도(pg/ml)는 표준용액의 농도를 기준으로 환산하였다. 구체적 실험방법은 kit에 있는 프로토콜대로 수행하였다.
5~ 100 μM 농도로 전처리하고 2시간 후에 LPS(500 ng/ml)를 처리 혹은 무처리하여 24시간 배양하였다. 그 후 상층액을 취하여 griess 시약을 이용해 NO 생성량을 확인하였다. 그 결과 LPS를 처리하지 않고 aurantio-obtusin을 12.
5~100 μM 농도로 처리 하고 2시간후에 LPS(500 ng/ml)를 처리하여 24시간 배양하였다. 그 후 세포 상등액만 취하여 PGE₂ 생성이 aurantio-obtusin의해 저해되는지 ELISA kit를 이용하여 분석하였다. LPS에 의해 Raw 264.
1% BSA에 든 anti-IκB-α(1:100) 처리하고 4^oC에서 밤새 반응하였다. 그런 후에 2차 anti-rabbit FITC conjugated(1:200)와 DAPI를 처리하고 실온에서 4시간 반응하였다. 마지막으로 PBS로 3회 세척 후 cover slip을 fluorescence solution(DAKO cytomation, Carpinteria, CA)으로 고정 시킨 후 fluorescence microscope(Carl Zeiss, Oberkochen, Germany)로 관찰하였다.
그런 후에 2차 anti-rabbit FITC conjugated(1:200)와 DAPI를 처리하고 실온에서 4시간 반응하였다. 마지막으로 PBS로 3회 세척 후 cover slip을 fluorescence solution(DAKO cytomation, Carpinteria, CA)으로 고정 시킨 후 fluorescence microscope(Carl Zeiss, Oberkochen, Germany)로 관찰하였다.
면역형광염색(Immunofluorescence) 분석 − Aurantio-obtusin이 염증 세포신호전달과 관련된 IκB-α의 degradation정도를 확인하기 위하여 immunofluorescence 실험방법을 이용하여 IκB-α와 핵을 염색하여 확인하였다.
성분 확인을 위한 박층크로마토그래피(TLC, Thin layer chromatography) 는 TLC plates(Silica gel 60 F254, Silica gel 60 RP-18 F254S)를 사용하였으며, 성분 분리를 위한 고정상은 silica gel(70-230 mesh, Merck, Darmstadt, Germany)과 ODS gel(50 μm, 1.2 Kg YMC, Koyto, Japan)을 구입해 사용하였다.
측정된 성분이 포함된 소분획물은 LC/MS 및 TLC를 이용해 분리 조건 설정 및 정제를 진행하였다. 소분획물 16과 17을 Silica gel(70-230 mesh, Merck, Germany)을 이용한 순상 컬럼크로마토그래피를 n-Hexane: EtOAc=2:1 ~ 1:1의 비율로 실시하여 MJ90-1617-1(Aurantio-obtusin)을 분리하였다.
앞의 실험방법대로 수행한 결과 모든 농도에서 세포독성이 없는 것을 확인하였고, 이 후 항염증 실험에서 12.5~100 μM 농도로 실험을 수행하였다(Fig. 3).
염증 유도된 RAW 264.7 세포주에서 aurantio-obtusin의 Prostaglandin E2(PGE2) 생성 억제 효과 − RAW 264.7 세포주에서 aurantio-obtusin이 PGE2 생성을 저해하는지 확인하기 위해 aurantio-obtusin을 12.5~100 μM 농도로 처리 하고 2시간후에 LPS(500 ng/ml)를 처리하여 24시간 배양하였다.
추출물을 증류수에 현탁 시킨 후 ODS gel(50 μm, 1.2 Kg YMC)을 이용한 Open column chromatography를 진행하였다.
각각의 분획물은 LC ITTOF MS(shimadzu, japan)를 이용해 스크리닝 하였으며, 분자량 측정을 통해 소분획물의 타겟성분을 추적하였다. 측정된 성분이 포함된 소분획물은 LC/MS 및 TLC를 이용해 분리 조건 설정 및 정제를 진행하였다. 소분획물 16과 17을 Silica gel(70-230 mesh, Merck, Germany)을 이용한 순상 컬럼크로마토그래피를 n-Hexane: EtOAc=2:1 ~ 1:1의 비율로 실시하여 MJ90-1617-1(Aurantio-obtusin)을 분리하였다.

대상 데이터

(Danvers, MA, USA)에서 구입하였다. Anti-rabbit FITC conjugate antibodies는 Thermo Fisher Scientific(Waltham, MA, USA)에서 구입하였다.
Dulbecco's modified eagle’s medium(DMEM)과 fetal bovine serum (FBS), Penicillin-Streptomycin는 Gibco/BRL(EggensteinLeopoldshafen, Germany)에서 구입하였고, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfo–phenyl)-2H-tetrazolium(MTS), inner salt; phenazine ethosulfate(PES)가 포함된 The CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay와 Griess reagent system은 Promega (Madison, WI, USA)에서 구입하였다.
HPLC(Shimadzu, Kyoto, Japan)를 이용해 성분 스크리닝을 진행하였으며, LC-IT-TOF MS(Shimadzu, Kyoto, Japan)를 통해 성분의 추적 및 분리 성분의 구조 동정을 위한 분자량과 분자식 측정이 이루어졌다. LC와 LC-MS 분석에는 Water, Acetonitrile(Phillipsburg, NJ, USA), Formic acid(DAEJUNG, Korea)를 구입해 사용하였다. 분리한 성분은 Sigma aldrich Inc.
고정상인 ODS gel을 Glass Column(16 cm×60 cm)에 충진하여 water와 acetonitrile을 이동상으로 전개하였으며, 19개의 소분획물을 얻었다(MJ90-1~19).
세포주 및 세포배양 − 본 실험에서 사용한 RAW 264.7 세포주는 American Type Culture Collection(ATCC, Virginia, USA)에서 분양받았다.
시약 및 기기 − 결명자의 추출 및 성분 분리에 사용된 methanol, n-hexane, methylene chloride, ethyl acetate, n-butanol은 DAEJUNG(Korea)에서 구입하였다.
실험재료 − 본 실험에 이용한 결명자는 2015년 6월에 전남 장흥에서 구입 해 목포대학교 한약자원학과 김휘 교수의 동정 후 실험에 이용하였고, 표본(표본번호: TKMII-9)은 한약진흥재단 한약재연구팀에서 보관하였다.

데이터처리

Different letters are significantly different at p<0.05 by Duncan’s Multiple range test.
대조군과 각 실험군과의 평균의 차이는 일원 분류 분산분석(one way analysis of variance)을 통하여 검증하였고, 유의성은 Duncan’s multiple range test를 이용하여 p<0.05 수준에서 평가하였다.
통계처리 − 본 실험에서 얻은 결과에 대해서는 SPSS Statistics 25 Standard for Public Service 프로그램으로 통계분석을 하였으며, 평균치 ± 표준편차(mean ± S.D.)로 나타 내었다.

이론/모형

세포 독성 평가(MTS 분석) − Aurantio-obtusin의 세포 독성이 있는지 확인하기 위해 MTS assay를 실시하였다.

성능/효과

그 후 세포 상등액만 취하여 PGE₂ 생성이 aurantio-obtusin의해 저해되는지 ELISA kit를 이용하여 분석하였다. LPS에 의해 Raw 264.7 세포에서 PGE₂ 생성이 약 33배 이상 증가되는 것을 확인하였고, aurantio-obtusin을 처리하였을 때 농도별로 유의성 있게 PGE₂ 생성이 감소되였고, 이는 aurantio-obtusin이 PGE₂ 생성 활성을 낮춤으로써 항염증 효과가 있음을 시사한다(Fig. 5).
그 결과 LPS를 처리하지 않고 aurantio-obtusin을 12.5~100 μM 처리한 군에서는 유의적인 차이가 없었다.
세포 상등액을 ELISA 방법으로 측정한 결과 aurantioobtusin 12.5~100 μM 농도에서 IL-6, IL-1β를 농도 의존적으로 억제하는 걸 확인하였고, 25 μM 농도이상에서는 유의적으로 감소되는 것을 관찰할 수 있었다(Fig. 6).
지표성분 구조 분석 − MJ90-1617-1의 LC/MS 분석 결과 m/z 331.0743 [M+H]+, 329.0673 [M-H]- 의 분자량 및 C17H14O7 의 분자식을 확인하였다(Fig. 1).

후속연구

19) 이러한 사실에 기초하여 결명자에서 추출 분리한 aurantio-obtusin의 항염증 연구를 한 결과 대식세포에서 LPS에 의해 유도된 NO, PGE2, 염증성 cytokine인 IL-6 와 IL-1β를 농도의존적으로 감소되는 것을 확인하였지만, 추가 기전 연구에 대해서는 많은 연구들이 필요할 것으로 사료된다.
¹⁹⁾ 이러한 사실에 기초하여 결명자에서 추출 분리한 aurantio-obtusin의 항염증 연구를 한 결과 대식세포에서 LPS에 의해 유도된 NO, PGE₂, 염증성 cytokine인 IL-6 와 IL-1β를 농도의존적으로 감소되는 것을 확인하였지만, 추가 기전 연구에 대해서는 많은 연구들이 필요할 것으로 사료된다. 추가적인 결명자 함유 단일 성분의 분리 및 항염증 관련 효능을 규명함으로써 향후 기능성 소재로의 이용 가능성을 제시한다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	염증(inflammation)이란 무엇입니까?	염증(inflammation)이란 생체방어기작으로 물리적인 충격이나 화학물질, 세균 감염 등의 자극에 대항하는 것을 말한다. 이 과정에서 다양한 세포와 사이토카인들이 관여하게 되는데, 외부자극원으로 그람 음성균의 구성물질인 lipopolysaccharide(LPS), 내부자극원으로 arachidonic acid 대사체 등을 주요 매개로 하여 세포대세포 상호작용, 염증성 세포의 염증부위로의 이동 및 표적항원의 붕괴 등 여러 면역반응을 일으키게 된다.
	대식세포의 종류는 무엇이 있습니까?	대식세포(macrophage)는 선천면역과 적응면역 등 다양한 면역반응에 관여하는 세포로 알려져 있다. 대식세포는 직접적으로 항원들을 제거해 면역반응에 관여 하는 M1과 항상성, 조직손상복구 대사작용 등에 관여해 광범위한 생리학적 역할을 하는 M2의 두 종류로 나뉜다. 항원에 의해 활성화된 대식세포는 일산화질소(NO)와 interferon gamma(IFNγ), tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-6(IL-6) 및 interleukin-1β(IL-1β)와 같은 염증매개성 사이토카인 분비를 촉진시켜 감염초기 생체방어에 중요한 역할을 한다.
	염증반응의 부작용은 무엇입니까?	염증반응은 유해한 자극원인 감염, 손상된 세포 등으로 일어나는 초기 생체반응 중 하나로 감염되거나 손상된 세포를 제거함과 동시에 원인이 되는 항원을 제거하는 후천적인 면역반응을 촉발시키는 것으로 알려져 있다.13) 하지만 정상세포 등을 인식하지 못하게 되거나, 일부 적은 자극에도 큰 반응성을 나타내는 등 비정상적인 염증 반응에 의해 지속적인 통증을 겪게 된다.14) 최근에는 여러 항염증 치료제들의 외부 미생물에 의한 감염 노출 위험성, 위장관의 소화장애, 과민반응 등 부작용이 보고되었으며, 이를 극복할 수 있는 항염증 활성성분을 찾는 연구가 활발히 진행되고 있다.15,16) NO, PGE2, cytokine, chemokine 등 다양한 염증 관련 물질을 분비하는 것으로 알려진 대식세포와,17,18) 이를 자극하는 항원으로 잘 알려진 LPS는 그람 음성균의 외막에서 관찰되며, 대식세포의 표면에 있는 수용체인 TLR4와 결합을 통해 평소에는 세포질에 Iκ-B에 의해 억제되어 있던 NF-κB가 염증반응이 촉진되게 되면 Iκ-B가 붕괴(degradation)되고 NF-κB가 핵 안으로 전이(translocation)되어 전사인자로서 각종 염증 관련 매개 물질의 분비를 촉진시키게 된다.

참고문헌 (19)

Medzhitov, R. and Janeway Jr., C. A. (1997) Innate immunity: impact on the adaptive immune response. Curr. Opin. Immunol. 9: 4-9.

상세보기
Tao, J. Y., Zheng, G. H., Zhao, L., Wu, J. G., Zhang, X. Y., Zhang, S. L., Huang, Z. J., Xiong, F. L. and Li, C. M. (2009) Anti-inflammatory effects of ethyl acetate fraction from Melilotus suaveolens Ledeb on LPS-stimulated RAW 264.7 cells. J. Ethnopharmacol. 123: 97-105.

상세보기
생약학교재편찬위원회 (2012) 생약학, 304-306. 동명사, 서울.
한방약리학교재편찬위원회 (2010) 한방약리학, 419-422. 신일북스, 서울.
Nho, J. H., Jung, H. K., Lee, M. J., Jang, J. H, Sim, M. O., Jung, J. K., Lee, K. H., An, B. K., Cho, J. H., Jang, M. C., Yong, J. H. and Cho, H. W. (2016) Effect of roasted water extract of fermented Cassia tora L. by Lactobacillus casei on the loperamide-induced constipation model in rats. Korean J. Med. Crop Sci. 24: 471-478.
Ahn, J. Y., Um, M. Y., Hong, K. H. and Ha, T. Y. (2012) Effect of Cassia tora extracts on D-galactosamine-induced liver injury in rats. Korean J. Food. Nutr. 25: 546-553.
Bin-Hafeez, B., Ahmad, I., Haque, R. and Raisuddin, S. (2001) Protective effect of Cassia occidentalis L. on chclophosphamide- induced suppression of humoral immunity in mice. J. Ethnopharmacol. 75: 13-18.
Ha, T. Y., Cho, I. J. and Lee, H. Y. (2001) Effect of Cassia tora ethanol extracts on carbon tetrachloride-induced liver injury in rats. Korean J. Food. Sci. Technol. 33: 789-794.
Li, L., Li, Q., Lv, X., Liao, L., Yang, W., Li, S., Lu, P. and Zhu, D. (2015) Aurantio-obtusin relaxes systemic arteries through endothelial PI3K/AKT/eNOS-dependent signaling pathway in rats. J. Pharmacol. Sci. 128: 108-115.
Kim, M., Lim, S. J., Lee, H. J. and Nho, C. W. (2015) Cassia tora seed extract and its active compound aurantio-obtusin inhibit allergic responses in IgE-mediated mast cells and anaphylactic models. J. Agric. Food Chem. 63: 9037-9046.

상세보기
Choi, J. S., Jung, J. H., Lee, H. J. and Kang, S. S. (1996) The NMR assignments of anthraquinones from Cassia tora. Arch. Pharm. Res. 19: 302-306.

원문보기 상세보기
Zhu, L., Yu, S., Zeng, X., Fu, X. and Zhao, M. (2008) Preparative separation and purification of five anthraquinones from Cassia tora L. by high-speed counter-current chromatography. Sep. Purif. Technol. 63: 665-669.

상세보기
Ferrero-Miliani, L., Nielsen, O. H., Andersen, P. S. and Girardin, S. E. (2007) Chronic inflammation: importance of NOD2 and NALP3 in interleukin-1beta generation. Clin. Exp. Immunol. 147: 227-235.
Lechner, M., Lirk, P. and Rieder, J. (2005) Inducible nitric oxide synthase (iNOS) in tumor biology: the two sides of the same coin. Semin. Cancer Biol. 15: 277-289.

상세보기
Jung, H. K., Kang, B. M., Jang, J. H., Ahn, B. K., Yeo, J. H., Jung, W. S., Cho, J. H., Kuk Y. I., Hyun, K. H. and Cho, H. W. (2014) Inhibitory effect of Alopecurus aequalis Sobol ethanol extracts on LPS-induced inflammatory response in RAW 264.7 cells. Korean J. Med. Crop. Sci. 22: 98-104.
Lee, K. S., Kim, G. H., Seong, B. J., Kim, S. I., Han, S. H., Lee, S. S., Yang, H. and Yoo, Y. C. (2014) Anti-inflammatory activity of solvent fractions from ginseng berry extract in LPS-induced RAW264.7 cells. Korean J. Med. Crop. Sci. 22: 449-456.
Sarkar, D., Saha, P., Gamre, S., Bhattacharjee, S., Hariharan, C., Ganguly, S., Sen, R., Mandal, G., Chattopadhyay, S., Majumdar, S. and Chatterjee, M. (2008) Anti-inflammatory effect of allylpyrocatechol in LPS-induced macrophages is mediated by suppression of iNOS and COX-2 via the NFkappaB pathway. Int. immunopharmacol. 8: 1264-1271.
Southan, G. J. and Szabo, C. (1996) Selective pharmacological inhibition of distinct nitric oxide synthase isoforms. Biochem. Pharmacol. 51: 383-394.

상세보기
Tsai, W. H., Huang, D. Y., Yu, Y. H., Chen, C. Y. and Lin, W. W. (2011) Dual roles of NOD2 in TLR4-mediated signal transduction and -induced inflammatory gene expression in macrophages. Cell Microbiol. 13: 717-730.

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증