[논문]대청룡탕(大靑龍湯)이 DNCB로 유발된 생쥐의 아토피피부염에 미치는 영향

김지은; 이호찬; 강은정; 최정화; 김종한; 박수연; 정민영

doi:10.6114/jkood.2019.32.3.058

대청룡탕(大靑龍湯)이 DNCB로 유발된 생쥐의 아토피피부염에 미치는 영향
Effects of Daecheonglyong-tang on Atopic Dermatitis Induced by DNCB in Mice 원문보기

韓方眼耳鼻咽喉皮膚科學會誌 = The journal of Korean Medicine Ophthalmology & Otolaryngology & Dermatology, v.32 no.3, 2019년, pp.58 - 76

김지은 (동신대학교 한의과대학 안이비인후피부과학교실) , 이호찬 (동신대학교 한의과대학 안이비인후피부과학교실) , 강은정 (동신대학교 한의과대학 안이비인후피부과학교실) , 최정화 (동신대학교 한의과대학 안이비인후피부과학교실) , 김종한 (동신대학교 한의과대학 안이비인후피부과학교실) , 박수연 (동신대학교 한의과대학 안이비인후피부과학교실) , 정민영 (동신대학교 한의과대학 안이비인후피부과학교실)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : This study was designed to examine the effects of Daecheonglyong-tang(DCL) on atopic dermatitis induced by DNCB in mice Methods : The Nc/Nga mice were divided into 5 groups, and four groups excluding the normal group were applied by 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB), to cause AD and were orally administered with distilled water(negative control), dexamethasone(positive control), and DCL 200 or 400mg/kg once a day for 4 weeks respectively. The visual changes on skin, changes in skin tissue thickness and eosinophil infiltration were observed. IgE, Histamine, Cytokines, immune cells and the amount of gene expression of filaggrin, VEGF, $TGF-{\beta}1$, EGF were measured. Results : Dermatitis score showed a gross improvement on all DCL groups, similar to or better than positive control. All DCL groups showed no significant change in the basophils, while neutrophils and eosinophils decreased. In only DCL 400 mg/kg groups, white blood cells and mononuclear cells were decreased and lymphocytes were increased. In particular, neutrophils had similar or better effects than the positive control. In all DCL groups, IgE, Histamine, $IL-1{\beta}$, IL-4, IL-5, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ were decreased and IL-2 was increased. In only DCL 400 mg/kg groups, IL-10 decreased and $IFN-{\gamma}$ increased. In particular, $IL-1{\beta}$ and $IFN-{\gamma}$ showed a similar rate of increase and decrease comparing positive control in DCL 400 mg/kg. $TGF-{\beta}$1 was increased in all DCL groups, filaggrin and VEGF were increased in only DCL 400 mg/kg groups. EGF did not make any changes. Epidermis, dermis thickness and eosinophil infiltration were also decreased in all DCL groups. Conclusions : By increasing Th1 cytokine and decreasing Th2 cytokine, DCL extracts appear to be effective in controlling immune response imbalances, anti-inflammatory and skin regeneration and are likely to be available as a treatment for AD.

주제어

표/그림 (27)

표 Table 1. The Prescription of DCL
표 Table 2. The Sequences of Primers for Real-Time PCR
그림 Fig. 1. HPLC Analysis of DCL
그림 Fig. 2. Effects of DCL on Skin Lesions in the DNCB-induced AD Mice(A : photography example, B : dermatitis score)
표 Table 3. Content of Pb, As, Cd and Hg in DCL
그림 Fig. 3. The Effects of DCL on White Blood Cell Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 4. The Effects of DCL on Monocyte Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 5. The Effects of DCL on Neutrophil Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 6. The Effects of DCL on Eosinophil Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 7. The Effects of DCL on Basophil Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 8. The Effects of DCL on Lymphocyte Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 9. The Effects of DCL on IgE Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 10. The Effects of DCL on Histamine Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 11. The Effects of DCL on IL-1β Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 12. The Effects of DCL on IL-2 Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 13. The Effects of DCL on IL-4 Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 14. The Effects of DCL on IL-5 Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 15. The Effects of DCL on IL-6 Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 16. The Effects of DCL on IL-10 Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 17. The Effects of DCL on TNF-α Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 18. The Effects of DCL on IFN-γ Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 19. The Effects of DCL on Filaggrin mRNA Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 20. The effects of DCL on VEGF mRNA level in the DNCB-induced AD mice
그림 Fig. 21. The Effects of DCL on TGF-β1 mRNA Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 22. The Effects of DCL on EGF mRNA Level in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 23. The Effects of DCL on Skin Thickness in the DNCB-induced AD Mice
그림 Fig. 24. The Effects of DCL on Eosinophil Infiltration in the DNCB-induced AD Mice

AI 본문요약
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* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

이에 저자는 DCL이 AD에 유의한 효능이 있는지 알아보기 위해, 백서에 DNCB(2,4-dinitrochlorobenzene) 용액을 도포하여 AD을 유발시킨 후 각 실험군에 증류수, dexamethasone, DCL을 경구 투여하여 피부의 육안적인 상태, 혈액 내 IgE, Histamine, 각종 Cytokine, 면역관련 세포, 조직 내 Filaggrin, VEGF, TGF-β1, EGF 등의 변화를 관찰하여 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.

제안 방법

. 때문에 DNCB를 마우스의 AD를 유발하기 위한 시료로 사용했으며, 정상군을 제외한 모든 군에 DNCB를 처리하여 피부염 유발을 확인하였다. 처리 6주차에 각 군의 피부 상태를 항목별로 평가하여 채점한 결과, 음성대조군과 비교하여 DCL 투여군은 AD의 증상이 현저하게 감소되었을 뿐 아니라 양성대조군에 비해 비슷하거나 더 우수한 효과를 나타내었다(Fig.
이에 저자는 DCL이 AD에 유의한 효능이 있는지 알아보기 위해, 백서에 DNCB 용액을 도포하여 AD을 유발시킨 후 증류수를 투여한 Negative control군, Dexamethasone을 투여한 Positive control군, DCL 의 저농도(200㎎/㎏) 및 고농도(400㎎/㎏) 투여군 그리 고 normal군 까지 총 5개의 비교군으로 나누어 본 연구를 시행하였다. 비교군에는 각각의 시료를 매일 1회 4주간 경구 투여한 뒤, 피부의 육안적인 상태, 혈액 내 IgE, Histamine, 각종 Cytokine, 면역관련세포 그리고 조직 내 Filaggrin, VEGF, TGF-β1, EGF 등의 변화를 관찰하였다.

대상 데이터

본 실험에 사용된 Nc/Nga mice(5주령, 수컷, 15-18g)는 ㈜라온바이오(Korea)에서 공급받아 실험 당일까지 물과 고형사료를 충분히 공급하고 온도 22±2℃, 습도 55±15%, 12시간-12시간(light-dark cycle)의 환경에서 1주일간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 본 실험은 대전대학교 동물실험윤리 위원회의 승인(승인번호: DJUARB2018-011)을 받아 동물윤리준칙에 의거하여 실험하였다.
본 실험에 사용한 大靑龍湯(石膏, 麻黃, 桂枝, 杏仁, 甘草, 生薑, 大棗 complex extract, DCL)의 구성 약재들은 대전한약국에서 구입하여 사용하였고, 그 내용 및 분량은 다음과 같다(Table 1).

데이터처리

결과는 SPSS 18.0의 ANOVA를 이용한 통계처리 및 Dunkan test로 사후검정 하였고 p<0.001, p<0.01 및 p<0.05 수준에서 그 유의성을 검정하였다.

성능/효과

DNCB 처리에 의하여 정상군을 제외한 모든 그룹에서 심한 상처와 짓무름에 의한 피부염 유발 현상을 확인하였으며, 6주차에 각 그룹의 피부상태를 육안으로 관찰한 결과, 대조군은 시간이 지날수록 각질의 각화와 탈락의 현상이 심한 반면, DCL 투여군은 AD의 증상이 현저하게 감소되는 것을 관찰할 수 있었다(Fig. 2).
2. 면역세포 분석 결과, 모든 DCL 투여군은 호염구는 차이를 보이지 않았으며, 호중구, 호산구는 유의한 감소를 보였으며, 백혈구, 단핵구는 DCL 400㎎/㎏ 에서만 유의하게 감소하였고, 림프구는 DCL 400㎎ /㎏에서만 유의하게 증가하였다. 특히 호중구는 양 성대조군과 비슷하거나 더 우수한 효과를 보였다.
실험 결과 EGF는 유의한 변화가 없었으나(Fig. 22), 섬유모세포의 증식과 전체 상처치유과정에 중요한 역할을 하는 TGF-β1³⁹⁾은 모든 투여군에서 유전자 발현량이 증가하였으며(Fig.
이상의 결과들을 종합해 보면, DCL은 Th1/Th2 면역 반응의 불균형으로 발생한 AD에서 Th1 cytokine (IL-2, IFN-γ)을 유의하게 증가시키고 Th2 cytokine (IL-4, IL-5, IL-6, IL-10)을 유의하게 감소시킴으로써, B세포의 생산과 분화를 억제하고 Th1/Th2 면역 반응의 항상성을 유지시키는 작용이 있으며, 그로 인해 IgE 의 합성을 감소시키고 호산구를 억제하여 histamine의 방출을 차단함으로써 염증성 cytokine(TNF-α, IL-1β) 을 억제한 것으로 보인다. 그 뿐만 아니라 DCL은 피부 조직의 재생에 관련된 filaggrin, VEGF, TGF-β1, EGF 유전자 발현량을 증가시킴으로써 피부조직의 손상과 염증 반응을 감소시켰다.

후속연구

따라서 AD에 있어서 DCL이 면역조절 및 항염증, 피부재생의 효과가 있을 것으로 판단되며 본 연구결과를 바탕으로 조직 내에서 발현되는 지표를 이용한 자세한 효능 보강 및 임상 실험이 뒷받침 된다면 AD치료를 위한 한의학적 처방으로써 활용이 가능할 것으로 보인다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	DCL 치료가 스테로이드제제 치료와 비교했을 때도 의미가 있는 이유는 무엇인가?	그 뿐만 아니라 DCL은 피부조직의 재생에 관련된 filaggrin, VEGF, TGF-β 1, EGF 유전자 발현량을 증가시킴으로써 피부조직의 손상과 염증 반응을 감소시켰다. 또한 양성대조군과 비교하여 일부 지표에서는 더 우수하거나 동등한 효과를 보이기도 하여, DCL 치료가 스테로이드제제 치료와 비교했을 때도 의미가 있다고 볼 수 있다.
	아토피피부염의 원인은 무엇인가?	특히 서구화된 국가의 유병률이 높고, 개발도상국에서도꾸준히 증가하고 있다. 그 원인으로 대기오염, 주거환경의 변화, 소아기 항생제사용 증가, 정신적 스트레스 증가 등이 추측되고 있으며, 특히 최근 국내 성인 AD 환자가 많아지는 추세이다1,2).
	outside-in model 이론은 무엇을 설명하는가?	outside-in model 이론은 표피장벽의 결함에 초점을 두고 AD의 발병 기전을 설명한다. 표피장벽의 기능장애는 AD 환자의 정상 피부에서도 나타나며, 각질층수화의 감소, 경피 수분 손실의 증가 및 특정 구조적 결손 등이 특징적으로 관찰된다.

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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