[논문]신서란(Phormium tenax) 잎 조추출물 및 용매 분획물의 항염증 및 항아토피 효과

양권민; 송상목; 이도승; 윤원종; 김찬식; 김창숙

doi:10.7732/kjpr.2019.32.5.433

신서란(Phormium tenax) 잎 조추출물 및 용매 분획물의 항염증 및 항아토피 효과
Anti-inflammatory and Anti-Atopic Effects of Crude Extracts and Solvent Fractions of Phormium tenax leaf 원문보기

韓國資源植物學會誌 = Korean journal of plant resources, v.32 no.5, 2019년, pp.433 - 441

양권민 ((재)제주테크노파크 생물종다양성연구소) , 송상목 ((주)더마프로) , 이도승 ((재)제주테크노파크 생물종다양성연구소) , 윤원종 ((재)제주테크노파크 생물종다양성연구소) , 김찬식 (제주대학교 생명자원과학대학 생명공학부) , 김창숙 (제주대학교 생명자원과학대학 생명공학부)

초록
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본 연구는 하라케케(Harakeke)로 불리는 신서란(Phormium tenax)를 화장품 및 의약품산업의 기능성 소재로서의 이용 가능성을 확인하기 위하여 신서란 잎을 대상으로 70% 에탄올 추출물과 용매 분획물을 제조하여, 이것들의 항염증 및 항아토피의 효과를 조사하였다. LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에서 신서란 에탄올 추출물과 용매 분획물의 항염증 효과를 조사한 결과, methylene chloride와 ethyl acetate 분획물에서 NO와 $PGE_2$ 생성 억제 활성이 가장 높게 나타났으며, 농도 의존적으로 NO와 $PGE_2$ 생성 억제 활성을 보였다. 또한, 이들 분획물에서는 iNOS 및 COX-2 발현 억제 활성을 보였다. 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물에 의한 NO, $PGE_2$ 생성 억제 활성이 NOS 및 COX-2 발현 억제에 의한 것임을 제시한다. 더불어, $hIFN-{\gamma}$로 자극된 HaCaT 세포에 용매 분획물을 처리하여 MDC 및 TRAC 생성억제 효과를 조사한 바, methylene chloride 분획물은 MDC 및 TATC의 생성을 각각 65%, 52% 생성억제 시켰으며, ethyl acetate 분획물은 MDC 및 TATC의 생성을 각각93%, 84% 억제 효과를 보였다. 이상의 결과는 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물을 이용한 항염증 및 항아토피 효능을 갖는 유효성분 분리 및 활용화 연구에 중요한 기초자료가 될 것이며, 기능성 화장품, 의약외품 및 의약품 소재 개발에 적용 가능성이 높다고 사료된다.

Abstract ▼ AI-Helper

This study describes a preliminary evaluation of the anti-inflammatory activity and anti-atopic activity of Phormium tenax leaf extracts. P. tenax leaf was extracted using 70% ethanol and then fractionated sequentially with n-hexane, methylene chloride, ethyl acetate, n-butanol. In order to effectively screen for anti-inflammatory agents, we first investigated the inhibitory effects of P. tenax leaf crude extracts and solvent fractions on production of pro-inflammatory factors[nitric oxide(NO), prostaglandin $E_2(PGE_2)$, inducible nitric oxide synthase(iNOS) and cyclooxygenase-2(COX-2)] and pro-inflammatory cytokines [tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$, interleukin-6(IL-6) and $interleukin-1{\beta}(IL-1{\beta})$] in lipopolysaccharide(LPS)-stimulated RAW 264.7 cells. In addition, we also evaluated of their inhibitory effect on the atopic dermatitis-like inflammatory markers such as macrophage-derived chemokine(MDC) and thymus and activation-regulated chemokine(TARC) in HaCaT cells. Among the five solvent fractions of P. tenax, methylene chloride and ethyl acetate fractions inhibited production of pro-inflammatory factors and pro-inflammatory cytokines in a dose dependent manner, respectively. These fractions were also showed inhibitory activity for MDC and TARC expression levels in $IFN-{\gamma}-stimulated$ HaCaT cells, respectively. These results suggest that P. tenax have significantly effects of anti-inflammatory activity and anti-atopic activity that might be beneficial for the topical treatment of inflammatory skin disorders.

주제어

표/그림 (8)

$Fig. 1. Inhibitory effect of crude extract and solvent fractions from P. tenax leaf on NO production and cytotoxicity in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): The production of nitric oxide(NO) was assayed in the culture medium of cells treated with LPS (1 ㎍/mL) for 24h in the presence of crude extract and solvent fractions (100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Cytotoxicity was determined using the LDH method. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01. (B) : Cells were treated by LPS (1 ㎍/mL) for 24h in the presence of CH2Cl2 (MC) fractions (25, 50 and 100 ㎍/mL).$ 그림 Fig. 1. Inhibitory effect of crude extract and solvent fractions from P. tenax leaf on NO production and cytotoxicity in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): The production of nitric oxide(NO) was assayed in the culture medium of cells treated with LPS (1 ㎍/mL) for 24h in the presence of crude extract and solvent fractions (100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Cytotoxicity was determined using the LDH method. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01. (B) : Cells were treated by LPS (1 ㎍/mL) for 24h in the presence of CH₂Cl₂ (MC) fractions (25, 50 and 100 ㎍/mL).
$Fig. 2. Inhibitory effect of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on PGE2 production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): Cells(1.8×105 cells/mL) were stimulated by LPS(1 ㎍/mL) for 24h in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P, tenax leaf. Supernatants were collected, and the PGE2 concentration in the supernatants was determined by ELISA. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01. (B) : Cells were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24h in the presence of CH2Cl2 (MC) fractions(25, 50 and 100 ㎍/mL).$ 그림 Fig. 2. Inhibitory effect of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on PGE₂ production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): Cells(1.8×10⁵ cells/mL) were stimulated by LPS(1 ㎍/mL) for 24h in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P, tenax leaf. Supernatants were collected, and the PGE₂ concentration in the supernatants was determined by ELISA. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01. (B) : Cells were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24h in the presence of CH₂Cl₂ (MC) fractions(25, 50 and 100 ㎍/mL).
$Fig. 3. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on the protein level of iNOS and COX-2 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): RAW 264.7 cells(1 × 106 cells/mL) were pre-incubated for 18 hr, and the cells were treated with LPS(1 ㎍/mL) in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P, tenax leaf for 24 hr. iNOS and COX-2 protein levels were determined using immunoblotting method. (B): Cells were treated by LPS(1 ㎍ /mL) for 24h in the presence of CH2Cl2 (MC) fractions(25, 50 and 100 ㎍/mL).$ 그림 Fig. 3. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on the protein level of iNOS and COX-2 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): RAW 264.7 cells(1 × 10⁶ cells/mL) were pre-incubated for 18 hr, and the cells were treated with LPS(1 ㎍/mL) in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P, tenax leaf for 24 hr. iNOS and COX-2 protein levels were determined using immunoblotting method. (B): Cells were treated by LPS(1 ㎍ /mL) for 24h in the presence of CH₂Cl₂ (MC) fractions(25, 50 and 100 ㎍/mL).
$Fig. 4. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on TNF-α production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): Cells(1.8 × 105 cells/mL) were treated by LPS (1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Supernatants were collected, and the TNF-α concentration in the supernatants was determined by ELISA. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01 (B): Cells(1.8 × 105 cells/mL) were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of CH2Cl2 (MC) fractions(25, 50 and 100 ㎍/mL).$ 그림 Fig. 4. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on TNF-α production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): Cells(1.8 × 105 cells/mL) were treated by LPS (1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Supernatants were collected, and the TNF-α concentration in the supernatants was determined by ELISA. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01 (B): Cells(1.8 × 10⁵ cells/mL) were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of CH₂Cl₂ (MC) fractions(25, 50 and 100 ㎍/mL).
$Fig. 5. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on IL-6 production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): Cells(1.8 × 105 cells/mL) were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Supernatants were collected, and the IL-6α concentration in the supernatants was determined by ELISA. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01 (B): Cells were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of CH2Cl2 (MC) fractions (25, 50 and 100 ㎍/mL).$ 그림 Fig. 5. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on IL-6 production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): Cells(1.8 × 10⁵ cells/mL) were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Supernatants were collected, and the IL-6α concentration in the supernatants was determined by ELISA. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01 (B): Cells were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of CH₂Cl₂ (MC) fractions (25, 50 and 100 ㎍/mL).
$Fig. 6. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on IL-1β production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): Cells(1.8 × 105 cells/mL) were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Supernatants were collected, and the IL-1β concentration in the supernatants was determined by ELISA. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01 (B): Cells were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of CH2Cl2 (MC) fractions(25, 50 and 100 ㎍/mL).$ 그림 Fig. 6. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on IL-1β production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. (A): Cells(1.8 × 10⁵ cells/mL) were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Supernatants were collected, and the IL-1β concentration in the supernatants was determined by ELISA. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01 (B): Cells were treated by LPS(1 ㎍/mL) for 24 h in the presence of CH₂Cl₂ (MC) fractions(25, 50 and 100 ㎍/mL).
$Fig. 7. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on MDC production in hIFN-γ-stimulated HaCaT cells. (A): MDC concentration in culture medium was measured with ELISA method in HaCaT cells (3.0 × 105 cells/mL) treated with hIFN-γ (10 ng/mL) in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01. (B) MDC concentration in HaCaT cells (3.0 × 105 cells/mL) treated with hIFN-γ (10 ng/mL) in the presence of CH2Cl2 (MC) fractions (25, 50 and 100 ㎍/mL).$ 그림 Fig. 7. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on MDC production in hIFN-γ-stimulated HaCaT cells. (A): MDC concentration in culture medium was measured with ELISA method in HaCaT cells (3.0 × 10⁵ cells/mL) treated with hIFN-γ (10 ng/mL) in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01. (B) MDC concentration in HaCaT cells (3.0 × 10⁵ cells/mL) treated with hIFN-γ (10 ng/mL) in the presence of CH₂Cl₂ (MC) fractions (25, 50 and 100 ㎍/mL).
$Fig. 8. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on TARC production in hIFN-γ-stimulated HaCaT cells. (A): TARC concentration in culture medium was measured with ELISA method in HaCaT cells (3.0 × 105 cells/mL) treated with hIFN-γ (10 ng/mL) in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01. (B) TARC concentration in HaCaT cells (3.0 × 105 cells/mL) treated with hIFN-γ (10 ng/mL) in the presence of CH2Cl2 (MC) fractions (25, 50 and 100 ㎍/mL).$ 그림 Fig. 8. Inhibitory effects of crude extract and solvent fractions of P. tenax leaf on TARC production in hIFN-γ-stimulated HaCaT cells. (A): TARC concentration in culture medium was measured with ELISA method in HaCaT cells (3.0 × 10⁵ cells/mL) treated with hIFN-γ (10 ng/mL) in the presence of crude extract and solvent fractions(100 ㎍/mL) of P. tenax leaf. Values are the mean ± SEM of triplicate experiments. *, P<0.05; **, P<0.01. (B) TARC concentration in HaCaT cells (3.0 × 10⁵ cells/mL) treated with hIFN-γ (10 ng/mL) in the presence of CH₂Cl₂ (MC) fractions (25, 50 and 100 ㎍/mL).

AI 본문요약
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문제 정의

대식세포에서는 LPS와 같은 외부자극에 의하여 염증반응이 일어날 때 NO, PGE₂, pro-inflammatory cytokines와 같은 물질들이 생성됨으로(Lazarov et al., 2000), 본 연구에서는 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물의 NO와 PGE₂의 생성에 미치는 영향을 조사하였다. LPS로 자극된 RAW 264.
본 연구는 하라케케(Harakeke)로 불리는 신서란(Phormiumtenax)를 화장품 및 의약품산업의 기능성 소재로서의 이용 가능성을 확인하기 위하여 신서란 잎을 대상으로 70% 에탄올 추출물과 용매 분획물을 제조하여, 이것들의 항염증 및 항아토피의효과를 조사하였다. LPS로 유도된 RAW 264.
본 연구에서는 하라케케로 알려진 신서란이 항염증 또는 항 아토피의 특성을 갖는 특용자원으로서 활용 가치 여부를 평가함으로서 화장품 및 의약품산업에 기능성 소재로써 적용 가능성을 확인하고자 하였다. 이를 위해 신서란 잎을 대상으로 추출물과 극성에 따라 순차적으로 용매 분획한 분획물을 제작하였고, 이렇게 제작된 시료를 LPS로 자극된 RAW 264.

제안 방법

1과 2에 나타난바와 같이 신서란 추출물 및 분획물에 의한 NO, PGE₂생성 억제 활성이 염증 유발 단백질로 알려진 iNOS와 COX-2 단백질의 발현 억제에 의한 것인지를 알아보기 위하여 단백질 수준에서의 발현을 western blot 방법으로 조사하였다. RAW 264.7 cell에 LPS (1 ㎍/mL) 신서란 잎 조추출물 및 분획물(100 ㎍/mL)를 24시간 처리한 후iNOS, COX-2의 발현 억제 활성을 확인하였다. 그 결과 LPS 단독 처리군 에서는 iNOS, COX-2의 발현이 현저히 증가하였고 methylene chloride 분획물과 ethyl acetate 분획물에서 iNOS, COX-2의 발현을 억제함을 알 수 있었다(Fig.
1990). RAW 264.7세포에서 신서란 잎 조추출물 및 분획물의 염증성 cytokine인 TNF-α, IL-1β 및 IL-6 의 발현에 미치는 영향을 ELISA kit를 이용하여 조사하였다. RAW 264.
, 2012). 아토피 활성 억제를 확인하기 위하여 human keratinocyte인 HaCaT 세포에 hINFγ로 자극하여 chemokine 생성을 유도한 후 신서란 추출물과 용매 분획물을 처리하여 그 효과를 조사하였다. hINF-γ무 처리군의 chemokine 생성을 0%, hINF-γ처리군의 chemokine 생성을 100%로 하여 활성을 조사한 결과는 Fig.
본 연구에서는 하라케케로 알려진 신서란이 항염증 또는 항 아토피의 특성을 갖는 특용자원으로서 활용 가치 여부를 평가함으로서 화장품 및 의약품산업에 기능성 소재로써 적용 가능성을 확인하고자 하였다. 이를 위해 신서란 잎을 대상으로 추출물과 극성에 따라 순차적으로 용매 분획한 분획물을 제작하였고, 이렇게 제작된 시료를 LPS로 자극된 RAW 264.7 세포에 처리한 후 염증성 매개 인자인 NO와 PGE₂의 생성 억제 효과 및 이를 합성하는 iNOS와 COX-2단백질 발현 억제 효능을 확인하였고, 염증성 cytokine(TNF-α, IL-6)의 생성 억제 효과를 조사하였다. 아토피 질환에 대한 활용 가능성 여부는 각질형성세포인 HaCaT cell에서 아토피 유발인자로 알려진 chemokine (MDC, TARC) 생성 억제효과를 조사하였다.
한편, prostaglandin(PG)은 arachidonic acid 로부터 유래된 불포화지방산에 속하는 호르몬으로서, 이들 생성된 PG 중 PGE₂는 염증반응에 깊게 관여한다. 이에 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물에 대한 PGE₂ 감소 효능을 조사하였다. LPS 무처리군의 PGE₂ 생성을 0%, LPS 단독 처리군의 PGE₂생성을 100%로 하여 추출물과 분획물처리군을 비교한 결과, methylene chloride 분획물에서 PGE₂ 생성억제 효능이 95% 이상, ethyl acetate 분획물에서는 80% 수준임을 확인하였다(Fig.

대상 데이터

Murine macrophage cell line인 RAW 264.7 세포를 한국 세포주 은행(Korean Cell Line Bank)으로부터 구입하여 10% fetal bovine serum (FBS)와 100 units/mL penicillin-streptomycine이 함유된 Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM, GIBCO, USA) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO₂ incubator (HERACell 240, ThermoFisher Scientific, USA)에서 3일 간격으로 배양을 하였다. 항 아토피 실험에 사용한 human keratinocyte cell line인 HaCaT cell 역시 10% FBS과 100 unit/mL penicillin-streptomycine을 첨가한 DMEM 배지에 넣고 37℃, 5% CO₂ 항온기에서 배양하였으며 3일에 한번 씩 계대배양을 하였다.
제주특별자치도 서귀포시 남원읍 신례리 일대에서 2015년8월에 채집한 신서란 잎을 열풍건조(40℃, 72 h) 시킨후, 마쇄기로 분쇄하여 미세 분말화 한 후4℃에 보관하면서 추출용 시료로 사용하였다. 채집 신서란은 백합과에 속하는 Phormium tenax로서 (재)제주테크노파크 생물종다양성연구소 고영순 선임연구원님의 식물학적 동정을 거쳤으며, 실험에 사용한 시료의 확증표본(표본번호 P15-061)은 (재)제주테크노파크 생물종다양성연구소에 보관하고 있다.

데이터처리

모든 실험은 3반복 이상 실시하였고, 실험결과는 각 항목에 따라 평균치 ± 표준편차(SD)를 구하여 신뢰수준95% (P<0.05)에서 통계적 유의차를 평가하였다.

이론/모형

Fig. 1과 2에 나타난바와 같이 신서란 추출물 및 분획물에 의한 NO, PGE₂생성 억제 활성이 염증 유발 단백질로 알려진 iNOS와 COX-2 단백질의 발현 억제에 의한 것인지를 알아보기 위하여 단백질 수준에서의 발현을 western blot 방법으로 조사하였다. RAW 264.
신서란 조추출물 및 용매 분획물이 세포 성장에 미치는 영향을 측정하기 위하여 lactate dehydrogenase (LDH) assay를 시행하였다. RAW 264.

성능/효과

이에 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물에 대한 PGE₂ 감소 효능을 조사하였다. LPS 무처리군의 PGE₂ 생성을 0%, LPS 단독 처리군의 PGE₂생성을 100%로 하여 추출물과 분획물처리군을 비교한 결과, methylene chloride 분획물에서 PGE₂ 생성억제 효능이 95% 이상, ethyl acetate 분획물에서는 80% 수준임을 확인하였다(Fig. 2A).
본 연구는 하라케케(Harakeke)로 불리는 신서란(Phormiumtenax)를 화장품 및 의약품산업의 기능성 소재로서의 이용 가능성을 확인하기 위하여 신서란 잎을 대상으로 70% 에탄올 추출물과 용매 분획물을 제조하여, 이것들의 항염증 및 항아토피의효과를 조사하였다. LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에서 신서란 에탄올 추출물과 용매 분획물의 항염증 효과를 조사한 결과, methylene chloride와 ethyl acetate 분획물에서 NO와 PGE₂ 생성 억제 활성이 가장 높게 나타났으며, 농도 의존적으로 NO와 PGE₂ 생성 억제 활성을 보였다. 또한, 이들 분획물에서는 iNOS 및 COX-2 발현 억제 활성을 보였다.
, 2000), 본 연구에서는 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물의 NO와 PGE₂의 생성에 미치는 영향을 조사하였다. LPS로 자극된 RAW 264.7 세포에 생성되는 NO 양은 Griess 시약을 이용하여 세포 배양액 중에 존재하는 NO₂- 의 형태로 측정한 결과, 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물에서 NO 생성 억제 효과를 보였는데, 그 중 methylene chloride 분획물과 ethyl acetate 분획물에서 대조군인 LPS 단독처리군에 비해 NO 생성 억제 효과가 크게 나타났다(Fig. 1A).
7세포에서 신서란 잎 조추출물 및 분획물의 염증성 cytokine인 TNF-α, IL-1β 및 IL-6 의 발현에 미치는 영향을 ELISA kit를 이용하여 조사하였다. RAW 264.7 세포에 신서란 추출물 또는 용매 분획물과 LPS (1 ㎍/mL)를 동시 처리하여 24시간배양 한후TNF-α의 생성 억제 활성을 측정한 결과, methylene chloride와 ethyl acetate 분획물에서 각각70%, 50% 수준으로 억제되고 있음을 보였다(Fig. 4A).
신서란 잎 조추출물과 용매 분획물에 의한 NO, PGE₂ 생성 억제 활성이 NOS 및 COX-2 발현 억제에 의한 것임을 제시한다. 더불어, hIFN-γ로 자극된 HaCaT 세포에 용매 분획물을 처리하여 MDC 및 TRAC생성억제 효과를 조사한 바, methylene chloride 분획물은 MDC 및 TATC의 생성을 각각 65%, 52% 생성억제 시켰으며, ethyl acetate 분획물은 MDC 및 TATC의 생성을 각각93%, 84% 억제 효과를 보였다. 이상의 결과는 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물을 이용한 항염증 및 항아토피 효능을 갖는 유효성분 분리 및 활용화 연구에 중요한 기초자료가 될 것이며, 기능성 화장품, 의약외품 및 의약품 소재 개발에 적용 가능성이 높다고 사료된다.
모든 세포의 세포질 안에 존재하는 효소 LDH는 pyruvic acid와 lactic acid 간의 가역적 반응에 관여하는데, LDH를 내포한 조직이 파괴될 때 혈액 중으로 흘러나와 혈중 LDH가 상승한다. 이 원리를 활용하여 신서란 RAW 264.7 세포에 대상 물질과 LPS(1 ㎍/mL)를 동시에 처리하여 24시간배양한 후LDH 분석을 통해서 세포 생존율을 확인한 결과, n-butanol 분획물인 경우 100㎍/㎖ 이상의 농도에서 다소 세포 독성이 관찰되었으나 다른 용매 분획물에서는 세포독성이 나타나지 않았고 100 ㎍/mL의 농도 이하에서는 신서란 잎 조추출물 및 용매 분획물에서 세포독성이 나타나지 않았다(Fig. 1).
이상의 결과를 종합하여 볼 때 신서란 에탄올 추출물과 용매 분획물은 LPS에 의한 대식세포 염증반응에서 NOS 및 COX-2 발현 억제를 통해 NO, PGE₂ 생성 억제뿐만 아니라 전염증성 물질인 TNF-α, IL-6, IL-1β의 생성을 억제시켜 항염증 효능이 있음을 제시하고 있다. 또한 아토피 유발 인자인 MDC 및 TARC생성을 억제시킴으로서 항아토피 효과를 갖는 유효성분이 있음을 보이고 있다.

후속연구

더불어, hIFN-γ로 자극된 HaCaT 세포에 용매 분획물을 처리하여 MDC 및 TRAC생성억제 효과를 조사한 바, methylene chloride 분획물은 MDC 및 TATC의 생성을 각각 65%, 52% 생성억제 시켰으며, ethyl acetate 분획물은 MDC 및 TATC의 생성을 각각93%, 84% 억제 효과를 보였다. 이상의 결과는 신서란 잎 조추출물과 용매 분획물을 이용한 항염증 및 항아토피 효능을 갖는 유효성분 분리 및 활용화 연구에 중요한 기초자료가 될 것이며, 기능성 화장품, 의약외품 및 의약품 소재 개발에 적용 가능성이 높다고 사료된다.
또한 아토피 유발 인자인 MDC 및 TARC생성을 억제시킴으로서 항아토피 효과를 갖는 유효성분이 있음을 보이고 있다. 즉, 신서란 추출물 중 methylene chloride와 ethyl acetate 분획물에 함유된 성분들이 독성이 없고 항염증 및항아토피 활성을 갖는 주요 분획물임을 제시하는 것이며, 앞으로 이 분획물의 유효성분 물질을 구조적으로 밝히고 기작연구가 진행된다면 항염증 및 항아토피 개선 기능을 가진 기능성 제품의 원료로 사용될 수 있을 것으로 여긴다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	염증성 질환 예방 및 치료를 위한 소재는 어떤 것들이 있는가?	최근 들어 건강과 뷰티 관련 바이오산업이 급성장하면서 천연물 혹은 생약의 유효성에 대한 연구가 활기를 띠고 있는데, 특히 염증성 질환 예방 및 치료를 위한 소재 발굴이 활발하게 이루어지고 있다. 어성초(Houttuynia cordate), 오가피Acanthopanacis cortex), 황기(Astragalus membranaceus), 천문동(Asparagus cochinchinensis) 등과 같은 전통 한약재뿐만 아니라 까마귀쪽나무(Litsea japonica) 와 같은 특용작물들은 염증세포의 활성을 조절하고, 관련 사이토카인 발현을 억제하는 항염증 및 항산화 효과가 뛰어난 것으로 알려져 있다(Ham et al. 2017; Kim and park, 2006; Kim et al.
	염증의 정의 및 역할은 무엇인가?	염증은 물리화학적 자극이나 세균 감염에 대한 생체조직의 방어 반응의 하나이며, 조직이나 장기의 손상을 회복시키는 기전으로서 매우 중요한 역할을 담당하고 있다(Zamora et al., 2000).
	염증반응이 과도해질 경우 어떤 문제가 생기는가?	, 2000). 그러나 염증반응이 과도해질 경우 동맥경화, 류마티스 관절염, 천식, 기관지염, 암 등을 유발하는 원인으로 작용하기 때문에 염증반응을 조절하는 항염증제 개발은 매우 중요시되고 있다(Kaplanski et al., 2003, Ko et al.

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Zamora, R., Y. Vodovotz and T.R. Billiar. 2000. Inducible nitric oxide synthase and inflammatory diseases. Mol. Med. 6:347-373.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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