[논문]펩티도글리칸에 의한 단핵세포의 Tumor necrosis factor-α 발현 기전 연구

정지영; 손용해; 김보영; 김관회

doi:10.5352/jls.2019.29.11.1251

펩티도글리칸에 의한 단핵세포의 Tumor necrosis factor-α 발현 기전 연구
Molecular Mechanisms Involved in Peptidoglycan-induced Expression of Tumor Necrosis Factor-α in Monocytic Cells 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.29 no.11, 2019년, pp.1251 - 1257

정지영 (부산대학교 의과대학 약리학교실) , 손용해 (부산대학교 의과대학 약리학교실) , 김보영 (부산대학교 의과대학 약리학교실) , 김관회 (부산대학교 의과대학 약리학교실)

초록
AI-Helper

본 연구에서는 펩티도글리칸이 단핵세포의 $TNF-{\alpha}$ 발현에 미치는 영향을 조사하였고, 또한 펩티도글리칸에 의한 $TNF-{\alpha}$ 발현에 관련된 세포의 요소들을 연구하였다. 사람의 단핵세포주인 THP-1 세포를 펩티도글리칸에 노출시키는 경우 $TNF-{\alpha}$ 분비 증가뿐만 아니라 $TNF-{\alpha}$ 유전자 전사를 유도하는 결과를 가져왔다. TLR-2/4의 억제제인 OxPAPC은 펩티도글리칸에 의한 $TNF-{\alpha}$의 발현을 저해하였다. 그리고 U0126, SB202190, SP6001250, LY294002, Akti IV, rapamycin, NAC, DPI 같은 약리학적 저해제 또한 $TNF-{\alpha}$ 발현을 유전자/단백질 수준에서 상당히 약화시켰다. 그러나 polymyxin B는 $TNF-{\alpha}$ 발현에 영향을 주지않았다. 따라서 펩티도글리칸이 TLR-2, PI3K, Akt, mTOR, MAPKs, ROS 등을 통하여 단핵세포의 $TNF-{\alpha}$ 발현을 증가시킴을 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

Peptidoglycan (PG) is found in atheromatous lesions of arteries, where monocytes/macrophages express inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor-alpha ($TNF-{\alpha}$). This study investigated the effects of PG on $TNF-{\alpha}$ expression and examined possible cellular factors involved in $TNF-{\alpha}$ upregulation. The overall aim was to identify the molecular mechanisms underlying inflammatory responses to bacterial pathogen-associated molecular patterns in the artery. Exposure of human THP-1 monocytic cells to PG enhanced the secretion of $TNF-{\alpha}$ and induced its gene transcription. Inhibition of TLR-2/4 with OxPAPC significantly inhibited $TNF-{\alpha}$ gene expression, whereas inhibition of LPS by polymyxin B did not. The PG-induced expression of $TNF-{\alpha}$ was also significantly suppressed by pharmacological inhibitors that modulate activities of cellular signaling molecules; for example, U0126 (an ERK inhibitor), SB202190 (a p38 MAPK inhibitor), and SP6001250 (a JNK inhibitor) significantly attenuated PG-induced transcription of $TNF-{\alpha}$ and secretion of its gene product. $TNF-{\alpha}$ expression was also inhibited by rapamycin (an mTOR inhibitor), LY294002 (a PI3K inhibitor), and Akt inhibitor IV (an Akt inhibitor). ROS-regulating compounds, like NAC and DPI, also significantly attenuated $TNF{\alpha}$ expression induced by PG. These results suggest that PG induces $TNF-{\alpha}$ expression in monocytes/macrophages by multiple molecules, including TLR-2, PI3K, Akt, mTOR, MAPKs, and ROS.

주제어

표/그림 (6)

그림 Fig. 1. Expression of TNF-α at the messenger and protein levels in response to peptidoglycan (PG). THP-1 cells (1×10⁶ cells/ml) were incubated for indicated time periods with 1 μg/ml PG (A) or for 9 hr with indicated amount of PG (B), and TNF-α gene transcripts were amplified by RT-PCR. Following stimulation of THP-1 cells (1×10⁶ cells/ml) for 9 hr with or without (control) the indicated concentration of PG, the amount of TNF-α released into the medium and levels of TNF-α transcripts within cells were assessed by ELISA (C) and real-time PCR (D), respectively. Data are expressed as mean ± SD (n=3 replicates/group). **p<0.01 vs. control; ***p<0.001 vs. control.
그림 Fig. 2. Effects of OxPAPC and polymyxin B on peptidoglycan (PG)-mediated up-regulation of TNF-α. THP-1 cells were stimulated for 9 hr with or without PG (1 μg/ml) in the presence or absence of OxPAPC (30 μg/ml) and pol-ymyxin B (10 mg/ml). The amount of TNF-α released into the medium and TNF-α gene transcripts were as-sessed by ELISA (A) and real-time PCR (B), respectively. Data are expressed as mean ± SD (n=3 replicates/group). ***p<0.001 vs. control; ###p<0.001 vs. PG.
그림 Fig. 3. Effects of LY294002 and Akti IV on peptidoglycan (PG)-mediated up-regulation of TNF-α. Following stimulation of THP-1 cells for 9 hr with PG (1 μg/ml) in the absence or presence of LY294002 and Akti IV (10 μM each), the amount of TNF-α released into the medium and TNF-α gene transcripts were assessed by ELISA (A) and re-al-time PCR (B), respectively. Data are expressed as mean ± SD (n=3 replicates/group). ***P<0.001 vs. control; ##p<0.01 vs. PG; ###p<0.001 vs. PG.
그림 Fig. 4. Effects of rapamycin on peptidoglycan (PG)-mediated up-regulation of TNF-α. After stimulation of THP-1 cells for 9 hr with PG (1 μg/ml) in the absence or presence of with rapamycin (100 nM), the amount of TNF-α re-leased into the medium and TNF-α gene transcripts were assessed by ELISA (A) and real-time PCR (B), respectively. Data are expressed as mean ± SD (n=3 rep-licates/group). ***p<0.001 vs. control; ##p<0.01 vs. PG; ###p<0.001 vs. PG.
그림 Fig. 5. Effects of inhibitors of MAPKs on peptidoglycan (PG)-mediated up-regulation of TNF-α. THP-1 cells were stimulated for 9 hr with or without PG (1 μg/ml) in the absence or presence of the indicated MAPKs inhibitors (10 μM each). The amount of TNF-α released into the medium and TNF-α gene transcripts were assessed by ELISA (A) and real-time PCR (B), respectively. Data are expressed as mean ± SD (n=3 replicates/group). ***p<0.001 vs. control; ##p<0.01 vs. PG; ###p<0.001 vs. PG.
그림 Fig. 6. Effects of ROS quenchers on peptidoglycan (PG)-mediated up-regulation of TNF-α. THP-1 cells were stimulated for 9 hr with or without PG (1 μg/ml) in the absence or presence of DPI (10 μM) and NAC (5 mM), after which The amount of TNF-α released into the medium and TNF-α gene transcripts were assessed by ELISA (A) and real-time PCR (B), respectively. Data are expressed as mean ± SD (n=3 replicates/group). ***p<0.001 vs. control;##p<0.01 vs. PG; ###p<0.001 vs. PG.

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

그러므로 Akt와 Akt의 activator인 PI3K가 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 발현에 연관이 있는지 조사하였다[14].
따라서 본 연구에서는 DPI와 NAC를 이용하여 ROS가 TNF-α 발현에 연관이 있는지를 조사하였다.
본 연구는 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 발현에 역할을 하는 세포 요소를 밝히는 실험을 수행하였다.
본 연구에서는 죽상경화 병변에 존재하는 성분인 펩티도글리칸이 사람의 THP-1 세포주 에서 TNF-α의 발현을 전사와 단백질 단계에서 증가시킨다는 것을 밝혔다.
본 연구에서는 펩티도글리칸이 단핵세포의 TNF-α 분비에 미치는 영향을 연구하였다.

제안 방법

384-well plate의 각 well에 SYBR Green PCR Master Mix 와 TNF-α 및 GAPDH의 forward primer and reverse primer (각각 10 pM)를 넣고 50 °C for 2 min, 95 °C for 10 min 반응시킨 다음 95 °C for 30 s, 60 °C for 30 s 조건에서 40 cycles 을 수행하였다.
After stimulation of THP-1 cells for 9 hr with PG (1 μg/ml) in the absence or presence of with rapamycin (100 nM), the amount of TNF-α released into the medium and TNF-α gene transcripts were assessed by ELISA (A) and real-time PCR (B), respectively.
Akti IV와 LY294002 둘 다 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 유전자 발현을 약화시키고 TNF-α 분비를 저해하였다.
Applied Biosystems Prism 7900 Sequence Detection System(Applied Biosystems, Foster City, CA) 장비를 사용하여 real-time PCR을 수행하였다. 384-well plate의 각 well에 SYBR Green PCR Master Mix 와 TNF-α 및 GAPDH의 forward primer and reverse primer (각각 10 pM)를 넣고 50 °C for 2 min, 95 °C for 10 min 반응시킨 다음 95 °C for 30 s, 60 °C for 30 s 조건에서 40 cycles 을 수행하였다.
ELISA kits (BD Biosciences, San Diego, CA, USA)를 이용하여 분비된 TNF-α의 양을 분석하였다.
Following stimulation of THP-1 cells for 9 hr with PG (1 μg/ml) in the absence or presence of LY294002 and Akti IV (10 μM each), the amount of TNF-α released into the medium and TNF-α gene transcripts were assessed by ELISA (A) and real-time PCR (B), respectively.
LPS가 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 발현에 관여하는지 조사하기 위해 이번 연구에서는 LPS와 결합하여 LPS의 생물학적 효과를 저해한다고 알려진 polymyxin B를 이용하였다[5].
TNF-α의 primer는 5- CAGCCTCTT CTCCTTCCTGA-3 (forward)와 5-GGAAGACCCCTCCCAGATAG-3 (reverse)이고,glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)의 primer는5-AAGCTCTGCGTGACTGTCCT-3 (forward)와 5-GCTTGC TTCTTTTGGTT TGG-3 (reverse)이었다. PCR 산물은 2% agarose gel에서 전기영동하여 분리하였고 ethidium bromide 염색을 이용하여 PCR 생산물을 확인하였다.
세포배양 배지와 TNF-α의 standard를 TNF-α에 대한 단일클론 항체로 미리 코팅되어 있는 microtiter plate에 첨가하고, 2시간 배양 후에 plate를 세척하고 TNF-α에 대한 특정 enzyme-conjugated polyclonal 항체와 함께 배양하였다. Plate를 여러 번 세척한 후 substrate를 첨가하고 색의 강도를 측정하였다. Standard curve를 만들고 이를 바탕으로 배지에 존재하는 TNF-α의 양을 정하였다.
ROS가 TNF-α 발현에 역할을 하는지 조사하기 위해, NAC와 DPI를 이용하였다(Fig. 6A, Fig. 6B).
Standard curve를 만들고 이를 바탕으로 배지에 존재하는 TNF-α의 양을 정하였다.
ELISA kits (BD Biosciences, San Diego, CA, USA)를 이용하여 분비된 TNF-α의 양을 분석하였다. THP-1 세포를 0.1% BSA를 첨가한 RPMI medium 1640에 overnight incubation시키고, 펩티도글리칸을 처리하고 일정시간 후 세포배양 배지를 모았다. 세포배양 배지와 TNF-α의 standard를 TNF-α에 대한 단일클론 항체로 미리 코팅되어 있는 microtiter plate에 첨가하고, 2시간 배양 후에 plate를 세척하고 TNF-α에 대한 특정 enzyme-conjugated polyclonal 항체와 함께 배양하였다.
TLRs이 TNF-α 발현을 매개하는지 조사하기 위해 TLR2/4 억제제인 OxPAPC를 사용하였다.
TRIzol^TM Reagent를 사용하여 THP-1 세포로부터 TotalRNAs를 얻고 Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase를 이용하여 역 전사하였고, PCR은 94℃ for 30 s, 55℃ for 30 s, 72℃ for 30 s 조건에서 25cycles를 수행하였다. TNF-α의 primer는 5- CAGCCTCTT CTCCTTCCTGA-3 (forward)와 5-GGAAGACCCCTCCCAGATAG-3 (reverse)이고,glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)의 primer는5-AAGCTCTGCGTGACTGTCCT-3 (forward)와 5-GCTTGC TTCTTTTGGTT TGG-3 (reverse)이었다.
그러므로 LY294002와 Akti IV, 두 가지 억제제를 사용하여 TNF-α 발현에 Akt가 관여하는지 조사하였다(Fig. 3A, B).
그러므로 mTOR의 저해제로 알려진 rapamycin을 이용하여 TNF-α 발현에 mTOR가 관여하는지 실험하였다(Fig. 4A, Fig. 4B).
그러므로, LPS 억제제로 알려진 polymyxin B를 사용하여 LPS가 TNF-α의 증가에 영향을 주는지 조사해보았다.
그리고 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 발현에 TLR2, Akt, mammalian target of rapamycin(mTOR), mitogen-activated protein kinases (MAPKs), and reactive oxygen species (ROS)의 연관성을 규명하였다.
또한 펩티도글리칸이 TNF-α 단백질의 분비에 어떤 영향을 미치는지 조사하였다(Fig. 1C).
실험적으로 펩티도글리칸이 단핵세포주인 THP-1 세포의 TNF-α 분비를 증가시키고 그리고 전사체를 양을 변화시키는지를 조사하였다.
펩티도글리칸은 염증성 반응으로 이어지는 신호전달 경로의 활성화를 유도하는 TLR2에 의해 인지되는 세균성 PAMP이므로[1, 10, 24] TLR2/4의 저해제인 OxPAPC를 이용하여 TNF-α 발현에 영향을 주는지 조사하였다.
펩티도글리칸이 extracellular signal-regulated kinase (ERK), p38 MAPK, 그리고 c-jun N-terminal kinase (JNK)를 인산화시키므로[13], MAPKs가 TNF-α 발현에 관여하는지 조사하기 위하여 다음과 같은 억제제들을 사용하였다: SB202190 (p38 MAPK 억제제), SP600125 (JNK 억제제), 그리고 U0126 (ERK 억제제) 세가지 억제제는 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 분비를 현저히 줄였고, 또한 TNF-α 유전자 전사 역시 약화시켰다(Fig.5A, Fig. 5B).
펩티도글리칸이 단핵세포의 TNF-α 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해, TNF-α 유전자의 전사 정도를 조사하였다(Fig. 1A, Fig. 1B).
화학 물질이 존재하는 상태에서 펩티도글리칸을(1 μg/ml) 9시간 동안 처리하고 배지에 분비된 TNF-α의 양을 enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)로 측정하고 reverse transcription (RT)-polymerase chain reaction(PCR) 혹은 real-time PCR을 통하여 세포 내 TNF-α 유전자의 전사체를 조사하였다.

대상 데이터

American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA)에서 인간 급성 monocytic leukemia THP-1 세포주를 구입하였고 ATCC에서 제안한 방법에 따라 유지하였다. Staphylococcus aureus에서 분리한 펩티도글리칸 그리고 polymyxinB와 oxidized 1-palmitoyl-2-arachidonosyl-sn-phosphatidylcholine(OxPAPC)은 InvivoGen (San Diego, CA, USA)에서 구입하였다.
Staphylococcus aureus에서 분리한 펩티도글리칸 그리고 polymyxinB와 oxidized 1-palmitoyl-2-arachidonosyl-sn-phosphatidylcholine(OxPAPC)은 InvivoGen (San Diego, CA, USA)에서 구입하였다. Endotoxin-free bovine serum albumin (BSA), LY294002, diphenyleneiodonium chloride (DPI), N-acetylcysteine (NAC), rapamycin, 그리고 SP600125는 Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA)에서 구입하였다. U0126, SB202190, 그리고 Akt inhibitor IV (Akti IV)는 Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA)에서 구입하였다.
American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA)에서 인간 급성 monocytic leukemia THP-1 세포주를 구입하였고 ATCC에서 제안한 방법에 따라 유지하였다. Staphylococcus aureus에서 분리한 펩티도글리칸 그리고 polymyxinB와 oxidized 1-palmitoyl-2-arachidonosyl-sn-phosphatidylcholine(OxPAPC)은 InvivoGen (San Diego, CA, USA)에서 구입하였다. Endotoxin-free bovine serum albumin (BSA), LY294002, diphenyleneiodonium chloride (DPI), N-acetylcysteine (NAC), rapamycin, 그리고 SP600125는 Sigma-Aldrich Co.
Louis, MO, USA)에서 구입하였다. U0126, SB202190, 그리고 Akt inhibitor IV (Akti IV)는 Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA)에서 구입하였다.

데이터처리

통계학적 GraphPad PRISM, version 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA)를 이용하였고, p<0.05는 통계학적으로 유의미한 것으로 처리하였다.

성능/효과

OxPAPC 존재 하에서 펩티도글리칸에 의한 TNF-α의 분비는 대조군 세포만큼 거의 완벽히 차단되고 또한 유도된 TNF-α 전사체의 발현 역시 OxPAPC 존재 하에 억제되었다.
Polymyxin B는 전사와 단백질 수준 모두에서 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 발현에 영향을 끼치지 않는다는 것을 밝혔고 이는 이번 연구에서 관찰된TNF-α의 증가는 펩티도글리칸에 의해 유도되었다는 것을 나타낸다.
따라서 MAPKs가 TNF-α의 발현에 중요한 역할을 하는지 조사하였고, ERK, p38 MAPK, JNK의 선택적 저해가 단백질 및 유전자 수준에서 TNF-α 발현을 현저하게 약화시킴을 증명하였다.
본 연구결과에 의하면 DPI와 NAC는 펩티도글리칸에 의한 TNF-α의 증가를 상당히 약화시켰다.
본 연구에서 mTOR가 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 발현에 관련이 있는지 조사하였고, mTOR의 저해제인 rapamycin은 TNF-α 유전자 전사를 약화시킬 뿐만 아니라 TNF-α의 분비를 상당히 감소시키는 확인하였다.
본 연구에서는 THP-1 세포가 펩티도글리칸에 노출되면 TNF-α 분비가 증가하고 TNF-α 유전자의 전사가 유도된다는 결과를 보여주었고, 그리고 이 과정에 TLR2, PI3K, Akt, mTOR, ERK, p38 MAPK, JNK, 그리고 ROS가 관여한다는 것을 밝혔다.
본 연구의 결과와 기존의 보고를 종합해보면 PI3K 의존적인 Akt/mTOR 경로가 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 증가에 중요한 역할을 한다는 것을 의미한다.
이러한 사실들을 종합하면 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 발현에 ERK, p38 MAPK, 그리고 JNK의 활성이 필수적임을 알 수 있다.
이러한 사실을 종합하면 ROS가 펩티도글리칸에 의한 TNF-α 증가에 적극적으로 관여하고 있다는 것을 의미한다.
펩티도글리칸으로 인한 TNF-α 분비 및 유전자 전사는 rapamycin이 존재할 때 현저히 감소하였다.

후속연구

본 연구에서는 THP-1 세포가 펩티도글리칸에 노출되면 TNF-α 분비가 증가하고 TNF-α 유전자의 전사가 유도된다는 결과를 보여주었고, 그리고 이 과정에 TLR2, PI3K, Akt, mTOR, ERK, p38 MAPK, JNK, 그리고 ROS가 관여한다는 것을 밝혔다. 그러나 이번 연구는 이러한 분자들이 TNF-α 발현에 독립적으로 또는 협동적으로 역할을 하는지 정확하게 밝혀내지 못했다. 따라서 위에서 거론된 신호전달 물질들 간의 관련성이나 가능한 crosstalk의 유형을 밝히는 연구가 필요하다.

참고문헌 (26)

Akira, S., Uematsu, S. and Takeuchi, O. 2006. Pathogen recognition and innate immunity. Cell 124, 783-801.

상세보기
Barath, P., Fishbein, M. C., Cao, J., Berenson, J., Helfant, R. and Forrester, J. S. 1990. Detection and localization of tumor necrosis factor in human atheroma. Am. J. Cardiol. 65, 297-302.

상세보기
Black, R. A., Rauch, C. T., Kozlosky, C. J., Peschon, J. J., Slack, J. L. and Wolfson, M. F. 1997. A metalloproteinase disintegrin that releases tumour-necrosis factor-alpha from cells. Nature 385, 729-33.

상세보기
Branen, L., Hovgaard, L., Nitulescu, M., Bengtsson, E., Nilsson, J. and Jovinge, S. 2004. Inhibition of tumor necrosis factor-alpha reduces atherosclerosis in apolipoprotein E knockout mice. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 24, 2137-2142.

상세보기
Cardoso, L. S., Araujo, M. I., Goes, A. M., Pacifico, L. G., Oliveira, R. R. and Oliveira, S. C. 2007. Polymyxin B as inhibitor of LPS contamination of Schistosoma mansoni recombinant proteins in human cytokine analysis. Microb. Cell Fact. 6, 1.

상세보기
Dobrina, A., Nardon, E., Vecile, E., Cinco, M. and Patriarca, P. 1995. Leptospira icterohemorrhagiae and leptospire peptidolgycans induce endothelial cell adhesiveness for polymorphonuclear leukocytes. Infect Immu. 63, 2995-2999.
Getz, G. S. 2005. Thematic review series: the immune system and atherogenesis. Immune function in atherogenesis. J. Lipid Res. 46, 1-10.

상세보기
Hahn-Windgassen, A., Nogueira, V., Chen, C. C., Skeen, J. E., Sonenberg, N. and Hay, N. 2005. Akt activates the mammalian target of rapamycin by regulating cellular ATP level and AMPK activity. J. Biol. Chem. 280, 32081-32089.

상세보기
Kavoosi, G., Ardestani, S. K. and Kariminia, A. 2009. The involvement of TLR2 in cytokine and reactive oxygen species (ROS) production by PBMCs in response to Leishmania major phosphoglycans (PGs). Parasitology 136, 1193-1199.

상세보기
Kawai, T. and Akira, S. 2006. TLR signaling. Cell Death Differ. 13, 816-825.

상세보기
Laman, J. D., Schoneveld, A. H., Moll, F. L., van Meurs, M. and Pasterkamp, G. 2002. Significance of peptidoglycan, a proinflammatory bacterial antigen in atherosclerotic arteries and its association with vulnerable plaques. Am. J. Cardiol. 90, 119-123.

상세보기
Langer, M., Malykhin, A., Maeda, K., Chakrabarty, K., Williamson, K. S. and Feasley, C. L. 2008. Bacillus anthracis peptidoglycan stimulates an inflammatory response in monocytes through the p38 mitogen-activated protein kinase pathway. PloS One 3, e3706.

상세보기
Lee, S. A., Kim, S. M., Son, Y. H., Lee, C. W., Chung, S. W., Eo, S. K. and Kim, K. 2011. Peptidoglycan enhances secretion of monocyte chemoattractants via multiple signaling pathways. Biochem. Biophys. Res. Commun. 408, 132-138.

상세보기
Manning, B. D. and Cantley, L. C. 2007. AKT/PKB signaling: navigating downstream. Cell 129, 1261-1274.

상세보기
Miesel, R., Sanocka, D., Kurpisz, M. and Kroger, H. 1995. Anti-inflammatory effects of NADPH oxidase inhibitors. Inflammation 19, 347-362.

상세보기
Nijhuis, M. M., Pasterkamp, G., Sluis, N. I., de Kleijn, D. P., Laman, J. D. and Ulfman, L. H. 2007. Peptidoglycan increases firm adhesion of monocytes under flow conditions and primes monocyte chemotaxis. J. Vasc. Res. 44, 214-222.

상세보기
Ohta, H., Wada, H., Niwa, T., Kirii, H., Iwamoto, N. and Fujii, H. 2005. Disruption of tumor necrosis factor-alpha gene diminishes the development of atherosclerosis in ApoE-deficient mice. Atherosclerosis 180, 11-17.

상세보기
Rus, H. G., Niculescu, F. and Vlaicu, R. 1991. Tumor necrosis factor-alpha in human arterial wall with atherosclerosis. Atherosclerosis 89, 247-254.

상세보기
Shaw, R. J. and Cantley, L. C. 2006. Ras, PI(3)K and mTOR signalling controls tumour cell growth. Nature 441, 424-430.

상세보기
Spagnuolo, G., D'Anto, V., Cosentino, C., Schmalz, G., Schweikl, H. and Rengo, S. 2006. Effect of N-acetyl-L-cysteine on ROS production and cell death caused by HEMA in human primary gingival fibroblasts. Biomaterials 27, 1803-1809.

상세보기
Tedgui, A. and Mallat, Z. 2006. Cytokines in atherosclerosis: pathogenic and regulatory pathways. Physiol. Rev. 86, 515-81.

상세보기
Thobe, B. M., Frink, M., Hildebrand, F., Schwacha, M. G., Hubbard, W. J. and Choudhry, M. A. 2007. The role of MAPK in Kupffer cell toll-like receptor (TLR) 2-, TLR4-, and TLR9-mediated signaling following trauma-hemorrhage. J. Cell. Physiol. 210, 667-675.

상세보기
Wajant, H., Pfizenmaier, K. and Scheurich, P. Tumor necrosis factor signaling. 2003. Cell Death Differ. 10, 45-65.

상세보기
Wang, Q., Dziarski, R., Kirschning, C. J., Muzio, M. and Gupta, D. 2001. Micrococci and peptidoglycan activate TLR2-->MyD88-->IRAK-->TRAF-->NIK-->IKK-->NF-kappaB signal transduction pathway that induces transcription of interleukin-8. Infect. Immu. 69, 2270-2276.

상세보기
Wang, Z. M., Liu, C. and Dziarski, R. 2000. Chemokines are the main proinflammatory mediators in human monocytes activated by Staphylococcus aureus, peptidoglycan, and endotoxin. J. Biol. Chem. 275, 20260-20267.

상세보기
Yoshimura, A., Lien, E., Ingalls, R. R., Tuomanen, E., Dziarski, R. and Golenbock, D. 1999. Cutting edge: recognition of Gram-positive bacterial cell wall components by the innate immune system occurs via Toll-like receptor 2. J. Immunol. 163, 1-5.

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증