Trienzyme과 Lactobacillus casei를 이용한 국내 수산 자원의 엽산 분석 및 유효성 검증 Validation of a trienzyme-Lactobacillus casei method for folate analysis in fishery resources consumed in the Korean diet원문보기
본 연구에서는 trienzyme 추출 및 L. casei 분석법을 국내 다양한 수산 자원의 엽산 분석에 적용하기 위해 분석수행지표(직선성, 민감성, 정확성, 정밀성)를 분석 평가하여 분석법의 유효성을 검증하였다. 분석법의 검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ)는 각각 0.562 ㎍/100 g와 1.057 ㎍/100 g으로 엽산 함량이 낮은 식품에 적용할 수 있는 분석법으로 나타났다. 시료 중 엽산 함량에 대한 L. casei 생육 관계는 다항식 모델(y=4-1.132/((1+X/0.0502)1.02)+1.26)로 분석한 결과 R2=1.0000을 나타내는 우수한 상관성을 얻었다. 또한, 분석법의 정확성과 정밀성이 우수한 수준임을 확인할 수 있었으며, 수산 자원 6개 군별에 따른 엽산 회수율 분석에서도 약 87-108%의 신뢰도가 확보된 회수율을 나타냄을 확인하였다. 본 연구에서 분석한 수산자원 20종의 엽산 함량분석 및 검증 데이터는 국내 수산 자원에 대한 신뢰도 있는 데이터베이스 구축 자료로 활용될 수 있을 것으로 판단되며, 한국은 삼면이 바다로 인접된 지리적 특성으로 인하여 일상 식단에서 다양한 수산 자원이 자주 이용되고 있는 바 trienzyme-L. casei 분석법을 향후 수산 자원의 엽산 함량 분석에 확대 적용하여 국가수준의 영양성분데이터베이스 구축에 기여할 수 있을 것이라 사료된다.
본 연구에서는 trienzyme 추출 및 L. casei 분석법을 국내 다양한 수산 자원의 엽산 분석에 적용하기 위해 분석수행지표(직선성, 민감성, 정확성, 정밀성)를 분석 평가하여 분석법의 유효성을 검증하였다. 분석법의 검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ)는 각각 0.562 ㎍/100 g와 1.057 ㎍/100 g으로 엽산 함량이 낮은 식품에 적용할 수 있는 분석법으로 나타났다. 시료 중 엽산 함량에 대한 L. casei 생육 관계는 다항식 모델(y=4-1.132/((1+X/0.0502)1.02)+1.26)로 분석한 결과 R2=1.0000을 나타내는 우수한 상관성을 얻었다. 또한, 분석법의 정확성과 정밀성이 우수한 수준임을 확인할 수 있었으며, 수산 자원 6개 군별에 따른 엽산 회수율 분석에서도 약 87-108%의 신뢰도가 확보된 회수율을 나타냄을 확인하였다. 본 연구에서 분석한 수산자원 20종의 엽산 함량분석 및 검증 데이터는 국내 수산 자원에 대한 신뢰도 있는 데이터베이스 구축 자료로 활용될 수 있을 것으로 판단되며, 한국은 삼면이 바다로 인접된 지리적 특성으로 인하여 일상 식단에서 다양한 수산 자원이 자주 이용되고 있는 바 trienzyme-L. casei 분석법을 향후 수산 자원의 엽산 함량 분석에 확대 적용하여 국가수준의 영양성분데이터베이스 구축에 기여할 수 있을 것이라 사료된다.
Fishery resources have been widely consumed as protein- and vitamin-rich food sources in the Korean diet. However, information regarding their vitamin levels is extremely limited. In this study, trienzyme-Lactobacillus casei method was validated and used to determine the folate contents in fishery f...
Fishery resources have been widely consumed as protein- and vitamin-rich food sources in the Korean diet. However, information regarding their vitamin levels is extremely limited. In this study, trienzyme-Lactobacillus casei method was validated and used to determine the folate contents in fishery foods. The trienzyme-L. casei method for folate analysis showed excellent accuracy (85.2 to 95.3% recovery) and precision (repeatability 1.4% RSD and reproducibility 2.4% RSD). Folate contents of 20 fish foods (4 fish, 3 crustaceans, 3 sea algae, 3 cephalopods, 4 shellfish, and 3 others) ranged from 1.75 to 97.98 ㎍/100 g. Furthermore, we found that the folate content in seaweed fusiforme was the highest, followed by gulfweed (69.73 ㎍/100 g). Folate analysis using the trienzyme-L. casei method was determined excellent based on the z-score of -0.3 in the Food Analysis Performance Assessment Scheme test. Analytical and method validation data generated in this study could be used to update the national food composition table on vitamin B9 in Korean fishery resources.
Fishery resources have been widely consumed as protein- and vitamin-rich food sources in the Korean diet. However, information regarding their vitamin levels is extremely limited. In this study, trienzyme-Lactobacillus casei method was validated and used to determine the folate contents in fishery foods. The trienzyme-L. casei method for folate analysis showed excellent accuracy (85.2 to 95.3% recovery) and precision (repeatability 1.4% RSD and reproducibility 2.4% RSD). Folate contents of 20 fish foods (4 fish, 3 crustaceans, 3 sea algae, 3 cephalopods, 4 shellfish, and 3 others) ranged from 1.75 to 97.98 ㎍/100 g. Furthermore, we found that the folate content in seaweed fusiforme was the highest, followed by gulfweed (69.73 ㎍/100 g). Folate analysis using the trienzyme-L. casei method was determined excellent based on the z-score of -0.3 in the Food Analysis Performance Assessment Scheme test. Analytical and method validation data generated in this study could be used to update the national food composition table on vitamin B9 in Korean fishery resources.
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문제 정의
이러한 회수율 수준은 AOAC 가이드라인(2002)에서 제시하는 수용범위(1μg/100 g일 때 70-125%) 내에 포함되는 것을 확인할 수 있었으며, 본 연구에서 분석한 인증표준물질은 NIST에서 제시하고 있는 인증값의 범위 내에 포함되는 것으로 수용 가능한 정확성을 나타낸다 하겠다. 본 연구는 L. casei를 이용한 엽산 분석법의 정밀성 검증은 AOAC 가이드라인(2002)에서 제시하는 반복성과 재현성의 상대표준편차(relative standard deviation, RSD) 범위에 준하여 평가하였다. Chen과 Eitenmiller (2007)는 5 가지의 CRM을 시료로 하여 trienzyme-L.
본 연구에서는 trienzyme 추출 및 L. casei 분석법을 국내 다양한 수산 자원의 엽산 분석에 적용하기 위해 분석수행지표(직선성, 민감성, 정확성, 정밀성)를 분석 평가하여 분석법의 유효성을 검증하였다. 분석법의 검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ)는 각각 0.
casei를 이용한 엽산 정량법의 유효성을 검증하고 국내에서 이용되는 다양한 수산 자원의 엽산 함량 분석에 적용하였다. 분석수행지표(직선성, 민감성, 정밀성, 정확성) 평가를 통해 분석법의 유효성을 검증하였으며 수산자원별 매트릭스에 따른 분석 유효성을 비교하여 국내 수산식품 데이터베이스 마련을 위한 신뢰도를 확보하고자 하였다.
제안 방법
농도에 따라 반응하는 분석 정량법의 상관성은 표준물질을 단계희석하여 미생물학적 분석법으로 분석하였으며 검출된 흡광도와 농도를 변수로 계산하여 도출된 검량선의 상관계수(R ) 값을 이용하여 확인하였다. 엽산의 검출한계(limit of detection, LOD)와 정량한계(limit of quantification, LOQ)는 공시험액을 단계적으로 희석하여 계산이 가능한 최소 농도의 평균 O.
Microplate에 멸균 증류수를 이용하여 시료 추출액(150μL)을 6단계로 희석한 후 folic acid casei 배지 15mL, L-ascorbic acid 150μL과 depletion media 75μL를 혼합한 배지를 각 well에 150μL씩 가하여 37 C incubator에서 18-20시간 배양하였다. 배양된 microplate의 각 well을 균일하게 혼합한 다음 microplate reader를 이용하여 595nm에서 측정한 후 분석 소프트웨어(Gen5, BioTek Instruments, Winooski, VT, USA)를 사용하여 엽산 표준용액 농도에 따른 L. casei 성장 곡선을 나타냈으며, 엽산 함량은 μg/100g으로 나타내었다.
본 연구에서는 trienzyme을 이용한 엽산 추출 및 L. casei를 이용한 엽산 정량법의 유효성을 검증하고 국내에서 이용되는 다양한 수산 자원의 엽산 함량 분석에 적용하였다. 분석수행지표(직선성, 민감성, 정밀성, 정확성) 평가를 통해 분석법의 유효성을 검증하였으며 수산자원별 매트릭스에 따른 분석 유효성을 비교하여 국내 수산식품 데이터베이스 마련을 위한 신뢰도를 확보하고자 하였다.
있다. 본 연구에서는 분석품질관리를 위해 시판되는 엽산강화밀가루를 품질관리 시료로 선정하고, 분석 초기에 QC chart 를 구축하고 연구가 수행되는 약 5개월 동안 시료를 분석할 때마다 품질관리 시료를 동시에 분석하여 구축한 QC chart에 plotting하여 분석품질을 모니터링하였다(Fig. 1). 분석 초기에 구축된 QC chart의 평균값은 199.
사용하였다. 시료 0.5-1.0g을 100mL 삼각플라스크에 칭량하였으며, 5% 이상의 지방을 함유한 시료의 경우 hexane을 가하여 지방을 제거한 다음 사용하였다. 시료를 칭량한 삼각플라스크에 phosphate buffer(pH 7.
엽산 함량 분석은 엽산 농도에 따라 반응하는 L. casei가 생육하는 정도를 측정하는 미생물학적 방법을 이용하였으며, microplate reader (Eon, BioTek Instruments, Winooski, VT, USA)로 측정하였다. L.
농도에 따라 반응하는 분석 정량법의 상관성은 표준물질을 단계희석하여 미생물학적 분석법으로 분석하였으며 검출된 흡광도와 농도를 변수로 계산하여 도출된 검량선의 상관계수(R ) 값을 이용하여 확인하였다. 엽산의 검출한계(limit of detection, LOD)와 정량한계(limit of quantification, LOQ)는 공시험액을 단계적으로 희석하여 계산이 가능한 최소 농도의 평균 O.D.값에 표준편차 값의 3배와 10배를 각각 더하여 산출하였다(AOAC, 2002). 정확성 검증을 위해 NIST에서 구입한 인증표준물질의 참값과 분석값을 비교하여 회수율(%)로 나타내었으며, 정밀성 검증은 각 QC 시료를 5일 동안 3반복으로 1회씩 분석하여 재현성(reproducibility)을 평가하였으며, 하루에 3반복으로 5회 분석하여 반복성(repeatability)을 평가하였다.
값에 표준편차 값의 3배와 10배를 각각 더하여 산출하였다(AOAC, 2002). 정확성 검증을 위해 NIST에서 구입한 인증표준물질의 참값과 분석값을 비교하여 회수율(%)로 나타내었으며, 정밀성 검증은 각 QC 시료를 5일 동안 3반복으로 1회씩 분석하여 재현성(reproducibility)을 평가하였으며, 하루에 3반복으로 5회 분석하여 반복성(repeatability)을 평가하였다.
QC 시료는 최소 10회 이상 반복 분석하였으며, 그 중 상대표준편차가 5% 이내에 들어가는 분석값 10개를 선정한 뒤 평균값을 산출하였다. 평균값을 기준으로 관리 상하한선(upper and lower control line, UCL and LCL) 및 조치 상하한선(upper and lower action line, UAL and LAL)을 설정하여 QC chart를 작성한 뒤 시료 분석기간 동안의 분석품질관리를 위한 지표로 사용하였다. 관리 및 조치를 위한 계산식은 다음과 같다.
0000으로 농도에 대한 반응도가 매우 높음을 확인할 수 있었다(Table 1). 한편 식품 중 엽산과 같은 수용성 비타민은 일반적으로 낮은 농도 수준으로 존재하기 때문에 적용하는 분석법이 어느 농도 수준까지 재현성 있는 분석이 가능한지 LOD와 LOQ 분석을 통해 평가하였다. 엽산 표준용액의 농도를 측정 가능한 범위까지 단계 희석하여 농도에 따라 L.
casei법의 엽산 회수율(recovery)을 분석한 결과는 Table 5와 같다. 회수율은 각 군별로 엽산 농도 수준의 100% 수준이 되도록 엽산 표준용액을 가하여 분석하였다. 어류에 속하는 청어가 86.
대상 데이터
Louis, MO, USA)에서 구입하였으며, 엽산 균주는 ATCC (Manassas, VA, USA)에서 Lactobacillus casei subsp. rhamnosus (ATCC 7469)를 구입하여 사용하였다. 엽산 분석 시 사용된 효소인 protease, α-amylase는 Sigma-Aldrich Co.
국내 수산자원을 표준수산물 성분표 분류군에 따라 총 6군(어류, 갑각류, 두족류, 해조류, 패류 및 기타 수산물)으로 분류하여 대표 시료를 선정하였다. 선정된 어류 4종(덕대, 청어, 눈볼대 및 참다랑어), 갑각류 3종(대롱수염새우, 갯가재 및 꽃게), 해조류 3종(모자반, 톳 및 쇠미역), 두족류 3종(갈고리흰오징어, 살오징어 및 문어), 패류 4종(피조개, 홍합, 참소라 및 진주담치) 및 기타수산물 3종(멍게, 미더덕 및 해삼)은 국립수산과학원(National Fisheries Research and Development Institute, NIFS) 식품위생가공과에서 비가식부를 제외하고 균질화한 다음 소포장 후 ice pack을 동봉하여 분석실로 배송되어 분석 전까지 −70 C에서 보관하였다.
에서 구입하였으며, folate conjugase는 Pel-Freeze Biologicals (Rogers, AR, USA)에서 구입하여 사용하였다. 기타 사용된 시약 및 용매는 GR 등급 및 HPLC 등급 이상을 구매하여 사용하였다. 분석법의 정확성 검증을 위해 NIST (National Institute of Standards and Technology, Gaithersburg, MD, USA)에서 인증표준물질(certified reference materials, CRM) 1849a (infant/adult nutritional formula) 및 3290 (dry cat food)을 구입하여 사용하였다.
기타 사용된 시약 및 용매는 GR 등급 및 HPLC 등급 이상을 구매하여 사용하였다. 분석법의 정확성 검증을 위해 NIST (National Institute of Standards and Technology, Gaithersburg, MD, USA)에서 인증표준물질(certified reference materials, CRM) 1849a (infant/adult nutritional formula) 및 3290 (dry cat food)을 구입하여 사용하였다. 정밀성 검증을 위한 분석품질관리(quality control, QC) 시료는 엽산 강화 밀가루(Rogers, commercial folate fortified flour, premium hard wheat flour, Armstrong, Canada)를 사용하였다.
분석법의 정확성 검증을 위해 NIST (National Institute of Standards and Technology, Gaithersburg, MD, USA)에서 인증표준물질(certified reference materials, CRM) 1849a (infant/adult nutritional formula) 및 3290 (dry cat food)을 구입하여 사용하였다. 정밀성 검증을 위한 분석품질관리(quality control, QC) 시료는 엽산 강화 밀가루(Rogers, commercial folate fortified flour, premium hard wheat flour, Armstrong, Canada)를 사용하였다.
데이터처리
chart)를 작성하여 관리하였다. QC 시료는 최소 10회 이상 반복 분석하였으며, 그 중 상대표준편차가 5% 이내에 들어가는 분석값 10개를 선정한 뒤 평균값을 산출하였다. 평균값을 기준으로 관리 상하한선(upper and lower control line, UCL and LCL) 및 조치 상하한선(upper and lower action line, UAL and LAL)을 설정하여 QC chart를 작성한 뒤 시료 분석기간 동안의 분석품질관리를 위한 지표로 사용하였다.
수산 자원의 엽산 분석에 적용할 trienzyme-L. casei 분석법의 유효성 검증은 AOAC 분석법 검증 가이드라인에 따라 직선성, LOD, LOQ, 정확성 및 정밀성 지표를 분석하여 평가하였다. 먼저, 엽산 분석법의 엽산 농도에 대한 L.
분석숙련도 평가는 영국 환경식품농림부(Department for Environment, Food and Rural Affairs, DEFRA)에서 주관하는 국제 정도 관리 분석능력시험인 Food Analysis Performance Assessment Scheme (FAPAS) PT 21118에 참여하여 평가하였으며 총 20개 국제적인 실험실의 분석 결과와 z-score를 비교하여 분석숙련도를 비교 평가하였다.
이론/모형
단일실험실(single laboratory)을 위한 AOAC 분석법 검증 가이드라인(2002)에 준하여 분석법 검증은 다음과 같은 방법으로 실시하였다. 농도에 따라 반응하는 분석 정량법의 상관성은 표준물질을 단계희석하여 미생물학적 분석법으로 분석하였으며 검출된 흡광도와 농도를 변수로 계산하여 도출된 검량선의 상관계수(R ) 값을 이용하여 확인하였다.
분석품질관리는 내부 및 외부 수준으로 이루어졌으며 내부 분석품질관리는 AOAC 가이드라인(2002)에 준하여 분석품질 관리도표(QC chart)를 작성하여 관리하였다. QC 시료는 최소 10회 이상 반복 분석하였으며, 그 중 상대표준편차가 5% 이내에 들어가는 분석값 10개를 선정한 뒤 평균값을 산출하였다.
엽산 추출은 Chun 등(2006)의 방법에 따라 protease, α-amylase, folate conjugase를 각각 처리하는 trienzyme 추출법을 사용하였다. 시료 0.
성능/효과
8%의 범위를 나타내었다. 가이드라인은 정밀성 수용범위를 분석성분의 농도 수준이 1μg/g일 때 반복성과 재현성이 각각 8% 와 16% 이하로 적용할 수 있다고 제시하고 있는데, 본 연구에서 사용된 L. casei 엽산 분석법의 반복성과 재현성 측정 결과는 각각 1.4%와 2.4%로 나타나 분석법의 정밀성이 우수함을 확인할 수 있었다(Table 2).
85μg/100 g) 의 수산자원의 분류군에 따라 엽산 수준에 차이가 나타남을 확인할 수 있었다. 그 중 해조류에 속하는 톳(97.98μg/100 g)이 가장 높은 엽산 함량을 보였으며 그 다음은 모자반(69.73μg/100 g)으로 나타났다. 해조류에 속하는 쇠미역은 엽산 함량이 12.
0000을 나타내는 우수한 상관성을 얻었다. 또한, 분석법의 정확성과 정밀성이 우수한 수준임을 확인할 수 있었으며, 수산 자원 6개 군별에 따른 엽산 회수율 분석에서도 약 87-108%의 신뢰도가 확보된 회수율을 나타냄을 확인하였다. 본 연구에서 분석한 수산자원 20종의 엽산 함량분석 및 검증 데이터는 국내 수산 자원에 대한 신뢰도 있는 데이터베이스 구축 자료로 활용될 수 있을 것으로 판단되며, 한국은 삼면이 바다로 인접된 지리적 특성으로 인하여 일상 식단에서 다양한 수산 자원이 자주 이용되고 있는 바 trienzyme-L.
casei 분석법의 유효성 검증은 AOAC 분석법 검증 가이드라인에 따라 직선성, LOD, LOQ, 정확성 및 정밀성 지표를 분석하여 평가하였다. 먼저, 엽산 분석법의 엽산 농도에 대한 L. casei의 성장 반응의 상관성을 분석(소프트웨어 Gen5, BioTek Instruments)한 결과 다항1.02회귀(polynomial regression)식 y=4−1.132/((1+X/0.0502) )+1.26을2얻었으며 상관계수(R) 값은 1.0000으로 농도에 대한 반응도가 매우 높음을 확인할 수 있었다(Table 1). 한편 식품 중 엽산과 같은 수용성 비타민은 일반적으로 낮은 농도 수준으로 존재하기 때문에 적용하는 분석법이 어느 농도 수준까지 재현성 있는 분석이 가능한지 LOD와 LOQ 분석을 통해 평가하였다.
z-Score는 표준편차를 단위로 하여 분석값이 평균을 기준으로 벗어난 정도를 평가하는 것으로 일반적으로 ±2 이내 범위를 나타내면 국제적 수준의 분석숙련도를 갖고 있는 것으로 평가하며, z-score가 0 에 가까울수록 평균치에 가까운 값으로 우수한 결과라 평가할 수 있다. 본 연구에서 검증한 L. casei 엽산 분석법을 이용하여 시험시료 중의 엽산을 분석한 결과는 141.509μg/100 g으로 z-score −0.3에 해당하는 값을 얻었다. 이는 ±2 이내 범위 이내를 충족하는 수준일 뿐 아니라 0에 가까운 값으로 본 연구에서 사용된 분석법과 분석수행도가 국제적 수준의 데이터를 생산할 수 있는 수준으로 우수함을 갖추고 있다고 평가할 수 있다.
casei 분석법을 국내 다양한 수산 자원의 엽산 분석에 적용하기 위해 분석수행지표(직선성, 민감성, 정확성, 정밀성)를 분석 평가하여 분석법의 유효성을 검증하였다. 분석법의 검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ)는 각각 0.562 μg/100 g와 1.057μg/100 g으로 엽산 함량이 낮은 식품에 적용할 수 있는 분석법으로 나타났다. 시료 중 엽산 함량에 대한 L.
시료를 선정하였다. 선정된 어류 4종(덕대, 청어, 눈볼대 및 참다랑어), 갑각류 3종(대롱수염새우, 갯가재 및 꽃게), 해조류 3종(모자반, 톳 및 쇠미역), 두족류 3종(갈고리흰오징어, 살오징어 및 문어), 패류 4종(피조개, 홍합, 참소라 및 진주담치) 및 기타수산물 3종(멍게, 미더덕 및 해삼)은 국립수산과학원(National Fisheries Research and Development Institute, NIFS) 식품위생가공과에서 비가식부를 제외하고 균질화한 다음 소포장 후 ice pack을 동봉하여 분석실로 배송되어 분석 전까지 −70 C에서 보관하였다.
83μg/100 g이었다. 시료 분석 시 함께 분석된 품질관리 시료는 분석 기간 동안 모두 관리상하한선 내에 수용되는 것으로 나타나 본 연구에서 분석된 총 20종의 수산물 및 수산가공품의 엽산 분석이 모두 일정 수준의 분석품질을 유지하며 진행되었음을 확인할 수 있었다.
057μg/100 g으로 엽산 함량이 낮은 식품에 적용할 수 있는 분석법으로 나타났다. 시료 중 엽산 함량에 대한 L. casei생육 관계는 다항식 모델(y=4−1.132/((1+X/0.0502) )+1.26)로 분석한 결과 R =1.0000을 나타내는 우수한 상관성을 얻었다. 또한, 분석법의 정확성과 정밀성이 우수한 수준임을 확인할 수 있었으며, 수산 자원 6개 군별에 따른 엽산 회수율 분석에서도 약 87-108%의 신뢰도가 확보된 회수율을 나타냄을 확인하였다.
회수율은 각 군별로 엽산 농도 수준의 100% 수준이 되도록 엽산 표준용액을 가하여 분석하였다. 어류에 속하는 청어가 86.6%로 가장 낮은 회수율을 보였으며 다른 5개 분류군 시료의 회수율은 94.2-108.1%로 보다 높은 수준을 나타내었다 (Table 5). AOAC 분석법 검증 가이드라인(2002)은 시료 중 분석하고자 하는 성분의 함량 수준에 따라 회수율 수용범위를 다르게 제시하고 있는데, 시료 중 분석성분 1μg/g 수준에서는 회수율 75-120%, 10μg/kg에서는 70-125%의 범위가 신뢰도가 확보된 수용 가능한 회수율 수준으로 제시하고 있다.
한편 식품 중 엽산과 같은 수용성 비타민은 일반적으로 낮은 농도 수준으로 존재하기 때문에 적용하는 분석법이 어느 농도 수준까지 재현성 있는 분석이 가능한지 LOD와 LOQ 분석을 통해 평가하였다. 엽산 표준용액의 농도를 측정 가능한 범위까지 단계 희석하여 농도에 따라 L. casei의 생육도를 측정한 결과 LOD와 LOQ는 각각 0.562μg/100 g와 1.057μg/100 g으로 나타났다(Table 1). HPLC를 이용하여 영양강화 밀가루의 엽산을 분석한 Alaburda 등(2008)은 분석법의 LOD와 LOQ를 각각 6.
3에 해당하는 값을 얻었다. 이는 ±2 이내 범위 이내를 충족하는 수준일 뿐 아니라 0에 가까운 값으로 본 연구에서 사용된 분석법과 분석수행도가 국제적 수준의 데이터를 생산할 수 있는 수준으로 우수함을 갖추고 있다고 평가할 수 있다.
3%의 회수율을 나타내었다. 이러한 회수율 수준은 AOAC 가이드라인(2002)에서 제시하는 수용범위(1μg/100 g일 때 70-125%) 내에 포함되는 것을 확인할 수 있었으며, 본 연구에서 분석한 인증표준물질은 NIST에서 제시하고 있는 인증값의 범위 내에 포함되는 것으로 수용 가능한 정확성을 나타낸다 하겠다. 본 연구는 L.
casei 생육도를 이용하여 다양한 수산 자원의 엽산 함량을 분석한 결과는 Table 4와 같다. 총 20종의 수산 자원의 엽산 함량은 1.75-97.98μg/100 g으로 비교적 넓은 범위를 나타내었으며 어류(1.75-10.34μg/100 g), 갑각류(20.96-36.24 μg/100 g), 해조류(12.94-97.98μg/100 g), 두족류(2.23-3.32μg/100 g), 패류(9.10-45.54μg/100 g) 그리고 기타류(2.28-33.85μg/100 g) 의 수산자원의 분류군에 따라 엽산 수준에 차이가 나타남을 확인할 수 있었다. 그 중 해조류에 속하는 톳(97.
특히, 본 연구와 같이 미생물을 이용한 분석법을 적용하는 경우, 미생물을 다루는 분석자의 숙련도와 분석 기간 동안의 분석에 사용되는 미생물의 생육 특성 등이 분석 결과에 영향을 미치게 되므로 일반적인 기기분석이 일정한 주기별로 분석품질을 관리하는 것과 달리 미생물을 이용하는 모든 분석일에 분석품질시료를 함께 분석하는 것이 미생물이 정상적으로 엽산 농도에 반응하고 있는지를 확인할 수 있게 된다. 이러한 분석품질관리 데이터는 본 연구에서 분석한 국내 수산 자원의 엽산 분석데이터의 신뢰성을 보여주는 것으로써 향후 국가영양성분 데이터베이스 구축 및 개정의 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
한편 어류와 두족류의 엽산 함량은 다른 수산 자원에 비하여 상대적으로 낮은 수준을 보인 반면 갑각류와 패류는 이에 비해 상대적으로 높은 엽산 함량을 보이는 것으로 확인되었다. 그러나 같은 패류와 기타류 중에서도 각각 참소라와 해삼은 같은 군에 속하는 다른 수산 자원에 비하여 엽산 함량이 비교적 낮은 수준을 나타내었다.
casei를 이용한 분석법은 엽산의 검출 및 정량 수준이 낮아 엽산이 미량으로 존재하는 식품의 정량분석에도 용이하게 적용할 수 있을 것으로 보여진다. 한편, L. casei를 이용한 엽산 분석법의 정확성 검증을 위해 인증표준 물질 SRM 1849a(infant formula)와 3290(dry cat food)을 분석하여 NIST에서 제시한 인증값(229.3±23, 600.0±100.0 g/100 g)과 비교하여 회수율을 산출한 결과 각각 85.1%와 95.3%로 나타났다 (Table 2). HPLC 분석법을 이용하여 folic acid가 포함된 multivitamin tablet을 분석한 Kucukkolbasi 등(2013)은 88.
후속연구
본 연구에서 분석한 수산자원 20종의 엽산 함량분석 및 검증 데이터는 국내 수산 자원에 대한 신뢰도 있는 데이터베이스 구축 자료로 활용될 수 있을 것으로 판단되며, 한국은 삼면이 바다로 인접된 지리적 특성으로 인하여 일상 식단에서 다양한 수산 자원이 자주 이용되고 있는 바 trienzyme-L. casei 분석법을 향후 수산 자원의 엽산 함량 분석에 확대 적용하여 국가수준의 영양성분 데이터베이스 구축에 기여할 수 있을 것이라 사료된다.
특히, 본 연구와 같이 미생물을 이용한 분석법을 적용하는 경우, 미생물을 다루는 분석자의 숙련도와 분석 기간 동안의 분석에 사용되는 미생물의 생육 특성 등이 분석 결과에 영향을 미치게 되므로 일반적인 기기분석이 일정한 주기별로 분석품질을 관리하는 것과 달리 미생물을 이용하는 모든 분석일에 분석품질시료를 함께 분석하는 것이 미생물이 정상적으로 엽산 농도에 반응하고 있는지를 확인할 수 있게 된다. 이러한 분석품질관리 데이터는 본 연구에서 분석한 국내 수산 자원의 엽산 분석데이터의 신뢰성을 보여주는 것으로써 향후 국가영양성분 데이터베이스 구축 및 개정의 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
000μg/100 g로 보고하였다. 이에 비하여 본 연구에서 L. casei를 이용한 분석법은 엽산의 검출 및 정량 수준이 낮아 엽산이 미량으로 존재하는 식품의 정량분석에도 용이하게 적용할 수 있을 것으로 보여진다. 한편, L.
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