[논문]초임계 추출 느릅나무 성분을 함유한 고 보습 화장품 제형에 대한 평가 연구

구은비; 김한규; 김윤식; 추의진

doi:10.15207/jkcs.2020.11.5.241

초임계 추출 느릅나무 성분을 함유한 고 보습 화장품 제형에 대한 평가 연구
A study on the Formulation of high-moisturizing Cosmetics containing Ulmus davidiana supercritical fluid extract 원문보기

한국융합학회논문지 = Journal of the Korea Convergence Society, v.11 no.5, 2020년, pp.241 - 251

구은비 ((주)동구바이오제약 중앙연구소) , 김한규 ((주)동구바이오제약 중앙연구소) , 김윤식 (네비팜 R&D센터) , 추의진 ((주)동구바이오제약 중앙연구소)

초록
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항균, 항산화, 항염증 효능의 기능성 원료로써 효능이 확인된 느릅나무 추출물을 포함하는 화장품 개발을 위한 연구와 이 화장품의 아토피피부염과 같은 건조하고 민감한 피부 개선 효능에 대한 연구를 수행하였다. 원료 물질인 느릅나무 초임계 추출박 60%주정 추출물(USCFR)과 초임계 추출물(USCF), 이를 포함하는 예비제형 DKBP-1903 (겔)에 대한 독성시험을 수행한 결과 '무독성'으로 판정되었다. 이를 토대로 조제한 각 제형별 화장품 로션, 크림, 겔에 대한 안정성 시험 결과, 크림과 겔이 더 우수한 안정성을 보였고 안정성이 확보된 두 가지 제형에 대해 아토피 피부염 개선 효능 입증을 위한 화장품 효능시험으로 48시간 보습지속력 시험과 건조함에 의한 소양감개선 시험을 진행한 결과, 크림과 겔 도포 24시간 후 82.9%, 92.32%의 피부각질층 수분함량 개선율을 보였고 2주 후부터 소양감 개선 효과를 나타냈다. 이러한 결과를 통해 크림과 겔 모두 비교적 안전한 보습제로써 건조하고 민감한 피부에 도움을 줄 수 있는 것으로 판단된다.

Abstract ▼ AI-Helper

This study was performed to develop the cosmetics containing extract of U.davidiana, which has been confirmed as a functional ingredient of anti-microbial, anti-oxidant, and anti-inflammatory effects, and also to evaluate the improvement effects of dry and sensitive skin such as atopic dermatitis. Toxicity tests of the Ulmus davidiana supercritical fluid residue 60% EtOH extracts(USCFR), Ulmus davidiana supercritical fluid extracts(USCF) and preliminary formulations, DKBP-1903(gel), containing the USCFR and USCF were determined to be 'Non-toxic'. Based on this, the stability test of the lotion, cream, gel formulation was conducted and the results showed that cream and gel formulation were stable. A 48-hour moisturizing sustainability test and the improvement test on the pruritus caused by dryness were selected for the cosmetic efficacy test to evaluate the improvement of atopic dermatitis and as a result both cream and gel have been found to be relatively safe moisturizers that can help dry and sensitive skin.

주제어

표/그림 (15)

표 Table 1. Result of Patch test
표 Table 2. Erythema scores
표 Table 3. Subjective evaluation score table for pruritus caused by subject's dry skin.
표 Table 4. The composition of DKBP-1901
그림 Fig. 1. Stability test results for lotion formulation(DKBP-1901), cream formulation(DKBP-1902), gel formulation (DKBP-1903).
표 Table 5. The composition of DKBP-1902
표 Table 6. The composition of DKBP-1903
표 Table 7. Mean Erythema Scores. G1: N,N-dimethylformamide (DMF), G2-G4: USCFR, G5: α-hexylcinnamaldehyde, S.D.: Standard deviation, N: Number of animals.
표 Table 8. Mean stimulation index. G1: N,N-dimethylformamide (DMF), G2-G4: USCFR, G5: α-hexylcinnamaldehyde, S.D.: Standard deviation, N: Number of animals.
표 Table 9. Stability test report of Cream. Report criteria: NT(Not Tested), 0 (No change), 1.2 and 3 (Unacceptable change)
표 Table 10. Stability test report of Gel. Report criteria: NT(Not Tested), 0 (No change), 1.2 and 3 (Unacceptable change)
표 Table 11. Stability test report of Lotion. Report criteria: NT(Not Tested), 0 (No change), 1.2 and 3 (Unacceptable change)
그림 Fig. 2. Changes of corneometer value in stratum corneum.
그림 Fig. 3. Result of subjective evaluation score for pruritus caused by subject's dry skin.
표 Table 12. Changes in corneometer value over time(p<0.05).

AI 본문요약
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문제 정의

본 시험은 CBA/J 마우스를 이용하여 시험물질인USCFR을 경피투여하고, 시험물질의 피부감작성 유무를 평가하고자 실시하였다. 본 시험은 음성대조군(시험물질희석액)으로 N,N-dimethylformamide(DMF)를 설정하였고 양성대조군은 a-hexylcinnamaldehyde를 AOOsolution (Acetone:olive oil=4:1)에 25% 농도로 희석하여 사용하였다.
본 연구에서는 초임계 추출 기술을 활용한 느릅나무초임계 추출물을 포함하는 화장품을 다양한 제형으로 조제하고 이에 대한 안정성과 아토피피부염에 대한 개선효과에 대하여 알아보고자 수행하였다. 초임계 추출 기술은 기존의 공정을 친환경 공법으로 대체하고 인체에 사용을 목적으로 하는 생리활성 천연물질의 추출, 정제에있어서 문제 제기 되어오는 유기용매에 대한 인체 유해성과 환경 독성 등의 문제점을 해결하기 위한 보완대체방법으로 알려져 있다[20-23].
난치성 피부 질환에 적용이 가능한 천연물 유래 신소재를 발굴하기 위해 느릅나무 가지를 초임계 유체 기술을 활용하여 추출한 느릅나무 가지 초임계 추출물(USCF)과 초임계 추출박 60% 주정 추출물(USCFR)을사용하여 연구하였다. 본 연구에서는 피부상재균에 대한 항균활성, 프리라디컬 소거능에 의한 항산화 활성, NO소거능에 의한 항염증활성, 항알러지 활성이 각각 확인된 USCFR과 USCF를 이용하여 아토피피부염과 같은 난치성 피부면역 질환 개선을 위한 화장품을 개발하는 연구를 수행하였다.
본 연구진은 원료 물질인 USCFR과 USCF의 독성을 알아보기 위하여 인체첩포시험과 피부자극시험, 피부감작성시험 총 3가지 시험을 진행하였고, 이를 통해서 원료물질이 무자극, 비자극성 물질임을 확인하였다. 이를 통해 화장품에 사용할 때, 두 원료 물질의 농도를 독성이 나타나지 않는 적정 농도인 USCFR 1.0%, USCF 0.01%로 설정하고 향후 다양한 제형에 적용시키고자 하였다.

제안 방법

본 시험의 구성은 음성대조군,양성대조군 및 시험물질군 총 3군으로 각 군당 3개(tissue)의 반복시료(three replicate tissue)로 설정하였으며, 단회 시험으로 진행하였다.
시험방법은 시험부위(시험대상자의 등)를 정제수로 세척한 후 약 5분간 자연건조하고, 시험시료를 20μL 만큼 첩포에 로딩한 후 24시간 동안 폐쇄 첩포한다. 24시간 후 첩포를 제거하고 첩포 제거 30분 후, 24시간 후 및 48시간 후에 각 시험부위의 피부 반응을 평가한다. 판정점수는 0:무자극, 1:불확실한 반응(희미한 홍반), 2: 약한 양성 반응(홍반, 침윤 또는 구진), 3: 강한 양성 반응(홍반, 침윤, 구진 및 소수포 형성), 4:매우 강한 양성 반응(진한 홍반, 침윤 및 불규칙한 수포형성)으로 나뉜다.
SKINETHICTM 인체피부모델에 대한 원료물질USCFR(1.0%)과 USCF(0.01%), 이를 포함하는 화장품(DKBP-1903)의 독성을 평가하였다. 시험물질을 인체피부모델에 적용 및 세척한 후 42±1시간 동안 배양하여 시험물질이 인체피부모델에 미치는 가역적 손상을 평가한 결과, USCFR의 세포생존율은 103.
SKINTHIC™ 인체피부모델에 대한 USCFR, USCF,화장품(DKBP-1903)의 피부자극성을 평가하기 위하여시험물질을 인체피부모델에 적용 및 세척한 후 42±1시간 동안 배양하여 시험물질이 인체피부모델에 미치는 가역적 손상을 평가하였다.
가속시험은 일반적으로 장기보존시험의 지정저장온도보다 15℃ 이상 높은 온도에서시험하므로 온도 40±2℃, 상대습도 75±5%로 하였다. 가혹시험은 온도순환(-15 ~ 45℃), 냉동-해동 또는 저온-고온을 고려하여 설정하였다. 성상, 향, 점도, pH, 질량변화, 비중을 시험항목으로 설정하였다.
결과의 판정은 자극지수(SI)가 1.6이상(SI ≥ 1.6)이면피부감작성 양성물질로 판정하였다.
모든 투여군은 1회/일, 3일간총 3회 동물의 좌, 우측 이개부 외측 피부에 각각 경피투여 하였으며, 오전 중 일정한 시간에 실시하였다. 관찰기간 동안 매일 1회 일반증상을 관찰하였고, 체중은 투여개시일(투여 전) 및 투여 후 6일 째(조직적출일)에 측정하였다. 육안적 피부자극(홍반)은 투여개시일부터 1회/일,6일간 총 6회 관찰하였고, 귀 두께는 투여개시일(투여전), 투여 후 3 및 6일째(조직적출일)에 측정하였다.
난치성 피부 질환에 적용이 가능한 천연물 유래 신소재를 발굴하기 위해 느릅나무 가지를 초임계 유체 기술을 활용하여 추출한 느릅나무 가지 초임계 추출물(USCF)과 초임계 추출박 60% 주정 추출물(USCFR)을사용하여 연구하였다. 본 연구에서는 피부상재균에 대한 항균활성, 프리라디컬 소거능에 의한 항산화 활성, NO소거능에 의한 항염증활성, 항알러지 활성이 각각 확인된 USCFR과 USCF를 이용하여 아토피피부염과 같은 난치성 피부면역 질환 개선을 위한 화장품을 개발하는 연구를 수행하였다.
항균, 항산화, 항염, 항알러지 활성이 확인된 USCFR의 화장품 원료로써 가능성을 확인하기 위한 원료 독성시험으로 인체첩포시험과 피부자극시험을 진행한 결과,1%의 고농도에서도 무자극, 피부 비자극성 물질로 판정되었다. 또한 원료의 제형 내 안정성을 확보하기 위한 연구 결과, 크림과 겔 제형에서 그 안정성을 확인하였고 이에 대한 화장품 효능평가를 진행하였다. 건조하고 민감한피부 개선에 가장 중요한 요소인 보습력과 소양감 개선을 위한 효능평가로 48시간 보습지속력
1%의 농도로 희석하여 사용하였다. 모든 투여군은 1회/일, 3일간총 3회 동물의 좌, 우측 이개부 외측 피부에 각각 경피투여 하였으며, 오전 중 일정한 시간에 실시하였다. 관찰기간 동안 매일 1회 일반증상을 관찰하였고, 체중은 투여개시일(투여 전) 및 투여 후 6일 째(조직적출일)에 측정하였다.
본 연구에는 USCFR과 USCF를 각각 1%, 0.01% 함유하게 하여 로션 DKBP-1901(Table 4 참조), 크림DKBP-1902(Table 5 참조), 겔 DKBP-1903(Table 6참조)을 제조하였다.
본 연구진은 앞선 연구에서 다양한 제형의 안정성 시험결과를 통해서 안정성을 확인한 겔 제형 화장품DKBP-1903과 원료 물질인 USCFR, USCF 총 3가지에대한 독성시험을 진행하였다.
본 연구진은 원료 물질인 USCFR과 USCF의 독성을 알아보기 위하여 인체첩포시험과 피부자극시험, 피부감작성시험 총 3가지 시험을 진행하였고, 이를 통해서 원료물질이 무자극, 비자극성 물질임을 확인하였다. 이를 통해 화장품에 사용할 때, 두 원료 물질의 농도를 독성이 나타나지 않는 적정 농도인 USCFR 1.
선행 연구를 통해 제품의 안정성을 확보한 크림, 겔 제형에 대해 화장품 효능평가를 진행하였다.
가혹시험은 온도순환(-15 ~ 45℃), 냉동-해동 또는 저온-고온을 고려하여 설정하였다. 성상, 향, 점도, pH, 질량변화, 비중을 시험항목으로 설정하였다.
평가 시마다 동일한 부위에서 측정이이루어질 수 있도록 측정 부위를 구획하고 corneometer의 측정은 각각 5회 시행 후 측정치의 평균값을 측정값으로 기록한다. 소양감 개선 효과 평가는 Table 3과 같은 문항으로 피험자의 주관적 평가를 통해 실시하고 시험기간 중 시료 사용에 의한 부작용(홍반, 부종, 인설, 가려움, 자통, 작열감, 뻣뻣함, 따끔거림 및 기타 이상증) 발생 여부는 피부과 전문의가 평가하였다.
피험자의 전완부에 6cm x 4cm 크기의 직사각형 시험 부위를 구획하고 2mg/cm2의 시료를 1회 도포하고도포 전, 도포 후 1시간, 3시간, 6시간, 24시간, 48시간에 corneometer를 이용해 각질층 수분함량을 측정하였다. 시험기간 중 시료 사용에 의한 부작용(홍반, 부종, 인설, 가려움, 자통, 작열감, 뻣뻣함, 따끔거림 및 기타 이상증) 발생 여부는 피부과 전문의가 평가하였다.
시험방법은 시험부위(시험대상자의 등)를 정제수로 세척한 후 약 5분간 자연건조하고, 시험시료를 20μL 만큼 첩포에 로딩한 후 24시간 동안 폐쇄 첩포한다.
식품의약품안전처에서 고시한 안정성시험 시험조건에 따라 제형의 안정성을 평가하였다. 장기보존시험의 경우,온도 25±2℃, 상대습도 60±5% 또는 30±2℃, 상대습도 66±5%로 실험하였다.
예비 제형으로 제조한 로션, 크림, 겔의 안정성을 확인하고자 각각 용기에 30g씩 담아 실온, 장기보관(25℃, 상대습도 65%)조건 및 가속조건(40℃, 상대습도 75%)에서 1개월 보관하여 성상에 대한 평가를 진행하였다.
관찰기간 동안 매일 1회 일반증상을 관찰하였고, 체중은 투여개시일(투여 전) 및 투여 후 6일 째(조직적출일)에 측정하였다. 육안적 피부자극(홍반)은 투여개시일부터 1회/일,6일간 총 6회 관찰하였고, 귀 두께는 투여개시일(투여전), 투여 후 3 및 6일째(조직적출일)에 측정하였다. 조직적출일에 귀 조직 및 이개림프절을 적출하였고, 귀 조직의 중량을 측정하였다.
판정점수는 0:무자극, 1:불확실한 반응(희미한 홍반), 2: 약한 양성 반응(홍반, 침윤 또는 구진), 3: 강한 양성 반응(홍반, 침윤, 구진 및 소수포 형성), 4:매우 강한 양성 반응(진한 홍반, 침윤 및 불규칙한 수포형성)으로 나뉜다. 육안판정 후 공식을 이용하여 각 시험부위에 대한 평균 피부 반응도를 계산하였으며 Table 1과 같이 피부 반응도를 바탕으로 인체첩포시험 결과를 판정하였다.
이산화탄소를 이용한 초임계 추출공법을 활용해 추출한 느릅나무 초임계 추출물(USCF)과 이 자원을 재활용하기 위해 초임계 추출박을 60% 주정 추출한 느릅나무초임계 추출박 주정 추출물(USCFR) 두 원료에 대한 폴리페놀 함량을 비교한 결과 USCFR에서 약 3배가량 많은 폴리페놀 함량을 확인하였다. 이를 활용하여 건조하고민감한 피부의 보습 및 소양감 개선에 도움을 줄 수 있는 천연물 유래 USCFR을 포함하는 화장품 개발을 위한 안정성시험 및 효능평가를 수행하였다.
6)이면피부감작성 양성물질로 판정하였다. 자극의 평가는 홍반의 평가, 귀 두께 및 귀 무게를 종합적으로 평가하였다. 홍반은 육안적 피부자극 평가를 실시하였으며 Table 2의 Draize 법에 근거하여 관찰하여 기록하였다.
조직적출일에 귀 조직 및 이개림프절을 적출하였고, 귀 조직의 중량을 측정하였다. 적출한 이개림프절은 BrdUlabeling cell을 정량하였고, 자극지수를 산출하여 시험물질의 피부감작성을 평가하였다. 각 군의 BrdUlabeling index를 다음 식에 대입하여 자극 지수(Stimulation index, SI)를 산출하였다.
육안적 피부자극(홍반)은 투여개시일부터 1회/일,6일간 총 6회 관찰하였고, 귀 두께는 투여개시일(투여전), 투여 후 3 및 6일째(조직적출일)에 측정하였다. 조직적출일에 귀 조직 및 이개림프절을 적출하였고, 귀 조직의 중량을 측정하였다. 적출한 이개림프절은 BrdUlabeling cell을 정량하였고, 자극지수를 산출하여 시험물질의 피부감작성을 평가하였다.
평소 건조에 의한 가려움증이 있는 피험자 21명에 대해 아침, 저녁 하루 2회씩 안면부에 피험자가 4주 동안자가 사용하였다. 평가 시마다 동일한 부위에서 측정이이루어질 수 있도록 측정 부위를 구획하고 corneometer의 측정은 각각 5회 시행 후 측정치의 평균값을 측정값으로 기록한다. 소양감 개선 효과 평가는 Table 3과 같은 문항으로 피험자의 주관적 평가를 통해 실시하고 시험기간 중 시료 사용에 의한 부작용(홍반, 부종, 인설, 가려움, 자통, 작열감, 뻣뻣함, 따끔거림 및 기타 이상증) 발생 여부는 피부과 전문의가 평가하였다.
평소 건조에 의한 가려움증이 있는 피험자 21명에 대해 아침, 저녁 하루 2회씩 안면부에 피험자가 4주 동안자가 사용하였다. 평가 시마다 동일한 부위에서 측정이이루어질 수 있도록 측정 부위를 구획하고 corneometer의 측정은 각각 5회 시행 후 측정치의 평균값을 측정값으로 기록한다.
피험자의 전완부에 6cm x 4cm 크기의 직사각형 시험 부위를 구획하고 2mg/cm2의 시료를 1회 도포하고도포 전, 도포 후 1시간, 3시간, 6시간, 24시간, 48시간에 corneometer를 이용해 각질층 수분함량을 측정하였다. 시험기간 중 시료 사용에 의한 부작용(홍반, 부종, 인설, 가려움, 자통, 작열감, 뻣뻣함, 따끔거림 및 기타 이상증) 발생 여부는 피부과 전문의가 평가하였다.

대상 데이터

48시간 보습지속력 시험에 참여한 시험대상자는 총21명으로, 평균연령 44세, 여성 21명, 남성 0명이었다.식품의약품안전처(Ministry of Food and DrugSafety; MFDS) ‘화장품 표시, 광고 실증을 위한 시험방법 가이드라인(2015.
본 시험의 구성은 음성대조군,양성대조군 및 시험물질군 총 3군으로 각 군당 3개(tissue)의 반복시료(three replicate tissue)로 설정하였으며, 단회 시험으로 진행하였다. USCFR과 USCF를각각 1%, 0.01%의 농도가 되도록 정제수에 녹인 물질과이 물질을 포함하는 화장품(DKBP-1903)을 본 시험의 시험군으로 하였다. 시험방법은 growth medium 1mL이 담겨있는 6 well plate에 조직을 옮겨 배양하고 시험물질 적용 전까지 2시간 이상 전배양을 통해 안정화시킨다.
건조로 인한 소양감 개선시험에 참여한 시험대상자는평소 건조에 의한 가려움증이 있는 21명으로 평균연령 50세, 여성 21명, 남성 0명이었다.
본 시험에 사용된 샘플은 USCFR과 USCF를 각각1%, 0.01%의 농도가 되도록 정제수에 녹인 물질과 이물질을 포함하는 화장품(DKBP-1903)을 시험군으로 하였다.
본 시험은 CBA/J 마우스를 이용하여 시험물질인USCFR을 경피투여하고, 시험물질의 피부감작성 유무를 평가하고자 실시하였다. 본 시험은 음성대조군(시험물질희석액)으로 N,N-dimethylformamide(DMF)를 설정하였고 양성대조군은 a-hexylcinnamaldehyde를 AOOsolution (Acetone:olive oil=4:1)에 25% 농도로 희석하여 사용하였다. 시험물질은 0.
본 시험의 시험군은 G1: 음성대조군, G2: 시험물질투여군1(0.001%), G3: 시험물질투여군2(0.01%), G4: 시험물질투여군(0.1%), G5: 양성대조군으로 구성하였으며 각군당 투여액량은 25μL/ear, 동물 수는 투여군당 5마리로 하였다.
식품의약품안전처(Ministry of Food and DrugSafety; MFDS) ‘화장품 표시, 광고 실증을 위한 시험방법 가이드라인(2015.12)’ 및 대한피부과학연구소 자체규정에 근거하여 20명 이상의 유효데이터를 확보하였다.
인체첩포시험에 참여한 시험대상자는 총 30명으로,평균연령은 만 49.6±6.2세이며 여성 30명, 남성 0명이었다.

데이터처리

피부감작성 시험 측정결과에 대하여Bartlett test를 실시하여 등분산성을 검정하였고 등분산성인 경우 ANOVA를 실시하여 유의성이 관찰되면 Dunnett’s t-test의 다중검정을 실시하였다. 등분산성이 기각되면 Kruskal-Wallis test를 실시하였다. 모든 통계학적 차이의 유의 수준은 p-value 0.
본 연구의 실험 결과들은 3회 반복 측정하여 평균값으로 나타내었으며, 48시간 보습지속력시험 및 건조함에 의한 소양감 개선시험의 통계처리는 Minitab 19(Minitab19.2, Minitab Inc.) 프로그램을 이용해 유의성을 확인하였고, 결과 값은 정규성 검정(Ryan-Joiner Nomality)을 통해 정규 분포로 추정되는 경우 반복측정분산분석(Repeated mesure ANOVA)을 통해 유의성을 확인하며 정규성이 기각되는 경우 Friedman 검정을 통해 유의성을 확인하였다. 피부감작성 시험 측정결과에 대하여Bartlett test를 실시하여 등분산성을 검정하였고 등분산성인 경우 ANOVA를 실시하여 유의성이 관찰되면 Dunnett’s t-test의 다중검정을 실시하였다.
피부감작성 시험 측정결과에 대하여Bartlett test를 실시하여 등분산성을 검정하였고 등분산성인 경우 ANOVA를 실시하여 유의성이 관찰되면 Dunnett’s t-test의 다중검정을 실시하였다.

이론/모형

2세이며 여성 30명, 남성 0명이었다. 기능성화장품 심사에 관한 규정(식품의약품안전처고시 제2017-42호), International Contact DermatitisResearch Group(ICDRG)의 판정기준 및 한국화학융합시험연구원 표준작업지침서(SOP)에 따라 시험을 수행하였다.
본 시험은 “OECDGuidelines for the Testing of Chemicals, 442B,Skin Sensitization Local Lymph Node Assay:BrdU-ELISA or-FCM” Organisation for EconomicCo-operation and Development(Adopted: 22 June2018)의 시험기준을 근거하여 실시되었다.
시험부위 육안평가는 International ContactDermatitis Research Group(ICDRG) 판정기준에 따라 실시하였다. 육안평가는 2인 이상의 시험자가 진행하며 두 시험자간의 판정 결과가 상이할 경우 더 높은 등급을 선택하였다.
피부감작성시험은 ㈜바이오톡스텍을 통해 진행되었으며, 2010년 AAALAC International (Association forAssessment and Accreditation of LaboratoryAnimal Care International) 완전인증을 획득하였다.본 시험은 동물보호법(제정 1991년 5월 31일 법률 제4379호, 일부 개정 2019년 8월 27일 법률 제16544호)에 근거한 ㈜바이오톡스텍의 동물실험윤리위원회에 의해승인되었다(승인번호: 190643).
피부자극시험은 한국화학융합시험연구원(KTR)에서진행하였으며 SKINTHIC™ 인체피부모델을 사용하였다.
자극의 평가는 홍반의 평가, 귀 두께 및 귀 무게를 종합적으로 평가하였다. 홍반은 육안적 피부자극 평가를 실시하였으며 Table 2의 Draize 법에 근거하여 관찰하여 기록하였다. 본 시험의 시험군은 G1: 음성대조군, G2: 시험물질투여군1(0.

성능/효과

00이었다. 0.00~0.75를 무자극으로 판정하는 기준에 따라 원료물질 2가지와 화장품 모두 무자극으로 판단되었다. 이러한 결과로서 원료인 USCFR과 USCF에서 피부반응이 없었으며, 이를 이용한 화장품에서도 피부반응이 경미하여 화장품으로 사용함에 있어 부작용이 없는 것으로 판단된다.
1개월 후에 실온 및 장기보관(25℃, 상대습도 65%)조건에서 로션, 크림, 겔 제형 모두 상분리나 색변화 없이 안정함을 확인하였다. 가속조건(40℃, 상대습도 75%)에서는 크림(DKBP-1902)과 겔(DKBP-1903)에서 성상의변화가 관찰되지 않았고, 로션(DKBP-1901)에서 색이 약간 노랗게 변한 것을 관찰할 수 있었으나 유의할만한 변화는 아니었다.
25% 농도의 양성대조군은 2.967로 나타났고 음성대조군과 비교하여 유의(p<0.05)하게 증가되었고, 1.6이상으로 산출되어 해당시험은 적절하게 실시된 것으로 확인되었다.
25% 농도의 양성대조군은 귀 두께 0.19~0.23mm로나타났고 귀 무게는 14.6mg으로 음성대조군과 비교하여 유의한(p<0.01, 투여후 3 및 6일째)차이가 나타났다.
05)으로 개선됨을 확인하였다. 겔을 사용한 경우,시험 전 2.05에서 시험 2주 후 1.10, 시험 4주 후 0.29로감소하여 소양감 증상이 개선됨을 확인하였다.
05)으로 개선됨을 확인하였다. 겔의 시험 결과, 시험 2주 후33.93%, 시험 4주 후 40.12%로 확인되어 각질층 수분함량이 개선됨을 확인하였다.
결과적으로 겔과 크림 두 제품 모두 피험자에게서 소양감이 개선되는 효과를 나타내었다. 근래의 아토피피부염 질환은 소양감 개선 및 보습효과에 중점을 둔 제품들이 많이 판매되고 있다.
결과적으로 크림과 겔을 1회 도포한 시험 부위가 대조부위에 비해 통계적으로 유의한 수준(p<0.05)의 높은 각질층 수분함량을 나타내고 이러한 차이가 48시간 동안지속되어 피부 수분 유지력(보습력)을 가지고 있는 것을 확인하였다.
또한 건조함에 의한 소양감 개선 시험 결과,크림과 겔 모두 시험 부위가 시험 전에 비해 통계적으로 유의한 수준(p<0.05)으로 피부 수분 함량이 증가하며 보습에 도움을 줄 수 있는 것으로 판단되며, 피험자 소양감 주관적 평가에서도 시험 전에 비해 통계적으로 유의한수준(p<0.05)으로 개선된 결과를 나타내어 크림과 겔 모두 피부 건조에 의한 소양감(가려움증)완화에 도움을 줄 수 있는 것으로 판단된다.
05)의 보습 개선 효과를 확인할 수 있었다. 또한 겔을 1회 도포한 시험 부위의 피부 각질층 수분함량 개선율은 도포 1시간 후, 3시간 후, 6시간 후에 각각 74.62%,112.70%, 116.64%로 확인되었고 도포 24시간 후, 48시간 후에는 각각 92.32%, 74.62%로 확인되었다.
또한 선행 연구를 통해 초임계 추출 공법으로부터 발생되는 추출박의 자원 재활용을 위해 느릅나무 초임계추출박을 60% 주정 추출하여 이에 대한 항산화 활성, 항알러지 활성과 총 페놀 함량을 분석한 결과, 기존의 느릅나무 초임계 추출물과 양성대조군인 비타민C와 비교했을 때 매우 강력한 항산화 활성을 나타내며 적은 농도에서도 강력하고 유의성 있는 항알러지 효능을 확인하였다. 또한 총 페놀 함량 분석 결과, 기존 초임계 추출물과 비교했을 때 약 3배가량 높은 폴리페놀(poly-phenol) 함량이 확인되었다[29].
또한 선행 연구를 통해 초임계 추출 공법으로부터 발생되는 추출박의 자원 재활용을 위해 느릅나무 초임계추출박을 60% 주정 추출하여 이에 대한 항산화 활성, 항알러지 활성과 총 페놀 함량을 분석한 결과, 기존의 느릅나무 초임계 추출물과 양성대조군인 비타민C와 비교했을 때 매우 강력한 항산화 활성을 나타내며 적은 농도에서도 강력하고 유의성 있는 항알러지 효능을 확인하였다. 또한 총 페놀 함량 분석 결과, 기존 초임계 추출물과 비교했을 때 약 3배가량 높은 폴리페놀(poly-phenol) 함량이 확인되었다[29].
선행 연구결과를 바탕으로 느릅나무 추출물을 포함하는 화장품 3종 제형으로 로션, 크림, 겔을 선정하였고 느릅나무 추출물의 함유량을 1.0%로 하여 간이 안정성을평가한 결과, 느릅나무 추출물의 농도가 높을수록, 보관조건의 온도가 높을수록 색이 짙어지거나 원물의 취가발생하였다. 이를 개선하기 위해 느릅나무 추출물의 농도를 낮춰 3종 제형을 제작하였고 이에 대한 안정성 결과는 Table 9, 10, 11에 나타내었다.
시험 결과, 크림과 겔을 1회 도포한 시험 부위가 대조부위에 비해 통계적으로 유의한 수준(p<0.05)으로 높은 각질층 수분함량을 나타내고, 이러한 차이가 48시간 동안 지속되므로 피부 수분 유지력(보습력)을 가지고 있다고 판단된다.
시험물질을 인체피부모델에 적용 및 세척한 후 42±1시간 동안 배양하여 시험물질이 인체피부모델에 미치는 가역적 손상을 평가한 결과, USCFR의 세포생존율은 103.5±2.3%, USCF의세포생존율 104.5±4.4%, 2가지 원료물질을 포함하는화장품(DKBP-1903)의 세포생존율 82.0±11.2%로 산출되었다.
3mg으로 나타났다. 시험물질투여군 모두 귀 두께는 0.19~0.20mm로 나타났고, 귀 무게는 각각 13.5, 13.3 및 13.3mg으로 나타났고 음성대조군과 비교하여 유의한 차이가 나타나지 않았다. 25% 농도의 양성대조군은 귀 두께 0.
50℃ 고온 보관 4주차에 로션의 색이 짙어지고 점도가 낮아지는 경향을 보였다. 원료 물질을 제외하고 조제 후 관찰한 결과에서는색 변화나 점도가 낮아지는 경향은 보이지 않았고 원료물질의 함유량을 낮춰 조제한 경우에도 색, 점도에 큰 변화 없이 안정함을 확인하였다. 이러한 안정성 시험 결과를 바탕으로, 화장품 내 USCFR 원료의 함유량을 1%보다 낮게 설정해야 할 것으로 사료된다.
음성대조군의 투여 전부터 투여 후 6일째 귀 두께는 모두 0.19~0.20mm, 귀 무게는 13.3mg으로 나타났다. 시험물질투여군 모두 귀 두께는 0.
음성대조군의 투여 전부터 투여 후 6일째까지 육안적피부자극(Erythema scores, 홍반)은 모두 0으로 나타났다. 시험물질투여군 모두 0으로 나타났고, 음성대조군과비교하여 유의한 차이가 나타나지 않았다.
이는 시험 시표 도포 후피부 각질층 수분함량이 지속적으로 증가한 결과이며 무도포 대조 부위에 비해서도 통계적으로 유의한 차이(p<0.05)의 보습 개선 효과를 확인할 수 있었다.
6이상으로 산출되어 해당시험은 적절하게 실시된 것으로 확인되었다. 이러한 결과로서 시험물질인 USCFR로 CBA/J 마우스를 이용한 피부감작성 시험(Local lymph node assay:BrdU-ELISA법)을 진행하였을 때, 감작성은 음성으로 판단되었다. 이로써 원료의 안전성을 확보하였기 때문에 화장품 원료로 사용하였을 때 독성이 없음을 확인하였다.
75를 무자극으로 판정하는 기준에 따라 원료물질 2가지와 화장품 모두 무자극으로 판단되었다. 이러한 결과로서 원료인 USCFR과 USCF에서 피부반응이 없었으며, 이를 이용한 화장품에서도 피부반응이 경미하여 화장품으로 사용함에 있어 부작용이 없는 것으로 판단된다.
피부자극시험을 통해 GloballyHarmonized System of Classification andLabelling of Chemicals(GHS)에 따른 분류에서 ‘범주외’에 해당하는 피부 비자극성물질로 판정된다. 이러한 결과로서 원료인USCFR과 USCF에서 피부자극이 없었으며, 이를 이용한 화장품에서도 피부자극이 없어 화장품으로 사용함에 있어 부작용이 없는 것으로 판단된다.
이러한 결과로서 시험물질인 USCFR로 CBA/J 마우스를 이용한 피부감작성 시험(Local lymph node assay:BrdU-ELISA법)을 진행하였을 때, 감작성은 음성으로 판단되었다. 이로써 원료의 안전성을 확보하였기 때문에 화장품 원료로 사용하였을 때 독성이 없음을 확인하였다.
이산화탄소를 이용한 초임계 추출공법을 활용해 추출한 느릅나무 초임계 추출물(USCF)과 이 자원을 재활용하기 위해 초임계 추출박을 60% 주정 추출한 느릅나무초임계 추출박 주정 추출물(USCFR) 두 원료에 대한 폴리페놀 함량을 비교한 결과 USCFR에서 약 3배가량 많은 폴리페놀 함량을 확인하였다. 이를 활용하여 건조하고민감한 피부의 보습 및 소양감 개선에 도움을 줄 수 있는 천연물 유래 USCFR을 포함하는 화장품 개발을 위한 안정성시험 및 효능평가를 수행하였다.
총 30명의 시험대상자가 본 시험의 전 과정에 참여하여 4일에 걸쳐 안전성 평가를 위한 인체 첩포 시험을 진행한 결과, 원료 물질 USCFR(1.0%) 및 USCF(0.01%)의피부반응도는 0.00이었다.
2에 나타내었다. 크림을 1회 도포한 시험 부위의 피부 각질층 수분함량 개선율은 도포 1시간 후, 3시간 후, 6시간 후에 각각 79.19%, 87.87%, 80.15%로 확인되었고 도포 24시간 후, 도포 48시간 후에는 각각62.90%, 47.61%로 확인되었다. 이는 시험 시표 도포 후피부 각질층 수분함량이 지속적으로 증가한 결과이며 무도포 대조 부위에 비해서도 통계적으로 유의한 차이(p<0.
크림의 경우, 각질층 수분함량 corneometer 측정 값(A.U.)이 시험 전과 비교하여 시험 2주 후 4.6%, 시험 4주 후 37.38%로 증가되어 시험 부위의 피부 수분함량이 시험 4주 후부터 통계적으로 유의한 수준(p<0.05)으로 개선됨을 확인하였다.
피험자 피부 건조에 기인한 소양감 주관적 평가 값은크림을 사용한 경우, 시험 전 1.38에서 시험 2주 후0.62, 시험 4주 후 0.24로 감소하여 피험자의 주관적인 소양감 증상이 시험 2주 후부터 통계적으로 유의한 수준(p<0.05)으로 개선됨을 확인하였다.
항균, 항산화, 항염, 항알러지 활성이 확인된 USCFR의 화장품 원료로써 가능성을 확인하기 위한 원료 독성시험으로 인체첩포시험과 피부자극시험을 진행한 결과,1%의 고농도에서도 무자극, 피부 비자극성 물질로 판정되었다. 또한 원료의 제형 내 안정성을 확보하기 위한 연구 결과, 크림과 겔 제형에서 그 안정성을 확인하였고 이에 대한 화장품 효능평가를 진행하였다.

후속연구

원료 물질을 제외하고 조제 후 관찰한 결과에서는색 변화나 점도가 낮아지는 경향은 보이지 않았고 원료물질의 함유량을 낮춰 조제한 경우에도 색, 점도에 큰 변화 없이 안정함을 확인하였다. 이러한 안정성 시험 결과를 바탕으로, 화장품 내 USCFR 원료의 함유량을 1%보다 낮게 설정해야 할 것으로 사료된다.
근래의 아토피피부염 질환은 소양감 개선 및 보습효과에 중점을 둔 제품들이 많이 판매되고 있다. 이에 항균, 항산화, 항염증 및 항알러지에 활성을 가지고 있는 USCFR을[29] 함유하며소양감 개선 및 보습효과를 나타내는 본 시험물질은 보다 높은 치료효과를 나타낼 것으로 판단된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	아토피 화장품의 2016년, 2017년 국내 시장규모는?	8%의 성장률을 보이며 2020년에는 5,233 백만달러로 예상된다. 국내 시장규모 또한 2016년 392 억원, 2017년 404 억원으로 매년 3.1%의 성장률을 보이며 2020년 442 억원으로 예상된다.
	아토피 피부염의 특징은?	아토피(Atopy)는 그리스어인 a-topos가 어원으로‘특이한’, ‘부적당한’ 또는 ‘비정상적인 반응’ 등의 뜻을 가지고 있으며, 알레르기 반응을 일으키는 면역물질(IgE)을쉽게 형성함으로써 천식, 고초열, 알레르기 비염, 아토피피부염 등을 잘 일으키는 유전적 경향이라고 알려져 있다. 아토피 피부염은 만성적으로 재발하는 흔한 습진성병변으로 전 인구의 약 10% 정도에서 나타나며, 유소아기에 특히 높은 발생 빈도를 보인다[1].
	스테로이드제 장기 사용에 따른 부작용은 무엇인가?	아토피피부염에 효과가 있는 것으로 알려진 대표적 약물로는스테로이드제, 항히스타민제, 항생제, 비스테로이드제를 비롯한 기타 진정제와 신경안정제 등을 들 수 있다. 이중스테로이드제는 소염 및 면역억제에 대한 효과가 뛰어난반면, 장기간 사용할 경우에 피부의 탄력이 사라지고 얇아져서 실핏줄이 드러나는 등 흉하게 되고, 심한 경우에는 호르몬에 의한 전신증상, 부신기능의 저하, 면역력의저하가 나타나며 약을 중지하면 증상이 폭발적으로 악화되는 단점이 있다. 그리고 항히스타민제는 비만세포로부터 히스타민이 유리되지 못하도록 하여 가려운 증상을 경감시키는 임시방편에 지나지 않으며, 장기간 사용할 경우에 불면, 불안, 식욕감퇴 등의 부작용이 나타난다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
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