[논문]제주도 손바닥선인장 추출물의 표면소독제로써의 항균효과

권영란; 김다송; 신현재

doi:10.7586/jkbns.2021.23.1.1

제주도 손바닥선인장 추출물의 표면소독제로써의 항균효과
Effect of Antimicrobiotic of Opuntia ficus-indica on Surface Disinfection 원문보기

Journal of Korean biological nursing science, v.23 no.1, 2021년, pp.1 - 10

권영란 (경북대학교 간호대학) , 김다송 (조선대학교 생명화학고분공학과) , 신현재 (조선대학교 생명화학고분공학과)

Abstract ▼ AI-Helper

Purpose: To verify the anti-microbiotic activity and to develop eco-friendly surface disinfectants using the Opuntia ficus-indica extract. Methods: The stem and fruits of the Opuntia cultivated in Jeju Island were extracted with hot water, 70% EtOH and 100% MeOH, respectively. To examine the antimicrobial activity of the extracts, gram positive bacteria (Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus), gram negative bacteria (Escherichia coli, Salmonella typhimurium), yeast (Candida albicans), mold (Aspergillus flavus) and antibiotic resistant bacteria (E. coli, S. aureus) were measured to form a clear zone. Results: The antibacterial activity of the fruit extract was higher than that of the stem extract, and the antibacterial activity of the 100% MeOH (FM) extract and the 70% EtOH (FE) extract of the palm cactus fruit was suitable for the surface disinfectant overall, and clear-zone formed even at relatively low concentrations (250 mg/mL). The FM and FE have antibacterial activity against various bacteria, therefore they can be used as disinfectants. Conclusion: The antimicrobial activity of Opuntia ficus-indica extract from Jeju Island by stem and fruit was determined at relatively low concentrations (250 mg/mL). The Opuntia ficus-indica extract will be useful for surface disinfectants dissolving the patients' bath, oral gargling, and powdered powder in water or ethanol in appropriate concentrations.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구는 국내의 천연물을 이용하여 표면 소독제로써의 항균효과를 실험하였고 천연물 활용한 기초자료를 제공할 수 있다는데 의의가 있다.
본 연구는 제주도산 손바닥선인장 추출물의 부위별과 추출 용매 방법에 따라 세균과 진균을 이용하여 항균 효과를 확인하였고, 표면 소독제로써 사용 가능성을 확인해 보았다. 손바닥선인장 줄기보다 열매 추출물의 생육저해환을 형성하는 지름의 크기가 더 컸고, 비교적 낮은 농도(250 mg/mL)에서도 생육저해환을 형성하였다.
본 연구는 제주도산 손바닥선인장의 부위 및 추출용매에 대한 항균 효과를 세균과 진균을 이용한 대조군 비교 실험 연구이다.
본 연구에서는 제주도산 손바닥선인장, 백년초(Opuntia ficus-indi- ca) 추출물이 표면 소독제로써의 항균 효과가 있는지를 검증하여, 제주도산 손바닥 선인장 추출물이 표면 소독제로써의 사용 가능성을 파악하기 위함이다.
암피실린은 그람 양성균과 그람 음성균에 넓게 항균 활성을 보이지만, 항생제에 내성이 생긴 균에 항균 효과에 한계가 있으므로, 항생제에 내성인 생긴 균에 대한 손바닥선인장 추출물의 항균 효과를 보고자 대조군으로 사용하였다. 암피실린은 박테리아의 세포막합성을 저해하는 메커니즘으로 살균 효과를 나타내며 넓은 항균 영역을 보유하고 있어서 그람 양성균, 그람 음성균 등에 효과적으로 작용한다[30].
제주도산 손바닥선인장, 백년초의 항균 효과를 실험실에서 살펴본 결과 여러 균에 대하여 항균활성을 가지고 있어 천연물을 활용한 소독제로 활용 가능성을 확인해 보았다. 본 연구 결과에서 백년초, 제주도산 손바닥선인장 추출물은 항생제에 내성이 생긴 균에 생육 저해환이 형성되었다는데 의의가 있다.

제안 방법

1) 생육저해환 형성과 항균 활성의 크기는 농도 별로 희석한 추출물을 종이 디스크(paper disc, 8 mm)에 100 μL씩 흡수시키고 24시간 동안 37°C에서 배양한 후, 디스크 주변에 생성된 생육저해환의 크기로 측정하였다. 항균 활성은 액체 배양에서 생육 저해 효과를 측정하였다.
2) 대조군으로 암피실린을 증류수로 희석하여 0.1 mg/mL 농도로 제조하여 사용하였다.
3) MTT 용액이 짙은 자주색으로 바뀌는지 관찰하였다.
KYR and SHJ contributed to the conception and design of this study; KYR and KDS collected data; KDS performed the statistical analysis and interpretation; KYR drafted the manuscript; KYR, KDS, and SHJ critically revised the manuscript; SHJ supervised the whole study pro- cess. All authors read and approved the final manuscript.
를 도말하였다. 각각의 추출물을 100% DMSO [dimethyl sulfoxide] 로용해하여 500 mg/mL 농도로 제조하여, 멸균수로 희석(250 mg/mL, 100 mg/mL, 50 mg/mL)하여 실험하였다. 균주를 도말한 배지 위에 시료를 흡수시킨 종이 디스크를 놓은 후 배양하였다.
디스크 확산법(paper disc method)에 의하여 생육저해환 형성 직경 측정을 2회 실험을 하여, 평균과 오차 범위로 비교하여, 항균 활성 결과를 분석하였다.
본 연구에서는 FE와 FMe 같은 균주에 대하여 생육저해환을 형성하였다. 표면 소독제로 사용시 인체 안정성을 고려하면 FE가 가장 적합할 것으로 판단된다.
본 연구에서는 대조군으로 암피실린을 사용하여, 백년초가 SE, SM, FW, FE, FM이 항생제에 내성이 생긴 S. aureus의 생육을 저해하는 결과를 얻었다. 한편 본 연구에서는 모든 추출물이 효모균과 곰팡이에는 저해 효과가 없었다.
생육저해 효과는 균주 주변에 원형으로 나타나는 투명대인 생육 저해 환 지름 크기를 측정하였다.
제주도산 손바닥선인장 줄기와 열매를 2 cm 너비로 절단하여 40°C 에서 3일 동안 열풍건조 후 분쇄하여 증류수 고온 가압, 70% 에탄올, 100% 메탄올로 추출하였다. 추출된 시료는 추후에 한천배지 (agar plate)에 생육하는 미생물에 처리하여 미생물의 생장 저해 측정용 시료로 사용하였다.
제주도산 손바닥선인장 추출물의 부위별(줄기, 열매)과 추출 용매 방법(고온가압 증류수 추출, 70% 에탄올 추출, 100% 메탄올 추출)에 따른 항균 효과를 세균 균주(그람 양성균 2종, 그람 음성균 2 종), 효모균, 곰팡이를 이용하여, 대조군으로 암피실린(ampicillin)을 사용하여 항균 효과를 비교하였다.
100% 메탄올로 추출하였다. 추출된 시료는 추후에 한천배지 (agar plate)에 생육하는 미생물에 처리하여 미생물의 생장 저해 측정용 시료로 사용하였다.
크기로 측정하였다. 항균 활성은 액체 배양에서 생육 저해 효과를 측정하였다.

대상 데이터

25 μg/ mL, 2 μg/mL, 2 μg/mL의 MIC를 가지고 있다. 구강에 집락하는 균이나, 장에 장착하는 균 등 그람 양성 2종과 그람 음성 2종, 항생제에 내성이 생긴 균으로 손바닥 선인장의 항균성이 있다는 연구 보고[17] 가 있는 균을 선정하였다[12-27].
세균 생육배지는 Nutrient broth (NB)와 agar (NA)를 사용하였고, 효모균과 곰팡이 생육배지는 Sabouraud dextrose broth (SDB)와 agar (SDA)를 사용하였다.
손바닥선인장은 제주특별자치도 제주시 한림읍 제주선인장마을 농가에서 재배한 백년초의 줄기와 열매를 사용하였다. 실험 기간은 2019년 10월부터 2020년 6월에 Ch대학교 생명화학고분자공학과실험실에서 시행되었다.
재배한 백년초의 줄기와 열매를 사용하였다. 실험 기간은 2019년 10월부터 2020년 6월에 Ch대학교 생명화학고분자공학과실험실에서 시행되었다.
실험에 사용한 균주는 그람양성균인 Bacillus subtilis (KCCM 11316), Staphylococcus aureus (KCCM 11764), 그람음성균인 Escherichia coli (KCCM 12119), Salmonella typhimurium (KCTC 1526), 효모균인 Candida albicans (KCTC 7678), 곰팡이인 Aspergillus flavus (KCTC 6633), 항생제 내성균인 Escherichia coli (CCARM 1229), Staphylococcus aureus (CCARM 3108)을 대상 미생물로 선정하였다. 항생제에 내성이 생긴 E.

이론/모형

세포 독성 여부를 확인하기 위해 [3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl) -2-5-di- phenyltetrazolium bromide] (MTT) assay 시험법을 사용하였다[22]. 대사 과정이 온전한 세포의 미토콘드리아 내의 탈수소효소가 노란색 수용성 tetrazoliumsalt (MTT)를 비수용성의 짙은 자주색 MTT formazan 결정으로 환원시키는 원리를 이용한 것이다[22].

성능/효과

손바닥선인장 줄기보다 열매 추출물의 생육저해환을 형성하는 지름의 크기가 더 컸고, 비교적 낮은 농도(250 mg/mL)에서도 생육저해환을 형성하였다. FM 과 FE는 그람 양성균, 그람 음성균 , 항생제 내성균에 항균활성을 보였지만, 효모균과 곰팡이에는 항균활성이 없었다. 표면 소독제와 인체의 상호작용을 감안하여, FM 보다 FE가 접촉주의 환자의 침상 소독 시 FW의 농도 는 최소 500 mg/mL는 되어야 할 것이다.
소독제로 활용 가능성을 확인해 보았다. 본 연구 결과에서 백년초, 제주도산 손바닥선인장 추출물은 항생제에 내성이 생긴 균에 생육 저해환이 형성되었다는데 의의가 있다.
연구도 있다[17]. 본 연구에서는 SM가 S. aureus, 항생제 내성이 생긴 S. aureus에 항균활성을 보이는 한편, 모든 추출물이 효모균과 곰팡이에는 저해 효과가 없었다.
0 mg/disc와 비슷한 활성이 인정되었으며 Micrococcus luteus에 대해서는 벤젠 산보다 강력한 활성이 확인되었다는 연구 결과가 있다[16]. 본 연구에서는 백년초, 70% 에탄올로 추출하여 대조군 암피실린과 항균 효과를 비교하여, FE 에서 일치하는 결과를 얻었고, SE는 그람 양성균에만 항균 효과를 보이는 결과를 얻었다.
세포 독성 평가 결과 SW, SE, SM, FW, FE, FM 별 25-400 μg/mL 농도에 세포 독성이 없는 결과를 얻었다.
소독제로써 사용 가능성을 확인해 보았다. 손바닥선인장 줄기보다 열매 추출물의 생육저해환을 형성하는 지름의 크기가 더 컸고, 비교적 낮은 농도(250 mg/mL)에서도 생육저해환을 형성하였다. FM 과 FE는 그람 양성균, 그람 음성균 , 항생제 내성균에 항균활성을 보였지만, 효모균과 곰팡이에는 항균활성이 없었다.
줄기와 열매에서 비슷하다는 연구 결과가 있다[14]. 줄기와 열매의 플라보노이드 함량이 비슷하다는 연구 결과에 의하면, 본 연구에서 항균 활성 효과에도 부위별 차이는 없는 것이 기대되나, 생육 저해환의 크기가 다른 결과는 추출 수율이 FW, FE, SE, FM 순으로 차이가 난 것이 연구 결과에 영향을 미친 것으로 판단된다.
aureus의 생육을 저해하는 결과를 얻었다. 한편 본 연구에서는 모든 추출물이 효모균과 곰팡이에는 저해 효과가 없었다. 그러므로, 이를 보완할 자외선 소독 등 대책을 마련하는 추후 연구가 필요하다.

후속연구

FW는 항균성은 지니고, FE보다 휘발성은 없어서 표면 소독할 때 접촉하는 인체 부위의 상호작용으로부터 해로움을 예방할 수 있을 것으로 사료된다. 본 연구 결과 손바닥 선인장 추출물이 세포독성이 없는 것으로 측정되었지만 병원에서 표면 소독할 경우 표면에 접촉이 닿는 인체에 해로움이 없음을 입증하는 추후 연구가 필요하다.
한편 본 연구에서는 모든 추출물이 효모균과 곰팡이에는 저해 효과가 없었다. 그러므로, 이를 보완할 자외선 소독 등 대책을 마련하는 추후 연구가 필요하다.
FW는 항균성은 지니고, FE보다 휘발성은 없어서 표면 소독할 때 접촉하는 인체 부위의 상호작용으로부터 해로움을 예방할 수 있을 것으로 사료된다. 본 연구 결과 손바닥 선인장 추출물이 세포독성이 없는 것으로 측정되었지만 병원에서 표면 소독할 경우 표면에 접촉이 닿는 인체에 해로움이 없음을 입증하는 추후 연구가 필요하다. 손바닥선인장 분말 가루를 열수나, 에탄올에 적정 농도에 용해하여, 환자의 침상 목욕이나 구강 가글 및 농반, 후두경, 질경, 초음파 탐침 등 영상의학, 소화기 검진 의료장비 표면 소독, 침전 소독, 표준주의 및 접촉주의 환자의 침상 및 주변, 의료 기구의 소독에 추후 연구가 필요하다.
본 연구 결과 손바닥 선인장 추출물이 세포독성이 없는 것으로 측정되었지만 병원에서 표면 소독할 경우 표면에 접촉이 닿는 인체에 해로움이 없음을 입증하는 추후 연구가 필요하다. 손바닥선인장 분말 가루를 열수나, 에탄올에 적정 농도에 용해하여, 환자의 침상 목욕이나 구강 가글 및 농반, 후두경, 질경, 초음파 탐침 등 영상의학, 소화기 검진 의료장비 표면 소독, 침전 소독, 표준주의 및 접촉주의 환자의 침상 및 주변, 의료 기구의 소독에 추후 연구가 필요하다. 손바닥 줄기나 열매는 분말 가루 형태로 구할 수 있고, 표면적이 넓은 소독이 필요한 경우에 유용할 수 있다.
손바닥 줄기나 열매는 분말 가루 형태로 구할 수 있고, 표면적이 넓은 소독이 필요한 경우에 유용할 수 있다. 실제 병원에서 손바닥선인장 추출물이 휘발성이 적어 인체의 접촉과 흡인으로 인한 점막의 손상과 자극을 줄이고, 접촉하는 의료 장비와 상호작용으로 인한 표면 손상을 방지할 수 있고, 사용 후 폐기가 쉬운 친환경적인 표면 소독제로써 유용하고 인체와의 상호작용 및 의료 장비 표면의 상호작용을 평가하는 연구가 앞으로 요구될 전망이라고 본다.
4 mg 탁시폴린을 분리하였으며, 백년초 추출물의 항균 활성도 확인하였다. 추출 방법에 따라 항생 효과를 얻을 수 있는 물질의 구조가 달라질 수 있으므로, 본 연구에서 항생 효과를 하는 물질은 레불린 산[19] 또는 탁시폴린(Taxifolin) [20], 플라보노이드 (chalcone, flavan-3-ol (catechin), flavanone, flavone, flavonal, proantho- cyanidin) 일종[23]일 가능성이 있고, 밝혀지지 않은 새로운 물질인지는 정확한 화학구조를 규명이 필요하다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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