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제안 방법
- Rhodamine을 peptide로 바꾸어 방사를 하여 peptide가 release되는 실험을 하였고 방사 조건은 다음과 같이 하였다.
- release 된 peptide의 활성을 측정하기 위하여 E. coli 박테리아를 이용하여 peptide의 항생제 활성도를 측정하였다. peptide의 투여량은 다음과 같으며 A는 peptide를 처리하지 않은 배지에 세포를 배양 것이며 B와 C는 normal peptide를 처리하여 세포를 배양한 것이며 D와 E는 released peptide를 처리하여 세포를 배양한 것이다.
- 기본적인 전기방사장치의 구성 요소로는 고전압공급장치(high voltage power supply, HVPS, SHV20040kV/5mA, Convertech), 시린지 펌프(syringe pump, model 781100, KDScience), 노즐(nozzle), 콜렉터(collector)를 사용하였으며 노즐의 위치는 콜렉터로부터 150 mm 떨어진 곳에서 지면과 수직으로 방사하였고 각각의 고분자를 일정 시간동안 방사하여 적층하는 방식을 사용하였다.
- 나노 섬유의 직경을 측정하기 위하여 sputter(E-1030, Hitachi)를 사용하여 15 mA로 60초 동안 7 nm의 백금(pt)코팅을 하였으며 주사전자현미경(SEM, S-4800, Hitachi)을 사용하였으며 release되는 Rhodamine B의 양을 측정하기 위해 spectrophotometer를 사용하여 543 nm의 빛으로 측정하였다.
- 방사된 peptide의 활성도를 측정하기 위해 E.coli를 1x106 cfu/ml 이용하여 37 ℃에서 trypticase soy broth(TSB) agar 배지에 24시간 동안 bacteria를 배양하였으며 colony의 형성을 관찰하였다.
- 본 연구에서는 poly ε(-carprolactone)(PCL) 과 poly ethylene oxide (PEO)를 고분자 물질로 사용하는 전기방사 공정을 이용하여 만든 나노 섬유에 peptide를 같이 방사하여 in vitro로 상태에서 시간이 경과함에 따라 나노 섬유가 용해되고 그로인해 peptide가 release되는 양을 확인하였으며 전기 방사의 시간, 적층수 및 두께 등을 조절함으로써 peptide의 release 속도를 조절할 수 있었다.
- 본 연구에서는 polyε(-carprolactone)(PCL) 과 poly ethylene oxide (PEO)를 고분자 물질로 사용하는 전기방사 공정을 이용하여 만든 나노 섬유에 peptide를 같이 방사하여 in vitro로 상태에서 시간이 경과함에 따라 나노 섬유가 용해되고 그로인해 peptide가 release되는 양을 확인하였으며 전기 방사의 시간, 적층수 및 두께 등을 조절함으로써 peptide의 release 속도를 조절할 수 있었다.
대상 데이터
- ) 및 3rd Distilled Water를 용매로 사용하였다. HPA3NT3 (amino acid sequence : FKRLKKLF KKIWNWK) 항생제 단백질(antibacterial peptide)은 조선대학교 단백질 센터로부터 받았으며 전기방사에 이용 후 활성도 측정을 하였다.
- 본 연구에서는 PCL (Mw=80,000 Aldrich)과 PEO (Mw=900,000 Aldrich), Rhodamine B (Mw=479.02 Fluka) 를 사용하였으며 DMF (N,N-dimetyl formaide, Junsei Chemical co.), MC(Methylene chloride, Junsei Cemical co.) 및 3rd Distilled Water를 용매로 사용하였다. HPA3NT3 (amino acid sequence : FKRLKKLF KKIWNWK) 항생제 단백질(antibacterial peptide)은 조선대학교 단백질 센터로부터 받았으며 전기방사에 이용 후 활성도 측정을 하였다.
- 전기 방사를 위한 고분자 용액은 8 wt% PCL, 73.55 wt% MC, 18.45 wt% DMF를 사용하였고 2 wt% PEO와 0.01 wt% Rhodamine B, 98 wt% 3rd DW를 혼합하여 사용하였다.
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