This study relates to low and medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan produced by submerged liquid culture of Agaricus blazei, a method of producing the isoflavone-B-D-glucan using autolysis enzyme of Agaricus blazei mycelia, and use of the isoflavone-B-D-glucan for anti-can...
This study relates to low and medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan produced by submerged liquid culture of Agaricus blazei, a method of producing the isoflavone-B-D-glucan using autolysis enzyme of Agaricus blazei mycelia, and use of the isoflavone-B-D-glucan for anti-cancer and immunoenhancing effect. In acordance with one aspect of the present study, it deals with a method of producing isoflavone-${\beta}$-D-glucan, which comprises the followings; 1) culturing and separating mushroom mycelia, 2) producing low-medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan from high molecular weight one. The cytotoxicity on human cnacer cell line (Caco-2, MCF-7), the expression of Cyclin D, Bcl-2, Bax protein, p21 protein, p53 protein in MCF-7 cells assessed by SDS-PAGE and immunoblotting, and other immuno related factors such as TNF-${\alpha}$ and IL-1B activities were examined. Structural identification of isoflavone-${\beta}$-D-glucan which showed cytotoxicity against cancer cell and immunoenhancing effects was carried by separation with DEAE-cellulose column chromatography, TLC, HPLC, IR, NMR. Clinical test for the cancer patients (n=119) for 6 month was carried out, and immunoenhancing factors (NK. cell number, ratio of T4/T8) were checked. We concluded the identified isoflavone-${\beta}$-D-glucan has immuno enhancing effects and could be useful for cancer chemoprevention.
This study relates to low and medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan produced by submerged liquid culture of Agaricus blazei, a method of producing the isoflavone-B-D-glucan using autolysis enzyme of Agaricus blazei mycelia, and use of the isoflavone-B-D-glucan for anti-cancer and immunoenhancing effect. In acordance with one aspect of the present study, it deals with a method of producing isoflavone-${\beta}$-D-glucan, which comprises the followings; 1) culturing and separating mushroom mycelia, 2) producing low-medium molecular weight isoflavone-${\beta}$-D-glucan from high molecular weight one. The cytotoxicity on human cnacer cell line (Caco-2, MCF-7), the expression of Cyclin D, Bcl-2, Bax protein, p21 protein, p53 protein in MCF-7 cells assessed by SDS-PAGE and immunoblotting, and other immuno related factors such as TNF-${\alpha}$ and IL-1B activities were examined. Structural identification of isoflavone-${\beta}$-D-glucan which showed cytotoxicity against cancer cell and immunoenhancing effects was carried by separation with DEAE-cellulose column chromatography, TLC, HPLC, IR, NMR. Clinical test for the cancer patients (n=119) for 6 month was carried out, and immunoenhancing factors (NK. cell number, ratio of T4/T8) were checked. We concluded the identified isoflavone-${\beta}$-D-glucan has immuno enhancing effects and could be useful for cancer chemoprevention.
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제안 방법
1) 아가리쿠스 버섯균사체를 액체배양액한 다음, 자가분해효소를 이용하여 분자량이 약9800 으로 중 - 저분자화된 isoflavone-P-D-glucan (Gluvone®)을 생산하였다.
성능/효과
1) 기존의 항암제가 대체로 면역력을 저하시키는 문제가 있는데 비해 면역력을 높임과 동시에 암세포를 살해하는 물질로써 항암제로써 매우 기대되는 물질이다.
2) 특히 대장암 (Caco-2 cell), 폐암 (A549 cell) 등의 암세포 생장을 억제하고 사멸시키는 효과를 보였으며, S.180과 같은 쥐의 복수암 세포에도 동일한 효과를 보임.
3) Gluvone®은 타 항암제와는 달리 부작용이 없고, 면역기능의 증강과 함께 암세포만을 선별적으로 사멸시킨다는 획기적인 소재로써 현재, 면역증진용, 항암보조용으로 사용될 수 있도록 한국과 미국에 특허등록되었으며, 일본에 특허출원중이다.
3) 면역증진과 항암제로써 미국과 한국에 특허등록이되었으며, 일본에 출원중이다. 4) 부작용이 없는 천연성분이면서, 항암성이 기존의 항암제와 유사하며, 단독 또는 기존의 항암제와 혼용으로 사용될 수 있는 성분임이 in Vitro와 in vivo mouse실험에서 밝혀 졌고, 임상실험을 통해 암환자의 삶의 질 향상과 면역증진기능이 확인되었다.
출원중이다. 4) 부작용이 없는 천연성분이면서, 항암성이 기존의 항암제와 유사하며, 단독 또는 기존의 항암제와 혼용으로 사용될 수 있는 성분임이 in Vitro와 in vivo mouse실험에서 밝혀 졌고, 임상실험을 통해 암환자의 삶의 질 향상과 면역증진기능이 확인되었다.
4) 임상시험결과 백혈구 감소가 Ghivone®복용군에서 적었으며, Gluvone®를 복용하지 않은 대조군에 비해 증가율이 높았다.
5) T4/T8 비율이 Gluvone®복용군에서 증가하는 경향이 있었음으로 복용으로 면역증진 효과가 있었다.
6) NK세포는 Control 군에서 지속적으로 감소되었으나 Gluvone® 군에서는 단기(2개월), 장기(6개월) 모두 증가하였다.
7) 암치료 종료 후 회복기간에 Ghwone®를 복용함으로써 T4/T8 mtio의 증가 및 NK 수치의 증가가 담도암/췌장암을 비롯한 다양한 암환자에서 일관되게 있었으며 이는 비특이적 면역력 향상 가능성을 시사한다고 판단된다.
이들이 항암효과를 일으키는 작용기전은 T 백혈구 세포를 활성화하고) 감마 인터페론, 인터루킨2의 생산촉진, 면역조절 cytokine의 생산과 cytokine수용체의 유전자표줄을 촉진하여 신체의 자기항상성을 키우는 과정을 통해 이루어진다. 종양세포의 운동성을 억제하고 종양세포의 혈관내 부착을 억제하며 신생혈관의 생성을 억제하는 방법으로 저지하는 것으로 나타났다. 또한 PSK는 환자의 산화 스트레스를 줄여주는 것으로 보고되었다.
후속연구
신약에 비해 부작용이 없는 건강보조식품소비가 늘어감에따라 (국내: 1994년도 8263억원, 1996년도 11235억원, 1998년도 6218억원, 1999년도 8730억원, 2도 13, 500억원) 버섯균사체를 이용한 면역기능강화를 겨냥한 건강보조식품시장의 전망이 밝다. 따라서, 버섯균사체로부터 분리된 항암성소재를 이용한 부작용이 없는 항암제의 개발과 이 성분 (Gluvcme®)에 대한 과학적인 근거 제시 (임상실험)는 새로운 항암제 시장을 개척할 수 있을 것으로 기대된다. Ghwone®은 기존의 항암제에 비해 부작용이 없다는 점에서 국제 경쟁력이 충분히 확보될 수 있다.
기존의 항암제 (Taxol등)가 합성 및 분리과정에서 들어가는 고비용으로 인하여 약제자체가 고가이거나, 희귀한 식물의 추출물이라는 점에서 천연항암제 또한 매우 고가인데 비해 Ghivone®의 경우 미생물 (버섯균사체)에의한 대량배양으로 저가의 원료생산이 가능하다. 저비용 고부가가치의 항암 소재 생산이 가능하므로, 고부가가치를 창출할 것으로 기대된다.
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