[논문]국내산 돈육의 Staphylococcus aureus 오염도 및 항생제 내성

양정임; 이환주; 한자은; 이수경; 이선민; 김민규

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양정임 (CJ푸드시스템 식품안전센터) , 이환주 (CJ푸드시스템 식품안전센터) , 한자은 (CJ푸드시스템 식품안전센터) , 이수경 (CJ푸드시스템 식품안전센터) , 이선민 (CJ푸드시스템 식품안전센터) , 김민규 (CJ푸드시스템 식품안전센터)

본 연구는 국내산 돈육의 Staphylococcus aureus에 대한 오염도와 항생제 내성 여부를 살펴보기 위해 실시되었다. 가공전의 원료육과 가공후의 포장육의 Staphylococcus aureus 에 대한 오염도를 비교해 본 결과 원료육에서 11.5%, 포장육에서 6.1%의 검출률을 보여 도축단계에서의 오염으로 판단된다. 돈육에서 검출된 Staphylococcus aureus의 항생제별 내성은 Penicillin 및 Ampicillin에 각각 93.3%로 매우 높은 내성률을 나타내었으며, Tetracycline에서 60.0%, Tobramycin 20.0%, Erythromycin, Streptomycin에 각각 13.3%의 내성률을 보였다. 2001년 전국 6개 도시의 일반인의 비강으로부터 분리한 S. aureus의 tetracycline에 대한 내성률은 8.2%로 돈육에서 검출된 S. aureus의 내성률과 비교하였을 때 7배 이상 높은 것을 알 수 있었다. 생산성을 향상시킬 목적으로 동물에게 항생제를 처방하고, 사료에 항생제를 첨가하여 균 자체의 내성율을 높이고 이런 균들이 인간에게 전파되어 내성균의 생성 루트가 될 수 있기 때문에 향후 돈육의 사료에 첨가하는 최초 항생제의 사용량부터 지속적인관리가 필요하리라 판단된다.

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문제 정의

* 국내의 경우는 정확한 통계자료가 없어 그 사용량을 정확히 알 수는 없으나 가축, 수산 등에 사용되는 항생제의 종류 및 양이 많을 것으로 추정되고 있어 우리나라에서도 기존에 사용하던 항생제로서는 치료가 불가능한 병원균이 생길 가능성이 충분히 내제되어 있다. 따라서 본 연구에서는 국내외적으로 높은 식중독 발생률을 보이며, 자연계에 널리 분포하고 있고, 자연환경에 대한 저항성이 강하며 자연적으로 쉽게 오염될 수 있는 Staphylococcus aureus의 국내 유통 중인 축산물에서의 오염현황을 파악하고, 축산물에서 분리된 S. aureus의 항생제 감수성검사를 실시하여 내성현황을 모니터링 하였다.

제안 방법

저지환 직경에 따른 결과는 NCCLS에 준하여 감수성 여부를 판독하였다. 결과판독은 BBL Sensi-Disc Zone Interpretation Set을 참고하고, 균 억제대 (mm)를 기록하고, 결과에는 R(내성), 1(중등도내성), S(감수성)으로 입력하였다.
도말 후 5분간 평판배지를 건조시킨 다음 BBL dispenser(Becton Dickson, USA)를 이용하여 각 항생제 감수성 검사용 디스크를 평판배지위에 고정시켰다. 고정된 평판배지를 37℃ 배양기에서 18시간 배양한 후 생육 저 지환의 직경을 측정하였다. 저지환 직경에 따른 결과는 NCCLS에 준하여 감수성 여부를 판독하였다.
Difco)에 접종하여 37C에서 18~24시간 배양 하였다. 그람염색을 실시하여 포도상의 배열을 갖는 그람양성 구균을 확인하였다. 포도상의 배열을 갖는 그람양성구균이 확인된 것은 catalase시험 (ID Color Catalase.
0><108 ceU/ml)의 농도로 조정한 후 15분 이내에 멸균된 면봉을 이용하여 4mm 두께로 준비한 Mueller-Hinton 평판배지(Difco)에 균일하게 도말하였다. 도말 후 5분간 평판배지를 건조시킨 다음 BBL dispenser(Becton Dickson, USA)를 이용하여 각 항생제 감수성 검사용 디스크를 평판배지위에 고정시켰다. 고정된 평판배지를 37℃ 배양기에서 18시간 배양한 후 생육 저 지환의 직경을 측정하였다.
testing 방법을 이용하였다. 항섕제 디스크는 BBL Sensi-Disc(Becton Dkinson, USA)를 사용하였으며 실험에 사용된 항생제는 16종(ampicillin, bacitracin, ciprofloxacin, clindamycin, erythromycin, gentamycin, nitrofurantoin, oxacillin, penicillin, rifampin, sulfamethoxazole/trimethoprim, streptomycin, tetracycline, tobramycin, teicoplanin, vancomycin)을 사용하였다, 분리주를 Mueller-Hinton 배지 (Difco)에 접종하여 37℃에서 18-24시간 배양했다’ 배양액을 MacFarland No, 0.5(1.0><108 ceU/ml)의 농도로 조정한 후 15분 이내에 멸균된 면봉을 이용하여 4mm 두께로 준비한 Mueller-Hinton 평판배지(Difco)에 균일하게 도말하였다. 도말 후 5분간 평판배지를 건조시킨 다음 BBL dispenser(Becton Dickson, USA)를 이용하여 각 항생제 감수성 검사용 디스크를 평판배지위에 고정시켰다.

대상 데이터

2004년 1월부터 8월까지 서울 및 경기지역의 백화점, 할인점 등을 대상으로 돼지고기 포장육 148건을 구입하여 분석하였고, 가공전의 원료육 돼지고기 52건을 구입하여 실험재료로 사용하였다. S.

이론/모형

S. aureus의 정성시험은 미국의 FDA Bacteriological Analytical Manual(8th) 방법에 따라 실시하였다. 시료 25g을 무균bag에 무균적으로 취하여 10% NaCl이 첨가된 TSB(Tryptic soy broth.
Staphylococcus wrw 의 항생제 감수성시험은 National Committee for Clinical Laboratory Standardization(NCCLS, 1997)에 기술된 방법대로 실시하였으며 Disc diffusion susceptibility testing 방법을 이용하였다. 항섕제 디스크는 BBL Sensi-Disc(Becton Dkinson, USA)를 사용하였으며 실험에 사용된 항생제는 16종(ampicillin, bacitracin, ciprofloxacin, clindamycin, erythromycin, gentamycin, nitrofurantoin, oxacillin, penicillin, rifampin, sulfamethoxazole/trimethoprim, streptomycin, tetracycline, tobramycin, teicoplanin, vancomycin)을 사용하였다, 분리주를 Mueller-Hinton 배지 (Difco)에 접종하여 37℃에서 18-24시간 배양했다’ 배양액을 MacFarland No, 0.
본 실험을 위해 S. aureus 분리주의 항생제 감수성 시험을 Disc diffusion susceptibility testing 방법을 이용하여 항생제 16종에 대해 실시하였고, NCCLS에 준하여 감수성 여부를 판독하였다. S aureus 15주에 대하여 항생제 검사를 실시한 결과는 Table 2와 같다.
고정된 평판배지를 37℃ 배양기에서 18시간 배양한 후 생육 저 지환의 직경을 측정하였다. 저지환 직경에 따른 결과는 NCCLS에 준하여 감수성 여부를 판독하였다. 결과판독은 BBL Sensi-Disc Zone Interpretation Set을 참고하고, 균 억제대 (mm)를 기록하고, 결과에는 R(내성), 1(중등도내성), S(감수성)으로 입력하였다.

성능/효과

0%, erythromycin, streQmycin에 각각 133%의 내성률을 보였다. S aureus 15주 모두 1개 이상의 항생제에 내성을 나타내었다, gentamy- cin, rifampin, vancomycin 등 3종류의 항생제는 모든 분리주에 감수성이 있었다. (Table 1)
본 연구에서는 국내에서 유통되고 있는 돈육에서의 Staphylococcus aueus의 오염도 조사를 위하여 백화점 및 대형할인점에서 포장육 146건 및 원료육 52건을 정성시험 하였다, 총 200건 중 15건에서 Staphylococcus aureusA 검출되어 7.5%의 검출률을 보였다* 품목별로는 원료육 52건 증 6건이 검출되어 1L5%의 검출률을 보였으며, 포장육 148건 중 9건이 검출되어 61%의 검출률을 나타내었다. (Fig.
S aureus 15주에 대하여 항생제 검사를 실시한 결과는 Table 2와 같다. 항생제 별로는 penicillin 및 ampici%에 각각 933%로 매우 높은 내성률을 나타내었으며, tetacychne에서 60.0%, tobramycin 20.0%, erythromycin, streQmycin에 각각 133%의 내성률을 보였다. S aureus 15주 모두 1개 이상의 항생제에 내성을 나타내었다, gentamy- cin, rifampin, vancomycin 등 3종류의 항생제는 모든 분리주에 감수성이 있었다.

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