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HPLC를 이용한 우유 중에 잔류 항생물질(Streptomycin)의 정량 분석 원문보기

한국축산식품학회 2005년도 제36차 추계 학술발표대회, 2005 Oct. 28, 2005년, pp.310 - 316  

변장원 (건국대학교 축산식품생물공학) ,  박환석 (건국대학교 축산식품생물공학) ,  홍고은 (건국대학교 축산식품생물공학) ,  홍무기 (식품의약품안전청) ,  박관하 (군산대학교 해양대학) ,  이치호 (건국대학교 축산식품생물공학)

초록
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축산식품(우유)내의 잔류항생물질을 신속하고 간편하고 정확하게 분석하기 위한 시험법 개발을 목적으로 하였다. 축산식품내의 일반적인 잔류항생물질에 대한 지금까지의 분석법으로는 Bioassay법, TLC법, ELISA법, GC법 및 HPLC법 등이 있지만 Streptomycin/dihydrostreptomycin, neomycin에 대한 HPLC법은 거의 확립되어 있지 않은 실정이다. 우리나라의 공인 검사법으로는 Bioassay법 및 HPLC법등이 있지만 그러나 지금까지의 방법으로는 검출감도가 낮은 것이 큰 문제점으로 되어 왔다. 본 연구에서는 STP에 대한 HPLC법에 대한 보고한 Edder 방법 중에 clean-up 과정 및 이동상 조건을 대폭 수정하여 STP의 분리 및 검출감도를 낮추려고 시도하였다. 본 연구에 사용된 유도체화 장치 Post-Column Derivatization Instrument PCX 5100 (Pickering La-boratories, Inc.)의 컬럼 온도는 $40^{\circ}C$, 오븐온도 $55^{\circ}C$, 유도체화 용매 유속 0.6ml/min 이동상 유속 0.8ml/min으로 검출기는 형광검출기를 이용하여 STP 검출에 대해 만족할 만한 결과를 얻었다. 이때의 분석소요시간은 약 15분이었다. 표준시료 STP의 검량선은 넓은 농도범위(0.02${\sim}$1.0ppm)에서 양호한 직선성을 나타냈다. 본 시험법에 의한 검출한계는 limit of detection(LOD)은 0.02ppm이었으며, 적어도 우유에서의 MRL이 0.6ppm임을 감안하면 STP를 정량적으로 정도 좋게 측정할 수 있다는 것을 확인했다. 상기의 조건하에서 실제시료인 우유에 표준 STP를 0.5ppm을 spiking한 후 SPE상에서 SCX(Strong cation exchange column)을 통한 clean-up과정을 거친 후의 STP의 limit of quantification(LOQ)는 약 0.44ppm이었으며, 이에 대한 회수율은 89.7${\pm}$2.3%(n=6)를 나타냈다. 실제 CODEX에서 권장한 우유의 MRL이 0.6ppm인 점을 감안하면 CODEX권고치에 도달할 수 있는 것으로 판단되었다. 따라서 본 연구에서 개발 된 시험법은 지금까지 국내적으로 STP에 대한 시험법이 확립되어 있지 않은 것으로 이와 아울러 간편한 parallux와 병용해 STP에 대한 정량 및 정성 분석을 유도체화 장치 및 형광검출기를 이용해 잔류항생물질 STP에 대한 분석시험법을 개발하였다.

AI 본문요약
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문제 정의

  • Whall 등이 Streptomycin의 HPLC분석법을 소개한 바가 있으며,(6,7,8) Edder등이 또한, streptomycin 분석을 형광 검출기와 LC를 이용해 측정한 바가 있다.(9) 본 연구에서는 이러한 여러 가지 방법들 중 특호}, Edder의 분석법을 개선하여 회수율과 재현성을 높이고자 하였다.
  • 본 Parallux screening test의 시험목적은 우유 내의 streptomycin을 알아내는데 사용 가능한 지 여부와 본 연구에서 개발하고자하는 HPLC법과 정량관계를 알아보기 위하여 실시하였다. 본 언구에 사용 된 Parallux screening fest기는 현재 streptomycin 잔류량을 파악하는데 사용되고 있는 간편 측정 기기이다, Table 3은 Edder의 추출방법을 획기적으로 수정한 clean-up 기술 이 용해 Parallux screening test 및 HPLC 결과를 요약 한 것 이다, Parallux screening test에서 얻어진 결과를 토대로 HPLC분석을 실시한 결과 Parallux sereening test에서 얻어진 결과가 pospositive인 것을 HPLC분석을 통해서 거의 같은 수준으로 positive하게 나타났으며, 그 후 정량값을 구할 수 있었다.
  • 본 연구에서는 추출 및 clean-up 과정을 통해 형광 검출기를 이용해 신속, 정확하고도 고감도인 잔류항생물질 시험법을 개발할 목적으로 새로이 개발된 Parallux kit screen test(IDEXX Lab. Inc.)와 Edder 등이 보고한 Streptomycin의 추출과정 및 정제과정을 병용 수정해 실시하였다.
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